藥物血漿濃度的測定及半衰期的計算

1、藥物血漿濃度的測定及半衰期的計算姓名： 學(xué)號： 班級：一、 實驗?zāi)康?. 以磺胺嘧啶鈉為例學(xué)習(xí)測定藥物血漿濃度、藥物血漿半衰期(t1/2) 及表觀分布容積(Vd)等藥動學(xué)參數(shù)的基本方法。2. 理解常用藥動學(xué)參數(shù)的臨床意義。二、 實驗材料1. 實驗動物：家兔1只2. 器材：試管24支，移液吸管(10ml 1支，1ml 2支，2ml 7支)，移液器1支，吸頭若干,試管夾，試管架，離心機，722型分光光度計，手術(shù)剪，眼科剪，止血鉗，動脈夾，眼科鑷,縫線，藥棉，紗布，捆扎繩，注射器(10ml 1支，5ml 1支)。3. 藥品：5%磺膠略啶鈉溶液，7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亞硝酸鈉溶液，0

2、.5%麝香草酚鈉溶液(溶于20%氫氧化鈉濃度內(nèi))，草酸鉀結(jié)晶，20%烏拉坦容液，肝索注射液，生理鹽水。三、 實驗方法和步驟1. 取試管6支，依次用A1、A2、A3A6標記，各加入7.5%三氯醋酸2ml備用。2. 取試管6支，依次用B1、B2、B3B6標記,各加人草酸鉀結(jié)晶幾粒。3. 取家兔1只，稱重，以20% 烏拉坦溶液1g/kg (5 ml/kg) 耳緣靜脈注射麻醉，背位固定于手術(shù)臺上，正中切開頸部皮膚，分離一側(cè)頸總動脈，結(jié)扎其遠心端，并在近心端夾上動脈夾，以阻斷血流，再將放血導(dǎo)管向心臟方向插人頸總動脈內(nèi)，用線打活結(jié)固定。4. 松開動脈夾，放血約1ml，置于B 管，迅速搖勻抗凝，然后耳緣靜脈

3、注人5% 磺胺嘧啶鈉150 mg/kg (3 ml/kg )，記錄注完時間( 準確到分鐘)。5. 給藥后5、10、20、30、40 min,用同樣方法放血約1ml,分別置于B2、B3、B4、B5、B6管，迅速搖勻，記錄取血標本的準確時間，然后B1 B6管以1500轉(zhuǎn)/min 離心5 min，準確吸取上層血漿50l加人相應(yīng)的各A 管，各管以1500轉(zhuǎn)1分離心5 min,分別取離心后的上清液1.5 ml,加0.5% 亞硝酸鈉溶液0.5 ml,搖勾，再加0.5% 麝香草酚1ml，可見橙紅色反應(yīng).以給藥前血樣為空白對照，用722 型分光光度計于525m 波長處進行比色，測定各取血時間點的光密度，用標準

4、曲線方程計算磺胺嘧啶鈉濃度。6. 標準曲線的制作 用免血配制不同濃度的磺胺嘧啶鈉溶液，按方法5項進行重氮化及偶聯(lián)反應(yīng)，分別測定吸光度。以磺胺嘧啶鈉溶液濃度為橫坐標，其吸光度為縱坐標，進行直線回歸，求標準曲線回歸方程。四、 實驗結(jié)果給藥后不同時間點的磺胺嘧啶鈉濃度管號123456給藥時間0.0580.0980.0860.0750.0740.075吸光度值/30.712423.707117.285516.701717.2855磺胺嘧啶鈉濃度/1.48731.37491.23771.22281.2377對數(shù)磺胺嘧啶鈉濃度/515204060K和t1/2換算五、 實驗討論1. 磺胺類藥物檢測機制 磺胺

5、類藥物為對氨基苯磺酰胺類化合物，在酸性溶液中，可與亞硝酸鈉起重氮反應(yīng)，產(chǎn)生重氮鹽。在堿性溶液中，重氮鹽可與酚類化合物（麝香草酚）起偶氮反應(yīng)，形成橙紅色的偶氮化合物。采用分光光度檢測法，在525nm波長進行比色測定。根據(jù)Beer-Lambert定律，藥物濃度與光密度呈正比關(guān)系。2. 一級消除動力學(xué)規(guī)律 多數(shù)藥物在體內(nèi)按一級動力學(xué)的規(guī)律而消除，靜脈注射給藥后，不同時間采血，測定血漿濃度，以藥物濃度的對數(shù)值為縱坐標，時間為橫坐標，其藥時曲線常呈直線。圖1. 零級&一級消除動力學(xué)曲線該直線的方程為：lgCt=lgC0+(-K/2.203)t根據(jù)此曲線方程可求出斜率b值。消除速率常數(shù)K=-2.303b，進而求出血漿半衰期。藥物血漿半衰期為t1/2=0.693/K六、 實驗反思實驗過程中，家兔在實驗過程中發(fā)生死亡，在實驗過程中每次取血后從動脈導(dǎo)管中反推肝素，而肝素并不是造成家兔死亡的主因。推測是由于反復(fù)逆流推送肝素，可能使心肌前負