第12章-喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析陳濤陳宏宇

1、喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析第十二章第十二章14314006 14314006 陳濤陳濤14314003 14314003 陳宏宇陳宏宇 抗瘧藥抗瘧藥(antimalarial drugs)作用于瘧原蟲生活史的作用于瘧原蟲生活史的不同環(huán)節(jié)，從而抑制或殺滅瘧原蟲。根據(jù)用藥的目的，不同環(huán)節(jié)，從而抑制或殺滅瘧原蟲。根據(jù)用藥的目的，將抗瘧藥分為三類：將抗瘧藥分為三類：v主要用于控制癥狀的抗瘧藥主要用于控制癥狀的抗瘧藥(如磷酸氯喹、硫酸奎寧、如磷酸氯喹、硫酸奎寧、磷酸咯萘啶，青蒿素，蒿甲醚，青蒿琥酯，本芴醇等磷酸咯萘啶，青蒿素，蒿甲醚，青蒿琥酯，本芴醇等)；v主要用于控制復(fù)發(fā)和傳播的藥物主要用于控制復(fù)發(fā)

2、和傳播的藥物(如磷酸伯氨喹等如磷酸伯氨喹等)；v主要用于病因性預(yù)防的抗瘧藥主要用于病因性預(yù)防的抗瘧藥(如乙胺嘧啶、磺胺類如乙胺嘧啶、磺胺類等等)。一、喹啉類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、喹啉類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)NH3CONHCHHOHCH2H2SO42H2OH硫酸奎寧硫酸奎寧Quinine Sulfate NH3CONHHCHHOHCH22HCl二鹽酸奎寧二鹽酸奎寧Quinine Dihydrochloride NNNNNNClCl4H3PO44H2O磷酸哌喹磷酸哌喹Piperaquine Phosphate NHNCH3NCH3CH3Cl2H3PO4磷酸氯喹磷酸氯喹Chloroquine

3、 Phosphate 4H3PO4NNHNOHNNOCH3Cl磷酸咯萘啶磷酸咯萘啶Malaridine Phosphate 2H3PO4NH3COHNNH2CH3磷酸伯氨喹磷酸伯氨喹Primaquine Phosphate 喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)喹啉雜環(huán)，環(huán)上雜原子，環(huán)上雜原子的反應(yīng)性能基本與的反應(yīng)性能基本與吡啶吡啶相同。相同。 喹啉類藥物的物理性質(zhì)、鑒別、檢查及含量測定喹啉類藥物的物理性質(zhì)、鑒別、檢查及含量測定 藥物名稱藥物名稱物理性質(zhì)物理性質(zhì)鑒別鑒別檢查檢查含量含量硫酸奎寧硫酸奎寧QuinineSulfate白色細(xì)微的針

4、狀結(jié)晶，輕柔，易壓縮；無臭，味極苦；遇白色細(xì)微的針狀結(jié)晶，輕柔，易壓縮；無臭，味極苦；遇光漸變色；水溶液顯中性反應(yīng)。光漸變色；水溶液顯中性反應(yīng)。在三氯甲烷在三氯甲烷-無水乙醇無水乙醇(2:1)中易溶，在水、乙醇、三氯甲烷中易溶，在水、乙醇、三氯甲烷或乙醚中微溶。或乙醚中微溶。 D(0.1mol/L HCl溶液溶液)-237o-244o。1.熒光反應(yīng)熒光反應(yīng)2.綠奎寧反應(yīng)綠奎寧反應(yīng)3.氯化鋇反應(yīng)氯化鋇反應(yīng)4.IR1.酸度酸度2.三氯甲烷三氯甲烷-無水乙醇無水乙醇不溶物不溶物. 3.其他金雞納其他金雞納堿堿(TLC). 4.干燥失重干燥失重. 5.熾灼殘渣熾灼殘渣非水滴定非水滴定二鹽酸奎寧二鹽酸奎

5、寧QuinineDihydrochloride白色粉末；無臭，味極苦；遇光漸變色；水溶液顯酸性反白色粉末；無臭，味極苦；遇光漸變色；水溶液顯酸性反應(yīng)。應(yīng)。在水中極易溶解，在乙醇中溶解，在三氯甲烷中微溶，在在水中極易溶解，在乙醇中溶解，在三氯甲烷中微溶，在乙醚中極微溶解。乙醚中極微溶解。 D(0.1mol/L HCl溶液溶液)-223o-229o。1.熒光反應(yīng)熒光反應(yīng)2.綠奎寧反應(yīng)綠奎寧反應(yīng)3. IR 4. 氯化物反應(yīng)氯化物反應(yīng)1.酸度酸度. 2.硫酸鹽硫酸鹽. 3.其其他金雞納堿他金雞納堿(TLC). 4.干燥失重干燥失重. 5.熾灼殘渣熾灼殘渣. 6.鋇鹽鋇鹽非水滴定非水滴定磷酸哌喹磷酸哌喹

6、PiperaquinePhosphate類白色至淺黃色的結(jié)晶性粉末；無臭，味微苦；遇光易變類白色至淺黃色的結(jié)晶性粉末；無臭，味微苦；遇光易變色。色。在水中微溶，在無水乙醇或三氯甲烷幾乎不溶。在水中微溶，在無水乙醇或三氯甲烷幾乎不溶。 1.硫氰酸銨反應(yīng)硫氰酸銨反應(yīng)2.UV3.IR4.磷酸鹽反應(yīng)磷酸鹽反應(yīng)1.酸度酸度2.有關(guān)物質(zhì)（有關(guān)物質(zhì)（TLC）3.水分水分非水滴定非水滴定(提取后提取后)磷酸氯喹磷酸氯喹ChloroquinePhosphate白色結(jié)晶性粉末，無臭，味苦。遇光漸變色；水溶液顯酸白色結(jié)晶性粉末，無臭，味苦。遇光漸變色；水溶液顯酸性反應(yīng)。性反應(yīng)。在水中易溶，在乙醇、三氯甲烷、乙醚中幾

7、乎不溶。在水中易溶，在乙醇、三氯甲烷、乙醚中幾乎不溶。1.UV2.IR3.磷酸鹽反應(yīng)磷酸鹽反應(yīng)1.酸度酸度. 2.溶液的澄清溶液的澄清度度. 3.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)(TLC). 4.干燥失重干燥失重. 5.重金素重金素. 6.砷鹽砷鹽非水滴定非水滴定磷酸咯萘啶磷酸咯萘啶MalaridinePhosphate黃色至橙黃色結(jié)晶性粉末；無臭，味苦；具引濕性。黃色至橙黃色結(jié)晶性粉末；無臭，味苦；具引濕性。 在水中溶解，在乙醇或乙醚中幾乎不溶。在水中溶解，在乙醇或乙醚中幾乎不溶。1.三硝基苯酚反應(yīng)三硝基苯酚反應(yīng)2.UV3.IR4.磷酸鹽反應(yīng)磷酸鹽反應(yīng)1.酸度酸度. 2.水中不溶物水中不溶物. 3. 氯化物

