免疫學復習資料

1、免疫學復習資料緒 論1、名詞解釋： 免疫：是指機體免除疫病及抵抗疾病發(fā)生的能力。免疫是機體的一種生理反應(yīng)。指外來抗原進入機體，機體免疫系統(tǒng)識別“自己”或“非己”發(fā)生特異性的免疫應(yīng)答，排除異物或?qū)ψ陨沓煞志S持耐受，但免疫過程并不是總是有利的，有時可引起機體損害的生理反應(yīng)。2、從正反二個方面闡述免疫的功能。 答：功 能生理性反應(yīng)（有利方面）病理性反應(yīng)（有害方面）免疫防御清除病原微生物及其他抗原超敏反應(yīng) 免疫缺陷病免疫自穩(wěn)清除損傷細胞或衰老的細胞自身免疫病免疫監(jiān)視清除突變或畸變的惡性細胞惡性腫瘤 持續(xù)性病毒感染3、了解免疫的類型，并將其特點進行比較答：免疫的類型有：1、自然免疫性、固有免疫性、先天的

2、或稱非特異性免疫。是機體先天就有的而且始終存在的防御機制。 特點：（1） 出生時已具備（早） （2） 可穩(wěn)定性遺傳給后代（3） 作用廣泛；無特異性 （4） 個體差異不大 2、獲得免疫性、適應(yīng)免疫性、后天的或稱特異性免疫。是機體通過抗原誘導獲得免疫應(yīng)答而產(chǎn)生的對非自身物質(zhì)包括病原物的抵抗性。特點：（1）出生后受抗原刺激產(chǎn)生（晚） （2）具有特異性（針對性） （3）一般不能遺傳 （4）個體差異大 （5）具有記憶性第二章 抗 原1、名詞解釋： 抗原(Ag)：是指一類能刺激機體免疫系統(tǒng)使之產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)的應(yīng)答產(chǎn)物（抗體或效應(yīng)T細胞）在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì).免疫原性：是指抗原能刺激

3、特異性免疫細胞，使之活化、增生、分化、最終產(chǎn)生抗體和效應(yīng)淋巴細胞的特性。免疫反應(yīng)性：是指抗原可在體內(nèi)外與相應(yīng)的抗體/|效應(yīng)淋巴細胞發(fā)生特異性結(jié)合產(chǎn)生免疫反應(yīng)的特性。AD（抗原決定簇）：指抗原分子中決定抗原特性的基本結(jié)構(gòu)或特殊化學基團，又稱表位。完全抗原：是指既有免疫原性又有抗原性的物質(zhì)。如：多數(shù)蛋白質(zhì)分子，細菌病毒等。半抗原：又稱不完全抗原。指單獨存在時只具有抗原性而無免疫原性的物質(zhì)。如：二硝基酚，青霉素異種抗原：是指來源于另一物種的抗原性物質(zhì)。如各種微生物、動物的血清。同種異型抗原：是指來源于同一物種中基因型不同個體的抗原性物質(zhì)，自身無應(yīng)答，但可刺激同種其他個體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。如ABO血型抗原

4、。自身抗原：是指自身正常的組成成分，特殊條件下（如自身組織成分結(jié)構(gòu)改變、胚胎期免疫系統(tǒng)未接觸的隱蔽性自身成分暴露）能引起自身免疫應(yīng)答反應(yīng)的物質(zhì)。如晶狀體、腦組織等未與淋巴系統(tǒng)接觸的成分。異嗜性抗原：指不同屬的動物、植物和微生物細胞表面上存在的共同抗原，即Forsman抗原。TD-Ag：又稱T細胞依賴性抗原。需要Th細胞輔助才能刺激機體產(chǎn)生抗體的一種抗原。如大多數(shù)天然蛋白質(zhì)或細胞抗原（病原微生物、血細胞、血清蛋白等）TI-Ag：又稱非T細胞依賴性抗原。指不需要Th細胞輔助就能刺激機體產(chǎn)生抗體的一種抗原。天然TI-Ag種類較少，如細菌脂多糖、莢膜多糖、聚合鞭毛素等。類毒素：是指細菌的外毒素經(jīng)0.3

