2.2.2 動物細胞融合和單克隆抗體

1、專題二 細胞工程2.2動物細胞工程2.2.2 動物細胞融合和單克隆抗體 回顧：植物體細胞雜交技術(shù)的過程(畫出流程圖)一、動物細胞融合（又叫：細胞雜交）1.概念：指          或          動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，也稱細胞雜交。2.結(jié)果：融合形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為        

2、0;  細胞。3.動物細胞融合原理：細胞膜的          。4.誘導動物細胞融合的方法物理方法: 化學方法: 生物方法: 。5.過程： 6.意義：細胞融合突破了有性雜交方法的局限，使           成為可能。這一技術(shù)成為研究          、     &

3、#160;    、腫瘤和生物          培育的重要手段。二、單克隆抗體問題1：抗體由什么細胞產(chǎn)生？長期以來，人們是如何獲得抗體的方法？ 問題2：這種抗體有什么缺點？為什么？問題3：如何獲得大量性質(zhì)單一的抗體呢？1概念：由單一B淋巴細胞進行無性生殖形成的細胞所產(chǎn)生的化學性質(zhì) 、 強的抗體。2.單克隆抗體的制備過程：第一步：將 注射到小鼠體內(nèi)進行免疫；第二步：從該小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的細胞，與小鼠的細胞在，或聚乙二醇的誘導下融合；第三步：在特定的培養(yǎng)基中，篩選出細

4、胞；第四步：克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞，進行抗體檢測，從中挑選出的細胞群，繼續(xù)培養(yǎng)；第五步：將該雜交瘤細胞在 條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠 內(nèi)增殖，然后再從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取，分離純化單克隆抗體；3.單克隆抗體的應用（1）單克隆抗體的優(yōu)點：性質(zhì)單一，          強、          高，并可能          

5、; 。（2）作為診斷試劑：診斷病毒引起的疾病和用癌細胞制備的單克隆抗體定位診斷優(yōu)點： 。（3）用于治療疾病和運載藥物：運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成 優(yōu)點： ?！究偨Y(jié)歸納】植物體細胞雜交與動物細胞融合比較植物細胞雜交(番茄馬鈴薯植株)動物細胞融合(單克隆抗體制備)過   程第1步原生質(zhì)體的制備(酶解法)正常小鼠的處理(注射滅活抗原)第2步原生質(zhì)體的融合(物化法)動物細胞融合(物化生法)第3步雜種細胞的篩選和培養(yǎng)雜交瘤細胞的篩選和培養(yǎng)第4步雜種植株鑒定提純單克隆抗體(特異性強、靈敏度高)原理/理論基礎(chǔ)細胞膜的流動性、植物細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞增殖融合前

6、處理酶解法除去細胞壁：纖維素酶、果膠酶注射特定抗原法免疫處理正常小鼠促融因子物理法：電刺激、離心、振動化學法：聚乙二醇物化法：與植物相同生物法：滅活的仙臺病毒意義和用途(1)克服有性遠緣雜交不親和性障礙(2)培育作物新品種制備單克隆抗體有助于疾病的診斷、治療、預防【課堂反饋】一、選擇題1科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是 （ ）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞2動物細胞融合的目的中最重要的是 （ ）A.克服遠源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種

7、 D.生產(chǎn)雜種細胞3植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是 （ ） A纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理酶的專一性 B植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)細胞的全能性 C原生質(zhì)體融合和動物細胞融合生物膜的流動性 D紫草細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞的培養(yǎng)細胞分裂4下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是 （ ）A培養(yǎng)中的人效應T細胞能產(chǎn)生單克隆抗體B培養(yǎng)中的人B細胞能夠無限地增殖C人的成熟紅細胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細胞株D用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞5單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學研究中具有廣泛的應用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯誤的是 （ ）A特異性強、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成

8、“生物導彈”C體外培養(yǎng)B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體D由效應B細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌6關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是 （ ）A可以制成診斷盒用于疾病的珍斷 B可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治療C可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)7用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是 （ ）A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞B用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞C用聚乙二醇（PEG）作誘導劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合D篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體8動物細胞培養(yǎng)

9、的細胞來自于 （ ）A任何個體的細胞 B只能取自動物胚胎細胞C只能取自幼齡動物的組織細胞 D胚胎或幼齡動物的器官和組織細胞9動物細胞工程常用的技術(shù)手段中，最基礎(chǔ)的是 （ ）A.動物細胞培養(yǎng) B動物細胞融合 C單克隆杭體 D胚胎、核移植10.如用動物的細胞進行克隆實驗應該選擇的細胞核不能是 （ ） A、乳腺細胞的 B、卵細胞的 C、胃腺細胞的 D、囊胚時期的胚胎細胞的11研究單克隆抗體治療癌癥的思路是 （ ）A利用單克隆抗體特異性地對抗癌細胞 B以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細胞C抗癌物質(zhì)在克隆細胞中大量合成 D單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細胞結(jié)合12用于動物細胞培養(yǎng)的組織和細胞大都取自胚胎

