蛋白質(zhì)序列分析及結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)第一講

1、生物信息學(xué)生物信息學(xué)謝文海謝文海 講師講師 第第五五章章 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)序列序列分析及結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)分析及結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)一、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)一、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)二、蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)介紹二、蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)介紹三、蛋白質(zhì)序列分析三、蛋白質(zhì)序列分析四、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)四、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)預(yù)測(cè)五、蛋白質(zhì)五、蛋白質(zhì)功能預(yù)測(cè)功能預(yù)測(cè)從多條免疫球蛋白序列中提取的從多條免疫球蛋白序列中提取的8 8個(gè)片段的多重比對(duì)個(gè)片段的多重比對(duì)疏水氨基酸色氨酸半胱氨酸保守結(jié)構(gòu)域免疫球蛋白恒定區(qū)免疫球蛋白可變區(qū)回顧1.human beta globin （人（人珠蛋白）珠蛋白）2.horse beta globin （馬（馬珠蛋白）珠蛋白）3.human alp

2、ha globin （人（人珠蛋白）珠蛋白）4.horse alpha globin （馬（馬珠蛋白）珠蛋白）5.cyanohaemoglobin （藍(lán)血紅蛋白）（藍(lán)血紅蛋白）6. whale myoglobin （鯨肌紅蛋白）（鯨肌紅蛋白）7.Leghaemoglobin （豆血紅蛋白）（豆血紅蛋白）通過(guò)珠蛋白的比通過(guò)珠蛋白的比較構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育較構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹判斷生物進(jìn)化樹判斷生物進(jìn)化分歧時(shí)間分歧時(shí)間回顧DNA 序列蛋白序列蛋白結(jié)構(gòu)功能結(jié)構(gòu)是蛋白行使功能的前提蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)主要分為四級(jí)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)主要分為四級(jí), 一級(jí)結(jié)構(gòu)、二級(jí)結(jié)構(gòu)、三級(jí)結(jié)構(gòu)以及四級(jí)結(jié)一級(jí)結(jié)構(gòu)、二級(jí)結(jié)構(gòu)、三級(jí)結(jié)構(gòu)以及四級(jí)結(jié)構(gòu)構(gòu)。一

3、級(jí)結(jié)構(gòu)一級(jí)結(jié)構(gòu):蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸殘基的排列順序蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸殘基的排列順序MTYKLILNGKTKGETTTEAVDAATAEKVFQYANDNGVDGEWTYTE二級(jí)結(jié)構(gòu)：主要由氫鍵維系的結(jié)構(gòu)（二級(jí)結(jié)構(gòu)：主要由氫鍵維系的結(jié)構(gòu)（-螺旋螺旋、-折疊折疊）指指多肽多肽鏈中主鏈原子的局部空間排布即構(gòu)象，不涉及側(cè)鏈部分的構(gòu)象鏈中主鏈原子的局部空間排布即構(gòu)象，不涉及側(cè)鏈部分的構(gòu)象。螺旋、螺旋、 折疊折疊、 轉(zhuǎn)角、無(wú)規(guī)卷曲轉(zhuǎn)角、無(wú)規(guī)卷曲 、螺旋組合（螺旋組合（）折疊組合（折疊組合（）和）和螺旋螺旋折疊組合（折疊組合（）螺旋螺旋(helix)的結(jié)構(gòu)特征為：的結(jié)構(gòu)特征為：（1）主鏈骨架圍繞中心軸盤繞

4、形成右手螺旋；）主鏈骨架圍繞中心軸盤繞形成右手螺旋；（2）螺旋每上升一圈是）螺旋每上升一圈是3.6個(gè)氨基酸殘基，螺距為個(gè)氨基酸殘基，螺距為0.54nm；（3）相鄰螺旋圈之間形成許多氫鍵；）相鄰螺旋圈之間形成許多氫鍵；（4）側(cè)鏈基團(tuán)位于螺旋的外側(cè)）側(cè)鏈基團(tuán)位于螺旋的外側(cè)。Ala、Glu、Leu、Met 促進(jìn)形成促進(jìn)形成 Pro、 Gly、Tyr、Ser不利于形成不利于形成（1）若干條肽鏈或肽段平行或反平行排列成片；）若干條肽鏈或肽段平行或反平行排列成片；（2）所有肽鍵的）所有肽鍵的C=O和和NH形成鏈間氫鍵；形成鏈間氫鍵；（3）側(cè)鏈基團(tuán)分別交替位于片層的上、下方。）側(cè)鏈基團(tuán)分別交替位于片層的上、

5、下方。 折疊折疊(sheets) 的結(jié)構(gòu)特征為：的結(jié)構(gòu)特征為：a.反反平行和平行的多個(gè)平行和平行的多個(gè)折疊鏈形成一個(gè)完整折疊鏈形成一個(gè)完整折疊結(jié)構(gòu)的氫鍵示意圖折疊結(jié)構(gòu)的氫鍵示意圖；b.來(lái)自來(lái)自人人pi型谷胱甘肽型谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)硫酶中單個(gè)亞基中連續(xù)主鏈的部分轉(zhuǎn)硫酶中單個(gè)亞基中連續(xù)主鏈的部分折疊結(jié)構(gòu)折疊結(jié)構(gòu)(2DGQ.pdb)側(cè)面視側(cè)面視圖，可見(jiàn)轉(zhuǎn)角圖，可見(jiàn)轉(zhuǎn)角(turn)； c.來(lái)自來(lái)自人人pi型谷胱甘肽型谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)硫酶一個(gè)亞基中連續(xù)主鏈的部分轉(zhuǎn)硫酶一個(gè)亞基中連續(xù)主鏈的部分折疊結(jié)構(gòu)頂部視圖，可見(jiàn)轉(zhuǎn)角折疊結(jié)構(gòu)頂部視圖，可見(jiàn)轉(zhuǎn)角(turn)；d.來(lái)自來(lái)自人信號(hào)傳遞蛋白人信號(hào)傳遞蛋白SMAD4

