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文檔簡介
1、職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術專業(yè)教學資源庫發(fā)光免疫分析儀2 2第二節(jié)第二節(jié) 發(fā)光免疫分析儀發(fā)光免疫分析儀發(fā)光免疫技術是將發(fā)光系統發(fā)光免疫技術是將發(fā)光系統與免疫反應相結合,以檢測與免疫反應相結合,以檢測抗原或抗體的方法。既具有抗原或抗體的方法。既具有免疫反應的特異性,更兼有免疫反應的特異性,更兼有發(fā)光反應的高敏感性,在免發(fā)光反應的高敏感性,在免疫學檢驗中應用日趨廣泛。疫學檢驗中應用日趨廣泛。 返回目錄3 3一、發(fā)光免疫分析儀的分型及特點一、發(fā)光免疫分析儀的分型及特點在常溫下,某些特定的化學反應產生的能量使其產在常溫下,某些特定的化學反應產生的能量使其產物或反應中間態(tài)分子激發(fā),形成電子激發(fā)態(tài)分子;物或反應
2、中間態(tài)分子激發(fā),形成電子激發(fā)態(tài)分子;當其衰退至基態(tài)時,釋放出的化學能量以可見光的當其衰退至基態(tài)時,釋放出的化學能量以可見光的形式發(fā)射,我們把這種現象稱為形式發(fā)射,我們把這種現象稱為化學發(fā)光化學發(fā)光(chemiluminescence,CL) 化學發(fā)光免疫根據標記物的不同,有化學發(fā)光免疫化學發(fā)光免疫根據標記物的不同,有化學發(fā)光免疫分析、電化學發(fā)光免疫分析、微粒子化學發(fā)光免疫分析、電化學發(fā)光免疫分析、微粒子化學發(fā)光免疫分析、化學發(fā)光酶免疫分析和生物發(fā)光免疫分析等分析、化學發(fā)光酶免疫分析和生物發(fā)光免疫分析等分析方法?,F臨床以前三者較為常用。分析方法。現臨床以前三者較為常用。 返回目錄4 4發(fā)光免疫分
3、析的基本種類及常用標記物發(fā)光免疫分析的基本種類及常用標記物種類種類常用標記物常用標記物化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光免疫分析氨基酰肼類及其衍生物,如氨基酰肼類及其衍生物,如5-5-氫基鄰苯二氫基鄰苯二甲酰肼甲酰肼( (魯米諾魯米諾) )等等電化學發(fā)光免疫分析電化學發(fā)光免疫分析三聯吡啶釘釕三聯吡啶釘釕微粒子化學發(fā)光免疫微粒子化學發(fā)光免疫分析分析二氧乙烷磷酸酯等二氧乙烷磷酸酯等化學發(fā)光酶免疫分析化學發(fā)光酶免疫分析辣根過氧化物酶辣根過氧化物酶生物發(fā)光免疫分析生物發(fā)光免疫分析熒光素熒光素返回目錄5 5(二)常用的發(fā)光免疫分析儀的特點(二)常用的發(fā)光免疫分析儀的特點全自動化學發(fā)光全自動化學發(fā)光免疫分析儀免疫分
4、析儀采用化學發(fā)光技術和磁性微粒子分離技術采用化學發(fā)光技術和磁性微粒子分離技術相結合,是一個全自動、隨機存取、軟件相結合,是一個全自動、隨機存取、軟件控制的智能分析系統??刂频闹悄芊治鱿到y。全自動微粒子化學全自動微粒子化學發(fā)光免疫分析儀發(fā)光免疫分析儀 采用微粒子化學發(fā)光技術對人體內的微量采用微粒子化學發(fā)光技術對人體內的微量成分以及藥物濃度進行定量測定成分以及藥物濃度進行定量測定全自動電化學發(fā)光全自動電化學發(fā)光免疫分析儀免疫分析儀磁性微珠包被采用磁性微珠包被采用“鏈酶親和素鏈酶親和素- -生物素生物素”新型固相包被技術,使檢測的靈敏度更高,新型固相包被技術,使檢測的靈敏度更高,線性范圍更寬,反應時