8、氯化物 4. 甲醛甲醛. 5.四氫吡咯四氫吡咯. 6. 干燥失重干燥失重非水滴定非水滴定(電位法電位法)磷酸伯氨喹磷酸伯氨喹PrimaquinePhosphate橙紅色結(jié)晶性粉未，無臭，味苦。橙紅色結(jié)晶性粉未，無臭，味苦。在水中溶解，在三氯甲烷或乙醚中不溶。在水中溶解，在三氯甲烷或乙醚中不溶。1.硫酸鈰銨反應(yīng)硫酸鈰銨反應(yīng)2.UV3.IR4.磷酸鹽反應(yīng)磷酸鹽反應(yīng)1.酸度酸度. 2.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)（TLC）.3.殘留溶劑殘留溶劑. 4.干燥失重干燥失重非水滴定非水滴定(電位法電位法)( (一一) )典型藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì)典型藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì)( (二二) )主要化學(xué)性質(zhì)主要化學(xué)性質(zhì) 奎寧為奎

9、寧為二元生物堿二元生物堿，其中，其中奎寧環(huán)上的氮原子奎寧環(huán)上的氮原子的堿性較強(qiáng)的堿性較強(qiáng)(pKa 8.8)，與強(qiáng)酸形成穩(wěn)定的鹽，與強(qiáng)酸形成穩(wěn)定的鹽， 奎寧和奎尼丁均與二元酸成鹽，如與硫酸成鹽；奎寧和奎尼丁均與二元酸成鹽，如與硫酸成鹽； 喹啉環(huán)上的氮原子堿性較弱喹啉環(huán)上的氮原子堿性較弱(pKa 4.2)，不能與硫酸成鹽。，不能與硫酸成鹽。 磷酸氯喹和磷酸伯氨喹為三元生物堿；磷酸咯萘啶為五磷酸氯喹和磷酸伯氨喹為三元生物堿；磷酸咯萘啶為五元生物堿；磷酸哌喹為六元生物堿。元生物堿；磷酸哌喹為六元生物堿。 1. 堿性堿性( (二二) )主要化學(xué)性質(zhì)主要化學(xué)性質(zhì) 喹啉類抗瘧藥基本都具有喹啉類抗瘧藥基本都具

10、有手性手性，硫酸奎寧為，硫酸奎寧為左旋體左旋體，其比旋度為其比旋度為-237o至至-224o； 二鹽酸奎尼也為左旋體，其比旋度為二鹽酸奎尼也為左旋體，其比旋度為-223o至至-229o。 磷酸哌喹和磷酸咯萘啶磷酸哌喹和磷酸咯萘啶不不具有手性。具有手性。 2. 旋光性旋光性( (二二) )主要化學(xué)性質(zhì)主要化學(xué)性質(zhì)3. 熒光特性熒光特性 硫酸奎寧和二鹽酸奎尼在稀硫酸溶液中均顯硫酸奎寧和二鹽酸奎尼在稀硫酸溶液中均顯藍(lán)色熒光藍(lán)色熒光。4. 紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征 由于喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹由于喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，具有啉雜環(huán)，具有共軛體系共

11、軛體系，可用紫外吸收光譜的特征鑒，可用紫外吸收光譜的特征鑒別該類藥物。別該類藥物。 二、鑒別試驗二、鑒別試驗( (一一) ) 綠奎寧反應(yīng)綠奎寧反應(yīng)( (二二) ) 光譜特征光譜特征( (三三) ) 無機(jī)酸鹽無機(jī)酸鹽(一一) 綠奎寧反應(yīng)綠奎寧反應(yīng) 奎寧為奎寧為6-位含氧喹啉衍生物，可以發(fā)生綠奎寧反應(yīng)位含氧喹啉衍生物，可以發(fā)生綠奎寧反應(yīng)(Thalleioquin reaction)。反應(yīng)基本機(jī)制是。反應(yīng)基本機(jī)制是6-位含氧喹啉位含氧喹啉，經(jīng)氯水經(jīng)氯水(或溴水或溴水)氧化氯化，再以氨水處理縮合，生成綠氧化氯化，再以氨水處理縮合，生成綠色的色的二醌基亞胺二醌基亞胺的銨鹽。的銨鹽。 NCH3ONOHCl

12、Cl2NH3NOClClNONH4NNO+2( (一一) ) 綠奎寧反應(yīng)綠奎寧反應(yīng) 硫酸奎寧和二鹽酸奎尼的綠奎寧反應(yīng)機(jī)制同上。取硫酸奎寧和二鹽酸奎尼的綠奎寧反應(yīng)機(jī)制同上。取其水溶液，加溴試液其水溶液，加溴試液0.2ml和氨試液和氨試液1ml，即顯翠綠色，即顯翠綠色，加酸成中性變成藍(lán)色，成酸性時則為紫紅色。翠綠色加酸成中性變成藍(lán)色，成酸性時則為紫紅色。翠綠色可轉(zhuǎn)溶于醇、三氯甲烷中而不溶于醚。因此可轉(zhuǎn)溶于醇、三氯甲烷中而不溶于醚。因此ChP2010采采用此反應(yīng)鑒別硫酸奎寧和二鹽酸奎尼。用此反應(yīng)鑒別硫酸奎寧和二鹽酸奎尼。 ChP2010硫酸奎寧的綠奎寧反應(yīng)鑒別：取本品約硫酸奎寧的綠奎寧反應(yīng)鑒別：取本

13、品約5mg，加水加水5ml溶解后，加溴試液溶解后，加溴試液3滴與氨試液滴與氨試液1ml，即顯翠綠，即顯翠綠色。色。( (二二) ) 光譜特征光譜特征1. 紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征 由于喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成由于喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，具有共軛體系，可用紫外吸收光譜的特的喹啉雜環(huán)，具有共軛體系，可用紫外吸收光譜的特征鑒別該類藥物。征鑒別該類藥物。 ChP2010采用本法鑒別磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯采用本法鑒別磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯氨喹。萘啶和磷酸伯氨喹。( (二二) ) 光譜特征光譜特征 2. 熒光光譜特征熒光光譜特征 利用

14、硫酸奎寧和二鹽酸奎寧在稀硫酸溶液中均顯利用硫酸奎寧和二鹽酸奎寧在稀硫酸溶液中均顯藍(lán)色熒光。藍(lán)色熒光。 ChP2010硫酸奎寧的熒光鑒別：取本品約硫酸奎寧的熒光鑒別：取本品約20mg，加，加水水20ml溶解后，分取溶液溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，加稀硫酸使成酸性，即顯藍(lán)色熒光。即顯藍(lán)色熒光。( (二二) ) 光譜特征光譜特征 3. 紅外吸收光譜特征紅外吸收光譜特征 硫酸奎寧、二鹽酸奎寧、磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸硫酸奎寧、二鹽酸奎寧、磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯氨喹在咯萘啶和磷酸伯氨喹在ChP2010中均采用紅外光譜的方法中均采用紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別。進(jìn)行鑒別。 ChP