5、%0.4%甲醛處理制成，失去毒性，保留免疫原性，可誘導機體產(chǎn)生抗體。DNA疫苗：指通過采用基因工程的方法，將編碼抗原決定簇的基因插入強啟動子的質(zhì)粒中而制成的疫苗，直接接種的質(zhì)粒轉(zhuǎn)源后可在宿主內(nèi)持續(xù)表達誘導免疫應(yīng)答的抗原。多肽疫苗：是指將病原體抗原基因中已知或預(yù)測的有效免疫原的氨基酸序列，經(jīng)基因工程法或化學法合成多肽抗原制備的疫苗。 重組蛋白疫苗：是指將病原體有效免疫原DNA片段插入原核或真核表達載體，再轉(zhuǎn)入細菌酵母或哺乳動物細胞表達后得到的所需的抗原蛋白。如重組乙肝表面抗原疫苗等。亞單位疫苗：指去除病原體中與激發(fā)保護性免疫無關(guān)甚至是有害成分，保留有免疫原成分制成的疫苗。如用乙肝表面抗原乙肝疫苗

6、，百日咳桿菌絲狀凝血素 無細胞百日咳疫苗。2、抗原有何特性？決定抗原免疫原性的因素有哪些？ 答：抗原有兩種特性，即免疫原性和免疫反應(yīng)性。 決定抗原免疫原性的因素：1、 抗原本身因素：a、抗原的理化性質(zhì)：分子組成（免疫原性：蛋白質(zhì) > 多糖/多肽 > 核酸 / 脂肪）分子大?。ㄎ镔|(zhì)分子量越大，免疫原性越強）分子結(jié)構(gòu)物理性狀（電荷多的免疫原性弱；聚合狀態(tài) > 單體狀態(tài)；顆粒性抗原 > 可溶性抗原） b、抗原的異物性：異種物質(zhì)，同種異體物質(zhì)，自身物質(zhì)。c、抗原的完整性 d、抗原的分子構(gòu)象和易接近性 2、抗體因素：遺傳因素、年齡、性別、生理性狀 3、免疫方式：a、劑量及次數(shù) b

7、、途徑3、何為交叉反應(yīng)？為什么抗原具有特異性，又能發(fā)生交叉反應(yīng)？答：交叉反應(yīng)是指抗體或致敏淋巴細胞對具有相同或相似的抗原表位的不同抗原的反應(yīng)，它是由抗原的異質(zhì)性和共同表位的存在所致。發(fā)生交叉反應(yīng)的原因：1、抗原異質(zhì)性：即抗原物質(zhì)的非均一性，多數(shù)抗原物質(zhì)由多個不同分子組成，且同一分子表面可存在不同表位。 2、相同決定簇：兩種或以上的抗原分子中含有相同的抗原決定簇。3、決定相似簇：結(jié)構(gòu)相似的抗原決定簇。第三章 抗 體1、名詞解釋：Ab（抗體）：是指機體的免疫系統(tǒng)受抗原物質(zhì)刺激后，B 細胞增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的一類能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白。Ig（免疫球蛋白）：具有抗體活性或化學結(jié)構(gòu)與抗體相似

8、的球蛋白均稱為免疫球蛋白。Ag(抗原)：是指一類能刺激機體免疫系統(tǒng)使之產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)的應(yīng)答產(chǎn)物（抗體或效應(yīng)T細胞）在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì).2、Ig的類型有哪些？其分類依據(jù)是什么？ 答：1、根據(jù)Ig重鏈靠近羧基末端氨基酸組成及排列順序的不同可分成五種：、鏈，由此相應(yīng)的Ig 可分為五類：Ig G （分為四個亞類：IgG1、 IgG2、 IgG3、 IgG4）、 Ig M （無鉸鏈區(qū)，有4個CH 結(jié)構(gòu)域（CH1、CH2、CH3、CH4） ）、 Ig A（IgA為外分泌抗體，分為血清型和分泌型（sIgA）兩種） 、Ig D（有mIgD 與sIgD 兩種類型） 、Ig E（無鉸鏈區(qū)

9、，有4個CH結(jié)構(gòu)域（CH1、CH2、CH3、CH4） ） 。 2、Ig輕鏈有和兩種，因此Ig 可分成和兩型。3、Ig的免疫原性有哪幾種類型？ 答：由于Ig 分子包含多種不同的抗原表位，因此具有不同的免疫原性。Ig 抗原表位可分為三種，故而Ig的免疫原性有以下三種：同種型：同種的所有個體Ig 的類、亞類型及亞型間的同種型抗原表位相同，但與另一物種不同。 同種異型：同一種屬不同個體間Ig 分子具有的不同抗原特異性 獨特型：同一個體內(nèi)不同B 細胞克隆產(chǎn)生的Ig，因其超變區(qū)aa序列不同而各自具有獨特的抗原決定簇結(jié)構(gòu)4、抗體的多樣性是如何形成？ 答：機制：1、眾多的胚系基因（原始因素）2、組合多樣性：（

