植物細(xì)胞滲透勢的測定

1、植物細(xì)胞滲透勢的測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、觀察植物組織在不同濃度溶液中細(xì)胞質(zhì)壁分離的產(chǎn)生過程。2、掌握測定植物組織滲透勢勢的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理（一）、滲透勢是水勢的組分之一，是指由于細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)顆粒的存在而使水勢下降的數(shù)值，純水的滲透勢為零，溶液的滲透勢為負(fù)值。植物細(xì)胞的滲透勢是植物的一個(gè)重要生理指標(biāo)，對于植物的水分代謝、生長及抗性都具有重要的意義。常用于測定植物細(xì)胞與組織水勢的方法有質(zhì)壁分離法、冰點(diǎn)降低法、蒸汽壓降低法等。   成熟植物細(xì)胞水勢的組成：   = s+ p1. s 溶質(zhì)勢/滲透勢   由于溶液中溶質(zhì)顆粒的存在而使水勢降低的值。純水的溶質(zhì)

2、勢為0，溶液的滲透勢可根據(jù) Vant Hoff Equation計(jì)算： s = - RTiC2.  p 壓力勢  壓力勢是指外界（如細(xì)胞壁）對細(xì)胞的壓力而使水勢增大的值。一般情況下細(xì)胞處于膨脹狀態(tài)，原生質(zhì)體壓迫細(xì)胞壁產(chǎn)生膨壓，而細(xì)胞壁反過來反作用于原生質(zhì)體使產(chǎn)生壓力勢。    當(dāng)發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)， p 0，這時(shí) = s（二）、質(zhì)壁分離法實(shí)驗(yàn)原理:       生活細(xì)胞的原生質(zhì)膜是一種選擇透性膜，可以看作是半透膜，它對于水是全透性的,而對于一些溶質(zhì)如蔗糖的透性較低。因此當(dāng)把植物組織放在一定

3、濃度的外液中，組織內(nèi)外的水分便可通過原生質(zhì)膜根據(jù)水勢梯度的方向而發(fā)生水分的遷移，當(dāng)外液濃度較高時(shí)（高滲溶液），細(xì)胞內(nèi)的水分便向外滲出，引起質(zhì)壁分離；而在外液濃度低時(shí)（低滲溶液），外液中的水則進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)細(xì)胞在一定濃度的外液中剛剛發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)（初始質(zhì)壁分離，質(zhì)壁分離僅在細(xì)胞角隅處發(fā)生），細(xì)胞的壓力勢等于零，細(xì)胞的滲透勢等于細(xì)胞的水勢，也就等于外液的滲透勢。該溶液即稱為細(xì)胞或組織的等滲溶液，其濃度稱為等滲濃度。 三、實(shí)驗(yàn)器材及試劑1、實(shí)驗(yàn)儀器：    顯微鏡，載玻片及蓋玻片，鑷子，刀片2、實(shí)驗(yàn)試劑：    1 mol/L蔗糖溶液：配成

4、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60mol/L的蔗糖溶液各2ml3、實(shí)驗(yàn)材料：    洋蔥鱗莖四、實(shí)驗(yàn)步驟1、分別配制0.20、 0.25 、 0.30、 0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60mol/L的蔗糖溶液各2ml于稱量瓶中，混勻,編號。2、用鑷子撕取帶有色素的洋蔥鱗莖表皮，分別放入不同濃度蔗糖溶液中（-片瓶），使其完全浸沒，約15min 。3、自高濃度依次取出洋蔥表皮放在載玻片上，加一滴原容易，加蓋玻片，于低倍顯微鏡下觀察。4、統(tǒng)計(jì)50個(gè)細(xì)胞，如果有50%發(fā)生質(zhì)壁分離，就認(rèn)為從此濃度

5、發(fā)生質(zhì)壁分離。5、確定一個(gè)引起半數(shù)以上細(xì)胞原生質(zhì)剛剛從細(xì)胞壁角隅上分離的濃度和不引起質(zhì)壁分離的最高濃度，洋蔥鱗莖細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離的等滲濃度即為兩極限濃度的平均值。6、記錄結(jié)果并將結(jié)果代入公式；                -sRTiC1式中： -s為細(xì)胞滲透勢；               

6、60;  R為氣體常數(shù)0.083×105L.Pa/mol.K；               T為熱力學(xué)溫度，單位K；即273+t，t為實(shí)驗(yàn)溫度，單位是；               i為解離系數(shù)，蔗糖為1；        

7、;       C1為等滲溶液的質(zhì)量摩爾濃度，單位是mol/kg。  C1=C2X1000/(1000X-MBC2)注意C1與C2的轉(zhuǎn)換。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過本次實(shí)驗(yàn) ，最后確定在視野中剛剛找到一半的細(xì)胞原生質(zhì)從細(xì)胞壁的角隅處上分離的濃度為：0.50mol/l。對其濃度進(jìn)行修正為：質(zhì)量摩爾濃度(mol/kg) C1=C2×1000/（1000×MBC2）=(0.475x1000)/(1000x1.0653342.3x0.475)=0.526mol/kg所以，洋蔥莖下表皮的細(xì)胞質(zhì)液的滲透勢為： 

8、60;    s = - RtiC=0.083X1X0.526X(273+20)X105=1.28MPa六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析1、本次實(shí)驗(yàn)中，由于撕下的洋蔥下表皮普遍較厚，通常是由幾層疊在一起的，這在一定程度上影響了在顯微鏡下的觀察，特別是確定大約一半的細(xì)胞發(fā)生了質(zhì)壁分離，并很難確定發(fā)生質(zhì)壁分離的程度。2、在撕下的洋蔥下表皮帶有色素的細(xì)胞較少，這在一定程度上對確定剛好發(fā)生質(zhì)壁分離的濃度也有偏差。3、撕取楊蔥鱗莖表皮較后的原因也與撕取的速度有關(guān)，所以在撕取時(shí)因盡量迅速，且由于浸入溶液的先后不同，導(dǎo)致時(shí)間有所差異。七、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1 蔗糖溶液一定要混合均勻；2 表皮組織必須

9、完全浸沒于溶液中；3 質(zhì)量摩爾濃度和物質(zhì)的量的濃度之間需進(jìn)行轉(zhuǎn)換。4、撕取楊蔥鱗莖表皮組織時(shí)應(yīng)盡量薄，以免為后續(xù)試驗(yàn)造成影響5、實(shí)驗(yàn)完畢后清理好實(shí)驗(yàn)器材                                       

10、