敦煌養(yǎng)顏面脂延緩皮膚衰老的實驗研究

1、敦煌養(yǎng)顏面脂延緩皮膚衰老的實驗研究    【摘要】  目的 觀察敦煌養(yǎng)顏面脂對老齡大鼠皮膚組織中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性及丙二醛(MDA)含量的影響。方法 將SPF級雌性SD大鼠隨機分成模型對照組、陽性對照組和空白對照組及敦煌養(yǎng)顏面脂高、中、低劑量組。各組大鼠背部脫毛后,給藥組涂抹敦煌養(yǎng)顏面脂,模型組涂抹敦煌養(yǎng)顏面脂基質(zhì),陽性組涂抹維生素E膠丸。連續(xù)涂敷30 d后,以生化分析方法測定皮膚組織中SOD、GSH-PX活性和MDA含量( 【關(guān)鍵詞】  

2、敦煌養(yǎng)顏面脂；皮膚衰老；超氧化物歧化酶；谷胱甘肽過氧化物酶；丙二醛；大鼠 Abstract： Objective To observe the influence of Dunhuang Nourishing Cream on the contents of SOD, GSH-PX and MDA in skin of aged rats. Methods 

3、Female SD rats of SPF level were divided into 6 groups：high, moderate and low dose groups of Dunhuang Nourishing Cream, model contrasting group, positive contrasting group

4、0;and blank contrasting group. After removed the hair on the back, the drug groups were applied with Dunhuang Nourishing Cream, the model group was applied with the 

5、matrix of Dunhuang Nourishing Cream and the positive group was applied with vitamin E. After 30 days, the contents of SOD, GSH-PX and MDA in the skin were teste

6、d with the method of biochemistry analysis. Results Compared with the model group, the contents of SOD, GSH-PX and MDA in the high, moderate and low dose groups 

7、;had significant difference (P<0.01). Compared with positive group, the high and moderate dose groups had no obvious difference (P<0.05), and the moderate dose group had 

8、;better effect. Conclusion Dunhuang Nourishing Cream can increase the contents of SOD and GSH-PX in skin and decrease the content of MDA, so that it can delay aging&

9、#160;process. Key words：Dunhuang Nourishing Cream；skin aging process；SOD；GSH-PX；MDA；rat     敦煌養(yǎng)顏面脂是在開發(fā)敦煌醫(yī)學(xué)古方基礎(chǔ)上,結(jié)合現(xiàn)代生物科技重新設(shè)計,篩選出的適合臨床應(yīng)用、療效確切的外用型中藥制劑。主要含有葳蕤仁、土瓜根、零陵香等,對面部皮膚干燥、粗糙皺紋、晦黯無光澤等有較好的治療和美容作用1,經(jīng)臨床應(yīng)用療效顯著。筆者通過實驗研究,進(jìn)一步探討其作用機理。 1  實驗材料 1.1

10、  藥物與試劑     敦煌養(yǎng)顏面脂(乳白色霜劑)、敦煌養(yǎng)顏面脂基質(zhì)(白色乳狀稠液),均由甘肅中醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)美容教研室提供；維生素E膠丸,青島雙鯨藥業(yè)有限公司,批號070509,規(guī)格：50 mg/粒；超氧化物歧化酶(SOD,批號20070723)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX,批號20070725)、丙二醛(MDA,批號20070724)試劑盒, 均購自南京建成生物工程研究所；科瑪脫毛膏,柏維詩(香港)化妝品貿(mào)易公司監(jiān)制,特殊許可證：衛(wèi)妝特字(2006)第0620號,批號FA12693。 1.2 

11、60;動物     18月齡SPF級雌性SD老齡大鼠50只,體重(470±20)g；4月齡SPF級雌性SD青齡大鼠10只,體重(215±20)g,甘肅中醫(yī)學(xué)院科研實驗中心提供,動物質(zhì)量合格證號：SCXK(甘) 2004-0006(醫(yī)藥學(xué)/臨床醫(yī)學(xué)論文 1.3  儀器     紫外分光光度計,日本島津,型號：UV-2401PC；電子精密天平,長沙湘平科技發(fā)展有限公司,型號：ES-1000E。 2  實驗方法 2.1  分組 &#

12、160;   取自然衰老老齡大鼠50只,按體重隨機分為模型對照組(敦煌養(yǎng)顏面脂基質(zhì))、陽性對照組(維生素E)及敦煌養(yǎng)顏面脂高、中、低劑量組,共5組,每組10只；另取青齡大鼠10只,作為空白對照組。然后按分組編號,將所有動物分籠飼養(yǎng)。 2.2  脫毛     于實驗前24 h將所有動物脊柱兩側(cè)及靠臀部皮膚用科瑪脫毛膏脫毛,然后用清水將脫毛膏殘留物洗凈,暴露約3 cm×3 cm范圍的皮膚,脫毛后大鼠皮膚光潔正常。之后每34 d脫毛1次,以免影響敷藥效果。 2.

