腦脈通口服液治療急性缺血性中風的實驗研究

1、腦脈通口服液治療急性缺血性中風的實驗研究 摘要：腦脈通口服液(由制大黃、水蛭、川芎、三七、瓜蔞、石菖蒲、枳實、川樸、葛根等組成)為山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院臨床治療急性缺血性中風的有效制劑。為探討其藥理學機制，觀察了不同劑量組腦脈通口服液對結扎大鼠雙頸總動脈造成的不完全性腦缺血實驗模型的保護作用。結果表明，腦脈通可以減輕大鼠腦毛細血管通透性，減輕腦水腫(P0.05或P0.01)；延長斷頭小鼠腦功能維持時間(P0.05或P0.01)；對二磷酸腺苷(ADP)誘發(fā)的大鼠血小板聚集及血栓性死亡呈拮抗作用(P0.05或P0.01)。本研究結果為腦脈通口服液臨床治療急性缺血性中風提供實驗依據(jù)。關鍵詞：腦脈通口

2、服液/藥理學；中風/中藥療法；大黃/治療應用；活血祛瘀藥/治療應用；腦缺血/中藥療法；腦水腫/中藥療法分類號：R255.2文獻標識碼：A文章編號：1007-3213(1999)04-0268-04An Experimental Study of Naomai Tong Oral Liquid for Acute Ischemic StrokeZHOU Yingchun（Doctorate Postgraduate of Grade 97,Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510405,China）SHAO Nianfang（Shandong Unive

3、rsity of TCM, Shandong 250011,China）LIU Zhaoping（Shandong Pharmacological Center of New Drug, Shandong 250100,China）Abstract: Naomai Tong Oral Liquid(NTOL)is an effective preparation for acute ischemic stroke in the affiliated hospital of Shandong Universty of TCM. To explore the pharmacological mec

4、hanism of NTOL, its protective effect on animal models with incomplete cerebral ischemia established by the occlusion of bilateral carotid arteries were observed. The results showed that NTOL alleviated the permeability of cerebral capillaries and cerebral edema in rats, prolonged the period of pers

5、istent cerebral function in decapitated mice and counteract the lethal blood platelet aggregation and thrombosis induced by adenosine diphosphate in rats(P0.05 or P0.01).Key words:NAOMAI TONG ORAL LIQUID/pharmocology;STROKE/TCD therapy;RHEUM OFFICINALE/ther. use;BLOOD ACT STASIS REMOV DRUGS/ther. us

6、e;CEREBRAL ISCHEMIA/TCD therapy;BRAIN EDEMA/TCD therapy腦脈通口服液是在中醫(yī)理論指導下，在前人治療中風病的基礎上，結合我們多年臨床實踐研制而成的中藥復方制劑。主要由酒制大黃、水蛭、川芎、三七、瓜蔞、石菖蒲、枳實、川樸、葛根等組成。其生藥含量為 2 kg/L。其主要功效為活血化瘀，通腑泄熱，化痰開竅。臨床主要用于治療急性缺血性中風，收到較好療效1。本實驗旨在探討其藥效學機理。1材料及藥品腦脈通口服液，規(guī)格 10 mL/支，每 mL 含生藥 2 g ，由山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院提供，批號940616。維腦路通(石家莊第一制藥廠，批號890309)

7、，二磷酸腺苷(ADP)，PAM-3 型血小板聚集儀(國產(chǎn))，721分光光度計(國產(chǎn))，RF-540 熒光分光光度計(日本島津公司)。實驗用 Wistar 大鼠和昆明種小鼠，由山東省實驗動物中心提供，鼠料由北京中國藥品檢定所實驗動物繁育廠提供。2方法與結果2.1統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)用 (s)表示，統(tǒng)計方法用成對或不成對資料 t 檢驗。2.2腦脈通口服液對實驗性大鼠腦缺血的保護作用取健康雄性大鼠 120 只，體重 190260 g，先分為 A、B兩組各 60只，再各隨機分成 6 組：假手術對照組，腦缺血對照組，腦脈通口服液高劑量(16 mL/kg)、中劑量(8 mL/kg)、低劑量(4 mL/kg)組