15、2010磷酸氯喹的磷酸氯喹的IR鑒別：取本品約鑒別：取本品約0.5g，置分液，置分液漏斗中，加水漏斗中，加水25ml溶解后，加氫氧化鈉試液溶解后，加氫氧化鈉試液5ml、乙醚、乙醚50ml振搖提取，醚層用水洗滌后通過置有無水硫酸鈉的振搖提取，醚層用水洗滌后通過置有無水硫酸鈉的漏斗濾過，濾液置水浴上蒸干，殘渣用五氧化二磷為干漏斗濾過，濾液置水浴上蒸干，殘渣用五氧化二磷為干燥劑減壓干燥至析出結(jié)晶，其紅外光吸收圖譜應(yīng)與氯喹燥劑減壓干燥至析出結(jié)晶，其紅外光吸收圖譜應(yīng)與氯喹的對照圖譜一致。的對照圖譜一致。(三三) 無機(jī)酸鹽無機(jī)酸鹽1. 硫酸鹽的鑒別反應(yīng)硫酸鹽的鑒別反應(yīng)利用利用硫酸奎寧的硫酸根，顯硫酸鹽的鑒

16、別反應(yīng)進(jìn)行鑒別。硫酸奎寧的硫酸根，顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)進(jìn)行鑒別。v 取供試品溶液，滴加氯化鋇試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀取供試品溶液，滴加氯化鋇試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。在鹽酸或硝酸中均不溶解。v取供試品溶液，加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋取供試品溶液，加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。v取供試品溶液，加鹽酸，取供試品溶液，加鹽酸，不不生成白色沉淀生成白色沉淀(與硫代硫酸鹽區(qū)別與硫代硫酸鹽區(qū)別)。 ( (三三) ) 無機(jī)酸鹽無機(jī)酸鹽 2. 氯化物的鑒別反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng) 二鹽酸

17、奎寧中具有鹽酸根，即顯氯化物的鑒別反應(yīng)二鹽酸奎寧中具有鹽酸根，即顯氯化物的鑒別反應(yīng)進(jìn)行鑒別。進(jìn)行鑒別。v取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性后取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性后,滴加硝酸銀試液，即滴加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加稀生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機(jī)堿硝酸酸化后，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機(jī)堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進(jìn)行試驗。取濾液進(jìn)行試驗。v取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳，混

18、勻，加取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤，緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使用水濕潤的碘化鉀硫酸濕潤，緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使用水濕潤的碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色。淀粉試紙顯藍(lán)色。 ( (三三) ) 無機(jī)酸鹽無機(jī)酸鹽3. 磷酸鹽的鑒別反應(yīng)磷酸鹽的鑒別反應(yīng) 磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯氨喹都磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯氨喹都具有磷酸根，顯磷酸鹽反應(yīng)進(jìn)行鑒別。具有磷酸根，顯磷酸鹽反應(yīng)進(jìn)行鑒別。v取供試品的中性溶液，加硝酸銀試液，即生成淺黃色沉淀；分離，取供試品的中性溶液，加硝酸銀試液，即生成淺黃色沉淀；分離，沉淀在氨試液或稀硝酸中均易溶解。沉淀在氨試液或稀硝酸中均易

19、溶解。v取供試品溶液，加氯化銨鎂試液，即生成白色結(jié)晶性沉淀。取供試品溶液，加氯化銨鎂試液，即生成白色結(jié)晶性沉淀。v取供試品溶液，加鉬酸銨試液與硝酸后，加熱即生成黃色沉淀；取供試品溶液，加鉬酸銨試液與硝酸后，加熱即生成黃色沉淀；分離，沉淀能在氨試液中溶解。分離，沉淀能在氨試液中溶解。 三、純度檢查三、純度檢查v理化特性：理化特性： 硫酸奎寧為白色細(xì)微的針狀結(jié)晶，輕柔，易壓縮；無硫酸奎寧為白色細(xì)微的針狀結(jié)晶，輕柔，易壓縮；無臭，味極苦；遇光漸變色；水溶液顯中性反應(yīng)。在氯仿臭，味極苦；遇光漸變色；水溶液顯中性反應(yīng)。在氯仿-無水乙醇無水乙醇(2:1)的混合液中易溶，在水、乙醇、氯仿或乙醚的混合液中易溶

20、，在水、乙醇、氯仿或乙醚中微溶。中微溶。 v有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì) 根據(jù)硫酸奎寧的制備工藝，產(chǎn)品中有關(guān)物質(zhì)主要是生根據(jù)硫酸奎寧的制備工藝，產(chǎn)品中有關(guān)物質(zhì)主要是生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的中間體以及副反應(yīng)產(chǎn)物。通過檢查以下產(chǎn)過程中產(chǎn)生的中間體以及副反應(yīng)產(chǎn)物。通過檢查以下項加以控制：項加以控制：酸度酸度三氯甲烷三氯甲烷-乙醇中不溶物質(zhì)乙醇中不溶物質(zhì)其他金雞納堿等其他金雞納堿等( (一一) ) 硫酸奎寧的檢查硫酸奎寧的檢查 ( (一一) ) 硫酸奎寧的檢查硫酸奎寧的檢查1. 酸度酸度 主要是在主要是在成鹽過程成鹽過程中引入。中引入。 檢查法：取本品檢查法：取本品0.20g，加水，加水20ml溶解后，用酸度溶解后，用酸

21、度計進(jìn)行測定，計進(jìn)行測定，pH值應(yīng)為值應(yīng)為5.76.6。2. 三氯甲烷三氯甲烷-乙醇中不溶物質(zhì)乙醇中不溶物質(zhì) 本項檢查主要控制藥物在制備過程中本項檢查主要控制藥物在制備過程中引入的醇中不溶性雜引入的醇中不溶性雜質(zhì)或無機(jī)鹽質(zhì)或無機(jī)鹽類等。類等。 檢查法：檢查法： 取本品取本品2.0g，加三氯甲烷，加三氯甲烷-無水乙醇無水乙醇(2:1)混合溶液混合溶液15ml，在，在50加熱加熱10分鐘后，用稱定重量的垂熔坩堝濾過，分鐘后，用稱定重量的垂熔坩堝濾過，濾渣用上述混合溶液分濾渣用上述混合溶液分5次洗滌，每次次洗滌，每次10ml，在，在105干燥至干燥至恒重，遺留殘渣不得過恒重，遺留殘渣不得過2mg。

