KAI1在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義

1、KAI-1在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義 作者：張錄芳，潘東亮彭學(xué)葉，尹哲摘要 目的 研究KAI-1在不同分期、分級、預(yù)后和年齡組腎細(xì)胞癌中的表達(dá)，分析其表達(dá)的意義。方法 隨訪19912000年入院治療并留取病理標(biāo)本的腎癌病例預(yù)后。根據(jù)臨床分期、細(xì)胞分級、年齡、T1-3aN0M0病例是否術(shù)后轉(zhuǎn)移分別將腎癌病例分組，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測腎癌標(biāo)本KAI-1表達(dá)，卡方檢驗(yàn)分析KAI-1表達(dá)的差異。結(jié)果 3070歲每十年齡段KAI-1陰性表達(dá)率為34.4%47.8%，比較低表達(dá)率2值為0.541.19，P均>0.05，過表達(dá)率2值為0.841.84，P均>0.05。腎癌TNM

2、期KAI-1陰性表達(dá)率為34.2%、25.2%、54.4%和80.0，、期間過表達(dá)比較P<0.05。Fuhrman分級級KAI-1陰性表達(dá)率為33.0%、47.8%、81.4%，和、和級比較2值分別為9.11、27.24，P均<0.01。T1-3aN0M0術(shù)后轉(zhuǎn)移組24例和未轉(zhuǎn)移組194例KAI-1陰性表達(dá)率為79.2、9.8；兩組低表達(dá)率比較2值64.49，P<0.01；過表達(dá)2值0.02，P>0.05。結(jié)論 轉(zhuǎn)移抑制基因KAI-1在腎癌中的表達(dá)與年齡因素?zé)o關(guān)。KAI-1低表達(dá)或表達(dá)缺失率在期、期和Fuhrman 級腎癌中最高。KAI-

3、1基因缺失可能參與了T1-3aN0M0腎癌術(shù)后轉(zhuǎn)移的發(fā)生，檢測KAI-1表達(dá)具有臨床預(yù)后指導(dǎo)價(jià)值。 關(guān)鍵詞 腎細(xì)胞；癌；KAI-1；轉(zhuǎn)移抑制基因 Expression of metastases suppressor gene KAI-1 on renal cell carcinoma and its significance Abstract Objective To study the expression of metastases suppressor gene KAI-1 on renal cell carcinoma（RCC) and analyze its significanc

4、e.Methods The patients with RCC undergoing surgical operations from 1991 to 2000 were followed up and their prognoses were written down.Then these patients were divided into different groups according to their clinical stages，tumour cell gradation，age of patient and whether postoperative metastasis

5、of T1-3aN0M0 stage patients occurred or not.The expression of KAI-1 on RCC lesions were testified with immunohistochemistry and the outcomes of expression were analyzed by 2 testing.Results The differences of KAI-1 expression every decades among ages of 3070 were not statistically significant.Nevert

6、heless，the negative expression rates of KAI-1 from TNM to stage were 34.2%，25.2%，54.4% and 80.0 individually，and the statistically significant differences of KAI-1 overexpression between and and stage（P<0.05).The negative expression between Fuhrman G1 and G3，G2 and G3 were compared separately

7、 and the 2 scores were 9.11，27.24（P<0.01).Twenty four cases with postoperative metastasis and 194 cases without postoperative metastasis in patients of T1-3aN0M0 stage were found out by follow-up.The low expression rate of KAI-1 in metastasis group was higher than that of no metastasis group（

8、P<0.01).Conclusion There is statistically significant correlation between the expression of metastases suppressor gene KAI-1 on RCC and the factor of patient age.The low or negative expression rates of KAI-1 were higher in TNM stage and ，F(xiàn)uhrman G3 than other groups.KAI-1 gene missing maybe p

9、articipated in the procedure of postoperative metastasis of T1-3aN0M0 stage patients and so to test the expression of KAI-1 would help predict the prognoses of these patients. Key words renal cell carcinoma;metastases suppressor gene;KAI-1 19912000年北京朝陽醫(yī)院泌尿外科經(jīng)手術(shù)治療腎細(xì)胞癌269例，顯示意外瘤為67.3（181/269），T1-3aN0

