淮河鯉魚不同組織同工酶PODCATMDHGDH的研究比較

1、本科生畢業(yè)論文（設計）題 目:淮河鯉魚不同組織同工酶POD、CAT、MDH、 GDH的比較研究姓 名: 石先平 學 院: 生命科學學院 專 業(yè): 生物科學 班 級: 06生科（2）班 學 號: 2006334220 指導教師: 肖明松 職稱: 副教授 2010年06月02日安徽科技學院教務處制目 錄 摘要 1關鍵詞 1引言11材料與方法1 1.1實驗材料試劑和儀器11.1.1實驗材料1 1.1.2主要試劑1 1.1.3主要儀器21.2實驗方法21.2.1酶樣品的提取21.2.2血清樣品的制備3 1.2.3儲備液及其制備31.2.4凝膠的制備31.2.5點樣與電泳41.2.6剝膠與染色41.2.

2、7褪色及掃描51.2.8酶的命名52結(jié)果與分析52.1CAT的結(jié)果分析 52.2POD的結(jié)果分析 52.3MDH的結(jié)果分析 62.4GDH的結(jié)果分析 63討論 7 3.1淮河鯉魚同工酶的表達具有明顯的組織特異性 73.2淮河鯉魚同工酶組織特異性與功能的相關性 8 4結(jié)論 9 5致謝9參考文獻10淮河鯉魚不同組織同工酶POD、CAT、MDH、GDH的研究比較 生物科學專業(yè)學生 石先平 指導教師 肖明松摘要：本文運用聚丙烯酰胺垂直梯度凝膠電泳方法對淮河鯉魚11種組織（腦、心臟、肌肉、眼睛、肝臟、脾臟、血液、腎臟、精巢、腸、鰓）中的4種同工酶（POD、CAT、MDH和GDH)的表達模式、同工酶位點及

3、其酶譜表型進行了分析。結(jié)果表明：CAT在淮河鯉魚中共檢測到4條酶帶（CAT1、CAT2、CAT3 、CAT4)，其中鰓中含量最多，腦和血液中沒有；POD檢測到6條酶帶（POD1 、POD2、POD3、POD4、POD5 、POD6)，其中血液含量最高。MDH檢測到2條酶帶(MDH1 、MDH2)在腦和肝中含量較多，其他都比較少。GDH檢測到3條酶帶（GDH1 、GDH2、GDH3)其中肝和腎臟中含量較高?；春吁庺~4種同工酶系統(tǒng)具有不同程度的織特異性，且同工酶的種類與活性變化與其功能相適應。關鍵詞：淮河鯉魚 聚丙烯酰胺凝膠電泳 POD CAT MDH GDH引言： 鯉魚(Cyprinus car

4、pio)隸屬于輻鰭魚亞綱的鯉形目，鯉魚是在亞洲原產(chǎn)的溫帶性淡水魚。喜歡生活在平原上的暖和湖泊，或水流緩慢的河川里。分布在除澳洲和南美洲外的全世界。屬于底棲雜食性魚類。屬于底棲雜食性魚類。鯉魚具有較高的養(yǎng)殖價值，味美鮮嫩，在經(jīng)濟魚類中占有重要的地位?；春吁庺~更是味美肉鮮，有很高的食用價值。為了促進淮河淡水漁業(yè)的長久發(fā)展和產(chǎn)量提高，極需對其種質(zhì)進行研究，以保持和提高其經(jīng)濟性狀，需進行大量的遺傳背景和遺傳基礎調(diào)查。同工酶作為基因產(chǎn)物，是基因型的生化表現(xiàn)型，是生物體生命活動中各水平上生理功能的重要參與者。因此，同工酶是分析生物的發(fā)育、遺傳、系統(tǒng)進化和生理過程的有效探針，也是研究魚類生化遺傳的重要手段。