22、( (一一) ) 硫酸奎寧的檢查硫酸奎寧的檢查TLC檢查法：取本品，加稀乙醇制成每檢查法：取本品，加稀乙醇制成每1ml中約含中約含10mg的溶液，作為供試的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，加稀乙醇稀釋制成每品溶液；精密量取適量，加稀乙醇稀釋制成每1ml中約含中約含50 g的溶液，作的溶液，作為對照溶液。吸取上述兩種溶液各為對照溶液。吸取上述兩種溶液各5 l，分別點于同一硅膠，分別點于同一硅膠G薄層板上，以薄層板上，以三氯甲烷三氯甲烷-丙酮丙酮-二乙胺二乙胺(5:4:1.25)為展開劑，展開后，微熱使展開劑揮散，為展開劑，展開后，微熱使展開劑揮散，噴以碘鉑酸鉀試液使顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑

23、點，與對照溶液的主斑噴以碘鉑酸鉀試液使顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點，與對照溶液的主斑點比較，不得更深。點比較，不得更深。 3.3.其他金雞納堿其他金雞納堿 本項檢查主要控制硫酸奎寧中的其他生物堿，采用本項檢查主要控制硫酸奎寧中的其他生物堿，采用HPLCHPLC或或TLCTLC中中的主成分的主成分自身對照法或雜質(zhì)對照品對照法自身對照法或雜質(zhì)對照品對照法進(jìn)行檢進(jìn)行檢查。查。3.3.其他金雞納堿其他金雞納堿BP7 HPLC檢查法檢查法： 金雞納生物堿的金雞納生物堿的HPLC分析系統(tǒng)適分析系統(tǒng)適用性試驗示意圖用性試驗示意圖1-cinchonine; 2-cinchonidine; 3-dihydroc

24、inchonine; 4-dihydrocinchonidine; 5-quinidine; 6-quinine;7-diydroquinidine; 8-dihydroquinine; 9-epiquinidine; 10-epiquinine( (二二) ) 磷酸咯萘啶的純度檢查磷酸咯萘啶的純度檢查v磷酸咯萘啶磷酸咯萘啶(瘧乃停瘧乃停)對瘧原蟲紅細(xì)胞內(nèi)期裂殖體有殺滅作對瘧原蟲紅細(xì)胞內(nèi)期裂殖體有殺滅作用。與氯喹無交叉抗藥性，臨床上用于治療抗氯喹株惡性瘧用。與氯喹無交叉抗藥性，臨床上用于治療抗氯喹株惡性瘧和搶救腦型瘧等兇險型瘧疾。和搶救腦型瘧等兇險型瘧疾。v磷酸咯萘啶在磷酸咯萘啶在生產(chǎn)和貯藏過

25、程生產(chǎn)和貯藏過程中引入的有關(guān)物質(zhì)，通過溶中引入的有關(guān)物質(zhì)，通過溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)等項目的檢查進(jìn)行控制。液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)等項目的檢查進(jìn)行控制。v磷酸咯萘啶為黃色至橙黃色結(jié)晶性粉末；無臭，味苦；具磷酸咯萘啶為黃色至橙黃色結(jié)晶性粉末；無臭，味苦；具引濕性。在水中溶解，在乙醇或乙醚中幾乎不溶。引濕性。在水中溶解，在乙醇或乙醚中幾乎不溶。 vChP2010磷酸咯萘啶進(jìn)行酸度、水中不溶物、磷酸咯萘啶進(jìn)行酸度、水中不溶物、 氯化物、氯化物、 甲甲醛、四氫吡咯、醛、四氫吡咯、 干燥失重的檢查干燥失重的檢查。( (二二) ) 磷酸咯萘啶的純度檢查磷酸咯萘啶的純度檢查1. 酸度酸度 v主要是在

26、主要是在成鹽過程成鹽過程中引入。本品水溶液的中引入。本品水溶液的pH值如小于值如小于2.4，刺激性較大。，刺激性較大。v檢查法：檢查法： 取本品取本品1.0g，加水，加水25ml溶解后，用酸度計進(jìn)溶解后，用酸度計進(jìn)行測定，行測定，pH值應(yīng)大于值應(yīng)大于2.4。2. 水中不溶物水中不溶物 v本品加水溶解后，稍放置即有黃色不溶物產(chǎn)生，影響質(zhì)量。本品加水溶解后，稍放置即有黃色不溶物產(chǎn)生，影響質(zhì)量。故質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)按給藥途徑不同，規(guī)定其不同限量以控制質(zhì)量。故質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)按給藥途徑不同，規(guī)定其不同限量以控制質(zhì)量。v 檢查法：取本品檢查法：取本品2.0g，加水，加水25ml振搖使溶解，放置振搖使溶解，放置30分鐘，分

27、鐘，用置用置105恒重的恒重的4號垂熔玻璃坩堝濾過，沉淀用水號垂熔玻璃坩堝濾過，沉淀用水15ml分次分次洗滌，在洗滌，在105干燥干燥4小時，遺留殘渣不得過小時，遺留殘渣不得過4mg(供供注射用注射用)或或7mg(供口服用供口服用)。 ( (二二) ) 磷酸咯萘啶的純度檢查磷酸咯萘啶的純度檢查3.氯化物氯化物 v系生產(chǎn)工藝中帶入。檢查時為了避免溶液顏色的干擾，系生產(chǎn)工藝中帶入。檢查時為了避免溶液顏色的干擾，先加堿使咯萘啶沉淀析出，然后再對濾液進(jìn)行檢查。先加堿使咯萘啶沉淀析出，然后再對濾液進(jìn)行檢查。v檢查法檢查法 取本品取本品0.10g，加水，加水4ml使溶解，加使溶解，加20碳酸鈉碳酸鈉溶液溶

28、液5ml，搖勻，使沉淀完全，用，搖勻，使沉淀完全，用5號垂熔玻璃漏斗濾號垂熔玻璃漏斗濾過，容器用水過，容器用水15ml分次洗滌、濾過，合并濾液，加水分次洗滌、濾過，合并濾液，加水使成使成25ml，依氯化物法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，依氯化物法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液3.0ml制成的對照液比較，不得更濃制成的對照液比較，不得更濃(0.03)。 ( (二二) ) 磷酸咯萘啶的純度檢查磷酸咯萘啶的純度檢查4. 甲醛甲醛 v在合成磷酸咯萘啶的反應(yīng)中使用了甲醛進(jìn)行縮合，甲醛具有毒性，在合成磷酸咯萘啶的反應(yīng)中使用了甲醛進(jìn)行縮合，甲醛具有毒性，應(yīng)對產(chǎn)品中可能剩余的甲醛進(jìn)行檢查。應(yīng)對產(chǎn)品中可能剩余的甲醛進(jìn)行檢查。

