高中生物基因工程核心知識點總結(jié)

1、.高中生物基因工程核心知識點總結(jié)高中生物基因工程核心知識點總結(jié)概念：基因工程是指按照人們的愿望，進展嚴格的設(shè)計，通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程是在DNA分子程度上進展設(shè)計和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)。一基因工程的根本工具1.“分子運輸車載體1載體具備的條件：能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。2最常用的載體是?質(zhì)粒,它是一種裸露的、構(gòu)造簡單的、獨立于細菌染色體之外，并具有自我復(fù)制才能的雙鏈環(huán)狀DNA分子。3其它載體： 噬菌體的衍生物、

2、動植物病毒2.“分子手術(shù)刀限制性核酸內(nèi)切酶限制酶1來源：主要是從原核生物中別離純化出來的。2功能：可以識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。3結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。3.“分子縫合針DNA連接酶1兩種DNA連接酶E?coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶的比較：一樣點：都縫合磷酸二酯鍵。區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。2與DNA聚

3、合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。二基因工程的根本操作程序第一步：目的基因的獲取1.目的基因是指： 編碼蛋白質(zhì)的構(gòu)造基因 。2.原核基因采取直接別離獲得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。3.PCR技術(shù)擴增目的基因1原理：DNA雙鏈復(fù)制2過程：第一步：加熱至9095DNA解鏈;第二步：冷卻到5560，引物結(jié)合到互補DNA鏈;第三步：加熱至7075，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構(gòu)建1.目的：使目的基因在受體細胞中

4、穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因可以表達和發(fā)揮作用。2.組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因1啟動子：是一段有特殊構(gòu)造的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。2終止子：也是一段有特殊構(gòu)造的DNA片段 ，位于基因的尾端。3標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞挑選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞_1.轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ?農(nóng)桿菌

5、轉(zhuǎn)化法，其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ?顯微注射技術(shù)。此方法的受體細胞多是 受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是 繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少 ，最常用的原核細胞是 大腸桿菌 ，其轉(zhuǎn)化方法是：先用 Ca2+ 處理細胞，使其成為 感受態(tài)細胞 ，再將 重組表達載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3.重組細胞導(dǎo)入受體細胞后，挑選含有基因表達載體受體細胞的根據(jù)是標(biāo)記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1.首先要檢測 轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入

6、了目的基因，方法是采用 DNA分子雜交技術(shù)。2.其次還要檢測 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用 用標(biāo)記的目的基因作探針與 mRNA雜交。3.最后檢測 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的 抗體進展抗原-抗體雜交。4.有時還需進展 個體生物學(xué)程度的鑒定。如 轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。三蛋白質(zhì)工程的概念蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的構(gòu)造規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為根底，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進展改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的消費和生活的需求。基因工程在原那么上只能消費自然界已存在的蛋白質(zhì)四基因工程的應(yīng)用1.植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因