毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定珍珠明目滴眼液中冰片的含量

1、502安徽醫(yī)藥 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal 2009May;13(5)藥物分析毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定珍珠明目滴眼液中冰片的含量蔡 冰(廣東藥學(xué)院,廣東廣州 510006)摘要:目的 用毛細(xì)管氣相色譜法對(duì)珍珠明目滴眼液中冰片的含量進(jìn)行測(cè)定。方法 采用OV 17毛細(xì)管色譜柱(30m 0.32mm 0.25 m);程序升溫,起始溫度為90!;進(jìn)樣口溫度220!;FID檢測(cè)器,檢測(cè)器溫度為220!。結(jié)果 用氣相色譜法測(cè)定該滴眼液其冰片在0.05490.2743gL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,線性方程為Y=2.0142X-0.0168,r=0.9999。平均回

2、收率為:98.3%(n=5),RSD=1.9%(n=5)。結(jié)論 本方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確?？蔀橥愃幤分斜暮繙y(cè)定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。關(guān)鍵詞:滴眼液;冰片;毛細(xì)管氣相色譜法DeterminationofborneolineyedropsbygaschromatographyCAIBing(GuangdongCollegeofPharmacy,Guangzhou,Guangdong510006)Abstract:Aim Toestablishagaschromatography(GC)methodforthedeterminationofborneolineyedrops.Method Aov 17col

3、 umn(30m 0.32mm 0.25 m)wasused.Columntemperaturewasraisedbyprogramming,withoriginaltemperatureat90!andin jectortemperatureat220!.FIDtemperatureis220!.Results Thelinearrangeofborneolwas0.05490.2743gL-1.Theaveragerecoverywas98.3%(n=5),andRSDwas1.9%(n=5).Conclusion Themethodissimpleandaccurate.Keywords

4、:eyedrops;borneo;lGC 珍珠明目滴眼液為外用中成藥制劑,是由珍珠液、冰片等13組成,具有清熱瀉火,養(yǎng)肝明目,緩解視力疲勞等作用。冰片為其中的主要成分之一,由于冰片為易升華的成分,因此,采用氣相色譜法測(cè)定48。本研究應(yīng)用OV 17毛細(xì)管色譜柱,以萘為內(nèi)標(biāo),以龍腦峰和異龍腦峰面積和計(jì)算冰片的峰面積,測(cè)定了珍珠明目滴眼液中冰片含量。在本研究的色譜條件下,冰片中的龍腦和異龍腦與內(nèi)標(biāo)物實(shí)現(xiàn)了基線分離。該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確,可用于含類滴眼液中冰片的含量測(cè)定。圖5 梔子苷HPLC色譜圖3.9 加樣回收試驗(yàn) 精密稱取批號(hào)為060701的樣,除去糖衣,研細(xì),取適量后分別精密加入適量梔子苷對(duì)照品

5、溶液適量,揮干對(duì)照品溶劑后,按供試品溶液制備方法,平行操作6份,依法測(cè)定,進(jìn)樣量10 ,l計(jì)算回收率,結(jié)果平均回收率為97.94%,RSD為2.07%。結(jié)果表明方法回收率良好。3.10 樣品測(cè)定結(jié)果 精密稱取10批膽樂(lè)片樣品,按供試品溶液制備方法制備成供試品溶液,進(jìn)樣量10 ,l依法測(cè)定,本品每1g含梔子以梔子苷(C17H24O11)計(jì),不得少于2.6mg。結(jié)果見(jiàn)表1。表1 樣品中梔子苷含量測(cè)定結(jié)果批號(hào)梔子苷含量/mgg-10607015.59320607024.72110607032.786406070457935批號(hào)梔子苷含量/mgg-10607065.28860

6、607075.28640607084.99730607094.69490607102.65004 討論膽樂(lè)片處方中的藥味較多,因此對(duì)其中藥味的薄層鑒別帶來(lái)了很大的困難,筆者通過(guò)大量的薄層條件和樣品的前處理方法的摸索試驗(yàn),得出了薄層效果較好,重復(fù)性好的大黃、柴胡、人工牛黃和梔子的薄層條件,并對(duì)幾批樣品進(jìn)行了鑒別,結(jié)果表明這4味藥材的薄層色譜鑒別方法良好,故可以作為膽樂(lè)片質(zhì)量控制的方法之一。參考文獻(xiàn):1 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)S.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:17.2 馮一凡,茍立成.膽樂(lè)片中梔子苷含量測(cè)定的方法學(xué)研究J.陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,7(25):55-6.3 張貴岑.梔

7、子顆粒劑中梔子苷的含量測(cè)定J.安徽醫(yī)藥,2003,7(5):378.4 金齊武,張青云,蒲婧哲.HPLC法測(cè)定龍膽瀉肝丸(水丸)中梔子苷的含量J.安徽醫(yī)藥,2008,12(7):604-5.(:-安徽醫(yī)藥 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal 2009May;13(5)1 儀器與試藥1.1 儀器 AgilentGC-6820型氣相色譜儀。1.2 試藥 冰片對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)110743200504)珍珠明目滴眼液(蘇州工業(yè)園區(qū)天龍制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)為080619,080812,060911)內(nèi)標(biāo)物:萘;試劑:無(wú)水乙醇為分析純。2 方法與