6、(1DD1.pdb)的一個(gè)亞基中部分的一個(gè)亞基中部分折疊結(jié)構(gòu)頂部視圖，可見(jiàn)到大折疊結(jié)構(gòu)頂部視圖，可見(jiàn)到大的環(huán)區(qū)的環(huán)區(qū)(loop)。 多肽鏈多肽鏈180回折部分，通常由四個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，借回折部分，通常由四個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，借1. 4殘基殘基之間形成的氫鍵維系。之間形成的氫鍵維系。 Asp、Asn、Ser、Thr、Gln 、Pro 常出現(xiàn)在常出現(xiàn)在轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角的結(jié)構(gòu)特征為：轉(zhuǎn)角的結(jié)構(gòu)特征為：來(lái)自來(lái)自人細(xì)胞珠蛋白人細(xì)胞珠蛋白(2DC3.pdb)的兩段的兩段螺旋由螺旋由轉(zhuǎn)角連接，用粗樹枝狀顯轉(zhuǎn)角連接，用粗樹枝狀顯示了兩段螺旋末端的脯氨酸。示了兩段螺旋末端的脯氨酸。無(wú)規(guī)卷曲無(wú)規(guī)卷曲的結(jié)構(gòu)特征為：的結(jié)

7、構(gòu)特征為： 無(wú)規(guī)卷曲的特點(diǎn)為在主鏈骨架上無(wú)規(guī)則盤繞，其構(gòu)象狀態(tài)仍遵循物理無(wú)規(guī)卷曲的特點(diǎn)為在主鏈骨架上無(wú)規(guī)則盤繞，其構(gòu)象狀態(tài)仍遵循物理化學(xué)原理，但波動(dòng)性較大，對(duì)溫度變化敏感；實(shí)驗(yàn)測(cè)定三級(jí)結(jié)構(gòu)時(shí)往化學(xué)原理，但波動(dòng)性較大，對(duì)溫度變化敏感；實(shí)驗(yàn)測(cè)定三級(jí)結(jié)構(gòu)時(shí)往往無(wú)法識(shí)別無(wú)規(guī)卷曲往無(wú)法識(shí)別無(wú)規(guī)卷曲(缺失其座標(biāo)缺失其座標(biāo))，即使有座標(biāo)則其溫度因子也較高，即使有座標(biāo)則其溫度因子也較高。無(wú)規(guī)卷曲同。無(wú)規(guī)卷曲同環(huán)的區(qū)分主要是其長(zhǎng)度和其形狀的波動(dòng)性。環(huán)的區(qū)分主要是其長(zhǎng)度和其形狀的波動(dòng)性。 超二級(jí)結(jié)構(gòu)超二級(jí)結(jié)構(gòu)(supersecondary structure)指位于同一主鏈的多個(gè)二級(jí)指位于同一主鏈的多個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)組

8、裝形成的特定組裝體，可直接作為三級(jí)結(jié)構(gòu)的或結(jié)構(gòu)域的組成單元結(jié)構(gòu)組裝形成的特定組裝體，可直接作為三級(jí)結(jié)構(gòu)的或結(jié)構(gòu)域的組成單元，是從蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)形成三級(jí)結(jié)構(gòu)的一個(gè)過(guò)渡結(jié)構(gòu)形式，也稱為立體結(jié)，是從蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)形成三級(jí)結(jié)構(gòu)的一個(gè)過(guò)渡結(jié)構(gòu)形式，也稱為立體結(jié)構(gòu)形成的模體。構(gòu)形成的模體。 （1）轉(zhuǎn)角或轉(zhuǎn)角或環(huán)等連接連續(xù)四個(gè)環(huán)等連接連續(xù)四個(gè)螺旋形成的四螺旋形成的四螺旋捆；螺旋捆；（2）中部固定位置含有亮氨酸及其他疏水側(cè)鏈氨基酸殘基、在螺旋兩端）中部固定位置含有亮氨酸及其他疏水側(cè)鏈氨基酸殘基、在螺旋兩端含有強(qiáng)親水側(cè)鏈氨基酸的含有強(qiáng)親水側(cè)鏈氨基酸的螺旋組成的亮氨酸拉鏈螺旋組成的亮氨酸拉鏈(Leucine zi

9、pper)；（3）一條主鏈中相鄰七個(gè)兩親）一條主鏈中相鄰七個(gè)兩親螺旋通過(guò)過(guò)度結(jié)構(gòu)形成的七次穿膜螺旋螺旋通過(guò)過(guò)度結(jié)構(gòu)形成的七次穿膜螺旋組；組；（4）連續(xù)主鏈中兩段）連續(xù)主鏈中兩段螺旋連接三段螺旋連接三段折疊鏈形成的折疊鏈形成的Rossmann折疊；折疊；（5）轉(zhuǎn)角連接轉(zhuǎn)角連接a螺旋構(gòu)成的螺旋構(gòu)成的a-螺旋螺旋-轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角-螺旋；螺旋；（6）環(huán)連接環(huán)連接螺旋構(gòu)成的螺旋構(gòu)成的螺旋螺旋-環(huán)環(huán)-螺旋等。螺旋等。（7）-折疊都為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。折疊都為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。 二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)一步折疊形成的結(jié)構(gòu)域三級(jí)結(jié)構(gòu)三級(jí)結(jié)構(gòu):蛋白質(zhì)的多肽鏈在各種二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上再進(jìn)一步盤曲或蛋白質(zhì)的多肽鏈在各種二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上再進(jìn)一步盤曲或

