乙型肝炎疫苗聯(lián)合卡介苗素在無或弱應(yīng)答人群中的免疫效果

1、乙型肝炎疫苗聯(lián)合卡介苗素在無或弱應(yīng)答人群中的免疫效果    （聲明：本站文章僅給需要的醫(yī)務(wù)工作者提供交流學(xué)習(xí)參考。易達(dá)論文網(wǎng)免費(fèi)提供。部分資源由工作人員網(wǎng)上搜索整理而成，如果您發(fā)現(xiàn)有哪部分資料侵害了您的版權(quán)，請速與我們后臺工作人員聯(lián)系，我們將即時(shí)刪除?？头q:29985366.）【摘要】 目的：探討乙型肝炎疫苗聯(lián)合卡介苗素(bcg)在首次接種乙型肝炎疫苗后無或弱應(yīng)答人群中的免疫效果，尋找一種提高乙型肝炎免疫成功率的方法。方法：放免法定量檢測我院產(chǎn)科出生的嬰兒按0、1、6方案(每次10g)標(biāo)準(zhǔn)全程接種重組乙型肝炎疫苗后乙肝表面抗體的幾何平均滴度(geom

2、etric mean titer，gmt)，篩選無或弱應(yīng)答者(gmt<100 u/l)60例，隨機(jī)分為兩組，每組各30例，按0、1、6方案進(jìn)行再免疫，其中一組同時(shí)肌內(nèi)注射卡介苗素，檢測復(fù)種前后血清中白細(xì)胞介素-12(il-12)、白細(xì)胞介素-10(il-10)的濃度以及乙肝表面抗體的gmt。結(jié)果：注射卡介苗素能誘導(dǎo)無或弱應(yīng)答嬰兒產(chǎn)生較高水平的il-12、il-10，并呈劑量依賴性;卡介苗素注射組的抗體應(yīng)答水平較對照組高，兩者差異有顯著性(p<0.01)。結(jié)論：卡介苗素能有效誘導(dǎo)無或弱應(yīng)答嬰兒機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞因子il-12、il-10，可以提高接種乙型肝炎疫苗應(yīng)答率，卡介苗素有望作為一種

3、較好的乙型肝炎疫苗佐劑.【關(guān)鍵詞】 卡介苗素;乙型肝炎疫苗;白細(xì)胞介素-10;白細(xì)胞介素-12;乙肝表面抗體接種乙型肝炎疫苗是預(yù)防和控制乙型肝炎病毒(hepatitis b virus，hbv)感染的有力措施。但排除宮內(nèi)感染的因素，仍有約5%10%的乙型肝炎疫苗接種者經(jīng)常規(guī)的免疫程序后不產(chǎn)生保護(hù)性抗體或抗體水平很低，即無或弱應(yīng)答，其原因可能與遺傳因素、免疫系統(tǒng)疾病或其他慢性疾病以及疫苗因素等有關(guān)。其中遺傳因素特別是與hla相關(guān)的免疫耐受為研究重點(diǎn)1。已有研究表明2，接種乙型肝炎疫苗后產(chǎn)生無或弱應(yīng)答的嬰兒其血清白細(xì)胞介素-12(il-12)、白細(xì)胞介素-10(il-10)水平往往明顯低于強(qiáng)應(yīng)答者

4、，其原因可能與抗原提呈細(xì)胞(antigen presenting cells，apc)功能以及共刺激分子的表達(dá)低下，導(dǎo)致il-12、il-10等細(xì)胞因子分泌不足有關(guān)。提高疫苗接種時(shí)機(jī)體的il-12、il-10分泌水平可能會提高疫苗接種的成功率。為此，我們觀察了肌內(nèi)注射卡介苗素對乙型肝炎疫苗接種后無或弱應(yīng)答的嬰兒在復(fù)種疫苗時(shí)血清il-12和il-10水平的變化及抗體應(yīng)答情況，探討其作為乙型肝炎疫苗佐劑的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。1資料和方法1.1一般資料?2006年1月至2008年12月溫州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院產(chǎn)科出生按常規(guī)3劑標(biāo)準(zhǔn)程序免疫接種乙型肝炎疫苗的嬰兒(802例)，3劑標(biāo)準(zhǔn)程序完成后第8周，定量