5、利用同工酶電泳分析方法，分析其同工酶分布的組織特異性，以便直接利用某些基因產(chǎn)物作為遺傳標志，對其進行種質(zhì)鑒定，提供種質(zhì)質(zhì)量參數(shù)，對加速水產(chǎn)事業(yè)的科學化，進一步提高淡水養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益具有重要意義1姜建國，熊全沫.青魚不同組織中同工酶的表達模式J. 華南理工大學學報，1998，3(6):1-22鄧思平，劉楚武，陳景雄，等軍曹魚不同組織5種同工的研究J湛江海洋大學學報，2002，22(6)：1-53陳有華，閆初，趙光年，等鲇魚不同組織同工酶的組特異性初步研究J氨基酸和生物資源，2006，248-500。4許黎黎，邵雪玲.鯽魚不同組織過氧化氫酶同工酶活性的J.Amino Acids Biotic Re

6、sources，2003，25(4 )69-70 5葛剛，彭志文，鄱陽湖鱖魚、團頭魴肌肉四種同工酶研究J.南昌大學學報(理科版)1999，23（1）62-656李凱彬，姜蘭，潘厚軍.RRB系劍尾魚LDH和GDH同工酶的分析J.中國比較醫(yī)學雜志2004，l4(5)，258-2607許巧情，張琴，李兵.橄欖蟶蚌不同組織乳酸脫氫酶(LDH)和蘋果酸脫氫酶(MDH)同工酶的電泳分析J.長江大學學報(自然科學版)2008，5(1)：農(nóng)學 39-468馮晴，徐朗萊，葉茂炳，等小麥葉片衰老過程中CAT和APX活力及其同工酶譜的變化J南京農(nóng)業(yè)大學學報，1997，20(2)：95-999 曹志華，高貴琴.鯉魚腸

7、道及腸內(nèi)微生物谷氨酸脫氫酶同工酶及活性的初步研究J.淡水漁業(yè)2001，31(5)52-5310朱必風，李思光.興國紅鯉成體組織中四種同工酶的研究.見:林光華主編.主要淡水養(yǎng)殖魚類種質(zhì)研究M北京:中國科技出版社，1991176-18411楊興棋，鄧初夏幾種羅非魚乳酸脫氫酶和蘋果酸脫氫酶同工酶的電泳研究J遺傳學報，1984、11(2)：132-4012周宗漢，林金榜，朱婉華介紹魚類組織中蛋白質(zhì)及同工酶的電泳方法J淡水漁業(yè)，1983(2)：35-4113朱藍菲，陳湘辨，王祖熊.20種鯉科魚類同工酯的表型分析及有關進化問題的探討J.水產(chǎn)學報，1983，7(2)：145-15214李紹文，孟玉萍，張宗炳

8、蜜蜂脂酶同工酶韻研究J.昆蟲學報，1985.28(4):369-37415棣衛(wèi)眼，宋秋寶，姚鑫.上鼠旺胎組織、成體組織和胚胎病細胞脂酶同工酶譜的比較研究J實驗生物學報198518(1)：99-10416韓雅莉，譚竹均.中國林蛙早期胚胎胎發(fā)育過程同工酶研究J.動物學研究，1993，14(1):66-7217黃原，鄭哲民四種癩蝗過氧化物酶同工酶的初步研究J動物學研究，1988，9(4)：34818羅廣華，王愛國植物SOD的凝腔電泳及活性的顯示J.植物生物學通訊，1983，3(6)：44-4519 王宏偉， 王安利， 王維娜等. 魚類同工酶研究進展 J. 動物學報，2001，47（4）:101-10