10、折迭形成具有一定規(guī)律的三維空間結(jié)構(gòu)，稱為蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)折迭形成具有一定規(guī)律的三維空間結(jié)構(gòu)，稱為蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)（tertiary structure）。蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定主要靠次級(jí)鍵，包括）。蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定主要靠次級(jí)鍵，包括氫鍵、疏水鍵、鹽鍵以及范德華力（氫鍵、疏水鍵、鹽鍵以及范德華力（Van der Wasls力）等。力）等。四級(jí)結(jié)構(gòu)四級(jí)結(jié)構(gòu):具有二條或二條以上獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈組成的蛋白具有二條或二條以上獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈組成的蛋白質(zhì)，其多肽鏈間通過(guò)次級(jí)鍵相互組合而形成的空間結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)，其多肽鏈間通過(guò)次級(jí)鍵相互組合而形成的空間結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)（質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)（qua

11、rternary structure）。其中，每個(gè)具有獨(dú)立）。其中，每個(gè)具有獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈單位稱為亞基（三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈單位稱為亞基（subunit）。）。蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定了蛋白質(zhì)的二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定了蛋白質(zhì)的二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)如如PIR、SWISS-PROT、NCBI , 這些數(shù)據(jù)庫(kù)的這些數(shù)據(jù)庫(kù)的數(shù)據(jù)主要以蛋白質(zhì)的序列為主數(shù)據(jù)主要以蛋白質(zhì)的序列為主, 并賦予相應(yīng)的注釋并賦予相應(yīng)的注釋; 如如PROSITE、Pfam, 這些數(shù)據(jù)庫(kù)主要這些數(shù)據(jù)庫(kù)主要收集了蛋白質(zhì)的保守結(jié)構(gòu)域和功能域的特征序列收集了蛋白質(zhì)的保守結(jié)構(gòu)域和功能域的特征序列; 如如PDB 等等, 這些數(shù)

12、據(jù)庫(kù)主要以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)測(cè)這些數(shù)據(jù)庫(kù)主要以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)測(cè)量數(shù)據(jù)為主量數(shù)據(jù)為主; 如如SCOP、CATH、FSSP 等等, 這其中有以序列這其中有以序列比較為基礎(chǔ)的序列分類數(shù)據(jù)庫(kù)以及以結(jié)構(gòu)比較為基礎(chǔ)的結(jié)構(gòu)分類數(shù)據(jù)比較為基礎(chǔ)的序列分類數(shù)據(jù)庫(kù)以及以結(jié)構(gòu)比較為基礎(chǔ)的結(jié)構(gòu)分類數(shù)據(jù)庫(kù)之分。庫(kù)之分。依據(jù)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次依據(jù)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次, 將蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)分為將蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)分為: 蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)r 這些數(shù)據(jù)庫(kù)種類有差別這些數(shù)據(jù)庫(kù)種類有差別, 但內(nèi)部是相互聯(lián)系的但內(nèi)部是相互聯(lián)系的.r 每個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)都有指針指向其他數(shù)據(jù)庫(kù)每個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)都有指針指向其他數(shù)據(jù)庫(kù), 而且數(shù)而且數(shù)據(jù)庫(kù)之間的序列以及相應(yīng)的結(jié)構(gòu)是共享的據(jù)

13、庫(kù)之間的序列以及相應(yīng)的結(jié)構(gòu)是共享的, 同一同一種蛋白質(zhì)依次會(huì)出現(xiàn)在不同的數(shù)據(jù)庫(kù)種蛋白質(zhì)依次會(huì)出現(xiàn)在不同的數(shù)據(jù)庫(kù).r這樣的數(shù)據(jù)溝通有助于更深層地挖掘蛋白質(zhì)的這樣的數(shù)據(jù)溝通有助于更深層地挖掘蛋白質(zhì)的內(nèi)在生物信息內(nèi)在生物信息, 這些數(shù)據(jù)庫(kù)是融序列信息的索取、這些數(shù)據(jù)庫(kù)是融序列信息的索取、處理、存儲(chǔ)、輸出于一身的。處理、存儲(chǔ)、輸出于一身的。（1）PIR(protein information resource, PIR)和和PSD (protein sequence database, PSD) /pirwww PIR-PSD 是一個(gè)綜合全面的、非冗余的

14、、專業(yè)注釋的、分類完整的蛋白是一個(gè)綜合全面的、非冗余的、專業(yè)注釋的、分類完整的蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫(kù)。質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫(kù)。PIR-PSD 的序列來(lái)自于將的序列來(lái)自于將GenBank/ EMBL/ DDBJ 三大三大數(shù)據(jù)庫(kù)的編碼序列的翻譯而成的蛋白質(zhì)序列、發(fā)表的文獻(xiàn)中的序列和用數(shù)據(jù)庫(kù)的編碼序列的翻譯而成的蛋白質(zhì)序列、發(fā)表的文獻(xiàn)中的序列和用戶直接提交的序列。戶直接提交的序列。（2）SWISS-PROT/ TrEMBL數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù) /swissprot數(shù)據(jù)庫(kù)由蛋白質(zhì)序列條目構(gòu)成數(shù)據(jù)庫(kù)由蛋白質(zhì)序列條目構(gòu)成, 每個(gè)條目包含蛋白質(zhì)序列、引用文獻(xiàn)信每個(gè)條目包含蛋白質(zhì)序列、引用文獻(xiàn)信息息、分類