5、檢測乙肝表面抗體的幾何平均滴度(geometric mean titer，gmt)，篩選對乙型肝炎疫苗無或弱應(yīng)答(gmt<100 u/l)的健康嬰兒60例，分為兩組，即觀察組(乙型肝炎疫苗+卡介苗素組)和對照組(單純乙型肝炎疫苗組)各30例參考代寫醫(yī)學(xué)論文1.2研究方法 兩組均按0、1、6方案(每次10g)重組乙型肝炎疫苗(上海生物制品研究所分裝比利時(shí)史克必成公司產(chǎn)品，批號990503)進(jìn)行再免疫，其中一組同時(shí)肌內(nèi)注射卡介苗素(浙江萬馬藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，商品名：迪蘇)，每次1 ml，每周2次，共三個(gè)月。并在復(fù)種疫苗前及每次接種乙型肝炎疫苗后次日采血2 ml，離心后，留取上清1 ml置冰箱

6、待檢。于復(fù)種后的第8周，平均年齡(15±0.7)月，以抗-hbs定量法檢測兩組乙肝表面抗體的gmt。1.3試劑和儀器hbv血清標(biāo)志物放免法定量檢測試劑盒及測定儀(電化學(xué)發(fā)光，美國羅氏公司提供試劑及測定儀);人il-12、il-10酶標(biāo)雙抗體夾心法試劑盒(深圳晶美生物工程公司)。1.4血清il-12、il-10檢測嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。1.5hbv血清標(biāo)志物放免法定量檢測嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法采用t檢驗(yàn)(等方差)或t檢驗(yàn)(異方差)和方差分析。2結(jié)果2.1觀察組和對照組的血清il-12和il-10水平比較?表1、表2顯示，在復(fù)種乙肝疫苗前對觀察組和對照組比較差異均

7、無顯著性(p>0.05);第一次接種后觀察組和對照組比較差異均無顯著性(p>0.05);第二、三次復(fù)種后，觀察組il-10水平均較對照組明顯升高，兩組比較差異均有顯著性(p<0.05);il-12水平同樣兩組比較差異均有顯著性(p<0.05)。2.2接種前、后兩組的血清il-12和il-10水平比較?由表1、2顯示，每一次復(fù)種后兩組的il-12和il-10水平均較接種前差異有顯著性(p<0.05);第二、三次復(fù)種后，觀察組的血清il-12和il-10水平均較接種前明顯升高，組間兩兩比較差異均有顯著性(p<0.05)，而對照組復(fù)種后組間兩兩比較差異無顯著性(p

8、>0.05)。2.3觀察組和對照組的復(fù)種后乙肝表面抗體應(yīng)答水平比較?由表3顯示，觀察組的乙肝表面抗體應(yīng)答水平較對照組明顯增高，兩組比較有顯著性差異(t=13.22，p<0.01)。3討論在已知免疫應(yīng)答中，t細(xì)胞表面的cd28分子與其配體b7結(jié)合，在防止形成免疫耐受方面起重要作用。il-12和il-10是重要的免疫調(diào)控因子3。il-12是t細(xì)胞亞群1型(th1型)細(xì)胞因子，它不僅可促進(jìn)t細(xì)胞生長和th1細(xì)胞分化成熟，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，而且還可促進(jìn)b細(xì)胞的增殖、分泌和合成抗體，促進(jìn)-干擾素等細(xì)胞因子的分泌，促進(jìn)細(xì)胞免疫應(yīng)答;il-10是調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的主要因子，主

9、要由th2細(xì)胞產(chǎn)生，調(diào)節(jié)t細(xì)、b細(xì)胞、nk細(xì)胞等的分化和增殖。它是一種雙抑制的反饋因子，對th1細(xì)胞和th2細(xì)胞增殖有雙向調(diào)節(jié)作用，il-10、il-12的產(chǎn)生水平可能直接影響機(jī)體在接受外來抗原刺激時(shí)抗體的免疫應(yīng)答能力。文獻(xiàn)表明乙肝表面抗體產(chǎn)生低下的人群中共刺激分子cd80和cd28表達(dá)不足，il-12和il-10分泌低下4，該人群即使給予多次的疫苗刺激往往也不能使其產(chǎn)生足夠的抗體，國內(nèi)外研究表明il-1、il-2、il-6、il-12、ifn-、 gmcsf(粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子)均能改善小鼠免疫應(yīng)答能力，從而顯著增加dna疫苗誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生5。國內(nèi)外對使用疫苗佐劑增加接種效果的研究結(jié)