29、v檢查法：取本品檢查法：取本品50.0mg，加水，加水2ml使溶解，加使溶解，加5%碳酸鈉溶液碳酸鈉溶液4ml，攪勻，濾過，濾液加硫酸溶液攪勻，濾過，濾液加硫酸溶液(12)3ml，冷卻后加，冷卻后加品紅亞硫酸品紅亞硫酸試試液液5ml，在，在2030保溫保溫30分鐘，如顯色，與新制的甲醛溶液分鐘，如顯色，與新制的甲醛溶液(每每1ml含甲醛含甲醛0.10mg的水溶液的水溶液)1.0ml用同一方法制成的對照液比較，用同一方法制成的對照液比較，不得更深不得更深(0.2%)。5. 四氫吡咯四氫吡咯 v在合成磷酸咯萘啶的反應(yīng)中使用了四氫吡咯進(jìn)行縮合，四氫吡在合成磷酸咯萘啶的反應(yīng)中使用了四氫吡咯進(jìn)行縮合，四

30、氫吡咯具有毒性，應(yīng)對產(chǎn)品中可能剩余的四氫吡咯進(jìn)行檢查。咯具有毒性，應(yīng)對產(chǎn)品中可能剩余的四氫吡咯進(jìn)行檢查。v檢查法：取本品檢查法：取本品10mg，加水，加水2ml溶解后，加溶解后，加5碳酸鈉溶液碳酸鈉溶液2ml，攪拌，濾過，濾液加新制的攪拌，濾過，濾液加新制的亞硝基鐵氰化鈉乙醛亞硝基鐵氰化鈉乙醛試液試液1ml，搖勻，搖勻，5分鐘內(nèi)不得顯藍(lán)紫色。分鐘內(nèi)不得顯藍(lán)紫色。 四、含量測定四、含量測定 硫酸奎寧具有生物堿的性質(zhì)，很難在水溶液中用酸直接滴定。而在硫酸奎寧具有生物堿的性質(zhì)，很難在水溶液中用酸直接滴定。而在非水酸性介質(zhì)中，堿性顯著增強(qiáng)非水酸性介質(zhì)中，堿性顯著增強(qiáng)，即可以在冰醋酸或醋酐等酸性溶液，即

31、可以在冰醋酸或醋酐等酸性溶液中，用高氯酸滴定液直接滴定，以指示劑或電位法確定終點。中，用高氯酸滴定液直接滴定，以指示劑或電位法確定終點。 由于硫酸為二元酸，在水溶液中能進(jìn)行二級解離，但在冰醋酸介質(zhì)由于硫酸為二元酸，在水溶液中能進(jìn)行二級解離，但在冰醋酸介質(zhì)中，只能解離為中，只能解離為HSO4，所以生物堿的硫酸鹽在冰醋酸中只能滴定至，所以生物堿的硫酸鹽在冰醋酸中只能滴定至硫酸氫鹽。硫酸氫鹽。 (BH+)2SO42- +HClO4 BH+ClO4- +BH+HSO4 測定時還應(yīng)注意生物堿分子結(jié)構(gòu)中氮原子堿性的強(qiáng)弱，正確判斷反測定時還應(yīng)注意生物堿分子結(jié)構(gòu)中氮原子堿性的強(qiáng)弱，正確判斷反應(yīng)的摩爾比，以準(zhǔn)確

32、計算結(jié)果。應(yīng)的摩爾比，以準(zhǔn)確計算結(jié)果。( (一一) )硫酸奎寧的含量測定硫酸奎寧的含量測定( (一一) )硫酸奎寧的含量測定硫酸奎寧的含量測定取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酐5ml與結(jié)晶紫指示液12滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于24.90mg的(C20H24N2O2)2H2SO4。 ChP2010硫酸奎寧的含量測定法：硫酸奎寧的含量測定法： 奎寧為二元堿，喹核氮可與硫酸成鹽，喹啉環(huán)氮不與硫酸成鹽，但奎寧為二元堿，喹核氮可與硫酸成鹽，喹啉環(huán)氮不與硫酸成鹽，但在冰醋酸介

33、質(zhì)中用高氯酸滴定時，卻能與高氯酸成鹽。即：在冰醋酸介質(zhì)中用高氯酸滴定時，卻能與高氯酸成鹽。即：因此，因此，1 mol硫酸奎寧消耗硫酸奎寧消耗3 mol高氯酸滴定液高氯酸滴定液。即。即1 mol奎寧可以結(jié)合奎寧可以結(jié)合4 mol質(zhì)子，其中質(zhì)子，其中1 mol質(zhì)子是硫酸提供的，其它質(zhì)子是硫酸提供的，其它3 mol質(zhì)子是由高氯酸提質(zhì)子是由高氯酸提供的。供的。USP與本法相同。與本法相同。( (一一) )硫酸奎寧的含量測定硫酸奎寧的含量測定 取本品20片，除去包衣后，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于硫酸奎寧0.3g)，置分液漏斗中。加氯化鈉0.5g與0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml，混勻，精

34、密加三氯甲烷50ml，振搖10分鐘，靜置，分取三氯甲烷液，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，加醋酐5mL與二甲基黃指示液2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯玫瑰紅色，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于19.75mg的 (C20H24N2O2)2H2SO4 2H2O。ChP2010 硫酸奎寧片的含量測定法：硫酸奎寧片的含量測定法： 測定中測定中1mol硫酸奎寧可轉(zhuǎn)化為硫酸奎寧可轉(zhuǎn)化為2mol奎寧，每奎寧，每1mol奎寧消耗奎寧消耗2mol高氯酸，高氯酸，故故1mol硫酸奎寧消耗硫酸奎寧消耗4mol高氯酸高氯酸。反應(yīng)式為：。反應(yīng)式為：(

35、 (一一) )硫酸奎寧的含量測定硫酸奎寧的含量測定 顯然其片劑分析與原料藥有所不同。另外還應(yīng)注意考察顯然其片劑分析與原料藥有所不同。另外還應(yīng)注意考察共存物的干擾，片劑中如有較多輔料，如硬脂酸鹽、苯甲酸共存物的干擾，片劑中如有較多輔料，如硬脂酸鹽、苯甲酸鹽等，也消耗高氯酸滴定液，故應(yīng)先用強(qiáng)堿溶液堿化，使之鹽等，也消耗高氯酸滴定液，故應(yīng)先用強(qiáng)堿溶液堿化，使之游離，經(jīng)三氯甲烷提取分離后，再用高氯酸滴定液滴定。游離，經(jīng)三氯甲烷提取分離后，再用高氯酸滴定液滴定。 USP34 USP34 硫酸奎寧片含量的硫酸奎寧片含量的HPLCHPLC測定法測定法 ( (二二) )磷酸氯喹制劑的含量測定磷酸氯喹制劑的含量