15、學(xué)、分類學(xué)信息、注釋等信息、注釋等, 注釋中包括蛋白質(zhì)的功能、轉(zhuǎn)錄后修飾位點(diǎn)、注釋中包括蛋白質(zhì)的功能、轉(zhuǎn)錄后修飾位點(diǎn)、特殊特殊位點(diǎn)和位點(diǎn)和區(qū)域、二級(jí)結(jié)構(gòu)、四級(jí)結(jié)構(gòu)、與其他序列的相似性、序列區(qū)域、二級(jí)結(jié)構(gòu)、四級(jí)結(jié)構(gòu)、與其他序列的相似性、序列殘缺與疾病的關(guān)系殘缺與疾病的關(guān)系、序列、序列變異體等信息。變異體等信息。模體數(shù)據(jù)庫(kù)模體數(shù)據(jù)庫(kù)（1）PROSITE 蛋白質(zhì)家族及結(jié)構(gòu)域數(shù)據(jù)庫(kù)蛋白質(zhì)家族及結(jié)構(gòu)域數(shù)據(jù)庫(kù)( /prosite/ ) PROSITE 數(shù)據(jù)庫(kù)收集了有顯著生物學(xué)意義的蛋白質(zhì)位點(diǎn)序列、蛋白質(zhì)特征序列譜庫(kù)以及序列模型, 并能依據(jù)這些特征屬性快速可靠地鑒定出一個(gè)未知功能

16、蛋白質(zhì)序列屬于哪個(gè)蛋白質(zhì)家族, 即使在蛋白質(zhì)序列相似性很低的情況下, 也可以通過(guò)搜索隱含的功能結(jié)構(gòu)模體(motif)來(lái)鑒定, 因此是有效的序列分析數(shù)據(jù)庫(kù)。 PROSITE 中涉及的序列模式包括酶的催化位點(diǎn)、配體結(jié)合位點(diǎn)、金屬離子結(jié)合位點(diǎn)、二硫鍵、小分子或者蛋白質(zhì)結(jié)合區(qū)域等, 此外PROSITE 還包括由多序列比對(duì)構(gòu)建的序列表譜( profile) , 能更敏感地發(fā)現(xiàn)序列中的信息。PROSITE同時(shí)數(shù)據(jù)庫(kù)提供了序列分析工具同時(shí)數(shù)據(jù)庫(kù)提供了序列分析工具: ScanProsite 是用于搜索所提交的序列數(shù)據(jù)是否包是用于搜索所提交的序列數(shù)據(jù)是否包含含 PROSITE 數(shù)據(jù)庫(kù)中的序列模式或者數(shù)據(jù)庫(kù)中的序

17、列模式或者SWISS-PROT 數(shù)據(jù)庫(kù)中已提交的序列模式數(shù)據(jù)庫(kù)中已提交的序列模式; MotifScan 用于查找未知序列中所有可能的已知結(jié)用于查找未知序列中所有可能的已知結(jié)構(gòu)組件構(gòu)組件, 數(shù)據(jù)庫(kù)包括數(shù)據(jù)庫(kù)包括PROSITE序列表譜、序列表譜、PROSITE 模式、模式、Pfam 收集的隱馬爾可夫模式收集的隱馬爾可夫模式( HMM)。(2) PRINTS Fingerprint Database www.bioinf.man.ac.uk/dbrowser/PRINTS/ 這個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)包含1 500 個(gè)蛋白質(zhì)指紋圖譜, 編碼9 136 個(gè)單一模體。(3) BLOCKS ( www.blocks.fh

18、/ )BLOCKS 是通過(guò)一些高度保守的蛋白質(zhì)區(qū)域比對(duì)出來(lái)的無(wú)空位的片段。模體數(shù)據(jù)庫(kù)模體數(shù)據(jù)庫(kù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域數(shù)據(jù)庫(kù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域數(shù)據(jù)庫(kù) (1 ) 蛋白質(zhì)家族序列比對(duì)以及隱馬爾可夫模式數(shù)據(jù)庫(kù)蛋白質(zhì)家族序列比對(duì)以及隱馬爾可夫模式數(shù)據(jù)庫(kù)Pfam( protein families database of alignments and HMMs)Pfam 是蛋白質(zhì)家族序列比對(duì)以及隱馬爾可夫模式數(shù)據(jù)庫(kù),其網(wǎng)址是: www.sanger.ac.uk/Software/Pfam/index.shtml。 (2) 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域數(shù)據(jù)庫(kù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域數(shù)據(jù)庫(kù)ProDom http:/prodes.toulo

