方案牛海綿狀腦病癢病監(jiān)測實施方案

1、附件2：外來動物疫病監(jiān)測實施方案牛海綿狀腦病、癢病監(jiān)測實施方案一、監(jiān)測范圍 （一）牛海綿狀腦病。重點在奶牛養(yǎng)殖場、肉牛養(yǎng)殖場、動物醫(yī)院和屠宰場進(jìn)行采樣監(jiān)測，采集對象包括具有神經(jīng)癥狀、緊急屠宰、非正常死亡的 2歲以上牛，以及正常屠宰的4-7歲奶牛和種牛。（二）癢病。重點對放牧羊群、種羊養(yǎng)殖場以及屠宰場進(jìn)行采樣監(jiān)測，采集對象為瘙癢、神經(jīng)癥狀、共濟(jì)失調(diào)、倒地不起、失明、死亡或其他癥狀的1歲以上綿羊和山羊。二、送樣時間及地點各市州將采集好的樣品先冷凍保存，然后于4月25日、6月25日、8月20日前分三次送省動物衛(wèi)生監(jiān)督所。省動物衛(wèi)生監(jiān)督所于5月10日、7月10日、9月5日分三次將采集的樣品送至中國動物

2、衛(wèi)生與流行病學(xué)中心國家牛海綿狀腦病參考實驗室。三、采樣數(shù)量和要求（一）采樣數(shù)量：各市州按照甘肅省2010年瘋牛病、癢病檢測任務(wù)分配表（附錄）中任務(wù)數(shù)量，采集相應(yīng)類別腦樣，確保完成年度采樣數(shù)量。（二）采樣要求1、各市（州）采集的牛腦樣品具有神經(jīng)癥狀的樣品應(yīng) 80%以上為奶牛樣品；緊急屠宰、死亡或4-7歲正常屠宰牛的樣品應(yīng)50%以上為奶牛樣品。2、各市州在采樣過程中要認(rèn)真填寫采樣單，對臨床疑似病牛要拍照或攝像，建立詳細(xì)的采樣檔案，所有檔案、圖片和錄像等材料連同采集到的樣品一起送省動物衛(wèi)生監(jiān)督所。四、監(jiān)測結(jié)果處理與報告（一）各市州在10月30日前將瘋牛病、癢病采樣和流行病學(xué)調(diào)查總結(jié)報省動物衛(wèi)生監(jiān)督所

3、，內(nèi)容包括：1、檢查的各種易感動物總數(shù)及其年齡結(jié)構(gòu)；2、每種易感動物總的死亡率和由神經(jīng)性疾病造成的死亡率；3、主管部門限制流通的動物類型與數(shù)量記錄；4、臨床檢查與流行病學(xué)調(diào)查的動物數(shù)量與結(jié)果；5、除牛科動物以外感染傳染性海綿狀腦?。═SEs）的動物；6、BSE相關(guān)知識的教育培訓(xùn)情況；7、進(jìn)口和飼喂肉骨粉的情況。省動物動物衛(wèi)生監(jiān)督所匯總后在11月30日前，向農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局提交BSE年度工作總結(jié)，并抄送國家牛海綿狀腦病參考實驗室。（二）牛海綿狀腦病普查采樣單、非正常屠宰牛登記表、羊癢病普查采樣單及采樣送樣方案詳見附錄。附錄：1、甘肅省2010年瘋牛病、癢病檢測任務(wù)分配表2、牛海綿狀腦病普查采樣單3、

4、羊癢病普查采樣單4、非正常屠宰牛登記表5、采樣與送樣方案附錄1：甘肅省2010年瘋牛病、癢病檢測任務(wù)分配表市（州）牛腦樣品（份）羊腦樣品 (份）臨床疑似奶牛腦樣（份）奶牛腦樣（份）其它牛腦樣（份）合計酒泉市2971815張掖市21082015武威市211122515白銀市1361015臨夏州413133010甘南州1361012隴南市1541012定西市210132515平?jīng)鍪?8102016慶陽市1561210天水市28102015合 計208595200150附錄2：牛海綿狀腦病普查采樣單采樣單編號：第_ 張 編制：國家牛海綿狀腦病參考實驗室樣品保存條件：甲醛固定 -18以下冷凍 樣品類別

5、：腦 淋巴結(jié) 脾臟 扁桃體 其它_采樣地點： ?。ㄊ校?縣 鄉(xiāng)樣 品編 號種 類月齡健康狀況備注奶牛肉牛兼用牛正 常 屠 宰非正常屠宰*死牛急 宰疑 似*若為非正常屠宰牛請繼續(xù)填寫非正常屠宰牛登記單，樣品編號要對應(yīng)。注釋：1.采樣地點相同的樣品可以登記在同一張采樣單上。樣品編號用地名的首字母+數(shù)字來表示，例如青島1號寫為QD-1，此號必須與樣品包裝編號對應(yīng)起來。2.請詳細(xì)填寫采樣單位名稱、電話、地址等信息。3.有些選項可以打“”表示。采樣單位（委托采樣單位）名稱：（蓋章） 電話：采樣單位（委托采樣單位）地址： 郵編：采樣人（委托采樣人） 簽名： 年 月 日封樣單位（運送單位）名稱：（蓋章） 電