8、，維腦路通(100 mg/kg)組。分別灌胃給藥，每日 1 次，連續(xù) 7 d，末次給藥后 1 h 參照文獻2 方法結扎大鼠雙側頸總動脈。假手術組只行手術而不結扎動脈。A組動物于結扎前 5 min 股靜脈注射伊文思藍 50 mg/kg，結扎 3 h后斷頭取腦，并立即浸泡于甲酰胺溶液中， 45 溫育 72 h，取浸泡液用 721 型分光光度計，在 620 nm 進行比色，求腦內(nèi) 伊 文 思 藍 含 量 w(m伊/m腦)，以 表 示腦內(nèi)毛細血管通透性3。結果見表1。表1腦脈通口服液對腦缺血大鼠腦血管通透性的影響組別N/只w(m伊/m腦)/(s)(g。g-1)正常對照組103.4250.928缺血對照

9、組105.6411.636腦脈通低劑量組104.7901.225腦脈通中劑量組104.0660.812*腦脈通高劑量組103.9910.693*維腦路通組103.7140.925* *與缺血對照組比較 P0.05，*P0.01；與正常對照組比較P0.01 B 組動物于結扎 3 h 后斷頭，取腦稱重，計算腦指數(shù) w(m腦/m體)，并將腦組織置 110 烘箱中烤至恒重，計算腦含水量4。結果見表2。表2腦脈通口服液對腦缺血大鼠含水量和腦指數(shù)的影響組別N/只w(m水/m腦)/(s)%w(m腦/m體)/(s)%正常對照組10 75.120.63 0.550.09缺血對照組1081.360.550.690

10、.06腦脈通低劑量組1080.140.760.700.08腦脈通中劑量組1079.210.64*0.620.04*腦脈通高劑量組1078.900.95*0.610.04*維腦路通組1079.160.69*0.620.05* *與缺血對照組比較 P0.05，*P0.01；與正常對照組比較P0.01 由表1可見，腦缺血模型組與假手術組相比，腦內(nèi)伊文思藍含量增多，表明其通透性增加。而各給藥組腦內(nèi)伊文思藍含量雖較假手術組高，但腦脈通口服液高、中劑量組和維腦路通組均低于腦缺血模型組，差異有顯著性。由表2可見，腦缺血模型組腦含水量及腦指數(shù)與假手術對照組比較有顯著性差異，腦含水量增加。而腦脈通口服液高、中劑

11、量組及維腦路通的腦指數(shù)和腦含水量均小于模型對照組。2.3腦脈通口服液對斷頭小鼠腦功能維持時間的影響取健康小鼠 60 只，雌雄各半，隨機分成 5 組：空白對照組，腦脈通口服液高劑量(32 mL/kg)、中劑量(16 mL/kg)、低劑量(8 mL/kg)組和維腦路通(200 mg/kg)組，連續(xù)灌胃 1 周。于末次用藥后 30 min，迅速剪下小鼠頭，測小鼠喘息持續(xù)時間(t喘息持續(xù))及喘息次數(shù)(N喘息)5。結果見表3。表3腦脈通口服液對斷頭小鼠腦功能維持時間的影響組別N/只N喘息/(s)次t喘息持續(xù)/(s)s空白對照組12 15.21.6 18.83.5腦脈通低劑量組1216.02.122.54

12、.7腦脈通中劑量組1218.41.2*27.43.5*腦脈通高劑量組1219.82.5*31.46.9*維腦路通組1219.41.8*34.67.6* *與空白對照組比較 P0.05，*P0.01 由表3可見，各用藥組喘息時間和喘息次數(shù)均較空白對照組延長，腦脈通高、中劑量組與空白對照組比較，差異有顯著性。2.4腦脈通口服液對大鼠 ADP 誘發(fā)的血小板聚集的影響取健康大鼠 40 只，體重(19021.5)g,雌雄各半，隨機分為 4 組：腦脈通口服液低劑量(8 mL/kg)、高劑量(16 mL/kg)組，阿斯匹林(40 mg/kg)組，空白對照組，灌胃給藥，1 次/d，連續(xù) 7 d。末次給藥后 1

13、 h 乙醚淺麻，心臟取血，肝素抗凝，制備富含血小板血漿(platelet rich plasma, PRP)及貧血血小板血漿(platelet poor plasma,PPP)，取 200 L 置比色杯中，常規(guī)測定 ADP 誘導的血小板聚集。結果見表4。表4腦脈通口服液對大鼠ADP誘導的血小板聚集功能的影響(s)組別N/只不同時間的血小板聚集率(p聚/%)最大聚集率(pMAR/%)到達最大聚集強度時間(tTMA/s)3 min 解聚率(p3min/%)t1=1 mint2=2 mint3=3 min空白對照組1070.2912.5674.8813.7661.638.4476.2413.2697