19、use.inra.fr/prodom/doc/prodom.html (3) SMART SMART 是一個(gè)簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu)研究工具, 可對(duì)可轉(zhuǎn)移的遺傳因子進(jìn)行鑒定和注解, 以及分析結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu), 可以檢測(cè)出500 多個(gè)參與信號(hào)傳導(dǎo)、胞外和染色體相關(guān)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域家族, 對(duì)這些結(jié)構(gòu)域又在系統(tǒng)進(jìn)化樹分布、功能分類、三級(jí)結(jié)構(gòu)和重要的功能殘基方面做了注解。 http:/smart.embl-heidelberg.de/PDB( protein data bank , PDB) /pdb/PDB 包括了蛋白質(zhì)、核酸、蛋白質(zhì)-核酸復(fù)合體以及病毒等生物大分子結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù), 主要是蛋

20、白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù), 這些數(shù)據(jù)來(lái)源于幾乎全世界所有從事生物大分子結(jié)構(gòu)研究的研究機(jī)構(gòu), 并由結(jié)構(gòu)生物學(xué)合作研究協(xié)會(huì)（RCSB） 維護(hù)和注釋。(1) CATH 數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù) www.biochem.ucl.ac.uk/bsm/cathnew/index.html(2) SCOP 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分類數(shù)據(jù)庫(kù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分類數(shù)據(jù)庫(kù)( structural classification of protein database,SCOP) scop.mrclmb.cam.ac.uk/scop/index.html蛋白質(zhì)序列分析蛋白質(zhì)序列分析蛋白質(zhì)一級(jí)序列蛋白質(zhì)一級(jí)序列蛋白質(zhì)基本理化性質(zhì)分析蛋白質(zhì)基本理化性質(zhì)分析蛋白質(zhì)親

21、疏水性分析蛋白質(zhì)親疏水性分析跨膜區(qū)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)跨膜區(qū)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)卷曲螺旋預(yù)測(cè)卷曲螺旋預(yù)測(cè)翻譯后修飾位點(diǎn)預(yù)測(cè)翻譯后修飾位點(diǎn)預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)序列信號(hào)位點(diǎn)分析蛋白質(zhì)序列信號(hào)位點(diǎn)分析蛋白質(zhì)超二級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)超二級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域分析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域分析蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)模擬蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)模擬蛋白質(zhì)分類蛋白質(zhì)分類蛋白質(zhì)家族分析蛋白質(zhì)家族分析蛋白質(zhì)理化性質(zhì)是蛋白質(zhì)研究的基礎(chǔ)蛋白質(zhì)理化性質(zhì)是蛋白質(zhì)研究的基礎(chǔ) 蛋白質(zhì)的基本性質(zhì)：蛋白質(zhì)的基本性質(zhì)：相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)分子質(zhì)量 氨基酸組成氨基酸組成等電點(diǎn)（等電點(diǎn)（PIPI） 消光系數(shù)消光系數(shù)半衰期半

22、衰期 不穩(wěn)定系數(shù)不穩(wěn)定系數(shù)總平均親水性總平均親水性 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法：方法： 相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定、等電點(diǎn)實(shí)驗(yàn)、沉降實(shí)驗(yàn)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定、等電點(diǎn)實(shí)驗(yàn)、沉降實(shí)驗(yàn) 缺點(diǎn)：費(fèi)時(shí)、耗資缺點(diǎn)：費(fèi)時(shí)、耗資基于實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)值的計(jì)算機(jī)分析方法基于實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)值的計(jì)算機(jī)分析方法1.1.蛋白質(zhì)基本理化性質(zhì)分析蛋白質(zhì)基本理化性質(zhì)分析 基于一級(jí)序列的組分分析基于一級(jí)序列的組分分析氨基酸親疏水性等分析為高級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)提供參考氨基酸親疏水性等分析為高級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)提供參考 Expasy 開發(fā)的針對(duì)蛋白質(zhì)基本理化性質(zhì)的分析：開發(fā)的針對(duì)蛋白質(zhì)基本理化性質(zhì)的分析： Protparam 工具工具 /tool

23、s/protparam.html相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)分子質(zhì)量 氨基酸組成氨基酸組成等電點(diǎn)（等電點(diǎn)（PI） 消光系數(shù)消光系數(shù)半衰期半衰期 不穩(wěn)定系數(shù)不穩(wěn)定系數(shù)總平均親水性總平均親水性 工具工具網(wǎng)站網(wǎng)站備注備注AACompldent/tools/aacomp/利用未知蛋白質(zhì)的氨基酸組利用未知蛋白質(zhì)的氨基酸組成確認(rèn)具有相同組成的已知成確認(rèn)具有相同組成的已知蛋白蛋白Compute pI/Mw/tools/pi_tool.html計(jì)算蛋白質(zhì)序列的等電點(diǎn)和計(jì)算蛋白質(zhì)序列的等電點(diǎn)和分子量分子量ProtParam/to

24、ols/protparam.html對(duì)氨基酸序列多個(gè)物理和化對(duì)氨基酸序列多個(gè)物理和化學(xué)參數(shù)（分子量、等電點(diǎn)、學(xué)參數(shù)（分子量、等電點(diǎn)、吸光系數(shù)等）進(jìn)行計(jì)算吸光系數(shù)等）進(jìn)行計(jì)算PeptideMass/tools/peptide-mass.html計(jì)算相應(yīng)肽段的計(jì)算相應(yīng)肽段的pI和分子量和分子量SAPSh t t p : / / w w w . i s r e c . i s b -sib.ch/software/SAPS_form.html利用蛋白質(zhì)序列統(tǒng)計(jì)分析方利用蛋白質(zhì)序列統(tǒng)計(jì)分析方法給出待測(cè)蛋白的物理化學(xué)法給出待測(cè)蛋白的物理化學(xué)信息信息蛋白質(zhì)理化性質(zhì)分析工具蛋

