光合細菌的基本特性及在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應用

1、責任編輯劉紅芹光合細菌是一大類能在厭氧條件下進行不產(chǎn)氧光合作用的細菌的總稱，包括紅螺菌科、著色菌科、綠硫菌科和綠色絲狀菌科，由于它有能利用硫化氫、氨氮、有機酸等小分子有機物快速生長且菌體本身具有營養(yǎng)豐富、無毒無害等特點，因而在水產(chǎn)養(yǎng)殖上得到了廣泛應用。目前水產(chǎn)養(yǎng)殖中用的光合細菌主要是紅螺菌科的光合細菌，如沼澤紅假單胞菌、莢膜紅假單胞菌、球形紅菌等，常用來凈化水質(zhì)、防治疾病和促進水產(chǎn)動物的生長，效果比較明顯。然而長期以來，光合細菌水產(chǎn)制劑卻沒有一個統(tǒng)一的質(zhì)量標準，造成產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，甚至時有摻假使雜現(xiàn)象發(fā)生，嚴重危害到水產(chǎn)養(yǎng)殖和光合細菌產(chǎn)業(yè)本身的粒的干擾。目前已有學者開始探討光合細菌的計數(shù)方法

2、。如孫軍德等人建立的雙層平板計數(shù)方法和光電比濁法的數(shù)學模型，但這些方法都是建立在對實驗室某一純培養(yǎng)物的研究基礎上，培養(yǎng)基有很大的局限性，并不適用于光合細菌的其它菌種的檢測，更無法應用于復雜的水產(chǎn)制劑的檢驗，離實際應用還有一定的距離。準確的光合細菌活菌計數(shù)只能采用菌落計數(shù)法。要建立一個標準的光合細菌檢測方法，必須作如下幾個方面的研究：一是培養(yǎng)基配方，光合細菌在該培養(yǎng)基上能產(chǎn)生唯一的可識別的菌落特征；二是該配方對同一類的不同菌種，至少是實際中常用的同類菌種的適應性；三是其它相關(guān)種類的細菌在該培養(yǎng)基上有無干擾現(xiàn)象；四是培養(yǎng)容器、培養(yǎng)條件的確定。我們以沼澤紅假單胞菌、球形紅假單胞菌、莢膜紅假單胞菌為模

3、型，研究出了光合細菌的通用檢測培養(yǎng)基即培養(yǎng)基，同時用紅酵母、深紅酵母、桔橙色動球菌、棕褐小單胞菌、沙門氏菌、志賀氏菌、大腸桿菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌等多種細菌作了干擾性試驗，結(jié)果表明只有光合細菌才能在培養(yǎng)基上產(chǎn)生紅色的菌落，該培養(yǎng)基對光合細菌的檢測具有專一性和特一性，可用于光合細菌純培養(yǎng)物及水產(chǎn)制劑的準確計數(shù)。在確定培養(yǎng)基的基礎上，我們還確定了培養(yǎng)的容器和培養(yǎng)條件等因子，最終建立了光合細菌的計數(shù)方法，即半固體試管法檢測光合細菌。本文提供的光合細菌菌落計數(shù)的方法如下。、適用范圍廣西出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心劉軍義汪文龍李娟科技與推廣健康發(fā)展。其中關(guān)鍵的技術(shù)指標即活菌密度的標注，更是十分混亂

4、，從億毫升到億毫升不等，令漁民無所適從。究其原因，主要是沒有一個準確的檢測方法所致。傳統(tǒng)的細菌計數(shù)方法有顯微鏡直接計數(shù)法、平板菌落計數(shù)法和光電比濁計數(shù)法三種。顯微鏡直接計數(shù)法采用血球計數(shù)板來計數(shù)，不僅計數(shù)誤差大，而且不能分辨雜菌。平板菌落計數(shù)法，適用于需氧細菌總數(shù)的檢測，但對于厭氧的光合細菌，則不易培養(yǎng)，此外，培養(yǎng)過程中由于長時間光照，易導致培養(yǎng)基滲水而計數(shù)不準。光電比濁法則更不可靠，一方面既不能分辨雜菌，又不能區(qū)分死菌；另一方面既受摻假色素的影響，又受物理性顆半固體試管法 中國水產(chǎn)年第期責任編輯劉紅芹本方法適用于各種紅螺菌科光合細菌的純培養(yǎng)物及其水產(chǎn)制劑的光合細菌菌落計數(shù)。、培養(yǎng)基：培養(yǎng)基。

5、乙酸鈉碳酸氫鈉氯化銨磷酸氫二鉀氯化鎂氯化亞鐵氯化鈉抗氧化劑瓊脂粉蒸餾水±，滅菌分鐘。、操作程序參照方法進行。（）制品樣品勻液以無菌操作取樣品，放入裝有稀釋劑的滅菌均質(zhì)杯內(nèi)，混勻，制成：的樣品勻液。（）稀釋樣品勻液用滅菌吸管準確吸?。旱臉悠穭蛞?，放入裝有稀釋劑的三角瓶中，混勻，制成：的樣品液，以此類推，將菌液稀釋至，。（）試管接種選用合適的連續(xù)三個稀釋度的菌液進行試管計數(shù)。分別用滅菌吸管吸取菌液放入具塞比色管內(nèi)，每個稀釋度的菌液用兩根試管。迅速傾注的培養(yǎng)基（已放±的水浴中恒溫）于管內(nèi)，等冷卻后，再加入近年來水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速，由傳統(tǒng)的自然放養(yǎng)轉(zhuǎn)向高密度集約化飼養(yǎng)，水產(chǎn)飼料的需

6、求量不斷攀升，大量的集約化飼養(yǎng)幾乎全靠人工飼料，然而，人工飼料與傳統(tǒng)的天然飼料相比，其風味和適口性往往存在很大差異，而且不同的水產(chǎn)動物其喜好各不一樣。在不同水生動物飼料中添加不同誘食成分即誘食劑，用來提高飼料產(chǎn)品的誘食作用是當前水產(chǎn)飼料生產(chǎn)中面臨的主要問題之一。目前人們將誘食劑定義為具有使魚趨向飼料周圍的化學物質(zhì)；而具有促進開始攝食、持續(xù)和吞入等一系列攝餌行為的化學物質(zhì)叫做促攝餌物質(zhì)。對于魚來說具有引誘和促進兩種性質(zhì)的活性物質(zhì)較多，所以可統(tǒng)稱為誘食劑。本文就目前水產(chǎn)動物誘食劑研究狀況作一綜述。一、誘食劑作用的生理機制水產(chǎn)動物攝食過程分三個階段：第一起始階段，即發(fā)覺和意識到食物刺激和存在；第二尋找階段，即尋找食物位點，并趨向食浙江大學動物科學學院科技與推廣的滅菌純瓊脂覆蓋。同時用稀釋劑作空白對照。（）培養(yǎng)置，培養(yǎng)。典型的光合細菌的培養(yǎng)特征是，菌落粉紅色、紅色或深紅色，在培養(yǎng)基中菌落呈鐵餅狀。（）計數(shù)培養(yǎng)后，立即計數(shù)每個試管內(nèi)的菌落數(shù)，個菌落為合適范圍。如果菌落不明顯，