13、3  給藥   敦煌養(yǎng)顏面脂高劑量組：按0.08 g/100 g體重涂抹；敦煌養(yǎng)顏面脂中劑量組：按0.04 g/100 g體重涂抹；敦煌養(yǎng)顏面脂低劑量組：按0.02 g/100 g體重涂抹；模型對照組：按給藥高劑量組的劑量計算涂抹敦煌養(yǎng)顏面脂基質(zhì)；陽性對照組：涂抹維生素E膠丸100 mg。涂抹方法：先取稱好的受試藥物少許在脫毛后受試皮膚處按摩12 min,然后將剩余藥物均勻涂抹、輕拍至吸收。每日1次,連續(xù)30 d。給藥期間,各組每周稱重1次,按體重的變化重

14、新計算涂抹劑量?？瞻讓φ战M只進(jìn)行相同方法的脫毛,但不給予任何處理因素,在同等環(huán)境下飼養(yǎng),記錄體重變化。 免費論文下載中心  2.4  10%皮膚組織勻漿制備    各組大鼠均于30 d后斷頸處死,取其臀背部脫毛受試皮膚組織塊各0.5 g,經(jīng)預(yù)冷生理鹽水漂洗,除去皮下脂肪和其他結(jié)締組織,濾紙拭干,稱重并放入燒杯中,量筒量取該組織塊9倍重量的預(yù)冷生理鹽水,取2/3量倒入裝有組織塊的燒杯中,用眼科小剪剪碎組織塊后倒入勻漿管中,再用剩余1/3的生理鹽水沖洗燒杯壁,用研磨式勻漿器制成10%的組織勻漿(制作

15、過程在冰水中進(jìn)行),然后反復(fù)凍融3次,使細(xì)胞完全破碎,內(nèi)容物全部游離在液相中,進(jìn)行生化指標(biāo)檢測。 2.5  生化分析     SOD與GSH-PX活性及MDA含量,嚴(yán)格參照南京建成生物工程研究所SOD、GSH-PX及MDA試劑盒的說明書方法進(jìn)行測定。 3  統(tǒng)計學(xué)方法    所有實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析,各組實驗參數(shù)以x±s表示。行方差分析,以P0.05和P0.01表示有統(tǒng)計學(xué)意義。 4  結(jié)果 (見表1)表1 &

16、#160;敦煌養(yǎng)顏面脂對老齡大鼠皮膚中SOD、GSH-PX活性及MDA含量的影響(略)注：與模型對照組比較,P0.01 5 討論     皮膚衰老是一個復(fù)雜的生理學(xué)現(xiàn)象,現(xiàn)已明確是內(nèi)源性因素與外源性因素共同作用的結(jié)果2。關(guān)于皮膚衰老有很多學(xué)說,目前普遍認(rèn)為,自由基累積損傷是導(dǎo)致皮膚衰老的重要原因3。隨機體的衰老,體內(nèi)抗氧化酶類減少,防護(hù)功能減退,生物體內(nèi)自由基堆積,而自由基具有極強的氧化能力,可攻擊生物膜中不飽和脂類發(fā)生過氧化,形成脂質(zhì)過氧化物,其終產(chǎn)物MDA是強的交聯(lián)劑,易與蛋白質(zhì)、核酸或脂類結(jié)合成難溶性物質(zhì),從而導(dǎo)致生物膜硬化、細(xì)胞破裂死亡

17、等,造成一系列氧化性損傷,而GSH-PX及SOD等則是體內(nèi)有效的抗氧化劑和自由基清除劑。     中醫(yī)理論認(rèn)為,正氣虧虛是皮膚衰老過程的主要因素,若五臟虛損、氣血失調(diào),則面色枯槁晦黯、皮膚粗糙、皺紋增多、體弱多病等。所以,中藥美容的基本原理是利用藥物本身的四氣五味、升降沉浮、歸經(jīng)、色澤等特點進(jìn)行美容保健和養(yǎng)顏抗衰,以辛溫藥物使用頻率較高,如辛夷、葳蕤仁、麝香、桃仁等,具有升騰陽氣、鼓舞氣血上升于面之作用,從而使面部肌膚獲得充足的養(yǎng)分,表現(xiàn)出紅潤光澤、富有彈性,達(dá)到養(yǎng)顏抗衰的目的4。敦煌養(yǎng)顏面脂正是根據(jù)這一傳統(tǒng)美容保健原理,結(jié)合現(xiàn)代藥理研究研制而成的中藥養(yǎng)顏抗衰制劑。本實驗結(jié)果表明,外用敦煌養(yǎng)顏面脂可顯著提高老齡大鼠皮膚中SOD與GSH-PX酶的活性,同時能明顯降低老齡大鼠皮膚中MDA含量,與模型對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。說明敦煌養(yǎng)顏面脂能有效提高機體抗氧化酶的活性,從而提高了皮膚組織清除自由基與抗氧化的能力,同時也降低了MDA對細(xì)胞組織的氧化性損傷,這對改