36、測定 取本品取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于磷約相當(dāng)于磷酸氯喹酸氯喹0.13g)，置，置200ml量瓶中，加量瓶中，加0.lmol/L鹽酸溶液適量，充鹽酸溶液適量，充分振搖使磷酸氯喹溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量分振搖使磷酸氯喹溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液取續(xù)濾液2ml，置，置100ml量瓶中，用量瓶中，用0.lmol/L鹽酸溶液稀釋至刻鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，在度，搖勻，在343nm的波長處測定吸光度；另取磷酸氯喹對照的波長處測定吸光度；另取磷酸氯喹對照品適量，精密稱定，加品適量，精密稱定，加0.lmol/L鹽酸溶液

37、溶解并定是稀釋制成鹽酸溶液溶解并定是稀釋制成每每lml中約含中約含13g的溶液，同法測定，計算，即得。的溶液，同法測定，計算，即得。 本品含磷酸氯喹本品含磷酸氯喹(C18H26ClN32H3PO4)應(yīng)為標(biāo)示量的應(yīng)為標(biāo)示量的93.0%107.0%。 ChP2010中磷酸氯喹片的中磷酸氯喹片的紫外紫外-可見分光光度可見分光光度含量測定法：含量測定法：( (二二) )磷酸氯喹制劑的含量測定磷酸氯喹制劑的含量測定 ChP2010中磷酸氯喹中磷酸氯喹注射液注射液(本品含磷酸氯喹的滅菌本品含磷酸氯喹的滅菌水溶液。含磷酸氯喹水溶液。含磷酸氯喹(C18H26ClN32H3PO4)應(yīng)為標(biāo)示量應(yīng)為標(biāo)示量的的95.

38、0%105.0%。)的含量的的含量的提取酸量測定法提取酸量測定法： 精密量取本品適量(約相當(dāng)于磷酸氯喹0.3g)，用水稀釋至30ml，加20%氫氧化鈉溶液3ml，搖勻，用乙醚提取4次，每次20ml，合并乙醚液，用10ml水洗滌，水洗滌液再用15ml乙醚提取1次，合并前后兩次的乙醚液，蒸發(fā)至近23ml時，精密加鹽酸滴定液(0.lmol/L)25ml，溫?zé)嵴羧ヒ颐巡⑹箽堅芙?，冷卻，加溴甲酚綠指示液數(shù)滴，用氫氧化鈉滴定液(0.lmol/L)滴定。每lml鹽酸滴定液(0.lmol/L)相當(dāng)于25.79mg C18H26ClN32H3PO4 。 USP 采用提取后采用提取后HPLC測定磷酸氯喹注射液的

39、含量。測定磷酸氯喹注射液的含量。 第二節(jié)第二節(jié) 青蒿素類藥物的分析青蒿素類藥物的分析OOH3COOHCH3HHOCH312345678911125a8a12a10(3R,5aS,6R,8aS,9R,12S,12aR)-八氫八氫-3,6,9-三甲基三甲基-3,12-氧橋氧橋-12H-吡喃吡喃并并4,3-j-1,2-苯并二塞平苯并二塞平-10(3H)-酮酮 v青蒿素青蒿素(artemisinin)又名黃蒿素，是我國學(xué)者從從又名黃蒿素，是我國學(xué)者從從菊科植物黃花蒿菊科植物黃花蒿(artemisia annua L.)中提取分離得中提取分離得到的一個含到的一個含過氧基團(tuán)的新型倍半萜內(nèi)酯過氧基團(tuán)的新型倍

40、半萜內(nèi)酯。青蒿素簡介青蒿素簡介v 1986年中醫(yī)研究院研制的青蒿素抗瘧藥獲得我國實施新藥審年中醫(yī)研究院研制的青蒿素抗瘧藥獲得我國實施新藥審批辦法以來的批辦法以來的第第1個新藥證書個新藥證書。但是，由于當(dāng)時中國還沒有專利。但是，由于當(dāng)時中國還沒有專利法，所以，我國法，所以，我國沒有申請發(fā)明專利沒有申請發(fā)明專利。 v 青蒿素是一種高效、速效、低毒的新型抗瘧藥。本品青蒿素是一種高效、速效、低毒的新型抗瘧藥。本品為為脂溶性脂溶性，易透過血腦屏障。在體內(nèi)，易透過血腦屏障。在體內(nèi)代謝很快代謝很快，排泄快排泄快，有效血藥濃度維持有效血藥濃度維持時間短時間短。主要用于耐氯喹的惡性瘧，包。主要用于耐氯喹的惡性瘧

41、，包括腦型瘧的搶救。括腦型瘧的搶救。v因有效血藥濃度維持時間短，殺滅瘧疾原蟲不徹底，復(fù)燃率因有效血藥濃度維持時間短，殺滅瘧疾原蟲不徹底，復(fù)燃率高達(dá)高達(dá)30%，與伯氨喹合用與伯氨喹合用，可使復(fù)燃率降至，可使復(fù)燃率降至10%。v青蒿素的多種衍生物均是治療瘧疾的有效單體，國青蒿素的多種衍生物均是治療瘧疾的有效單體，國內(nèi)外內(nèi)外公認(rèn)的首創(chuàng)新藥公認(rèn)的首創(chuàng)新藥。v 隨著對青蒿素類藥物隨著對青蒿素類藥物藥理作用研究的不斷深入藥理作用研究的不斷深入，證實其具有，證實其具有抗瘧、抗孕、抗纖維化、抗血吸蟲、抗弓形蟲、抗心律失常和抗瘧、抗孕、抗纖維化、抗血吸蟲、抗弓形蟲、抗心律失常和腫瘤細(xì)胞毒性等作用。腫瘤細(xì)胞毒性等

42、作用。 青蒿素發(fā)展史青蒿素發(fā)展史v 將青蒿素結(jié)構(gòu)中將青蒿素結(jié)構(gòu)中C-10位羰基還原成羥基得到位羰基還原成羥基得到雙氫青蒿素雙氫青蒿素，進(jìn)一步烷氧基化得到進(jìn)一步烷氧基化得到蒿甲醚蒿甲醚，而進(jìn)行酯化可得到，而進(jìn)行酯化可得到青蒿琥酯青蒿琥酯。v 1990年，為了控制瘧疾對青蒿素的耐藥性，世界衛(wèi)生組織建年，為了控制瘧疾對青蒿素的耐藥性，世界衛(wèi)生組織建議在治療中必須將青蒿素同別的抗瘧藥議在治療中必須將青蒿素同別的抗瘧藥聯(lián)合使用聯(lián)合使用。v2007年年5月，在瑞士日內(nèi)瓦舉行的第月，在瑞士日內(nèi)瓦舉行的第60屆世界衛(wèi)生大會上，世屆世界衛(wèi)生大會上，世界衛(wèi)生組織聲明，單方青蒿素會引發(fā)耐藥性，建議在全球范圍內(nèi)界衛(wèi)生

