種子標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)

1、種子標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)種子發(fā)芽率是種子質(zhì)量的四項(xiàng)必檢指標(biāo)之一。正確及時(shí)測(cè)定種子發(fā)芽率對(duì)種子分級(jí)、種子收購(gòu)調(diào)運(yùn)、種子貯藏加工、防止發(fā)芽力低的種子下田、確定合理的播種量等具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)的目的是熟悉種子的發(fā)芽條件，掌握標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)的操作技術(shù)，以及單子葉幼苗和雙子葉幼苗的主要構(gòu)造、幼苗鑒定標(biāo)準(zhǔn)和結(jié)果計(jì)算方法，并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果與種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中發(fā)芽率或規(guī)定值進(jìn)行比較，判定種子批質(zhì)量的優(yōu)劣。一、依據(jù)種子發(fā)芽需要足夠的水分、適宜的溫度和充足的氧氣，某些植物的種子還需要光照或黑暗。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，根據(jù)不同作物種子萌發(fā)所需的外界條件控制發(fā)芽所需條件，即根據(jù)作物種子種類選擇合適的發(fā)芽床、適宜的發(fā)芽溫度及光照（見(jiàn)附錄5），保

2、持發(fā)芽床適宜的水分，以獲得準(zhǔn)確、可靠的種子發(fā)芽試驗(yàn)結(jié)果。二、試材與設(shè)備1材料 水稻、小麥、玉米和洋蔥等單子葉植物種子，大豆、油菜、辣椒、西瓜等雙子葉植物種子。單、雙子葉植物種子可分別任選12種。2設(shè)備 種子發(fā)芽室或光照發(fā)芽箱、真空數(shù)種器或電子自動(dòng)數(shù)粒儀、恒溫干燥箱、發(fā)芽盒、吸水紙、消毒砂、鑷子、溫度計(jì)（0100）、燒杯（200mL）、標(biāo)簽紙、滴瓶等。3試劑0.2 % KNO3。三、方法步驟1制備發(fā)芽床大粒種子選砂床或紙間，中、小粒種子選用紙床、砂床均可。鑒定感病樣品以及為特定研究目的可采用土壤床。（1）作為紙床用的發(fā)芽紙、濾紙或吸水紙等，應(yīng)具有一定的強(qiáng)度、質(zhì)地好、吸水性強(qiáng)、保水性好、無(wú)毒無(wú)菌、

3、清潔干凈，不含可溶性色素或其他化學(xué)物質(zhì)，pH值為6.07.5。（2）砂床一般用無(wú)化學(xué)污染的細(xì)砂或清水砂為材料，使用前過(guò)篩（0.80mm和0.05mm孔徑的土壤篩），洗滌后放入搪瓷盤內(nèi)，攤薄，在120140高溫下烘3h以上。2數(shù)取試驗(yàn)樣品從經(jīng)過(guò)充分混合的凈種子中，用數(shù)種設(shè)備或手工隨機(jī)數(shù)取400粒。通常以100粒為1次重復(fù)，大粒種子或帶有病原菌的種子，可以再分為50粒、甚至25粒為一副重復(fù)。3置床 在種子置床前要檢查各重復(fù)間發(fā)芽床的含水量是否適宜、一致，以保證發(fā)芽整齊。種子置床時(shí)，各粒種子之間留有一定的距離，以保證幼苗的生長(zhǎng)空間和減少霉菌的傳染。不同作物種子的置床方法如下：（1）水稻種子：在方形發(fā)

4、芽盒內(nèi)放入兩層浸濕的吸水紙，鋪平，加水至吸水紙飽和。將水稻種子均勻擺在吸水紙上，每盒100粒種子，4次重復(fù)。（2）玉米種子：將砂加水拌勻（砂的含水量為其飽和含水量的60%80%，用手壓砂以不出現(xiàn)水膜為宜），然后將濕砂放于發(fā)芽盒內(nèi)，攤平，砂子厚度為23cm。然后播入50粒種子，種胚朝上，再蓋上1.52.0cm濕砂，蓋好蓋子，8次重復(fù)。（3）小麥種子：采用紙卷法。先將一層吸水紙 （36×28cm）濕潤(rùn)并平鋪在工作臺(tái)上，然后擺入100粒種子，再蓋上一層濕潤(rùn)的吸水紙，底邊向上摺起2cm寬，卷成松的紙卷，兩端用皮筋扣住，垂直插在有水透明容器里，4次重復(fù)，套上透明塑料袋。（4）洋蔥種子：將預(yù)先浸