8、結(jié)果2.1 色譜條件 本測(cè)試采用OV 17毛細(xì)管色譜柱(30m 0.32mm 0.25 m)。程序升溫,起始溫度為90!(保持3min),以10!/min的升溫速率升至110!(3min),再以8!/min的升溫速率升至160!(3min);采用FID檢測(cè)器,進(jìn)樣口溫度及檢測(cè)器溫度為220!。2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備2.2.1 對(duì)照品儲(chǔ)備液 取冰片對(duì)照品54.85mg于10ml容量瓶中,用無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻。5032.2.2 對(duì)照品溶液 取對(duì)照品儲(chǔ)備液1ml于10ml容量瓶中,精密加入1ml內(nèi)標(biāo)溶液,用無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻。2.2.3 內(nèi)標(biāo)溶液 取萘213.0mg于50mg

9、容量瓶中,用無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻。2.2.4 供試液 取珍珠明目滴眼液倒出內(nèi)容物,精密量取5ml于10ml容量瓶中,精密加入1ml內(nèi)標(biāo)溶液,用無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻。2.3 系統(tǒng)適應(yīng)性 在上述色譜條件下取對(duì)照品溶液1 l進(jìn)樣測(cè)定,結(jié)果理論塔板數(shù)按萘計(jì)算大于420000,龍腦與異龍腦的分離度大于1.5。見(jiàn)圖1(a)圖、(b)圖。2.4 陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn) 按照珍珠明目滴眼液的處方比例,制備陰性樣品適量,按樣品測(cè)定方法操作,陰性樣品色譜圖中,在與冰片對(duì)照品相同保留時(shí)間處無(wú)色譜峰出現(xiàn),表明樣品中其它組分對(duì)含量測(cè)定無(wú)干擾。見(jiàn)圖1(c)。圖1 冰片的氣相色譜圖 (注:1-異龍腦;2-龍腦;3

10、-萘)2.5 線性關(guān)系考察 精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.25,0.5,0.75,1.0,1.25m,l分別置于10ml容量瓶中,各加入內(nèi)標(biāo)溶液1,用無(wú)水乙醇定量稀釋配制成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別取1 l進(jìn)樣,以對(duì)照品含量為橫坐標(biāo),對(duì)照品峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸分析,得到的回歸方程為Y=2.0142X-0.0168,r=0.9999(n=5)。結(jié)果表明冰片在0.05490.2743gL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.6 精密度試驗(yàn) 取同一對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次,記錄對(duì)照品峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積,結(jié)果冰片的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比的RSD=0.3%(n=5)。2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)的供試品

11、5份,分別制成5份供試品溶液。分別取1 l進(jìn)樣,記錄冰片的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積.計(jì)算冰片的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比的RSD=1.86%(n=5)。2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一份供試品溶液,分別在0,2,4,6,8,10h各進(jìn)樣1次,l記錄各對(duì)照品峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積,結(jié)果冰片的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比的RSD=1.73%,表明供試品溶液在10h內(nèi)穩(wěn)定性良好。2.9 樣品含量測(cè)定 取同一廠家的3個(gè)批號(hào)的樣品,按2.2.4方法制備。取1 l樣品注入氣相色譜儀批號(hào)為080619、080812、060911的三批樣品,冰片平均含量分別為0.3068、0.3123、0.3194gL-1。2.10 回收率試驗(yàn) 取已

12、知含量的樣品(批號(hào)080619)適量,加入一定量的冰片對(duì)照品,按供試品溶液制備方法制備。在上述色譜條件下測(cè)定,結(jié)果平均回收率為98.3%(n=5)。RSD=1.86%(n=5)。3 討論3.1 固定液的選擇 本研究曾采用了DB FFAP毛細(xì)管色譜,現(xiàn)B P的保;組分未達(dá)到較好的分離。因而選擇了弱極性的OV 17毛細(xì)管色譜柱。3.2 內(nèi)標(biāo)物的選擇 在一些參考文獻(xiàn)中,測(cè)定冰片選擇的內(nèi)標(biāo)物有正己烷、水楊酸甲酯、萘等。由于萘與樣品中的組分能夠完全分離,價(jià)格又便宜,因而選擇萘作為內(nèi)標(biāo)物。3.3 人工合成冰片的確定 冰片對(duì)照品為人工合成,是由龍腦和異龍腦組成。在本研究條件下,冰片對(duì)照品氣相色譜圖有兩個(gè)峰,

13、即:龍腦峰和異龍腦峰。樣品中也有兩個(gè)峰,比較對(duì)照品和樣品的保留時(shí)間,可確定珍珠明目滴眼液中的冰片為人工合成冰片。參考文獻(xiàn):1 盧麗萍,王俊華.珍視明滴眼液中冰片的含量測(cè)定J.中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn),2005,6(3):36-7.2 周文梟,曾立威,周嵩煜,等.兩種氣相色譜法測(cè)定珍珠明目滴眼液中冰片的含量J.華西藥學(xué)雜志,2004,19(2):137-9.3 陸敏儀,周嵩煜,李 梅.珍視明目滴眼液中冰片含量測(cè)定方法的改進(jìn)J.廣西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2001,18(5):669-1.4 石巧娟,陳琴華,戴方偉,等.復(fù)方丹參片中冰片的GC-MS法測(cè)定J.中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,2006,37(10):706-7.5 韓 鵬,包世寅,葉興法.氣相色譜法測(cè)定止癢消炎水中冰片、薄荷腦和麝香草酚的含量J.藥學(xué)進(jìn)展,2