10、1）重排多樣性（最基礎(chǔ)、最重要的因素） （2）VH、VL鏈配對多樣性，隨機裝配3、連接多樣性：（1）不精確連接（實質(zhì)是核苷酸丟失）（2）體細胞高頻突變（3）N-區(qū)核苷酸插入（只發(fā)生在VH ，N區(qū)長短和組成隨機）5、人體若被狗咬傷或造成深度皮外傷后，為什么要多次注射狂犬疫苗或破傷風疫苗？ 答：這是由抗體產(chǎn)生的一般規(guī)律所決定的。當抗原第一次刺激機體時，產(chǎn)生初級應(yīng)答反應(yīng)，刺激機體產(chǎn)生具有潛伏期長、濃度低、維持時間較短、低親和力的IgM 類抗體。相同抗原再次刺激機體產(chǎn)生的應(yīng)答反應(yīng)，能刺激機體產(chǎn)生具有潛伏期短、濃度高、維持時間長、高親和力的IgG 類抗體。故人體被狗咬傷或造成深度皮外傷后，要多次注射狂犬

11、疫苗或破傷風疫苗第四章 補 體1、名詞解釋補體：存在于正常人和動物血清中的一組與免疫相關(guān)并在被激活后具有酶活性的蛋白質(zhì)，其主要作用是協(xié)助抗體 清除抗原。 補體系統(tǒng)：由存在于人或脊椎動物血清與組織液中的一組可溶性蛋白及存在于血細胞與其它細胞表面的一組膜結(jié)合蛋白和補體受體所組成，是由 30 余種蛋白質(zhì)成分組成的多分子系統(tǒng)。 經(jīng)典激活途徑：又稱傳統(tǒng)途徑、第一途徑、C1 途徑。是由抗原抗體復合物激活補體的補體激活途徑。主要激活物質(zhì)是特異性抗體與抗原結(jié)合形成的免疫復合物（IC）。適于激活補體的抗體：IgM（激活效率最高）、IgG1、 IgG2、 IgG3（2分子以上才能激活）MBL途徑：由結(jié)構(gòu)及功能與C

12、1q 相似的急性期蛋白引起的補體系統(tǒng)激活過程。主要激活物：病原體表面甘露糖基或 N- 氨基半乳糖基。替代途徑：是指由細菌細胞壁成分激活補體的補體激活途徑，不必經(jīng)過C1、C4、C2，由C3 裂解開始，在B 因子和D 因子參與下，激活物直接激活C3，然后C5 至C9 依次活化的途徑。主要激活物：細菌細胞壁成分（脂多糖、肽聚糖、磷壁酸等） 、酵母多糖、凝聚的IgA 及IgG4、眼鏡蛇毒等。補體受體（CR）：細胞表面能與某些補體成分或補體片段特異性結(jié)合的糖蛋白分子，即CR分子。它們均為膜蛋白，分布廣泛，各種組織細胞表面均有CR。溶膜復合物：補體活化后期在靶細胞的細胞膜上形成的跨膜管狀通道，由C5b67

13、89n聚合而成。 2、補體激活的途徑有哪些？它們之間有何異同？ 答：補體激活的途徑有：經(jīng)典途徑，MBL 途徑，旁路途徑三種。 其主要區(qū)別如下：比較項目經(jīng)典途徑MBL 途徑旁路途徑激活物IgM/IgG13與抗原形成的免疫復合物病原菌表面甘露糖基等固有成分C1C9MBL 、MASP C2 C9C3、B、D、P因子C5C9所需離子Ca2+、Mg2+Ca2+、Mg2+C3 轉(zhuǎn)化酶C4b2bC4b2bC3bBb(P) C5 轉(zhuǎn)化酶C4b2b3bC4b2b3b生物學作用在特異性體液免疫的效應(yīng)階段起作用參與非特異性免疫在感染早期起作用參與非特異性免疫在感染早期起作用是否依賴Ab是否否特異性有無無 相同點：具

14、有共同的終末通路，均可形成MAC，裂解細胞。3、補體系統(tǒng)在人體免疫防御中有何作用？ 答：1、補體介導的細胞溶解（溶菌及細胞毒作用） 2、調(diào)理作用：補體裂解片段C3b或C4b 的一端與細菌或病毒結(jié)合，另一端與具有C3b 受體的吞噬細胞結(jié)合，促進吞噬細胞的吞噬作用。 3、炎癥介質(zhì)作用：抗感染及清除異物；引起變態(tài)反應(yīng)性疾病及炎癥損傷。 a、激肽樣作用：C2a能增加血管通透性，引起炎癥性充血。 b、過敏毒素作用：C3a、C4a、C5a可激活肥大細胞和嗜堿性粒細胞釋放組胺等活性介質(zhì)，引起血管擴張、平滑肌收縮、局部水腫等炎癥反應(yīng)。 c、趨化作用：C3a、C5a、C5b67可吸引中性粒細胞和吞噬細胞向感染或