5、透的吸水紙2層，墊入發(fā)芽盒內(nèi)，每盒置100粒種子，重復(fù)4次。（5）大豆種子：砂床水分調(diào)到飽和含水量的80% ，裝入發(fā)芽盒內(nèi)，厚度為23cm，播50粒種子，覆蓋1.52.0cm 濕砂，8次重復(fù)。（6）辣椒種子：用方形發(fā)芽盒、TP（紙上）。將兩層經(jīng)0.2 % KNO3浸透的發(fā)芽紙墊入發(fā)芽盒，每盒100粒種子，4次重復(fù)。（7）甘藍(lán)型油菜種子：采用TP。每一發(fā)芽盒內(nèi)墊入兩層濕潤(rùn)的發(fā)芽紙，播入100粒種子，4次重復(fù)。（8）西瓜種子：采用紙卷發(fā)芽（BP：紙間）。先將紙浸濕，再用干紙吸去多余水分，達(dá)到低濕的要求。取一層平鋪在工作臺(tái)上，數(shù)取50粒種子置床，蓋上另一層濕發(fā)芽紙，底邊向上摺2cm，卷成松的紙卷，垂

6、直插入有水容器里，套上透明塑料袋，8次重復(fù)。4貼（寫）標(biāo)簽在發(fā)芽盒底盒的側(cè)面貼上標(biāo)簽（紙卷可直接用鉛筆寫在發(fā)芽紙的上端中間位置），寫明樣品號(hào)碼、品種名稱、置床日期、重復(fù)次數(shù)等，并登記在發(fā)芽試驗(yàn)記載簿上。5入箱培養(yǎng)根據(jù)作物要求把發(fā)芽箱調(diào)至所需溫度，將置床的發(fā)芽盒（皿）放在箱內(nèi)支架上。發(fā)芽盒（皿）蓋好蓋子。幼苗培養(yǎng)室內(nèi)濕度保持在70%80%。將小麥、玉米、大豆、甘藍(lán)型油菜和洋蔥種子放入發(fā)芽箱，在20 恒溫、光照條件下培養(yǎng)；水稻、西瓜和辣椒種子放入發(fā)芽箱，在30 恒溫、光照條件下進(jìn)行發(fā)芽。6檢查管理在發(fā)芽試驗(yàn)期間，每天檢查發(fā)芽箱內(nèi)的溫度和發(fā)芽床的水分。其要求是：溫度保持在規(guī)定溫度上下不超過(guò)1 之間；

7、對(duì)發(fā)芽床水分不足的，應(yīng)遵循一致性原則，用滴管或噴壺適量補(bǔ)水，若種粒四周（紙床）出現(xiàn)水膜，則表示水分過(guò)多。同時(shí)，注意通氣和種子發(fā)霉情況。使用玻璃培養(yǎng)皿作發(fā)芽容器的，注意加蓋后的通氣情況，特別是大粒種子發(fā)芽應(yīng)當(dāng)經(jīng)常揭開蓋子充分換氣。在檢查中發(fā)現(xiàn)表面生霉的種子，應(yīng)取出洗滌后放回原處，發(fā)現(xiàn)腐爛種子應(yīng)取出并記載。嚴(yán)重發(fā)霉（超過(guò)5%）的應(yīng)更換發(fā)芽床。7觀察記載在發(fā)芽試驗(yàn)過(guò)程中，按計(jì)算發(fā)芽勢(shì)（初次計(jì)數(shù)）、發(fā)芽率（末次計(jì)數(shù)）的規(guī)定日期各觀察記載一次。如果發(fā)芽率的規(guī)定日期在7d以上的，應(yīng)增加記載次數(shù)。記載應(yīng)根據(jù)正常幼苗和不正常幼苗的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合該種作物幼苗的形態(tài)特征逐一進(jìn)行觀察。在初次和中間記載時(shí)，將符合標(biāo)準(zhǔn)