10、M0期腎癌行腎癌手術(shù)后達(dá)到5年臨床治愈標(biāo)準(zhǔn)的為90.0%（217/241），但是仍有24例在術(shù)后（4.25±3.5）年出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，推測可能在手術(shù)前已發(fā)生微轉(zhuǎn)移。到目前為止尚缺乏預(yù)測腎癌轉(zhuǎn)移的標(biāo)記物，故本試驗(yàn)擬檢測轉(zhuǎn)移抑制基因KAI-1在腎癌中的表達(dá)和意義。 1 資料與方法 1.1 一般資料 269例患者中，男169例，女100例；年齡1981歲，平均47.1歲。16例有腎囊腫病史118年，平均6.2年。體檢發(fā)現(xiàn)腫瘤181例。均行超聲、腹部CT、胸片檢查。93例行腎動脈造影：其中57例行病側(cè)腎動脈栓塞。手術(shù)：242例行腎癌根治術(shù)；腎部分切除術(shù)21例；同側(cè)腎上腺切除術(shù)101例；淋巴結(jié)清掃術(shù)

11、10例。5例分別因?yàn)楹喜⒙园籽『头无D(zhuǎn)移、81歲患者并嚴(yán)重冠心病、廣泛肺轉(zhuǎn)移、下腔靜脈瘤栓并家屬拒絕手術(shù)、多發(fā)骨轉(zhuǎn)移和腦轉(zhuǎn)移放棄腎癌切除手術(shù)，僅行穿刺活檢術(shù)。40例術(shù)中發(fā)現(xiàn)腫大淋巴結(jié)：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌6例，陽性淋巴結(jié)7個(gè)。術(shù)后TNM分期：期120例，期132例，期12例，期5例。Fuhrman分級：級97例，級113例，級59例。隨訪和預(yù)后：隨訪514年，平均6.5年。失訪35例，失訪率13。未手術(shù)的5例均于3年內(nèi)死亡。T1-3aN0M0腎癌241例行腎癌手術(shù)后24例在術(shù)后（4.25±3.5）年出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。TNM期、期、期、期病例術(shù)后5年、10年的存活率分別是100（120/120）、8

12、1（107/132）、41.7（5/12）、0和76.9（20/26）、60.7（17/28）、0、0，5年和10年總存活率分別是86.2（232/269）、60.7（37/61）。 1.2 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本均取自上述病例的腎癌灶，為我院病理科存檔蠟塊。4甲醛固定，石蠟包埋切片。 1.3 方法 1.3.1 分組 根據(jù)臨床分期、細(xì)胞分級、年齡、T1-3aN0M0病例是否術(shù)后轉(zhuǎn)移分別將腎癌標(biāo)本分組。 1.3.2 免疫組織化學(xué)染色 采用Power Vision二步法檢測KAI-1蛋白表達(dá)，具體步驟按照說明書進(jìn)行。KAI-1一抗（sc-17752，鼠抗人）購自美國Santa Cruz公司，二抗（PV

13、6002，山羊抗鼠）購自美國Power Vision公司。 1.3.3 對照 用已知陽性片作陽性對照，用緩沖液代替一抗作陰性對照。 1.4 結(jié)果判斷 以胞漿、細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為KAI-1蛋白陽性染色的判斷標(biāo)準(zhǔn)。高倍鏡（×400）下選擇10個(gè)有代表性的視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞百分比。腫瘤細(xì)胞相應(yīng)部位不著色或陽性細(xì)胞數(shù)<5為陰性（0）；550為弱陽性（1+）；>50為強(qiáng)陽性（2+）。所有染色結(jié)果均經(jīng)病理科醫(yī)生3次重復(fù)觀察。 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 設(shè)KAI-1染色結(jié)果1+為低表達(dá)，2+為過表達(dá)。數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x

14、7;s)表示。采用2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有顯著性。應(yīng)用SPSS 11.5 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 2 結(jié)果 2.1 KAI-1表達(dá)與年齡的關(guān)系 如表1所示，6069歲、4049歲、5059歲三組年齡段腎癌發(fā)病率最高，分別為32.7、22.7、22.7。由于30歲以下和80歲以上年齡段病例數(shù)達(dá)不到統(tǒng)計(jì)學(xué)最小樣本量，故不進(jìn)行比較。3070歲各年齡段KAI-1陰性表達(dá)率為34.4%47.8%，1+表達(dá)率為36.0%39.8%，2+表達(dá)率為13.1%26.3%。各年齡段間低表達(dá)比較2值為0.541.19，P均>0.05。過表達(dá)比較2值為0.841.84，P均&