5、間更短。線性范圍更寬,反應時間更短。返回目錄6 6二、發(fā)光免疫分析的工作原理二、發(fā)光免疫分析的工作原理(一)全自動化學發(fā)光免疫分析儀(一)全自動化學發(fā)光免疫分析儀這種免疫分析技術又稱為微量倍增技術,包括:這種免疫分析技術又稱為微量倍增技術,包括:競爭法:多用于測定小分子抗原物質。競爭法:多用于測定小分子抗原物質。夾心法:多用于測定大分子的抗原物質。夾心法:多用于測定大分子的抗原物質。返回目錄7 7(二)全自動微粒子化學發(fā)光免疫分析儀(二)全自動微粒子化學發(fā)光免疫分析儀 應用經典的免疫學原理,小分子物質采用競爭法或應用經典的免疫學原理,小分子物質采用競爭法或抗體捕獲法進行測定,而大分子物質采用夾
6、心法抗體捕獲法進行測定,而大分子物質采用夾心法。返回目錄8 8(三)全自動電化學發(fā)光免疫分析儀(三)全自動電化學發(fā)光免疫分析儀 該類分析儀綜合應用了免疫學、鏈酶親合素生物該類分析儀綜合應用了免疫學、鏈酶親合素生物素包被技術及電化學發(fā)光標記技術,按照免疫學方素包被技術及電化學發(fā)光標記技術,按照免疫學方法的原理可應用三種抗原抗體反應方法:法的原理可應用三種抗原抗體反應方法: 檢測小分子量蛋白抗原檢測小分子量蛋白抗原抑制免疫法抑制免疫法夾心免疫法夾心免疫法橋聯免疫法橋聯免疫法檢測抗體如檢測抗體如IgG、IgM檢測大分子量物質檢測大分子量物質返回目錄9 9 三聯吡啶釕標記的三聯吡啶釕標記的ECLIAE
7、CLIA反應原理(夾心法)反應原理(夾心法) 返回目錄1010三、發(fā)光免疫分析的基本結構三、發(fā)光免疫分析的基本結構全自動化學發(fā)光全自動化學發(fā)光免疫分析儀免疫分析儀 主機主機微機微機儀器的運行反儀器的運行反應測定部分,應測定部分,包括原材料配包括原材料配備部分、液路備部分、液路部分、機械傳部分、機械傳動部分、光路動部分、光路檢測部分檢測部分。 儀器的核心部分,儀器的核心部分,是指揮控制中心。是指揮控制中心。其功能有程控操其功能有程控操作、自動監(jiān)測、作、自動監(jiān)測、指示判斷、數據指示判斷、數據處理、故障診斷處理、故障診斷等,并配有光盤。等,并配有光盤。 返回目錄1111微電腦微電腦控制控制 傳送艙傳
8、送艙 主探針主探針系統系統 分析分析系統系統 流體流體系統系統 電子電子系統系統 全自全自動微動微粒子粒子化學化學發(fā)光發(fā)光免疫免疫分析分析儀儀 三、發(fā)光免疫分析的基本結構三、發(fā)光免疫分析的基本結構返回目錄1212全自動電化學發(fā)全自動電化學發(fā)光免疫分析儀光免疫分析儀 三、發(fā)光免疫分析的基本結構三、發(fā)光免疫分析的基本結構就是一臺完整的就是一臺完整的計算機,并配有計算機,并配有支架及打印系統支架及打印系統。 是檢測系統的核是檢測系統的核心,主要包括預心,主要包括預清洗區(qū)、測量區(qū)清洗區(qū)、測量區(qū)、試劑區(qū)、耗品、試劑區(qū)、耗品區(qū)。區(qū)。 主要由條形碼閱主要由條形碼閱讀器、標本艙位讀器、標本艙位、標本架轉盤、標
9、本架轉盤、模塊軌道等組成模塊軌道等組成。 控制單元控制單元核心單元核心單元 分析模塊分析模塊返回目錄1313四、性能評價四、性能評價目前應用于臨床檢驗目前應用于臨床檢驗的發(fā)光免疫分析儀有的發(fā)光免疫分析儀有很多種類,具有檢測很多種類,具有檢測速度快、精度好、重速度快、精度好、重復性高、條碼識別系復性高、條碼識別系統、統、24小時待機、系小時待機、系統穩(wěn)定等特點。統穩(wěn)定等特點。 返回目錄1414四、性能評價四、性能評價項目全自動化學發(fā)光免疫分析儀全自動微粒子化學發(fā)光免疫分析儀全自動電化學發(fā)光免疫分析儀測定速度60180個/h100個/h80個/h最小檢測量10-15g/ml10-15g/ml10-
10、15g/ml重復性CV3%CV3%CV3%樣品盤60個標本60個標本75或30個標本試劑盤13種試劑24種試劑18或25種試劑急診標本均可隨到隨做,無需中斷運行返回目錄1515五、儀器的使用與維護及常見故障的處理五、儀器的使用與維護及常見故障的處理開開 機機參數設置參數設置進入菜單,設定測量參數,放置檢測試劑和進入菜單,設定測量參數,放置檢測試劑和消耗品消耗品將被測樣品放入樣品架,輸入起始樣品欄的將被測樣品放入樣品架,輸入起始樣品欄的位置和起始樣品編號,選擇樣品的測試項目位置和起始樣品編號,選擇樣品的測試項目樣品裝載樣品裝載關關 機機取出試劑放入冰箱,清理廢棄物,清洗探針取出試劑放入冰箱,清理