15、損傷部位聚集（形成濃度梯度），造成炎癥反應(yīng)。 4、免疫復合物清除作用：a. 清除免疫復合物，如抗病毒感染； b. 防止免疫性疾病，若復合物沉積過多，引起腎小球腎炎。 5、清除凋亡細胞：C1q、C3b 和iC3b 等補體因子可識別和結(jié)合凋亡細胞，通過與吞噬細胞表面的相應(yīng)受體作用將其清除。 6、免疫調(diào)節(jié)作用：a、CR2（CD21）B 細胞協(xié)同受體的組成部分，協(xié)助B細胞活化。b、C3b 與APC 表面的C3bR 結(jié)合，促進APC 對抗原的吞噬作用。C3b 與B 細胞表面CR1 結(jié)合，促B 細胞增殖分化。第五章 免疫系統(tǒng)1、名詞解釋：免疫活性細胞：免疫應(yīng)答過程中，能識別抗原、接受抗原刺激而活化、增生分

16、化，發(fā)生特異性免疫應(yīng)答的淋巴細胞。T細胞：即T淋巴細胞，介導細胞免疫應(yīng)答，并在TD-Ag誘導的體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要的輔助作用。B細胞：即B淋巴細胞，在骨髓中的淋巴結(jié)構(gòu)樣前體分化成熟后主要定居于淋巴結(jié)皮質(zhì)淺層的淋巴小結(jié)和脾臟的淋巴小結(jié)內(nèi)，是體內(nèi)產(chǎn)生抗體的細胞，主要執(zhí)行體液免疫，并具有抗原遞呈功能。CD抗原：以單克隆抗體鑒定為主的聚類分析法，將來自不同實驗室的識別同一白細胞分化抗原歸為同一分化群抗原即CD抗原，在許多場合下，某一分化抗原及其編碼基因都用同一CD序列號TCR（T細胞抗原受體）：T細胞表面能結(jié)合特異性抗原的膜結(jié)合蛋白質(zhì)分子。BCR（B細胞抗原受體）：B細胞表面能結(jié)合特異性抗原的蛋白質(zhì)

17、，B細胞特征性表面標志。 NK細胞：即自然殺傷細胞大顆粒淋巴細胞。是一類獨立的淋巴細胞，它們不表達特異性抗原識別受體，在其包漿內(nèi)有許多嗜苯胺顆粒?？勺R別正常自身組織和異常組織細胞，僅殺傷病毒感染和癌變細胞，對正常組織無細胞毒作用。APC抗原遞呈細胞：表面具有MHCII類分子，能攝取、加工處理抗原，并將其遞呈給淋巴細胞的一類免疫細胞（DC、M、B細胞）。2、何謂免疫系統(tǒng)？它由哪幾部分組成？中樞免疫器官與外周免疫器官在功能上有何主要區(qū)別？ 答：免疫系統(tǒng)是主宰和執(zhí)行機體的免疫功能的機構(gòu)，是機體發(fā)生免疫應(yīng)答的物質(zhì)基礎(chǔ)。免疫系統(tǒng)由免疫器官、免疫細胞、免疫分子組成。中樞免疫器官（骨髓，胸腺，法氏囊/ 腔上

18、囊）即初級淋巴細胞，是淋巴細胞產(chǎn)生和發(fā)育成熟的場所，淋巴細胞在這些器官中產(chǎn)生并發(fā)育成熟，同時又清除掉那些能識別自身成分的淋巴細胞克隆。外周免疫器官（淋巴，脾臟，其它外周淋巴組織）即次級淋巴器官，成熟的淋巴細胞在這些器官中定居增殖，并與外來抗原相遇并對其作出免疫應(yīng)答。3、T細胞、B細胞在發(fā)生、定居、表面標志及免疫作用方式上有何區(qū)別？ 答：發(fā)生：T細胞：骨髓中產(chǎn)生，胸腺中成熟；B細胞：骨髓中產(chǎn)生，骨髓中成熟。 定居：B細胞：在脾臟，淋巴結(jié)等定居；T細胞：在外周免疫器官的胸腺依賴區(qū)定居。 表面標志：B細胞的表面標志：膜表面受體： BCR（SmIg）；Fc受體；CR。表面抗原：CD抗原（CD40、CD