15、;gt;0.05。 2.2 KAI-1表達(dá)與腎癌分期的關(guān)系 如表2所示，隨著腎癌TNM分期的增高，各期KAI-1陰性表達(dá)率為34.2%、25.5%、52.3%和80.0；1+表達(dá)率為40.8%、46.1%、35.7%和20.0%，2+表達(dá)率為25.0%、28.4%、11.9%和0。各期KAI-1低表達(dá)比較2值為01.19，P均>0.05。期與其余各期間KAI-1過表達(dá)比較2值為，P均<0.01；和期間過表達(dá)比較2值4.87，P<0.05；其余各期間比較P均>0.05。表1 269例腎癌不同年齡組KAI-1表達(dá)表2 269例腎癌不同分期、細(xì)

16、胞分級、是否術(shù)后轉(zhuǎn)移組KAI-1表達(dá) 2.3 KAI-1表達(dá)與腎癌細(xì)胞分級的關(guān)系 隨著腎癌細(xì)胞Fuhrman分級的增高，、各級KAI-1陰性表達(dá)率為33.0%、47.8%、81.4%；1+表達(dá)率為35.1%、27.4%、17.0%；2+表達(dá)率為31.9%、24.8%、1.6%。各級間KAI-1低表達(dá)比較2值為0.040.7，P均>0.05。KAI-1過表達(dá)比較，和級間2值1.43，P>0.05；和、和級比較2值分別為9.11、27.24，P均<0.01。 2.4 T1-3aN0M0腎癌是否術(shù)后轉(zhuǎn)移組別間KAI-1表達(dá)的差異 通過隨訪得知241例T1-3

17、aN0M0腎癌中，轉(zhuǎn)移24例，未轉(zhuǎn)移194例，失訪23例。轉(zhuǎn)移組和未轉(zhuǎn)移組間比較，KAI-1陰性表達(dá)率為79.2、9.8；1+表達(dá)率為16.7、16.5；2+表達(dá)率為4.1、73.7。兩組低表達(dá)比較2值64.49，P<0.01；過表達(dá)2值0.02，P>0.05。 3 討論 KAI-1基因是一個(gè)具有2.4 kb的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，編碼白細(xì)胞表面糖蛋白，主要參與調(diào)控細(xì)胞黏附，使腫瘤細(xì)胞不易脫離原發(fā)灶而抑制轉(zhuǎn)移。在人類多種正常組織中表達(dá)，特別以前列腺、腎、肝、肺、骨髓和胎盤表達(dá)最高，而且研究顯示KAI-1低表達(dá)與前列腺癌轉(zhuǎn)移關(guān)系密切1。到目前為止，未見KAI-1在大樣本量

18、腎癌中表達(dá)的系統(tǒng)研究，特別是缺乏KAI-1在T1-3aN0M0腎癌術(shù)后遲發(fā)轉(zhuǎn)移中的作用和價(jià)值探討。 本組結(jié)果顯示各年齡組間KAI-1低表達(dá)和過表達(dá)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明KAI-1并未隨著腎癌病例年齡的增長而出現(xiàn)差異性表達(dá)，提示年齡因素與KAI-1在腎癌中的表達(dá)無相關(guān)性。 隨著腎癌TNM分期的增高，本組病例KAI-1陽性表達(dá)率逐漸下降。和期病例1+、2+陽性表達(dá)率最高，期陽性表達(dá)率最低；但是期KAI-1陰性表達(dá)率最高。通過統(tǒng)計(jì)學(xué)方法比較，期過表達(dá)率最高，至期、期過表達(dá)率降低，各組之間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但是和期之間比較不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示具有局部浸潤或轉(zhuǎn)移特點(diǎn)的期、期腎癌的發(fā)生可能與KAI-1基因的低表達(dá)或表達(dá)缺失有關(guān)，即KAI-1表達(dá)缺失的腎癌更易向高期演進(jìn)和發(fā)展。 腫瘤細(xì)胞分化已證實(shí)是腎癌獨(dú)立的預(yù)后因素，分化越差則預(yù)后越差2。那么在研究本組病例與KAI-1基因表達(dá)的關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn)：和級分化之間KAI-1各種表達(dá)率的比較不存在相關(guān)性，但是和級分別與級比較KAI-1過表達(dá)率時(shí)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即級分化腎癌KAI-1過表達(dá)率顯著降低，說明級分化腎癌中KAI-1低表達(dá)或表達(dá)缺失發(fā)生