9、5.20 陳定福， 陽清發(fā).吻鮈和圓筒吻鮈同工酶的電泳分析J.西南師范大學學報(自然科學版)， 1997，22(2):162-168. 1。1 材料與方法 11 實驗材料、試劑和儀器111 實驗材料實驗魚來源淮河流域蚌埠段，魚齡12 齡，全長1115 cm， 體質(zhì)量為100 g200g（雄魚6尾，雌魚4尾），選用的實驗魚體均經(jīng)充氧袋運回實驗室，并在水族箱中充氣暫養(yǎng)備用。1.1.2 主要試劑 丙烯酰胺(Acr，Solarbio) 甲叉雙丙烯酰胺（Amresco） 三羥甲基氨基甲烷（Tris，Solarbio） 過氧化氫（上?；瘜W試劑有限公司） 硫酸錳（鹽城鳳陽化工有限公司）鹽酸（上?；瘜W試劑有限

10、公司）氫氧化鈉（上?；瘜W試劑有限公司） 聯(lián)苯胺（上海索萊寶生物科技有限公司） 愈創(chuàng)木酚(天津市化學試劑一廠) 氧化型輔酶I(NAD，Solarbio) 氯化硝基四氮唑藍（NBT，Amresco） 吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS，Sigma) 溴酚藍（上海索萊寶生物科技有限公司） 三氯乙酸（上海索萊寶生物科技有限公司） 硫代硫酸鈉（北京百靈威科技有限公司） 碘化鉀（廣州化學試劑廠） 磷酸氫二鈉（國藥集團化學試劑有限公司） 磷酸二氫鈉（國藥集團化學試劑有限公司） 10%過硫酸銨（Roche) N，N，N，N-四甲基乙二胺（武漢鑫華遠醫(yī)藥化工制造有限公司） 甘氨酸(Solarbio) -醋酸萘酯(Scla

11、rbio)1.1.3主要儀器 研缽（阿法埃莎化學有限公司） 解剖器具一套（淮北正華生物儀器設備有限公司） 冰箱(Haier) FA1004型號的電子天平(上海良平儀器儀表有限公司，精度為0.0001g) Centrifuge804R冷凍離心機(Eppendorf) 烘箱(吳江市東遠電熱設備有限公司) DYY-4型電泳儀(北京市六一儀器廠生產(chǎn)) DY CZ- 22A型電泳槽(北京市六一儀器廠生產(chǎn)) 1-1000L型微量移液槍（德國Eppendorf公司）凝膠成像系統(tǒng)(SYNGNE)1.2 試驗方法1.2.1 酶樣品的提取 取魚體肌肉、腦、肝、眼、血液、腎、脾、卵巢、精巢、心、鰓，用0.9%生理鹽

12、水沖洗干凈，稱重0.4g。用吸水紙吸干水分，置于研缽中，按1：3(wv)加入01molL的磷酸緩沖液(pH=70)，冰浴研磨，再用吸管將勻漿移入冷凍離心管中。最后12000rmin離心，反復離心至上清液清晰透明，取上清液置于冰箱備用。均在低溫下進行。1.2.2 血清樣品制備 從魚尾動脈采血2-3ml，用少量的肝素抗凝，4放置4小時后，離心（10min，3000/min）分離血清，用0.5ml離心管分裝，-20保存?zhèn)溆谩?.2.3儲備液及其制備表1 不同濃度分離膠配制方法 Tab1 Different concentrations of the separate rubber 分離膠的濃度/ml

13、10%7.5%蒸餾水/ml4.054.851.5mol/L Tris-Hcl，pH8.8/ml2.52.5凝膠儲備液/ml3.352.510的過硫酸銨/µl5050 TEMED/µl4.054.85注：過氧化氫酶（CAT）和過氧化物酶（POD）采用濃度為7.5%的分離膠；蘋果酸脫氫酶（MDH）和谷氨酸脫氫酶（GDH）采用濃度為10%分離膠。一般濃縮膠濃度為5 %， pH 6.8，其方法見下表2表2 5%濃縮膠配制方法Tab2 5% of methods of preparing rubber試劑蒸餾水/ml0.5mol/lTris-Hcl緩沖液（pH6.8）/ml凝膠儲備液