43、組織聲明，單方青蒿素會引發(fā)耐藥性，建議在全球范圍內(nèi)推廣推廣復(fù)方類抗瘧藥復(fù)方類抗瘧藥。 一、青蒿素類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、青蒿素類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)OOH3COOHCH3HHOCH3青蒿素青蒿素Artemisine OOH3COOHCH3HHCH3HHHO雙氫青蒿素雙氫青蒿素Dihydroartemisinin OOH3COOHH3CHHCH3HHOHOHOO青蒿琥酯青蒿琥酯Artesunate OOH3COOHCH3HHCH3HHOCH3H蒿甲醚蒿甲醚Artemether 將青蒿素結(jié)構(gòu)中將青蒿素結(jié)構(gòu)中C-10位羰基位羰基還原成還原成羥基羥基得到得到雙氫青蒿素雙氫青蒿素(dihydr

44、oartemisinin)，進(jìn)一步，進(jìn)一步烷烷氧基化氧基化得到得到蒿甲醚蒿甲醚(artemether)，而進(jìn)行，而進(jìn)行酯酯化化可得到可得到青蒿琥酯青蒿琥酯(artesunate)。藥物名稱藥物名稱物理性質(zhì)物理性質(zhì)鑒別鑒別檢查檢查含量含量青蒿素青蒿素Artemisine無色針狀結(jié)晶，味苦。無色針狀結(jié)晶，味苦。在丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷中易溶，在甲醇、乙醇、稀乙在丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷中易溶，在甲醇、乙醇、稀乙醇、乙醚及石油醚中溶解，在水中幾乎不溶；在冰醋酸中易醇、乙醚及石油醚中溶解，在水中幾乎不溶；在冰醋酸中易溶。熔點為溶。熔點為150153 D(無水乙醇無水乙醇) +75o+78o。1.碘化

45、鉀試液碘化鉀試液-淀粉淀粉2.羥肟酸鐵反應(yīng)羥肟酸鐵反應(yīng)3.HPLC4.IR1.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)(TLC)2.干燥失重干燥失重HPLC法法雙氫青蒿素雙氫青蒿素Dihydroartemisinin白色針狀結(jié)晶；無臭，味苦。白色針狀結(jié)晶；無臭，味苦。在三氯甲烷中易溶，在丙酮中溶解，在甲醇或乙醇中略溶，在三氯甲烷中易溶，在丙酮中溶解，在甲醇或乙醇中略溶，在水中幾乎不溶。在水中幾乎不溶。熔點為熔點為145150，熔融時同時分解。，熔融時同時分解。1.碘化鉀試液碘化鉀試液-淀粉淀粉2.香草醛硫酸反應(yīng)香草醛硫酸反應(yīng)3.旋光旋光4.IR 1.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)(TLC)2.干燥失重干燥失重3.水分水分4.熾灼殘

46、渣熾灼殘渣5.重金素重金素HPLC法法青蒿琥酯青蒿琥酯Artesunate白色結(jié)晶性粉末；無臭，幾乎無味。白色結(jié)晶性粉末；無臭，幾乎無味。在乙醇、丙酮或三氯甲烷中易溶，在水中極微溶解。在乙醇、丙酮或三氯甲烷中易溶，在水中極微溶解。熔點為熔點為131136(口服用口服用)或或132137(注射用注射用) D(二氯甲烷二氯甲烷) +4.5o+6.5o。1.香草醛硫酸反應(yīng)香草醛硫酸反應(yīng)2.羥肟酸鐵反應(yīng)羥肟酸鐵反應(yīng)3.HPLC4.IR 1.酸度酸度2.溶液的澄清度溶液的澄清度3.氯化物氯化物4.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)(HPLC)5.水分水分 6.熾灼殘渣熾灼殘渣7.重金素重金素HPLC法法蒿甲醚蒿甲醚Art

47、emether白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭；味微苦。白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭；味微苦。在丙酮或三氯甲烷中極易溶解，在乙醇或乙酸乙酯中易溶，在水在丙酮或三氯甲烷中極易溶解，在乙醇或乙酸乙酯中易溶，在水中幾乎不溶。中幾乎不溶。熔點為熔點為8690。 D(無水乙醇無水乙醇) +168o+173o。1.碘化鉀試液碘化鉀試液-淀粉淀粉2.香草醛硫酸反應(yīng)香草醛硫酸反應(yīng)3.HPLC4.IR1.氯化物氯化物2.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)(TLC)3.殘留溶劑殘留溶劑(GC)4.干燥失重干燥失重5.熾灼殘渣熾灼殘渣HPLC法法青蒿素類藥物的物理性質(zhì)、鑒別、檢查及含量測定青蒿素類藥物的物理性質(zhì)、鑒別、檢查及含量測定 ( (

48、一一) )典型藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì)典型藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì) UV吸收特性吸收特性 由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核，由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核，不具有不具有共軛體系，其紫共軛體系，其紫 外吸收光譜的主要是外吸收光譜的主要是末端吸收末端吸收。但。但C-10由于取代基的不同由于取代基的不同具具 有一定有一定吸收特征吸收特征。 ( (二二) )主要化學(xué)性質(zhì)主要化學(xué)性質(zhì)氧化性氧化性 由于青蒿素類是具有過氧橋的由于青蒿素類是具有過氧橋的倍半萜內(nèi)酯類化合物倍半萜內(nèi)酯類化合物，這類化合物具有氧化性。這類化合物具有氧化性。 旋光性旋光性 青蒿素類藥物都均有旋光性，均為青蒿素類藥物都均有旋光性，均為右旋體藥物

49、右旋體藥物。青蒿素其。青蒿素其比旋度為比旋度為 +75o+78o。蒿甲醚其比旋度為。蒿甲醚其比旋度為+168o+173o。 水解反應(yīng)水解反應(yīng) 青蒿素結(jié)構(gòu)中由于青蒿素結(jié)構(gòu)中由于有內(nèi)酯有內(nèi)酯，在堿性條件下，發(fā)生水解，但，在堿性條件下，發(fā)生水解，但其其 他藥物由于母核中沒有內(nèi)酯，沒法發(fā)生水解。他藥物由于母核中沒有內(nèi)酯，沒法發(fā)生水解。二、鑒別試驗二、鑒別試驗( (一一) )、呈色反應(yīng)、呈色反應(yīng)( (二二) )、吸收光譜特征、吸收光譜特征( (三三) )、色譜法、色譜法( (一一) ) 呈色反應(yīng)呈色反應(yīng) ChP2010青蒿素的鑒別：取本品約青蒿素的鑒別：取本品約5mg，加無水乙醇，加無水乙醇0.5ml溶