19、72、CD80、CD86）；MHC- T細胞的表面標志：表面抗原：CD抗原（CD4，CD8）；膜表面受體：TCR；E受體（CD2）；其它受體（CD28，CD40L） 免疫作用方式：T細胞：細胞免疫及協(xié)助TD-Ag體液免疫；B細胞：體液免疫，呈遞抗原。第六章 主要組織相容性復合物1、名詞解釋：MHC（主要組織相溶性復合物）：脊椎動物某一染色體上編碼主要組織相容性抗原，控制免疫細胞間相互識別、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的一組緊密連鎖的基因群。 MHC分子：由MHC基因編碼的、在不同個體間進行組織或器官移植時，能引起快而強烈的排斥反應(yīng)的一類膜結(jié)合蛋白，其主要作用為提呈抗原肽進而激活T 淋巴細胞引起免疫應(yīng)答。HLA

20、分子：人的MHC（即HLA）編碼的、在不同個體間進行組織或器官移植時，能引起快而強烈的排斥反應(yīng)的一類膜結(jié)合蛋白?？煞譃镠LA-I類和HLA-II類分子，由兩條多肽鏈以非共價鍵形式連接組成的異二聚體。其主要作用是呈遞抗原肽，激活T細胞啟動免疫應(yīng)答。2、具有抗原提呈功能的HLA分子有幾種類型？它們之間有何主要區(qū)別？ 答：具有抗原提呈功能的HLA分子有HLA-I類和HLA-II類分子兩種類型。其區(qū)別如下： 多肽鏈的組成：HLA-I類分子由 鏈（44-47kD）和2m鏈 ( 12kD ) 組成；HLA-II類分子由鏈（32-34kD 和鏈（29-32kD )與T細胞結(jié)合的位置：HLA-I類分子：1和2

21、 結(jié)構(gòu)域 ； HLA-II類分子：1和1結(jié)構(gòu)域 共受體結(jié)合：HLA-I類分子：3區(qū)結(jié)合CD8 ； HLA-II類分子：2區(qū)結(jié)合CD4 肽結(jié)合槽：HLA-I類分子：容納8-12殘基的肽 ； HLA-II類分子：容納10-30殘基的肽 編碼的經(jīng)典成分：HLA-I類分子：HLA-A、B、C； HLA-II類分子：HLA-DP、DQ、DR 分布細胞類型：HLA-I類分子： HLA 類分子分布（廣泛分布） A、存在于有核細胞（含血小板和網(wǎng)織紅細胞）表面。 B、淋巴細胞 > 腎、肝臟、心臟 > 神經(jīng)組織、成熟的滋養(yǎng)細胞 HLA 類分子存在形式 A、膜結(jié)合：所有有核細胞表面 B、可溶性：存在于血

22、清、初乳和尿液等體液中。 HLA-II類分子（有限分布）：A、APC表面 - B細胞、單核/巨噬細胞、樹突狀細胞； B、激活的T細胞，精子和血管內(nèi)皮細胞表面 3、MHC在機體的免疫過程中有何作用？ 答： 加工、遞呈抗原：HLA-I 類分子為內(nèi)源性抗原的遞呈分子；HLA-II 類分子為外源性抗原的遞呈分子 啟動、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答：形成MHC- 抗原肽-TCR復合物，啟動免疫應(yīng)答；非經(jīng)典的類基因（E、G、F）及類基因中補體及炎癥相關(guān)基因可調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答；MHC分子是T細胞活化的協(xié)同刺激分子；免疫細胞間相互作用時，除細胞受體識別相應(yīng)抗原決 定簇外，細胞間還必須識別相應(yīng)的MHC分子。 誘導T細胞的成熟：胸腺

23、上皮細胞、DC等的MHC I類與II類分子，參與胸腺細胞的陽性選擇（雙陽性細胞）與陰性選擇，在CD4+ 和CD8+ T 細胞的分化、消除自身反應(yīng)性T細胞、建立中樞性免疫耐受過程中均起重要作用。 誘導同種異體免疫排斥反應(yīng)：宿主抗移植物或移植物抗宿主排斥反應(yīng)。第七章 抗原抗體反應(yīng)1、 名詞解釋?？苟舅兀菏瓜鄳?yīng)毒素失去毒性的抗體。中和抗體：使相應(yīng)病毒喪失傳染性的抗體。免疫分析：利用抗原抗體的特異性反應(yīng)的特性對抗原或抗體進行量和質(zhì)的測定分析。免疫電泳：利用蛋白質(zhì)在凝膠中電泳移動速率不同而被分離的特性與免疫瓊脂擴散結(jié)合起來的分析方法。免疫標記：用放射性同位素、酶、熒光素等標記抗體或抗原等所進行的抗原抗體