25、白質(zhì)理化性質(zhì)分析工具AACompIdent PeptideMass Protparam 工具 /tools/protparam.html計(jì)算以下物理化學(xué)性質(zhì)：計(jì)算以下物理化學(xué)性質(zhì)： 相對(duì)分子質(zhì)量 理論 pI 值 氨基酸組成 原子組成 消光系數(shù) 半衰期 不穩(wěn)定系數(shù) 脂肪系數(shù) 總平均親水性主要選項(xiàng)主要選項(xiàng)/參數(shù)參數(shù)序列在線提交形式： 如果分析SWISS-PORT和TrEMBL數(shù)據(jù)庫(kù)中序列 直接填寫Swiss-Prot/TrEMBL AC號(hào)(accession number) 如果分析新序列： 直接在搜索框中粘貼氨基酸序列輸入輸入Swiss-Prot/TrEM

26、BL AC號(hào)號(hào)打開打開protein.txt，將蛋白質(zhì)序列將蛋白質(zhì)序列粘貼在搜索框中粘貼在搜索框中 輸入Swiss-Prot/TrEMBL AC號(hào)分不同的功能域肽段輸出結(jié)果輸出結(jié)果 功能功能域域用戶自定義區(qū)用戶自定義區(qū)段段點(diǎn)擊不同功能域或是以直接粘貼氨基酸序列的方式得到以下結(jié)果點(diǎn)擊不同功能域或是以直接粘貼氨基酸序列的方式得到以下結(jié)果氨基酸數(shù)目氨基酸數(shù)目相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)分子質(zhì)量理論理論 pI 值值氨基酸組成氨基酸組成正正/負(fù)電荷殘基數(shù)負(fù)電荷殘基數(shù)37消光系數(shù)消光系數(shù)半衰期半衰期原子組成原子組成分子式分子式總原子數(shù)總原子數(shù)不穩(wěn)定系數(shù)不穩(wěn)定系數(shù)脂肪系數(shù)脂肪系數(shù)總平均親水總平均親水性性40 unsta

27、ble(a)-Type I membrane protein(b)-Type II membrane protein(c)-Multipass transmembrane proteins(d)-Lipid chain-anchored membrane proteins(e)-GPI-anchored membrane proteins2 2、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)親疏水性親疏水性/ /跨膜區(qū)分析跨膜區(qū)分析3 3、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)親疏水性分析親疏水性分析氨基酸側(cè)鏈的疏水性用從各氨基酸減去甘氨酸疏水性之值來(lái)表示，蛋白質(zhì)的疏水性在保持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的形成和穩(wěn)定中起著重要作用。疏水作用是蛋白質(zhì)折疊的主要驅(qū)動(dòng)

28、力分析蛋白質(zhì)氨基酸親疏水性是了解蛋白質(zhì)折疊的第一步氨基酸疏水分析為蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)提供佐證可用于分析蛋白質(zhì)相互作用位點(diǎn)-抗原位點(diǎn)預(yù)測(cè)（預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率達(dá)56%）是分析蛋白質(zhì)跨膜區(qū)重要一步海參溶菌酶親水性海參溶菌酶親水性/疏水性分析疏水性分析Score 0，表示疏水性； Score 0，表示親水性 螺旋跨膜區(qū)主要是由螺旋跨膜區(qū)主要是由20-30個(gè)疏水性氨基酸（個(gè)疏水性氨基酸（Leu、Ile、Val、Met、Gly、Ala等）組成等）組成 親水殘基往往出現(xiàn)在疏水殘基之間，對(duì)功能有重要的親水殘基往往出現(xiàn)在疏水殘基之間，對(duì)功能有重要的作用作用 基于親基于親/疏水量和蛋白質(zhì)膜區(qū)每個(gè)氨基酸的統(tǒng)計(jì)學(xué)分布疏水量和

29、蛋白質(zhì)膜區(qū)每個(gè)氨基酸的統(tǒng)計(jì)學(xué)分布偏好性量偏好性量 TMpred/software/TMPRED_form.html SOSUI- http:/bp.nuap.nagoya-u.ac.jp/sosui/ 4 4、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)跨膜區(qū)分析跨膜區(qū)分析常用蛋白質(zhì)跨膜區(qū)域分析工具常用蛋白質(zhì)跨膜區(qū)域分析工具工具工具網(wǎng)站網(wǎng)站備注備注DAShttp:/www.sbc.su.se/miklos/DAS/用用Dense Alignment Surface（DAS）算法來(lái)預(yù)測(cè)無(wú)同源）算法來(lái)預(yù)測(cè)無(wú)同源家族的蛋白跨膜區(qū)家族的蛋白跨膜區(qū)HMMTOPhttp:/www.enzi

30、m.hu/hmmtop/由由Enzymology研究所開發(fā)研究所開發(fā)的蛋白質(zhì)跨膜區(qū)和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)跨膜區(qū)和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)程序預(yù)測(cè)程序SOSUIhttp:/bp.nuap.nagoya-u.ac.jp/sosui/由由Nagoya大學(xué)開發(fā)一個(gè)具大學(xué)開發(fā)一個(gè)具有圖形顯示跨膜區(qū)的程序有圖形顯示跨膜區(qū)的程序TMAPhttp:/bioinfo.limbo.ifm.liu.se/tmap/基于多序列比對(duì)來(lái)預(yù)測(cè)跨膜基于多序列比對(duì)來(lái)預(yù)測(cè)跨膜區(qū)的程序區(qū)的程序TMHMMhttp:/www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM-2.0基于基于HMM方法的蛋白質(zhì)跨方法的蛋白質(zhì)跨膜區(qū)預(yù)測(cè)工具膜區(qū)預(yù)測(cè)工具T