8、的正常幼苗、腐爛種子取出并記錄，未達(dá)到正常幼苗標(biāo)準(zhǔn)的小苗、畸形苗和未發(fā)芽的種子繼續(xù)留在發(fā)芽床上入箱發(fā)芽。末次記載時(shí)，要把每株幼苗分別取出，對(duì)其根系、幼苗中軸、子葉、芽鞘等構(gòu)造仔細(xì)觀察鑒定，將正常幼苗、不正常幼苗、硬實(shí)、新鮮不發(fā)芽的種子、腐爛霉變等死種子分別計(jì)數(shù)。初次、末次計(jì)數(shù)的時(shí)間，水稻種子為第5d和第14d，玉米為第4d和第7d，小麥為第4d和第8d，洋蔥為第6d和第12d，大豆為第5d和第8d，辣椒為第7d和第14d，油菜為第5d和第7d，西瓜為第5d和第14d。其中，所述天數(shù)以置床后24h為1d推算，且不包括種子預(yù)處理的時(shí)間。如果確認(rèn)某樣品已經(jīng)達(dá)到最高發(fā)芽率，也可在規(guī)定的時(shí)間提前結(jié)束試驗(yàn)

9、，而到規(guī)定的結(jié)束時(shí)間仍有較多的種粒未萌發(fā)（如包衣種子），也可酌情延長(zhǎng)試驗(yàn)時(shí)間。發(fā)芽試驗(yàn)所用的實(shí)際天數(shù)應(yīng)在檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告中寫明。8結(jié)果計(jì)算與核對(duì)容許差距試驗(yàn)結(jié)果以粒數(shù)的百分率表示。當(dāng)一個(gè)試驗(yàn)的四次重復(fù)（每個(gè)重復(fù)以100粒計(jì)，相鄰的副重復(fù)合并成100粒的重復(fù)）正常幼苗百分率都在最大容許差距內(nèi)（表1），則認(rèn)為結(jié)果是可靠的，以其平均數(shù)表示發(fā)芽百分率。不正常幼苗、硬實(shí)、新鮮不發(fā)芽種子和死種子的百分率按四次重復(fù)平均數(shù)計(jì)算。如4次重復(fù)間最低和最高發(fā)芽率之差超過(guò)容許差距（或出現(xiàn)新鮮不發(fā)芽種子較多等規(guī)定情況），則需做第二次試驗(yàn)。第一次試驗(yàn)結(jié)果與第二次試驗(yàn)結(jié)果之差未超過(guò)容許差距（表2），則填寫二次試驗(yàn)結(jié)果的平均值；

10、如兩者之差超過(guò)容許差距，則以同樣方法進(jìn)行第三次試驗(yàn)，填報(bào)未超過(guò)容許差距的兩次結(jié)果的平均值。表1  同一發(fā)芽試驗(yàn)四次重復(fù)間的最大容許差距（2.5%顯著水平的兩尾測(cè)定）平 均 發(fā) 芽 率 最大容許差距50% 以上 50% 以下 99 2 5 98 3 6 97 4 7 96 5 8 95 6 9 9394 78 10 9192 910 11 8990 1112 12 8788 1314 13 8486 1517 14 8183 1820 15 7880 2123 16 7377 2428 17 6772 2934 18 5666 3545 19 5155 4650 20 （引自農(nóng)作物種子

11、檢驗(yàn)規(guī)程GB/T 3543.41995表3）表2  同一或不同實(shí)驗(yàn)室來(lái)自相同或不同送驗(yàn)樣品間發(fā)芽試驗(yàn)的容許差距（2.5%顯著水平的兩尾測(cè)定）平均發(fā)芽率50% 以上 50% 以下 9899 23 9597 46 9194 710 8590 1116 7784 1724 6076 2541 5159 4250 （引自農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程GB/T 3543.41995表4）9結(jié)果報(bào)告填寫發(fā)芽試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，須填報(bào)正常幼苗、不正常幼苗、硬實(shí)、新鮮不發(fā)芽種子和死種子的百分率，各百分率修約至最接近的整數(shù)，0.5修約進(jìn)入最大值，其總和應(yīng)為100%。若其中某項(xiàng)結(jié)果為零，則需填入“0”。同時(shí)還要填報(bào)采用的發(fā)芽床、溫度、試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間以及發(fā)芽前的處理方法。表3 種子發(fā)芽試驗(yàn)記載表樣品編號(hào)置床日期