24、反應(yīng)。常用方法有：放射免疫檢測技術(shù)、免疫熒光技術(shù)、酶免疫技術(shù)等?？寡逍r：在給定的條件下，可結(jié)合一定量抗原的抗血清的最高稀釋度。即將抗血清經(jīng)過一系列定量稀釋后，與定量抗原反應(yīng)，能發(fā)生可見反應(yīng)的最大稀釋倍數(shù)。免疫親和層析：將一對特異性抗原 抗體的組分之一與固相基質(zhì)交聯(lián)后來純化另一組分，常用于蛋白質(zhì)抗原的分離純化。 2、簡要敘述單克隆抗體制備技術(shù)的原理及方法。答：單克隆抗體的制備技術(shù) 雜交瘤技術(shù)1、雜交瘤技術(shù)的基本原理： 雜交原理：1個B細胞×1個腫瘤細胞雜交瘤細胞B 細胞：能分泌抗體但不能進行體外長期培養(yǎng)。腫瘤細胞：能體外長期培養(yǎng)，但不能分泌抗體。雜交瘤細胞：既能分泌抗體，又能體外長

25、期培養(yǎng)。將雜交瘤細胞高度稀釋并單獨培養(yǎng)成細胞株（單克?。?，此細胞株可以產(chǎn)生只對一種抗原決定簇反應(yīng)的單一種類的抗體。大量培養(yǎng)此單克隆細胞株，即可得到高度特異性、純度均一的抗體，即單克隆抗體。 雜交瘤細胞選擇原理：采用HAT培養(yǎng)基進行選擇：游離B細胞只能存活3d；游離骨髓瘤細胞為營養(yǎng)缺陷型細胞，在有氨基喋呤存在的條件下，不能利用環(huán)境中的次黃嘌呤、胸腺嘧啶合成DNA和RNA。雜交瘤細胞含有二者的全套基因，即能利用環(huán)境中的次黃嘌呤、胸腺嘧啶合成DNA和RNA；又能進行人工培養(yǎng)2、單克隆抗體制備方法： 免疫動物細胞 B細胞(處于活躍增殖狀態(tài)、可合成抗體的B細胞) 與骨髓瘤細胞融合（聚乙二醇（PEG）法）

26、初步篩選（HAT培養(yǎng)液篩選）單株化（高度稀釋單株化后增殖產(chǎn)生單克?。┒壓Y選（酶聯(lián)免疫反應(yīng)）抗體生產(chǎn)3、抗原抗體反應(yīng)基本原理及發(fā)生的基本條件有哪些，反應(yīng)特點如何？在什么情況下出現(xiàn)等價帶？ 什么情況下出現(xiàn)前帶或后帶？答：1、基本原理：.Ag 表位（決定簇）和Ab 分子高變區(qū)（CDR）相互作用，作用前提：兩者相互吻合，具有互補性.分子表面的特異結(jié)合是非共價的，可逆，且結(jié)合力弱在極短距離內(nèi)才能發(fā)生，Ag 表位與Ab 高變區(qū)必須緊密接觸，才能有足夠的結(jié)合力，使兩者結(jié)合在一起。2、基本條件： 抗原抗體的結(jié)合力：1、抗原和抗體的結(jié)合是互補性的特異性結(jié)合 2、不形成牢固的共價鍵，通過非共價鍵結(jié)合 3、這種弱

27、的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力（靜電引力、范德華引力、氫鍵結(jié)合力、疏水作用力） 抗原抗體親和性和親合力親和性/力：抗體分子上一個抗原結(jié)合位點與對應(yīng)的抗原決定簇之間可相互適應(yīng)而特異性結(jié)合的性質(zhì)/強度。 親合力：反應(yīng)系統(tǒng)中復雜抗原與相應(yīng)抗體之間的結(jié)合能力（抗體對抗原分子總的結(jié)合強度）。親合力與親和性、抗體的結(jié)合價和抗原的有效AD數(shù)目相關(guān)。親合力越大，抗原抗體結(jié)合越牢固。親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體 1.抗原和抗體同為蛋白質(zhì)，在血清學反應(yīng)條件下均帶負電，未發(fā)生結(jié)合時，兩者分別使極化的水分子在各自周圍形成水化層，成為親水膠體，處于穩(wěn)定狀態(tài)，故蛋白質(zhì)不會自行凝集出現(xiàn)沉淀。2.當抗原與抗體結(jié)合后，表面電荷減少，