11、廢棄物,清洗探針后,關閉儀器后,關閉儀器打開儀器電源,等待儀器自檢,按打開儀器電源,等待儀器自檢,按 “STARTUP”STARTUP”鍵啟動鍵啟動結果結果測定結束后,可以選擇需要瀏覽的結果,打測定結束后,可以選擇需要瀏覽的結果,打印報告印報告樣本測定樣本測定按已設定的參數和程序,按按已設定的參數和程序,按“Run”Run”鍵儀器鍵儀器自動檢測自動檢測 全自動化學發(fā)光免疫分析儀全自動化學發(fā)光免疫分析儀 返回目錄1616五、操作與維護及常見故障處理五、操作與維護及常見故障處理開開 機機工作前準備工作前準備在主屏幕進行系統設置后,裝入各類耗材,在主屏幕進行系統設置后,裝入各類耗材,并按要求進行質控
12、和定標并按要求進行質控和定標將樣本裝入標本架,在試驗菜單下輸入標本將樣本裝入標本架,在試驗菜單下輸入標本架號、標本號以及檢測項目架號、標本號以及檢測項目樣品裝載樣品裝載關關 機機卸載標本,清理廢棄物,清洗管路后,讓儀卸載標本,清理廢棄物,清洗管路后,讓儀器處于器處于24h24h待機狀態(tài)待機狀態(tài)打開儀器主電源和顯示器,開機儀器進行初打開儀器主電源和顯示器,開機儀器進行初始化始化結果結果測定結果可自動打印,也可以在菜單下選擇測定結果可自動打印,也可以在菜單下選擇瀏覽結果,以標準模式發(fā)送結果瀏覽結果,以標準模式發(fā)送結果樣本測定樣本測定確認標本裝載無誤后,開始測定操作,儀器確認標本裝載無誤后,開始測定
13、操作,儀器會自動檢查耗材和校準狀態(tài)會自動檢查耗材和校準狀態(tài) 全自動全自動微粒子化學發(fā)光微粒子化學發(fā)光免疫分析儀免疫分析儀 返回目錄1717五、操作與維護及常見故障處理五、操作與維護及常見故障處理開開 機機設置儀器參數,裝載各種耗材,運行校準程設置儀器參數,裝載各種耗材,運行校準程序,再運行質控和定標序,再運行質控和定標將樣本裝入標本架,選擇標本類型,輸入標將樣本裝入標本架,選擇標本類型,輸入標本架號、標本號以及檢測項目本架號、標本號以及檢測項目樣品裝載樣品裝載關關 機機卸載標本,清理廢棄物,清洗管路后,關閉卸載標本,清理廢棄物,清洗管路后,關閉主電源,關閉供水系統主電源,關閉供水系統打開供水系
14、統和操作電源,開啟啟動程序,打開供水系統和操作電源,開啟啟動程序,輸入操作者輸入操作者IDID,進入軟件,啟動系統操作,進入軟件,啟動系統操作結果結果可以在儀器上選擇瀏覽結果,也可以打印檢可以在儀器上選擇瀏覽結果,也可以打印檢測報告,以標準模式發(fā)送結果測報告,以標準模式發(fā)送結果樣本測定樣本測定確認啟動條件后,按確認啟動條件后,按“Start”Start”鍵,儀器會鍵,儀器會自動對標本進行測定自動對標本進行測定 全自動全自動電化學發(fā)光電化學發(fā)光免疫分析儀免疫分析儀 工作前準備工作前準備返回目錄1818(二)儀器的維護(二)儀器的維護1日保養(yǎng)日保養(yǎng) 保持機器外殼干凈。檢查系統基本狀態(tài),保持機器外殼干凈。檢查系統基本狀態(tài),之后再之后再 按保養(yǎng)程序進入清洗系統進行清洗針。按保養(yǎng)程序進入清洗系統進行清洗針。2周保養(yǎng)周保養(yǎng) 檢查主探針上、下導軌,進行特殊清洗。檢查主探針上、下導軌,進行特殊清洗。每周保養(yǎng)后一定要做系統檢測。每周保養(yǎng)后一定要做系統檢測。3月保養(yǎng)月保養(yǎng) 每月用專用不銹鋼小刷刷洗每月用專用不銹鋼小刷刷洗1次主探針、次主探針、標本采樣針、試劑針的內部。生理鹽水反復沖洗針標本采樣針、試劑針的內部。生理鹽水反復沖洗針內部,針外
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