31、Mpred/software/TMPRED_form.html基于對(duì)基于對(duì)TMbase數(shù)據(jù)庫(kù)的統(tǒng)數(shù)據(jù)庫(kù)的統(tǒng)計(jì)分析來(lái)預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)跨膜區(qū)計(jì)分析來(lái)預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)跨膜區(qū)和跨膜方向和跨膜方向TopPredhttp:/bioweb.pasteur.fr/seqanal/interfaces/toppred.html是一個(gè)位于法國(guó)的蛋白質(zhì)拓是一個(gè)位于法國(guó)的蛋白質(zhì)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)程序撲結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)程序TMHMM ProtScale工具工具 /tools/protscale.html 氨基酸標(biāo)度氨基酸標(biāo)度 表示氨基酸在某種實(shí)驗(yàn)狀態(tài)下相對(duì)其他氨

32、基酸在某些性表示氨基酸在某種實(shí)驗(yàn)狀態(tài)下相對(duì)其他氨基酸在某些性質(zhì)的差異，如疏水性、親水性等質(zhì)的差異，如疏水性、親水性等 收集收集56多個(gè)文獻(xiàn)中提供的氨基酸標(biāo)度多個(gè)文獻(xiàn)中提供的氨基酸標(biāo)度 默認(rèn)值以默認(rèn)值以Hphob. Kyte & Doolittle做疏水性分析做疏水性分析 特異性氨基酸標(biāo)度，如特異性氨基酸標(biāo)度，如Hopp & Woods（1981）針對(duì)抗原片）針對(duì)抗原片段定位；段定位；Accessible residues（1979）針對(duì)氨基酸溶劑可及）針對(duì)氨基酸溶劑可及性定位；性定位；Chou & Fasman （1978）針對(duì)氨基酸二級(jí)結(jié)構(gòu)疏）針對(duì)氨基酸二級(jí)結(jié)構(gòu)疏水性

33、分析水性分析5 5、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)親疏水性分析親疏水性分析主要選項(xiàng)主要選項(xiàng)/ /參數(shù)參數(shù)序列在線提交形式：序列在線提交形式：如果分析如果分析SWISS-PORT和和TrEMBL數(shù)據(jù)庫(kù)中序列數(shù)據(jù)庫(kù)中序列 直接填寫直接填寫Swiss-Prot/TrEMBL AC號(hào)號(hào)(accession number) 如果分析新序列：如果分析新序列： 直接在搜索框中粘貼氨基酸序列直接在搜索框中粘貼氨基酸序列輸入輸入Swiss-Prot/TrEMBL AC號(hào)號(hào)打開打開protein.txt，將一條蛋白質(zhì)序列將一條蛋白質(zhì)序列粘貼在搜索框中粘貼在搜索框中計(jì)算窗口（計(jì)算窗口（7-11）相對(duì)權(quán)重值相對(duì)權(quán)重值 權(quán)重值變化趨勢(shì)

34、權(quán)重值變化趨勢(shì) 氨基酸標(biāo)度氨基酸標(biāo)度是否歸一化是否歸一化輸出結(jié)果輸出結(jié)果 輸入Swiss-Prot/TrEMBL AC號(hào)分不同的功能域肽段功能功能域域用戶自定義區(qū)用戶自定義區(qū)段段所用氨基所用氨基酸標(biāo)度信酸標(biāo)度信息息分析所用分析所用參數(shù)信息參數(shù)信息輸出結(jié)果輸出結(jié)果圖形結(jié)果圖形結(jié)果 文本結(jié)果文本結(jié)果 序列序列 參數(shù)參數(shù) 每個(gè)位置每個(gè)位置 的得分的得分（3 3） 跨膜區(qū)分析跨膜區(qū)分析蛋白質(zhì)含有跨膜區(qū)提示它可能作為膜受體起作用，也可蛋白質(zhì)含有跨膜區(qū)提示它可能作為膜受體起作用，也可能是定位在膜上的錨定蛋白或離子通道蛋白。能是定位在膜上的錨定蛋白或離子通道蛋白。例例，使用，使用TMHMM Server v

35、.2.0TMHMM Server v.2.0在線分析在線分析http:/www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/http:/www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/鋁激活蘋果酸的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白鋁激活蘋果酸的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TaALMT1)跨膜結(jié)構(gòu)分析跨膜結(jié)構(gòu)分析6 6、跨、跨膜區(qū)分析膜區(qū)分析 TMpred工具工具：/software/TMPRED_form.html 預(yù)測(cè)跨膜區(qū)和跨膜方向 依靠跨膜蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)Tmbase主要參數(shù)主要參數(shù)/ /選項(xiàng)選項(xiàng) 序列在線提交形式：序列在線提交形式： 直接貼入蛋白序列直接貼入蛋白序列