28、水化層變薄；而且由于抗原抗體復合物形成后，與水接觸的表面積減少，由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。 3、反應(yīng)特點：特異性：某一抗原分子，只能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體結(jié)合而起反應(yīng)的專一性。 比例性：是指抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系，只有當二者濃度比例適當時，才出現(xiàn)可見反應(yīng)。可逆性：抗原與抗體結(jié)合成復合物后，在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。 分階段反應(yīng)：抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合的階段；可見反應(yīng)階段 。敏感性：抗原抗體反應(yīng)具有高度特異性和較高敏感性，可用于定性和極微量的抗原抗體的檢測，其靈敏程度大大超過當前應(yīng)用的常規(guī)化學方法，其敏感度因反應(yīng)種類不同而異。4、抗原與抗體分子比例處于合適的

29、范圍時出現(xiàn)等價帶?？贵w過量時出現(xiàn)前帶?？乖^量時出現(xiàn)后帶4、影響抗原抗體反應(yīng)的因素有哪些？抗原抗體反應(yīng)為什么必須加入電解質(zhì)？答：因素：1、反應(yīng)物自身因素、抗原：抗原的理化特性、Ag決定簇數(shù)量及種類均可影響血清學反應(yīng)結(jié)果。 例如：可溶性抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng)出現(xiàn)沉淀；顆粒性抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng)則出現(xiàn)凝集、 抗體：1）來源：來自不同動物的免疫血清，其反應(yīng)性有差異。 2）特異性與親和力（影響準確性的關(guān)鍵因素）用于診斷的試劑必須盡量選用特異性高、親和力強的抗體，才能保證和提高實驗結(jié)果的可靠性。 3）濃度（抗體的濃度往往是與抗原相對而言，合適的濃度才出現(xiàn)明顯的反應(yīng)現(xiàn)象）2、環(huán)境條件： 電解質(zhì)：抗原抗體結(jié)合后由

30、親水性變?yōu)槭杷裕藭r易受電解質(zhì)影響，如有適當濃度電解質(zhì)存在，就會使抗原抗體失去一部分電荷而相互凝集或沉淀，出現(xiàn)可見反應(yīng)；若無電解質(zhì)存在，則不出現(xiàn)可見反應(yīng)。振蕩和攪拌：抗原抗體反應(yīng)在液相中反應(yīng)時，適當振蕩與攪拌，可以促進抗原抗體分子的接觸，加速反應(yīng)，但強烈的振蕩可使結(jié)合物離解。 酸堿度：酸堿性可影響抗原和抗體的理化性質(zhì)，導致假陽性或假陰性結(jié)果。溫度：一定范圍內(nèi)溫度越高，分子運動速度加快，增加抗原抗體接觸機會，反應(yīng)速度越快，但亦容易引起復合物解離；溫度越低，反應(yīng)速度緩慢，但抗原抗體結(jié)牢固，易于觀察。 雜質(zhì)：可抑制反應(yīng)進行甚至引起非特異性反應(yīng)。 抗原抗體反應(yīng)加入適當電解質(zhì)使抗原抗體失去一部分電荷而

31、相互凝集或沉淀，出現(xiàn)可見反應(yīng)。5、抗原抗體反應(yīng)的類型有哪些？其原理如何？答：抗原抗體反應(yīng)類型：凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng) 、中和反應(yīng)、補體參與的反應(yīng)等凝集反應(yīng)：顆粒性抗原與相應(yīng)抗體相遇后，在電解質(zhì)參與下出現(xiàn)肉眼可見凝集物的現(xiàn)象。 沉淀反應(yīng)：可溶性抗原與相應(yīng)抗體在一定條件下，出現(xiàn)細微沉淀物的現(xiàn)象。中和反應(yīng)：抗體使相應(yīng)抗原（毒素或病毒）的毒性或傳染性喪失的反應(yīng) 。補體參與反應(yīng)：抗原抗體復合物激活補體，被活化的補體成分可與抗原抗體復合物結(jié)合；補體被復合物結(jié)合后即被消耗。 6、常見的免疫分析方法有哪些？并根據(jù)各類反應(yīng)的特點說明其應(yīng)用。答：1、免疫沉淀（1）環(huán)狀沉淀反應(yīng)：抗原與抗體交界處是否有沉淀環(huán) 。定性分析