14、/ml10%過硫酸銨/ulTEMED/ul總體積用量2.921.250.8255101.2.4凝膠制備 將玻璃板和墊片依次用5%的KOH甲醇溶液、去污劑和清水洗滌，晾干。將無凹口的玻璃板平放在桌面上；將墊片兩面涂少許凡士林后，排放在玻璃兩側(cè)，再將有凹口的玻璃板在墊片上放置妥當。將玻璃夾層推至桌沿，用膠帶紙封閉三個側(cè)面，留出有凹口的一面不封閉。使玻璃夾層豎立，有凹口面朝上。根據(jù)所需的凝膠濃度和用量，按表1的比例配制分離膠溶液。一旦加入TEMED，混勻后立即小心將分離膠注入準備好的玻璃板間隙中，為積層膠留有足夠空間。用吸管輕輕在其頂層加入幾毫升異丁醇，以阻止空氣中的氧氣對凝膠聚合的抑制作用。聚合完

15、成后（約3060分鐘）后，倒掉覆蓋液體，用蒸餾水洗凝膠上部數(shù)次，盡可能用吸水紙吸干凝膠頂端的殘余液體。根據(jù)所需用量，按表1和表2的比例配制積層膠溶液。注入積層膠溶液，插入梳子，小心避免氣泡，垂直放置于室溫下。在積層膠聚合完成（約30分鐘）后，小心拔掉梳子。用蒸餾水沖洗梳孔以除去未聚合的丙烯酰胺。將凝膠放入電泳槽中，上下槽均加入電泳緩沖液，檢查是否泄漏。驅(qū)除兩玻璃板之間凝膠底部的氣泡，即可上樣。1.2.5點樣與電泳 用微量注射器（50uL）吸取3微升樣液然后再吸取3微升溴酚藍混勻吸在一起，在濃縮膠上層點樣，每個點樣槽點一個組織并留一個空槽以辨認并且記下組織的順序。點樣時須小心，防止樣品液的擴散。

16、點樣后開始電泳。電泳采用的是丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）具體步驟如下：（1） 實驗前 20min，倒入電極緩沖液，打開穩(wěn)流穩(wěn)壓電泳儀，并在其四周敷上冰袋。（2） 預電泳：將預先制備好的聚丙烯酰胺凝膠膠模裝入電泳槽固定好，并在其四周敷上冰袋，在 50mA 電流下，預電泳 30min。（3） 前電泳：預電泳結(jié)束后，關閉電源，用微量加樣注射器在每個點樣孔內(nèi)分別加入 3uL 待測樣品（待測樣品是所測樣品和溴酚蘭的混合物，其中所測樣品和溴酚蘭的體積比為 4：1。和 3uL 溴酚蘭（指示劑），25mA 電流下，前電泳 10min 。（4） 正式電泳：在 50mA 的電流下，正式電泳，電泳時間為 2.5h。

17、1.2.6剝膠與染色剝膠是用帶有長針頭的注射器，內(nèi)裝蒸餾水作潤滑劑，把針頭插入玻板內(nèi)壁與凝膠表面之間，慢慢移動針頭，同時注入水，靠水流壓力與潤滑將玻板與凝膠分開，剝出的凝膠用3.5%醋酸固定10min。倒入染色液，蓋上包有黑紙的蓋子，進行染色。不同同工酶的染色時間和染色配方不同。具體染色方法如下表：表3 不同酶的染色方法 Tab 3 The recipe of dyestuff for isozyme staining 酶類染色方法過氧化氫酶A：取5ml3%過氧化氫10ml 0.1mol/L pH=7.0的磷酸緩沖液 7ml0.06mol/L硫代硫酸鈉溶于燒杯加水78mlB：取5ml 0.09