14、.1112.4923.2012.41腦脈通低劑量組1060.409.16*48.6711.50*24.349.44*61.198.56*79.1110.05*64.256.89*腦脈通高劑量組1055.096.23*44.589.23*12.496.17*55.287.56*72.247.69*78.868.36*阿斯匹林組1031.245.51*18.314.25*7.253.15*31.405.51*50.2411.20*92.706.50* *與空白對照組比較 P0.05，*P0.01 由表 4 可見，腦脈通口服液高、中劑量組 ADP 誘導的血小板聚集1、2、3 min 聚集率(p聚)和

15、最大聚集率(pMAR)、到達最大聚集強度時間(tTMA)小于空白對照組(P0.05或P0.01)，而 3 min 解聚率(p3min)大于空白對照組(P0.01)。2.5腦脈通口服液對ADP誘導的血栓性死亡的影響取健康小鼠 60 只，雌雄各半，隨機分成 5 組：腦脈通口服液高劑量(32 mL/kg)、中劑量(16 mL/kg)、低劑量(8 mL/kg)組，阿斯匹林(80 mg/kg)組和空白對照組。每日灌胃，連續(xù) 7 d，于末次給藥后 1 h 尾靜脈注射 ADP 480 mL/kg，記錄動物死亡情況。結果見表5。表5腦脈通口服液對ADP誘導的腦血栓性死亡的影響組別N總/只N死亡/只p死亡/%p

16、抑制/%空白對照組1212100 0腦脈通低劑量121083.316.7腦脈通中劑量12758.341.7*腦脈通高劑量12541.658.4*阿斯匹林組12216.683.4* *與空白對照組比較 P0.05，*P0.01由表5可見，腦脈通口服液高、中劑量組及阿斯匹林對照組對ADP致小鼠血栓性死亡呈明顯拮抗作用，腦脈通口服液低劑量組僅見此作用趨勢。3討論目前普遍認為中風為本虛標實之病，其發(fā)病與虛、火、風、痰、氣、血有關。但對于發(fā)病的關鍵環(huán)節(jié)認識不一，因此治法各異。通過長期臨床觀察，我們認為，痰瘀互結，腦脈不通是中風發(fā)病的關鍵所在；氣血逆亂，腑氣不通是決定急性期病情轉化的重要環(huán)節(jié)。宗急則治其標

17、之原則，以通腑調(diào)氣，化痰祛瘀為治法，研制腦脈通口服液。方中酒制大黃、水蛭為君藥以通腑攻下，活血祛瘀；瓜蔞、石菖蒲、川芎為臣藥以清熱化痰，活血開竅；枳實、厚樸、葛根等為佐使，以輸轉大氣，升清降濁，調(diào)理氣機。共奏通腑調(diào)氣，活血通脈，清熱化痰之功。缺血性腦血管病所引起的腦水腫，初起為細胞毒性，其后兼有血管源性因素共同作用。腦水腫的發(fā)生在腦血管復灌后發(fā)展得更快，使已缺血的腦組織病變進一步發(fā)展，是腦梗塞的主要致死因素6。實驗表明，腦脈通可以降低腦缺血大鼠模型的腦含水量及腦指數(shù)，從而打斷腦缺血病變發(fā)展的惡性循環(huán)，對缺血病變的修復帶來良好的效果。很多學者研究認為，血小板功能亢進是動脈血栓形成的關鍵因素。由于血小板功能亢進，一旦血液動力學、血管壁條件適合，腦梗塞就會發(fā)生。同時血小板高聚性對建立側枝循環(huán)，改善局部循環(huán)及血栓蔓延都有影響，因而影響預后7。本研究結果表明，腦脈通口服液對血小板聚集性的影響對缺血性中風的防治具有重要意義。作者簡介：第一作者，女，博士研究生作者單位：周迎春（廣州中醫(yī)藥大學97級博士生，廣州510405）邵念方（山東中醫(yī)藥大學，山東250011）劉兆平（山東省新藥藥理中心，山東250100）參考文獻：1周迎春.腦脈通方治療缺血性中風的臨床與實驗研究J.山東中醫(yī)藥大學學報，1996，20(2)：942牟琪琪，傅雅各