32、（2）單向凝膠擴散法：抗原溶液在抗血清瓊膠平板中擴散。定性、定量分析。（3）雙向凝膠擴散法：抗原、抗體在瓊膠平板中對應(yīng)擴散。定性、定量分析。（4）血清免疫電泳：先將抗原電泳分離，然后抗血清在平板中擴散。定性分析（5）對流免疫電泳：瓊膠平板中的抗原、抗體在電場的作用下相向運動結(jié)合。定性分析（6）火箭電泳：在抗血清瓊膠平板中，抗原在電場的作用下單向擴散。定量分析。2、免疫標記技術(shù)特點：敏感度高、特異性強、快速，能進行定性、定量、定位檢測。常用來標記抗原或抗體的同位素 （1）放射免疫分析：定性、定量分析。用放射性同位素標記的抗原或抗體與特異性抗體或抗原的結(jié)合反應(yīng)。 （2）酶聯(lián)免疫吸附試驗：定性、定量

33、分析。將抗原或抗體吸附于固相表面，與酶標記的抗體或抗原反應(yīng)后加入底物分析。 （3）熒光與發(fā)光免疫分析：定性分析將抗原或抗體吸附于固相表面，與熒光化合物或發(fā)光物等標記的抗體或抗原反應(yīng)，然后激發(fā)發(fā)光的分析方法。 （4）親和標記免疫分析：定性分析利用被標記的、且具有特異性親和力物質(zhì)的與檢測物質(zhì)結(jié)合的一種分析方法。第八章 免疫應(yīng)答1、名詞解釋：免疫應(yīng)答：免疫活性細胞（T、B）識別抗原分子、進行自身活化（或失去活化潛能）、克隆擴增、分化及產(chǎn)生效應(yīng)的全過程。在此過程中, 抗原對淋巴細胞起了選擇與觸發(fā)作用, 因此，抗原是啟發(fā)免疫應(yīng)答的始動因素。天然自動免疫：機體患過某種傳染性疾?。ㄈ纾号６唬┤螅瑢υ搨魅?/p>

34、性疾病產(chǎn)生免疫的現(xiàn)象。 天然被動免疫：新生機體通過胎盤（IgG）、初乳（sIgA）等獲得母源抗體而產(chǎn)生免疫力的現(xiàn)象。人工自動免疫：通過給機體注射疫苗（乙肝疫苗）使其獲得免疫力的現(xiàn)象。見效慢，有效期較長。人工被動免疫：給機體輸入現(xiàn)成的抗體使機體產(chǎn)生免疫力的現(xiàn)象。見效快，有效期短。細胞免疫：在抗原與其他輔助因素作用下，T 細胞活化、增殖、分化為效應(yīng)性T 細胞，通過效應(yīng)性 T 細胞及其產(chǎn)生的淋巴因子 發(fā)揮清除病原微生物等免疫效應(yīng)，稱細胞免疫應(yīng)答。體液免疫：在抗原與其他輔助因素作用下，B 細胞活化、增殖、分化為漿細胞并合成、分泌抗體，通過抗體發(fā)揮的特異性免疫效應(yīng)的過程稱體液免疫應(yīng)答2、簡述免疫應(yīng)答的基

35、本過程，并區(qū)別比較T 細胞介導的細細胞免疫與B 細胞介導的體液免疫在免疫應(yīng)答過程中的異同點。 答：1）基本過程：抗原識別和呈遞階段（感應(yīng)階段）：抗原遞呈細胞（APC）對抗原的識別、攝取、加工、遞呈的一系列過程。淋巴細胞活化、增殖、分化階段（反應(yīng)階段）：T、B細胞接受抗原刺激后活化、增殖、分化的階段免疫效應(yīng)階段：產(chǎn)生特異性免疫物質(zhì)（如：抗體、細胞因子）或效應(yīng)淋巴細胞發(fā)揮免疫效應(yīng)和進行免疫調(diào)節(jié)的階段。2）異同點：相同點：具有高度的特異性。 不同點：感應(yīng)階段：抗原遞呈的區(qū)別；T細胞的雙識別和MHC限制性； 反應(yīng)階段：T細胞活化需3個信號刺激B細胞活化為雙信號刺激，需要Th輔助。 效應(yīng)階段：效應(yīng)物質(zhì)不同；免疫方式不同3、簡述細胞免疫與體液免疫（抗體）的生物學效應(yīng)。 答：細胞免疫的生物學效應(yīng)：1.  抗胞內(nèi)寄生性病原體感染、抗腫瘤免疫（Tc）2. 免疫損傷（Th1引起自身免疫病和遲發(fā)型超敏反應(yīng)）3. 參與同種移植排斥反應(yīng)和介導移植物抗宿主反應(yīng)（Th1）體液免疫（抗體）的生物學效應(yīng)：中和作用：抗體使相應(yīng)抗原（毒素或病毒）的毒性或傳染性喪失。調(diào)理作用