50、解后，加碘溶解后，加碘化鉀試液化鉀試液0.4ml，稀硫酸，稀硫酸2.5ml與淀粉指示液與淀粉指示液4滴，立即呈紫色。滴，立即呈紫色。 ChP2010雙氫青蒿素片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量雙氫青蒿素片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于雙氫青蒿素約相當(dāng)于雙氫青蒿素20mg)，加無水乙醇，加無水乙醇2ml使雙氫青蒿素溶解，濾過，濾液中加碘化鉀試液使雙氫青蒿素溶解，濾過，濾液中加碘化鉀試液2ml與稀硫酸與稀硫酸4ml，搖勻，加淀粉指示液數(shù)滴，溶液即顯藍(lán)紫色。，搖勻，加淀粉指示液數(shù)滴，溶液即顯藍(lán)紫色。 由于青蒿素類是具有由于青蒿素類是具有過氧橋的倍半萜內(nèi)酯類化合物過氧橋的倍半萜內(nèi)酯類化合物，這類化合物具有

51、，這類化合物具有氧化性氧化性。在酸性條件能將。在酸性條件能將I I- -氧化成氧化成I I2 2與淀粉指示液，生成與淀粉指示液，生成藍(lán)紫色藍(lán)紫色。 1. 1. 碘化鉀試液碘化鉀試液- -淀粉反應(yīng)淀粉反應(yīng)( (過氧橋的氧化反應(yīng)過氧橋的氧化反應(yīng)) ) ( (一一) ) 呈色反應(yīng)呈色反應(yīng) 含有內(nèi)酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件含有內(nèi)酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件與羥胺作用，生成與羥胺作用，生成羥肟酸羥肟酸；在；在稀酸中與高鐵離子稀酸中與高鐵離子呈色。呈色。ChP2010收收載了青蒿素和青蒿琥酯的羥肟酸鐵鑒別反應(yīng)。載了青蒿素和青蒿琥酯的羥肟酸鐵鑒別反應(yīng)。 2.2. 羥

52、肟酸鐵反應(yīng)羥肟酸鐵反應(yīng) ChP2010青蒿素的鑒別：取本品約青蒿素的鑒別：取本品約5mg，加無水乙醇，加無水乙醇0.5ml溶解后，加鹽溶解后，加鹽酸羥胺試液酸羥胺試液0.5ml與氫氧化鈉試液與氫氧化鈉試液0.25ml，置水浴中微沸，放冷后，加鹽酸，置水浴中微沸，放冷后，加鹽酸2滴和三氯化鐵試液滴和三氯化鐵試液1滴，立即顯深紫紅色。滴，立即顯深紫紅色。 ChP2010青蒿琥酯的鑒別：取本品約青蒿琥酯的鑒別：取本品約50mg，加含，加含7鹽酸羥胺的乙醇溶鹽酸羥胺的乙醇溶液液(80100)1ml，再加乙醇制氫氧化鉀試液，再加乙醇制氫氧化鉀試液3ml，置水浴中加熱至沸，放冷，置水浴中加熱至沸，放冷，加

53、稀鹽酸至呈酸性，再加三氯化鐵試液加稀鹽酸至呈酸性，再加三氯化鐵試液l滴，即顯紫紅色。滴，即顯紫紅色。 ( (一一) ) 呈色反應(yīng)呈色反應(yīng)v香香草醛草醛-硫酸溶液又稱硫酸香蘭素顯色劑，很多的物質(zhì)如有機(jī)酸硫酸溶液又稱硫酸香蘭素顯色劑，很多的物質(zhì)如有機(jī)酸、揮發(fā)油、甾醇、萜類等都可以顯色。揮發(fā)油、甾醇、萜類等都可以顯色。 3. 3.香草醛香草醛- -硫酸反應(yīng)硫酸反應(yīng) v ChP2010青蒿琥酯的鑒別：取本品約青蒿琥酯的鑒別：取本品約50mg，加三氯甲烷，加三氯甲烷1ml溶解后，取溶解后，取34滴置白瓷板上，待三氯甲烷揮發(fā)后，加滴置白瓷板上，待三氯甲烷揮發(fā)后，加2香草醛硫酸溶液香草醛硫酸溶液1滴，顯紅滴

54、，顯紅色。色。v 硫酸香草醛溶液顯色原理硫酸香草醛溶液顯色原理:使羧基脫水，增加雙鍵結(jié)構(gòu)，再經(jīng)雙鍵位使羧基脫水，增加雙鍵結(jié)構(gòu)，再經(jīng)雙鍵位移，雙分子縮合等反應(yīng)生成共軛雙鍵系統(tǒng)，又在酸作用下形成陽碳離子移，雙分子縮合等反應(yīng)生成共軛雙鍵系統(tǒng)，又在酸作用下形成陽碳離子鹽而顯色。是一種通用顯色劑。鹽而顯色。是一種通用顯色劑。 ( (二二) )、吸收光譜特征、吸收光譜特征v青蒿素類抗瘧原料藥在青蒿素類抗瘧原料藥在ChP2010中均采用中均采用紅外光譜紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別。的方法進(jìn)行鑒別。1. 1. 紅外吸收光譜特征紅外吸收光譜特征 ChP2010青蒿琥酯片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量青蒿琥酯片的鑒別：取本品

55、的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于青蒿琥酯約相當(dāng)于青蒿琥酯0.1g)，加加15ml丙酮振搖使溶解，濾過，濾液揮干，殘渣用硅膠為干燥劑減壓干燥。丙酮振搖使溶解，濾過，濾液揮干，殘渣用硅膠為干燥劑減壓干燥。殘渣的紅外光吸收圖譜應(yīng)與青蒿琥酯的對照圖譜一致。殘渣的紅外光吸收圖譜應(yīng)與青蒿琥酯的對照圖譜一致。 v但是但是制劑制劑的紅外光吸收圖譜鑒別須的紅外光吸收圖譜鑒別須經(jīng)提取分離經(jīng)提取分離，殘渣干燥后，進(jìn)行，殘渣干燥后，進(jìn)行紅外光吸收圖譜與對照的圖譜比較。紅外光吸收圖譜與對照的圖譜比較。v要求所得的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的要求所得的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜一致圖譜一致。( (二二) )、吸收光譜特征、吸收光譜特征 由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核母核，不具有共軛體系，其，不具有共軛體系，其紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但C-10C-10由于取代基由于取代基的不的不同具有一定吸收特征。同具有一定吸收特征。ChP2010ChP2010均未采用本法鑒別所收載均未采用本法鑒別所收載青蒿素類藥物。青蒿素類藥物。 2. 2. 紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征 ( (三三) )、色譜法、色譜法 利用比較供試品溶液主峰與對照品溶液主峰的利用比較供試品溶液主峰與對照品溶液主峰的保留時間保留時間(tR)