6、話：封樣單位（運送單位）地址： 郵編：送樣人（委托送樣人） 簽名： 年 月 日此單一式3聯(lián)，一聯(lián)隨樣品封存，另兩聯(lián)分別由采樣單位和養(yǎng)殖單位保存。附錄3： 羊癢病普查采樣單采樣單編號：第 張 編制：國家牛海綿狀腦病參考實驗室 樣品保存：甲醛固定 -18以下冷凍 樣品類別：腦 淋巴結(jié) 脾臟 其他 采樣地點： ?。ㄊ校?縣 鄉(xiāng)樣品編號動物種類月齡性別健康狀況備 注（若為臨床可疑，請描述病羊的品種、畜主、是否為進(jìn)口等情況，可單獨附頁說明）臨床可疑山羊綿羊正常屠宰臨床可疑其他疾病1、發(fā)病初期易驚、不安、打顫、凝視，有時癲癇狀發(fā)作。2、走路時頭高舉，后肢明顯抬高，前肢搖擺不穩(wěn)類似驢跑。3、發(fā)病后期明顯瘙癢

7、，啃咬腹部和股部，或在固定物上摩擦患部，患部有皮膚破損，日漸消瘦而亡。注釋：采樣地點相同的樣品可以登記在同一張采樣單上。樣品編號用地名的首字母+數(shù)字來表示，例如青島1號寫為QD-1，此號必須與樣品包裝編號對應(yīng)起來。有些選項可以打“”。采樣單位（委托采樣單位）名稱：（蓋章） 電話：采樣單位（委托采樣單位）地址： 郵編：采樣人（委托采樣人） 簽名： 年 月 日封樣單位（運送單位）名稱：（蓋章） 電話：封樣單位（運送單位）地址：（蓋章） 郵編：送樣人（委托送樣人） 簽名： 年 月附錄2:附錄4：非正常屠宰牛登記表樣品編號： 編制：國家牛海綿狀腦病參考實驗室保存條件：甲醛固定 -18以下保存 樣品類別

8、：腦 其它_ 月齡：_牛的種類：奶牛 肉牛 兼用牛 健康狀況：臨床疑似牛 緊急屠宰牛 死牛 采樣地點： 省（市） 縣 鄉(xiāng) 村詳細(xì)描述：年齡判斷依據(jù)：牙齒 養(yǎng)殖檔案 曾飼喂肉骨粉：是 否 性別：母 公 品種：_ 原產(chǎn)國_ 耳標(biāo)_畜主/養(yǎng)殖場_臨床疑似牛（由不明原因引起的漸進(jìn)性行為變化或神經(jīng)癥狀，表現(xiàn)如下）：1 行為表現(xiàn)：甩頭 磨牙 過度舔舌 耳朵豎立 行為改變，如落伍 擠奶時持續(xù)踢踏 經(jīng)常伸展脖子 像拉馬車樣低頭站立 面對舍門或障礙物猶豫不前 不愿進(jìn)擠奶室 走路時后肢過度搖擺或伸展 2. 神經(jīng)癥狀：顫抖 興奮 膽怯 恐懼 狂怒 意識異常 轉(zhuǎn)圈運動 共濟(jì)失調(diào) 癱瘓/局部麻痹 感覺過敏如聽覺、觸覺、

9、視覺 沒有外傷或感染而瀕臨死亡 其他 緊急屠宰牛：倒地不起 斜靠著物體才能站立 不愿行動 嚴(yán)重傷病 宰前檢疫認(rèn)為要銷毀的牛 其他 死牛：在養(yǎng)殖場死的 在運輸過程中死的 在其他地方死的 其他描述：照片： 每省至少要對20%的臨床疑似牛進(jìn)行拍照或攝像，并收集臨床疑似牛的其他材料如檔案等。若為數(shù)碼照片，則可以給照片的名稱命名為對應(yīng)的樣品編號，然后以電子方式或相片（背面要標(biāo)明樣品編號）發(fā)送給省站或瘋牛病檢測實驗室。若不是數(shù)碼照片，則洗出來，在其背面用圓珠筆或記號筆注明樣品編號，與采樣單一并交給瘋牛病檢測實驗室。 附錄5：采樣與送樣方案牛羊腦樣品既可以按甲醛固定處理，也可以按冷凍保存處理，然后運送至國家