18、mol/L碘化鉀溶于另一個小燒杯中加1ml冰醋酸再加95ml水先加A液一段時間后然后再加B液過氧化物酶0.2mol/L乙酸鈉20ml+5mmol/L硫酸錳2ml+0.12%H2O2(56滴)+聯(lián)苯胺-愈創(chuàng)木酚液5ml(稱50mg聯(lián)苯胺，135mg愈創(chuàng)木酚溶于25ml的25%醋酸)蘋果酸酶NAD+（氧化型輔酶I)50 mg， NBT30 mg， PMS 2 mg， 1M蘋果酸鈉(pH7. 0)10 ml， 0. 5MTris-HCl緩沖液(pH7. 1) 20 ml， 100 ml容量瓶定容。谷氨酸脫氫酶NAD+（氧化型輔酶I)60 mg， NBT30 mg， PMS 2 mg， 1M谷氨酸鈉(

19、PH7. 0) 5 ml， 0. 5M磷酸緩沖液(pH7. 0) 25 ml， 100 ml容量瓶定容。 1.2.7褪色及掃描 染色后的電泳膠板倒入 3.5%冰醋酸固定10min。用脫色液(5份甲醇+1份冰醋酸+5份蒸餾水)脫色至凝膠底色脫盡為止。最后把染完色的膠拿到電泳凝膠成像系統(tǒng)中進行掃描并保存掃描圖片供最后的結(jié)果分析使用。1.2.8 酶的命名從陽極到陰極電泳遷移率的先后順序依次編寫編號的方法命名。2. 結(jié)果和分析2.1 CAT的結(jié)果分析 淮河鯉魚不同組織的CAT同功酶表達情況見圖1。CAT同工酶共檢測到4條酶帶（CAT1、CAY2、CAT3、CAT4）。在鰓和心臟中均含有CAT1、CAT

20、2、CAT3、CAT4；腸中含有CAT1和CAT4；精巢中含有CAT1、CAT4；肝中含有CAT1；眼中含有CAT1、CAT4；腎臟中含有CAT1、CAT2、CAT3、CAT4；而在肌肉、腦、血液中CAT含量都極少圖譜中顯示都看不到條帶。其中CAT4在鰓中含量最高，在心臟、腸、精巢、肝、眼、腎臟中均含有，而在肌肉、腦、血液中不含有。CAT3在鰓中含量最高，而在心臟、腸、精巢、肝、眼、腎臟中含量很低，在其它組織中沒有；CAT2在肌肉、腦和血液中沒有，在其他組織中含量都很少。CAT1除了在腦和血液組織中沒有，其他組織含量相對較少。圖1 CAT同工酶電泳圖譜Figure 1 CAT isozyme

21、electrophoresis profiles注：圖中從1到10的器官依次是鰓、心臟、腸、精巢、肝、眼、腎臟、肌肉、腦、血液2.2 POD的結(jié)果與分析淮河鯉魚不同組織的POD同功酶表達情況見圖2。由圖2可知，圖譜顯示共6檢測到種POD同工酶條帶分別命名為POD1、POD2、POD3、POD4、POD5、POD6。在眼中含有POD5和POD2；鰓中含有POD5、POD4、POD3； 精巢中含有POD4、POD5、POD6；腦和肌肉組織中沒有條帶；腎中含有POD6、POD5、POD4、POD3、POD2；腸中只含有POD6；心臟中含有POD2、POD3、POD4、POD5、POD6；肝中不含有任

22、何條帶;血液中含有POD1、POD2、POD3、POD4、POD5、POD6。POD6在各個器官中含量都很少，其中在血液中含量最高；POD5相對比較高特別是在血液、肝、鰓含量很高，而在精巢和腸中幾乎沒有；POD4除了在心臟中含量較高外在其他組織中含量都很少，不明顯；POD3在鰓、腦、腸、血液中含有少量，而在其他器官中幾乎沒有。POD2在血液中含量較高，眼中次之，其他器官沒有條帶；POD1除了在血液中含有外其他所有組織都不含有，具體見圖2。圖2 POD同工酶電泳圖譜Figure 2 POD isoenzyme electrophoresis profiles注：圖中從1到10的器官依次是眼、鰓、