36、填寫填寫SwissProt/TrEMBL/EMBL/EST的的ID或或AC輸出格式輸出格式最短和最長(zhǎng)的跨膜螺旋疏水區(qū)長(zhǎng)度最短和最長(zhǎng)的跨膜螺旋疏水區(qū)長(zhǎng)度輸入序列名（可選）輸入序列名（可選）選擇序列的格式選擇序列的格式貼入貼入protein.txt蛋白蛋白質(zhì)序列質(zhì)序列輸出結(jié)果輸出結(jié)果 包含四個(gè)部分包含四個(gè)部分 可能的跨膜螺旋區(qū)可能的跨膜螺旋區(qū) 相關(guān)性列表相關(guān)性列表可能的跨膜螺旋區(qū)可能的跨膜螺旋區(qū)相關(guān)性列表相關(guān)性列表位置位置分值分值 片段中點(diǎn)位置片段中點(diǎn)位置 跨膜拓?fù)淠Ｐ图皥D示建議的跨膜拓?fù)淠Ｐ徒ㄗh的跨膜拓?fù)淠Ｐ兔恳晃恢糜?jì)算分值每一位置計(jì)算分值最優(yōu)拓最優(yōu)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)撲結(jié)構(gòu) SOSUI工具工具： - ht

37、tp:/bp.nuap.nagoya-u.ac.jp/sosui/ 以圖形方式返回結(jié)果，需要Java Applet程序輸入氨基酸單字母輸入氨基酸單字母運(yùn)行運(yùn)行平均疏水值平均疏水值預(yù)測(cè)的跨模螺旋區(qū)預(yù)測(cè)的跨模螺旋區(qū)域域兩種跨膜兩種跨膜Helix預(yù)測(cè)區(qū)域的螺旋示意預(yù)測(cè)區(qū)域的螺旋示意圖圖平均疏水值平均疏水值預(yù)測(cè)的跨模螺旋區(qū)預(yù)測(cè)的跨模螺旋區(qū)域域兩種跨膜兩種跨膜Helix59親疏水輪親疏水輪廓廓跨膜蛋白序列跨膜蛋白序列“邊界邊界”原則原則 -Landolt Marticorena et al., 1993 胞外末端Asp、Ser和Pro 胞外-內(nèi)分界區(qū)域Trp 跨膜區(qū)Leu、Ile、Val、Met、Phe

38、、Trp、Cys、Ala、Pro和Gly 胞內(nèi)-外分界區(qū)域Tyr、Trp和Phe 胞內(nèi)末端Lys和Arg 兩股或兩股以上螺旋相互纏繞而形成超螺旋結(jié)構(gòu) 存在于多種天然蛋白質(zhì)中，如轉(zhuǎn)錄因子、結(jié)構(gòu)蛋白、膜蛋白中，在生物體內(nèi)執(zhí)行著代謝調(diào)控、分子運(yùn)動(dòng)、膜通道、分子識(shí)別等重要的生物功能，637 7、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)卷曲螺旋域分析卷曲螺旋域分析 典型的有亮氨酸拉鏈，存在7殘基 重復(fù)結(jié)構(gòu)（heptad repeat)，以a，b， c，d，e，f，g位置表示，其中a和d位置為疏水性氨基酸，而其他位置 殘 基為親水性 蛋白質(zhì)中由蛋白質(zhì)中由2-72-7條條螺旋鏈相互纏繞形成類似麻花狀結(jié)構(gòu)螺旋鏈相互纏繞形成類似麻花狀結(jié)

39、構(gòu)的總稱；的總稱； 主要存在形式是主要存在形式是2-52-5條相互纏繞形成的平行或反平行同寡條相互纏繞形成的平行或反平行同寡聚體或異寡聚體；聚體或異寡聚體； 是控制蛋白質(zhì)寡聚化的元件，轉(zhuǎn)錄因子、骨架蛋白、動(dòng)是控制蛋白質(zhì)寡聚化的元件，轉(zhuǎn)錄因子、骨架蛋白、動(dòng)力蛋白、膜蛋白、酶等；力蛋白、膜蛋白、酶等； 七肽重復(fù)區(qū)。七肽重復(fù)區(qū)。蛋白質(zhì)卷曲螺旋域分析蛋白質(zhì)卷曲螺旋域分析工具工具網(wǎng)站網(wǎng)站備注備注Coils /software/COILS_form.html主流的預(yù)測(cè)螺旋卷曲工具主流的預(yù)測(cè)螺旋卷曲工具Paircoil2http:/groups.csail.mi

40、/cb/paircoil2/paircoil2.html由由MIT大學(xué)開發(fā)的基于殘大學(xué)開發(fā)的基于殘基配對(duì)概率算法的預(yù)測(cè)工基配對(duì)概率算法的預(yù)測(cè)工具具PEPCOILhttp:/bioweb.pasteur.fr/seqanal/interfaces/pepcoil.html由由EMBOSS維護(hù)的預(yù)測(cè)卷維護(hù)的預(yù)測(cè)卷曲螺旋程序，同曲螺旋程序，同Coils類似類似S O C K E T serverhttp:/www.lifesci.sussex.ac.uk/research/woolfson/html/coiledcoils/socket/server.html一個(gè)分析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中卷一個(gè)分析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中卷曲螺旋的工具，其輸入數(shù)曲螺旋的工具，其輸入數(shù)據(jù)格式為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)據(jù)格式為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)TRESPASSERhttp:/comp.chem.nottingham.ac.uk/cgi-bin/trespasser/trespasser.cgi由由Nottingham大學(xué)開發(fā)的大學(xué)開發(fā)的亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)識(shí)別工具亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)識(shí)別工具2ZIPhttp:/2zip.molgen.mpg.de/index.html預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)序列中潛在的預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)序列中潛在的亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)和卷曲螺亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)和卷曲螺旋旋 蛋白質(zhì)卷曲螺旋預(yù)測(cè)