10、認(rèn)定的檢測實驗室進(jìn)行檢測。具體方法見“方案一：新鮮牛羊腦樣品的采集與運送方案”和“方案二：甲醛固定的牛羊腦樣品的采集與運送方案”。參考實驗室建議采用方案一的規(guī)定進(jìn)行采樣和運送，該方案也是當(dāng)前國際上廣泛采納的方案。方案一：新鮮牛羊腦樣品的采集與運送方案1. 專用采樣工具采集牛羊腦樣品的特點：國家牛海綿狀腦病參考實驗室根據(jù)國際上通用的牛羊腦采樣工具設(shè)計出我國的牛羊腦樣品采樣工具。該工具為塑料制品，呈勺子形狀，前端帶有鋒利的齒，便于切斷腦組織。這種采樣方式有著非常明顯的優(yōu)點，如使用簡單、節(jié)約成本、工作效率高、機(jī)動性強(qiáng)、采樣安全。2. 采樣物品準(zhǔn)備：數(shù)碼照相機(jī)（或數(shù)碼攝像機(jī)）、專用的采樣勺（一把勺子最

11、多可以采集三份樣品，牛腦采樣勺為藍(lán)色，羊腦采樣勺為黃色）、醫(yī)用剪刀（一把，長10cm左右）、一次性手套、橡膠檢查手套（即乳膠手套）、口罩、工作服、樣品杯（可向參考實驗室索取）、記號筆、冰袋（至少3塊大號的冰袋）、大號的透明膠帶、帶蓋泡沫箱（有厚度，無破損，大小適中）、簽字筆或圓珠筆、采樣單、吸水紙等。3. 采樣步驟：A. 如果有比較典型的瘋牛?。˙SE）疑似牛，則要拍照或攝像留下證據(jù)。每省至少要對20%的臨床疑似牛進(jìn)行拍照或攝像，并且收集臨床疑似牛的其他材料如檔案等。采集臨床疑似牛時，采樣人員還需要通過問詢等方式弄清該病牛的其他情況，問詢內(nèi)容可以包括飼養(yǎng)歷史、來源、流動等情況。這些證據(jù)材料必須

12、存檔和備份，運送樣品時一并寄送至檢測實驗室。B. 每次采樣至少有兩人在場，其中一人戴好一次性手套和橡膠檢查手套，另外一人專門登記和開啟樣品杯而不需要戴手套。通過觀察牙齒檢查牛羊的年齡，大于3歲的牛（第二對永久門齒長出）和大于18月齡的羊（第一對永久門齒長出）才可以采樣，但如果該動物為瘋牛病或癢病風(fēng)險動物則沒有年齡限制。C. 在平整地面倒置牛/羊頭，即牛/羊頭的兩角和鼻子靠地放置。同時，另外一人開始填寫采樣單，并且在樣品杯上標(biāo)記上對應(yīng)的樣品編號（以縣/市名+序號，如青島1號）。一個樣品杯只能裝一個腦樣品。D. 在枕骨大孔處用剪刀剪開腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。然后用一個手指伸入枕骨大孔中，沿著

13、延腦（延髓）轉(zhuǎn)一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經(jīng)和血管，以便于腦組織順利挖出。E. 從延腦腹側(cè)（也即勺子從枕骨大孔的上面進(jìn)入）將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以免損壞延腦組織。采樣勺插入的深度約為5-7cm（采羊腦時插入深度約為4 cm），然后向上一扳勺子手柄，同時往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。注意：盡量保護(hù)好延腦“三叉口”處（腦閂部）的組織的完整性。F. 將腦組織放入編好號的樣品杯中，擰緊杯蓋，然后放置在盛有冰袋的泡沫箱中，用透明膠帶將泡沫箱的蓋子綁緊。注意：采好的樣品必須在5小時之內(nèi)放入冰柜中冷凍上，以防腐?。粯悠分辽僖鋬?4小時才能往瘋牛病檢測

14、實驗室運送。G. 各地送來的樣品要先在省動物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)統(tǒng)一清理，如果沒有冷凍好的樣品，則必須及時放入冰柜中冷凍，然后由省動物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)統(tǒng)一將樣品發(fā)送至檢測實驗室。4. 樣品運送：準(zhǔn)備好帶蓋的結(jié)實的泡沫箱，該泡沫箱必須無任何破損，并且大小適中（根據(jù)樣品的量來決定）。先在泡沫箱的底部鋪上一層吸水紙，之后放入冷凍好的樣品，然后在側(cè)面放入幾塊冷凍好的冰袋，最后在樣品的上面放入幾塊冷凍好的冰袋，蓋緊箱蓋。用大號的透明膠帶封好箱口，再橫向打好包，箱子外面用記號筆寫上“易碎勿壓”以及向上的“箭頭”等字樣，然后由省動物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)統(tǒng)一運送。打好包的樣品必須及時發(fā)送，并確保4天之內(nèi)運送至檢測實驗