23、精巢、腦、腎、腸、心臟、肌肉、肝、血液2.3 MDH的結(jié)果分析 淮河鯉魚不同組織的MDH同功酶表達情況見圖3。由圖3可知，從圖譜中共檢測到2種同工酶帶分別命名為MDH1和MDH2。眼中含有MP1；腦中含有MDH1、MDH2；鰓中含有MDH1；肌肉中含有MDH1；心臟中含有MDH1；腸中含有MDH1；脾臟中MDH沒有條帶；腎臟中含有MDH1；肝中含有MDH1、MDH2。血液中含有MDH1。MDH1除了在脾臟以外的所有器官中幾乎都含有，其中腦好肝的含量最高，其他的次之；MDH2除了在腦和肝中少量含有外其他組織基本不含有MDH1。圖3 MDH同工酶電泳圖譜Figure 3 MDH isozyme e

24、lectrophoresis profiles注：圖中從1到10器官依次是眼、腦、鰓、肌肉、心臟、腸、脾臟、腎臟、肝、血液。2.4 GDH的結(jié)果分析 淮河鯉魚不同組織的GDH同功酶表達情況見圖4。由圖4可知，從圖譜中共檢測到3種同工酶酶帶分別命名為GDH1、GDH2、GDH3。心臟中GDH含量很少圖譜中基本無條帶；鰓中含有GDH1、GDH2；腦中含有GDH1；眼中含有GDH1、GDH2、GDH3；腸中含有GDH3；肝中含有GDH1、GDH2、GDH3；腎臟中含有GDH1、GDH2、GDH3；脾臟中含有GDH2；血液中含有GDH1.從各個酶在器官中的強弱分析：GDH1在各個器官中均含有，其中腦和

25、眼中含量較高。GDH2主要在肝、眼、腎臟、脾臟中，其中腎臟中含量最高；GDH3存在于眼、肝、腎臟中，而且含量很少。圖4 GDH同工酶電泳圖譜Figure 4 GDH isozyme electrophoresis profiles注：圖中從1到9器官依次是血液、脾臟、腎臟、肝、腸、眼、腦、鰓、心臟3 討論3.1淮河鯉魚同工酶的表達具有明顯的組織特異性 本研究表明淮河鯉魚不同組織4 種同工酶（CAT、POD、MDH、GDH）之間的存在特異性。4 種同工酶在淮河鯉魚的11種組織中均有表達但在不同組織中的同工酶種類和表達強度有差異。盡管組織間有差異，但在不同組織中有共同的譜帶。這與鄧思平2、陳有華3

26、的研究結(jié)果相同。淮河鯉魚CAT同工酶酶譜與許黎黎，邵雪玲4的研究結(jié)果相似，但檢測到的酶帶稍多，這可能與魚類生活的環(huán)境和種群有關系。葛剛等5研究了鄱陽湖鱖魚和團頭魴POD為空帶呈現(xiàn)關閉狀態(tài)，而本試驗中淮河鯉魚POD在各個不同的組織中均有表達，這說明物種之間存在較大差異。但與鄧思平研究的軍曹魚的各個組織之間有些相似，這說明兩者之間可能存在親緣關系。MDH與軍曹魚也存在一定程度的相似，軍曹魚檢測到三條帶而本實驗中的淮河鯉魚檢測到2條帶。本試驗中的GDH與RRB系劍尾魚6相比條帶要更加清晰，說明淮河鯉魚的GDH活性總體相對較強。 淮河鯉魚同工酶的組織特異性表現(xiàn)在以下幾個方面：(1) 位點的表達。某些位