10、或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細胞 （ ）A.容易產(chǎn)生各種變 B具有更強的全能 C.取材十分方便 D分裂增殖的能力強13動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是 （ ）誘導融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細胞A. B. C. D.14（多選）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應用的敘述中，正確的是 （ ）AB淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合，一般不需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導B融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體C體外培養(yǎng)時，一個效應B淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖D單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強，靈

11、敏度高，優(yōu)越性明顯15（多選）關(guān)于制備單克隆抗體的敘述不正確的是 （ ）A單克隆抗體產(chǎn)自淋巴細胞 B單克隆抗體的制備要經(jīng)過細胞融合C單克隆抗體的獲得不需要使細胞癌變D必須同時在體內(nèi)和體外培養(yǎng)挑選出所需抗體的細胞群16（多選）對細胞全能性的表述不正確的有 （ ）A沒有離體植物細胞也能表現(xiàn)出全能性 B動物細胞融合標志著動物細胞全能性的實現(xiàn)C單克隆抗體的制備原理依據(jù)是細胞的全能性 D花粉可培育成單倍體，是細胞全能性的體現(xiàn)17（多選）將小鼠骨髓瘤細胞與一種B淋巴細胞融合，可使融合的細胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體，其依據(jù)是 （ ）AB淋巴細胞只有與骨髓瘤細胞融合后才能產(chǎn)生抗體BB淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無

12、限增殖C骨髓瘤細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖D骨髓瘤細胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體18（多選）1975年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下列細胞中與單克隆抗體的制備有關(guān)是                                    

13、;                （ ）A.效應B細胞        BT淋巴細胞      C.骨髓瘤細胞 D雜交瘤細胞二、非選擇題19、下圖為細胞融合的簡略過程（只考慮兩個細胞的融合），請據(jù)圖回答：I若A、B是基因型分別為rrHH、RRhh兩個煙草品種細胞的花粉，且這兩對基因位于非同源染色體上，由于一對隱性純合基因(rr或hh) 的作

14、用，在光照強度大于800勒克斯時，都不能生長。（1）實驗開始時必須用 除去不利于原生質(zhì)體融合的物質(zhì)。（2）實驗中除獲得雜種細胞外，還有基因型為 的融合細胞。（3）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細胞，方法： 。（4）將雜種細胞培養(yǎng)成雜種植株依據(jù)的理論基礎(chǔ)是 。II若該過程是制備治療“SARS”病毒的單克隆抗體，A為人B淋巴細胞（染色體組成為2AXX=46），B為鼠骨髓瘤細胞（染色體組成為2AXX=40）（5）用單克隆抗體制成“生物導彈”主要利用了抗體的 特性。（6）A細胞來自于 ，雜種細胞C共有 個染色體組。（7）雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)時與植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是培養(yǎng)基要用 培

15、養(yǎng)基。（物理狀態(tài)），培養(yǎng)基中除了添加必要的營養(yǎng)物質(zhì)為還需加入 。20.兩場籌備了10年的“太空結(jié)合”首次在神舟八號飛船上舉行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞,新人在“產(chǎn)房”電融合儀內(nèi)孕育新生命。160min后,中國首批“太空娃娃”終于順利誕生?！疤胀尥蕖闭Q生和地面實驗如圖所示。請回答下列問題：(1)小白鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞能融合在一起,體現(xiàn)了細胞膜具有_ _的特點。(2)若用于SARS的預防上,則宜采用_ _細胞?？茖W工作者正在研究治療癌癥使用的生物導彈是_ _。(3)B淋巴細胞和T淋巴細胞都是由_ 形成的。這種相同細胞的后代,在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上產(chǎn)生穩(wěn)定差異的過程,叫

16、做_             。(4)鼠的淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后,在培養(yǎng)時通過_（有絲/減數(shù)）分裂方式大量繁殖。細胞中染色體數(shù)目與淋巴細胞相比有何特點？_；要觀察融合后的細胞中的染色體形態(tài)、數(shù)目,可用一定濃度的_       _處理。(5)融合的細胞具有兩種細胞的特性,即_和_。211975年科學家首次利用B淋巴細胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。請觀察下圖，回答問題：培養(yǎng)基特殊成分主要作用次黃嘌呤骨髓瘤細胞不能利用

17、氨基嘌呤阻斷DNA合成胸腺嘧啶核苷脾細胞用于合成DNA（1）單克隆抗體是指                 ，其特點是                       。（2）制備單克隆抗體的B淋巴細胞一般從  &

18、#160;      （器官）中采集。從表中看，用于篩選雜交瘤細胞的是特定的            培養(yǎng)基。（3）大量制備單克隆抗體的方法主要有兩種：體外培養(yǎng)法，可獲得10g/mL的抗體；動物體內(nèi)誘生法可獲得520mg/mL的抗體。你選擇的方法及原因是                                      。22、右圖是制備分泌抗X抗