1.2無菌操作和接種技術(shù)

1、1.2無菌操作和接種技術(shù)年級(jí)： 高二 學(xué)科： 生物 執(zhí)筆： 審核： 課時(shí)及內(nèi)容：無菌操作和接種技術(shù) 課型： 新授課 使用時(shí)間： 【知識(shí)目標(biāo)】1、說出菌落、滅菌、消毒的概念 。 2、理解無菌操作的重要性。3、掌握分離純化某種微生物的方法。【能力目標(biāo)】提高學(xué)生合作、探究、交流及語言表達(dá)能力?！厩楦袘B(tài)度價(jià)值觀目標(biāo)】認(rèn)同無菌操作的重要性?！绢A(yù)學(xué)案】一、自主學(xué)習(xí)，完成預(yù)習(xí)案1. 什么是滅菌、消毒？2. 滅菌、消毒的方法有哪些？3. 什么是菌落？4.怎樣分離純化某種微生物？二、 預(yù)習(xí)自測(cè)1、細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌 ()A接種環(huán)、

2、手、培養(yǎng)基B高壓鍋、手、接種環(huán)C培養(yǎng)基、手、接種環(huán)D接種環(huán)、手、高壓鍋2、關(guān)于滅菌和消毒理解不正確的是()A滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的C接種環(huán)用灼燒法滅菌D常用的滅菌和消毒方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法3、以下操作用到接種環(huán)的是     (     )  A平板劃線操作   B系列稀釋操作  C涂布平板操作    D倒平板操作4、滅菌的標(biāo)準(zhǔn)是     

3、;(  )  A使病原菌不生長          B殺死所有的微生物  C殺死所有的病原微生物     D殺死所有微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子5、關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述錯(cuò)誤的是  (  )  A細(xì)菌一般在3037的溫度下培養(yǎng)12d  B放線菌一般在2528的溫度下培養(yǎng)57d  C霉菌一般在2528的溫度下培養(yǎng)34d  D不同

4、種類的微生物，一般需要相同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間【探究案】探究一：列表比較滅菌、消毒的區(qū)別。條件結(jié)果常用的方法 較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線消毒法和化學(xué)藥劑消毒法 強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子 、 、 探究二：不同的滅菌、消毒方法分別針對(duì)哪些物品？針對(duì)訓(xùn)練：1、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是 ()化學(xué)消毒 灼燒滅菌 干熱滅菌紫外線消毒 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法ABCD探究三：以大腸桿菌為例，怎樣分離純化大腸桿菌？每種方法分別要注意什么

5、？針對(duì)訓(xùn)練：2、通過實(shí)驗(yàn)測(cè)定土壤中細(xì)菌數(shù)量，下列與此操作有關(guān)的敘述中，不正確的是 ()A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105的土壤稀釋液0.1 mL，分別涂布于各組平板上C將培養(yǎng)皿倒置，37 恒溫培養(yǎng)2448小時(shí) D選擇菌落數(shù)在300個(gè)以上的培養(yǎng)皿進(jìn)行計(jì)數(shù)3、(2011·新課標(biāo)全國卷，39)有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：(1)在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落

6、，常采用的接種方法有兩種，即_和_。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下 ，在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染?！居?xùn)練案】1、用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是 ()A涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B涂布了兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是215和260，取平均值238C涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212、256，取平均值163D涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)

7、的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值2332、據(jù)調(diào)查，市場(chǎng)上銷售的絕大部分雞蛋都沒有經(jīng)過清洗，更談不上消毒，表面經(jīng)常殘留羽毛、糞便、飼料等臟物，還可能帶有沙門氏菌、大腸桿菌，甚至?xí)斐汕萘鞲胁《緜鞑?，美國蛋制品檢查法將表面污濁的雞蛋列為“臟蛋”且禁止上市。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A生物學(xué)意義上的滅菌、消毒和防止雜菌污染各有不同的含義B由于雞蛋、奶等食品中的某些成分不易在高溫下被破壞，對(duì)其可采取高溫滅菌C巴氏消毒法就是加熱到7080 ，保持1530 min，能殺死一般雜菌和病原菌D高溫滅菌的原理是高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸，影響其生命活動(dòng)3、(2011·重慶卷，2)下列有

8、關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是 ()A在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌B在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長C向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長D在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運(yùn)動(dòng)4、在下列選項(xiàng)中，需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是 ()利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，獲得多倍體植株獲取大量的脫毒苗利用基因工程培養(yǎng)抗棉鈴蟲的植株單倍體育種無子西瓜的快速大量繁殖ABCD5、下列關(guān)于MS培養(yǎng)基與微生物培養(yǎng)基的配方相比，不同之處說法錯(cuò)誤的是 ()AMS培養(yǎng)基中常常添加植物激素，微生物培養(yǎng)基中不需要BMS培養(yǎng)基中的碳源和能源是蔗糖，微生物培養(yǎng)基中的碳源和能源主要是葡萄糖

9、CMS培養(yǎng)基中需提供植物生長必需的大量元素和微量元素DMS培養(yǎng)基中不需加維生素，微生物培養(yǎng)基中要加維生素作生長因子6、生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的菌種主要來自土壤，從土壤中分離微生物的實(shí)驗(yàn)流程如下：土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋鑒別培養(yǎng)請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：(1)將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上，可以將酵母菌從混雜的微生物群體中分離出來，獲得純種酵母菌，這一過程叫做_。在培養(yǎng)酵母菌的過程中，對(duì)培養(yǎng)基、接種環(huán)常采用的滅菌方法分別是_。(2)在使用酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)酒精的過程中，影響酵母菌酒精發(fā)酵的主要因素有_，常使用_的方法從發(fā)酵液中提取純酒精。(3)從土壤中分離纖維素分解菌，最好選擇在_環(huán)境中采集土樣，所選擇的培養(yǎng)基應(yīng)

10、以_作為唯一碳源。(4)纖維素分解菌能夠合成纖維素酶，為了使纖維素酶反復(fù)使用，可以對(duì)纖維素酶進(jìn)行_處理，處理的方法有吸附法、交聯(lián)法和_法。7、科學(xué)家利用基因工程技術(shù)成功地將人的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌體內(nèi)，生產(chǎn)出人的胰島素。在該過程中用質(zhì)粒作為載體，已知質(zhì)粒上含有抗氨芐青霉素(簡(jiǎn)稱氨芐)和抗四環(huán)素的基因(位于不同區(qū)段)，目的基因與質(zhì)粒的結(jié)合位點(diǎn)剛好位于抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)內(nèi)，且受體大腸桿菌體內(nèi)不含質(zhì)粒，也不含質(zhì)粒上的抗藥基因。導(dǎo)入完成后，實(shí)際上在得到的大腸桿菌中，有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒，有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒，只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。某科研機(jī)構(gòu)想從培養(yǎng)基上篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌(即“目的菌種”)，他們?cè)O(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)方案：第一步：將得到的大腸桿菌接種在含_的培養(yǎng)基上，篩選出含有質(zhì)粒的大腸桿菌。第二步：為選出“目的菌種”，將第一步篩選出的大腸桿菌用“影印法”分離。(1)采用涂布平板法，將第一步篩選出的大腸桿菌以合適的稀釋度涂布到含_質(zhì)粒的大腸桿菌和含_質(zhì)粒的大腸桿菌都能生長的培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后形成單菌落，如圖