27、點的同工酶僅限于某種組織特有，在其他組織中，該同工酶不表達或活性太低而檢測不出。如CAT1和CAT2只在鰓和心臟中表達。POD4只在鰓腎臟和心臟中表達。MDH2只在腦和肝中表達。GDH3只在眼肝和腎臟表達。（2）位點表達的程度即酶的強弱。同一位點在不同組織中的相對含量或表達的數(shù)量差別很大，如GDH-1在腎臟和脾臟中表達很強，而在其他幾種種組織中表達稍弱不同位點在不同組織中相對活性不同， 如腎臟組織中GDH1的表達比GDH3要強。(3) 等位基因表達上的差異。由于復等位基因的存在，不同的組織中會有不同的等位基因表達， 結(jié)果同一位點上的酶譜表型在不同組織中有明顯差異， 或有時等位基因編碼的亞基不一

28、定完全表達或不能通過電泳鑒定其產(chǎn)物，即存在“啞等位基因”或“無效基因”結(jié)果也導致不同組織中同一位點的酶譜表型出現(xiàn)差異， 如鰓和心臟中CAT表達了4條譜帶，而在其他的組織中只發(fā)現(xiàn)2條譜帶。3.2 淮河鯉魚同工酶組織特異性與功能的相關性 蘋果酸脫氫酶（MDH）催化蘋果酸脫氫生成草酰乙酸，它的作用主要是使蘋果酸脫氫，其含量影響糖的有氧代謝的進行，生成ATP的量也相應起變化，且還與葡萄糖異生過程有聯(lián)系，它是機體受到脅迫時為機體提供能量的重要酶之一 7。蘋果酸脫氫酶為二聚體酶，有移動較快的細胞質(zhì)型(sMDH)與移動較慢的線粒體型(mMDH)。本試驗在腦和肝中染色較深，因為這些組織含大量的線粒體和良好的血

29、液供應，因此它的代謝特別需要氧氣和能量。 過氧化氫酶（CAT）是體內(nèi)一種重要的抗氧化酶，可以消除因SOD消除體內(nèi)過量的O2-所帶來的過量的H2O2，維持機體正常的機能，因而在科研工作時常運用該酶同工酶的染色法 8。實驗結(jié)果顯示過氧化氫酶的活性大小依次為鰓>肉>心臟，這與過氧化氫酶在體內(nèi)的作用是緊密相關的。過氧化氫酶是體內(nèi)的一種主要抗氧化酶，可消除過量的H2O2，這就決定了在鯉魚的重要組織器官中，過氧化氫酶的活性相對會高一些9。谷氨酸脫氫酶（GDH）酶是一種催化使氨還原性地固定到-酮戊二酸上形成谷氨酸反應的酶。EC1113NADP 1114（NADP）。-酮戊二酸+NH3+NADH+

30、H+谷氨酸+NAD+它廣泛分布于生物中，在動物，存在于線粒體中。是氨基酸代謝的重要酶類，特別在非必需氨基酸的合成與轉(zhuǎn)化中起著重要的作用。本試驗中在腎臟和脾臟中含量就高說明鯉魚這兩個組織能利用尿素合成谷氨酸，但合成能力有限10。過氧化物酶（POD）同工酶是一類能利用H2O2氧化供氫體的氧化酶。由于其分布廣泛，變異性大，能作為低級動物的分類指標。國內(nèi)曾有人對動物和植物的過氧化物同工酶作過研究Comparative Studies on the POD、CAT、MDH、GDH in Different Tissues of Cyprinus carpioIn huaihe River Student

31、 majoring in Biological Sciences ShiXianping Tutor XiaoMingsongAbstract： The EST，SOD，LDH andADH isozymes in ten tissues or organs : brain,heart , muscle,eyes, liver,blood, kidney,spermary, intestines and gill of Cyprinus carpio were studied by using the vertical polyacrylamide gel electrophoresis.Th

32、e results showed that: CAT were detected 4 enzyme bands (CAT1,CAT2,CAT3,CAT4)in Cyprinus carpio from Huaihe Rive, of which the most abundant one is gills.POD detected six enzyme bands (POD1,POD2,POD3,POD4,POD5 and POD6) and the blood has highest levels.MDH detected to 2 bands (MDH1,MDH2) and brain and liver are more than others.GDH