10、果表明，磷酸鋁、sbas4(鋁劑+s-o脫酰單磷酰脂質(zhì)a復(fù)合物)等作為乙型肝炎疫苗佐劑，是通過增加免疫原與巨噬細(xì)胞的相互作用，增加向t細(xì)胞呈遞抗原來增強(qiáng)對疫苗的免疫應(yīng)答，但由于其常需與基因疫苗聯(lián)合，目前未能廣泛應(yīng)用。上世紀(jì)末有學(xué)者也曾以gm-csf作為健康成人乙型肝炎疫苗接種的免疫佐劑，結(jié)果提示80g和250g的劑量不能起明顯的佐劑作用6?？ń槊缢仄溆行С煞謈pg-odn2006 是目前發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的人特異性cpg序列7-8，能誘導(dǎo)多種免疫細(xì)胞的活化，它通過調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)細(xì)胞免疫與體液免疫，刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，激活單核-巨噬細(xì)胞功能，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力，bcg細(xì)胞壁上的相關(guān)脂多糖能誘導(dǎo)ifn-、il-1

11、2產(chǎn)生，促進(jìn)th1分化和大量巨噬細(xì)胞聚集活化9，研究證實(shí)，bcg刺激后，t24細(xì)胞表面的鐘聲蛋白樣受體(tlr)2和tlr4表達(dá)水平以及il-12的分泌量增加，且隨bcg劑量增加而升高10?？ń槊缢匾驯粦?yīng)用于老年慢性阻塞性肺疾病(copd)的防治11，并在抗腫瘤免疫和支氣管哮喘防治中有良好的作用，已被廣泛應(yīng)用于臨床12，但鮮見其作為佐劑與疫苗聯(lián)合使用的報(bào)道。本組資料中，兩組在每次接受乙肝疫苗刺激后il-12和il-10的水平均有升高，較刺激前差異有顯著性，表明兩組t細(xì)胞的功能不存在一般的免疫缺陷，這與國外的報(bào)道一致13。第二、第三次疫苗接種后雖兩組的il-12和il-10水平上升，但觀察組上升

12、幅度明顯超過對照組，差異有顯著性，說明經(jīng)過注射卡介苗素后，機(jī)體在接受抗原刺激時(shí)產(chǎn)生il-12、il-10等細(xì)胞因子的能力增加;但是在第一次復(fù)種后對照組與觀察組血清il-12和il-10的水平相仿，差異不顯著，考慮與卡介苗素使用時(shí)間短，尚未發(fā)揮作用有關(guān)。此外，在疫苗的三次復(fù)種過程中，觀察組每次疫苗復(fù)種后il-12和il-10水平均較前一次遞增，組內(nèi)比較差異有顯著性，證實(shí)il-12和il-10的分泌量可隨bcg劑量增加而升高，表明肌內(nèi)注射卡介苗素可以調(diào)節(jié)抗體無或弱應(yīng)答嬰兒的細(xì)胞免疫功能，使其il-10、il-12等細(xì)胞因子分泌增加。在三次復(fù)種結(jié)束后卡介苗注射組的乙肝表面抗體幾何平均滴度較對照組明顯

13、升高，說明卡介苗素的確能提高嬰兒在再免疫時(shí)的抗體應(yīng)答水平。卡介苗素有望作為一種較好的疫苗佐劑，為提高乙型肝炎疫苗的應(yīng)答水平開辟新的途徑?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 梁爭論.李河民. 接種乙型肝炎疫苗無低應(yīng)答與hla關(guān)聯(lián)的研究進(jìn)展j.微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展,2004, 324(4):54-57.2 velu v, saravanan s, nandakumar s, et al. relationship be-tween t-lymphocyte cytokine levels and sero-response tohepatitis b vaccinesj.world j gastroenterol,2008,14(22):3534-3540.3 pannekoea y,trum jm,bleker op,et al.cytokine omcentra-tions in seminal.plasama from subfertile men are not in-dicative of the presence of ureaplasma urealyticum of my-coplasma hominis in lower genital trac