15、室。提示：一、這種包裹最好通過航空途徑運送或由專人運送，并切記要注明“易碎勿壓”。二、切記在采樣單上寫明送樣人及其聯(lián)系方式，樣品檢測完后實驗室要出具檢驗報告并寄給送樣人。方案二：甲醛固定的牛羊腦樣品采集與運送方案1. 材料A. 數(shù)碼照相機(jī)（或數(shù)碼攝像機(jī)）、采樣單、復(fù)寫紙和圓珠筆或鉛筆B. 醫(yī)用膠布（用于捆裝有樣品的紗布，并在其上寫上樣品編號）C. 電動骨鋸或采樣勺、骨鉗、斧頭D. 解剖刀、剪刀、乳膠手套E. 紗布、棉線、密封塑料桶（容積不少于5000ml）F. 固定液：即10%福爾馬林（甲醛）生理鹽水氯化鈉8.5g ；水900ml ；40%福爾馬林（甲醛）100ml2. 采樣步驟A. 如果有比

16、較典型的BSE疑似牛，則要拍照或攝像留下證據(jù)。每省至少要對20%的臨床疑似牛進(jìn)行拍照或攝像，并且收集臨床疑似牛的其他材料如檔案等。采集臨床疑似牛時，采樣人員還需要通過問詢等方式弄清該病牛的其他情況，問詢內(nèi)容可以包括飼養(yǎng)歷史、來源、流動等情況。這些證據(jù)材料必須存檔和備份，運送樣品時一并寄送至檢測實驗室。B. 填寫采樣單根據(jù)實際情況，按采樣單要求認(rèn)真填寫。采樣地點相同的樣品可以登記在同一張采樣單上。C. 取樣（I）電鋸采樣法 a.用電鋸沿兩牛角根部到枕骨大孔上邊緣的方向?qū)⑴ｏB腔打開。b.用手術(shù)刀將腦膜切開，骨鉗打開顱腔，然后把腦神經(jīng)和腦血管切斷。c.取出整個腦組織包括大腦、小腦和腦干（間腦、中腦、

17、腦橋和延腦）；注意千萬不要把腦干損壞。d.將每頭牛的腦組織用紗布松松地裹住(紗布容易透水)，千萬不能緊，一定要松，然后將寫有編號名稱的醫(yī)用膠布（用圓珠筆或鉛筆將編號寫在上面，編號：地名+序號+樣品類別名，如“青島市10號牛”）用棉線栓在紗布口處，注意不讓膠布脫落。處理好后放入10-20倍體積10%福爾馬林生理鹽水中固定一周。注意標(biāo)簽編號與采樣單的編號相對應(yīng)。 e.用新的福爾馬林生理鹽水更換舊的固定液，密封在塑料桶中，桶外貼上桶中所有牛腦的編號，以便我們處理牛腦時不開桶蓋便可知桶中的牛腦情況。每個塑料桶可根據(jù)大小放置相應(yīng)數(shù)量的牛腦。（II）采樣勺采集法a.準(zhǔn)備專用的采樣勺（一把或二把便可）、醫(yī)用

18、剪刀（一把）、一次性手套、橡膠檢查手套（即乳膠手套）以及其他采樣用品如采樣單等。b.戴好一次性手套和橡膠檢查手套，專門登記的人員不需要戴手套。通過觀察牙齒檢查牛的年齡。c.在平整地面倒置牛頭，即牛頭的兩角和鼻子靠地放置。d.在枕骨大孔處用剪刀剪開腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。然后用一個食指伸入枕骨大孔中，沿著延腦轉(zhuǎn)一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經(jīng)和血管，以便于延腦的取出。e.從延腦腹側(cè)（也即勺子從枕骨大孔的上面進(jìn)入）將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以避免損壞延腦組織。采樣勺插入的深度約為5-7cm（采羊腦時插入深度約為4 cm），然后向上一扳勺子手柄，同時往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。f.其余步驟見(I)中的d和e。注：對于臨床疑似牛羊，采下腦后，從腦中線一分為二，一份用于甲醛固定，另一份用于20冷凍并在低溫下運送至參考實驗室。3. 樣品的包裝與運送A. 獨將采樣單郵寄給檢測實驗室，切不可與樣品一起郵寄，目的是防止采樣單被污染。B. 將固定好的牛腦放在幾個大的帶內(nèi)蓋的塑料桶中密封，注意每個牛腦都隨身帶有一個唯一的編號，桶外壁上也標(biāo)明桶內(nèi)的所有牛腦編號。運送時桶里的固定液可以不按10-20倍體積的量，而保留適當(dāng)?shù)牧勘憧?，適當(dāng)?shù)?/p>