體內(nèi)藥物分析課程必做作業(yè)(答案)參考

1、文檔供參考，可復(fù)制、編制，期待您的好評與關(guān)注！ 體內(nèi)藥物分析課程作業(yè)一、問答題第X章題目要求1什么是體內(nèi)藥物分析？與常規(guī)藥物分析相比，體內(nèi)藥物分析有哪些特點？答：體內(nèi)藥物分析旨在通過各種分析手段，了解藥物在體內(nèi)的數(shù)量與質(zhì)量變化。獲得藥物代謝動力學(xué)的各種參數(shù)和信息，從藥品生產(chǎn)、臨床醫(yī)療、實驗研究等方面對所研究藥物作出估計和評價。與常規(guī)藥物分析相比，體內(nèi)藥物分析具有干擾雜質(zhì)多、樣品量少且濃度變化大，不能再度獲得完全相同的樣品、有時要求較快提供結(jié)果、要有一定的儀器設(shè)備、工作量大等特點。必做影響血藥濃度的因素有哪些？答：包括j機體因素：生理（年齡、性別、妊娠）、病理、遺傳；k藥物因素：劑型因素、手性藥

2、物對映體相互作用；l環(huán)境因素：化學(xué)物質(zhì)、合并用藥；m人體晝夜節(jié)律、營養(yǎng)和精神狀態(tài)。必做為什么要進行體內(nèi)藥物分析？體內(nèi)藥物分析的主要任務(wù)是什么？答：為開展臨床藥學(xué)和臨床藥理學(xué)研究服務(wù)，以指導(dǎo)臨床安全、合理、有效用藥和正確評價新藥。體內(nèi)藥分的主要任務(wù)：分析方法學(xué)的研究、治療藥物監(jiān)測、藥代動力學(xué)研究、人群代謝分型研究、體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)的測定及其它方面（藥物濫用、吸毒、興奮劑檢測、法醫(yī)毒物分析等）的應(yīng)用。必做2藥物進入體內(nèi)后一般需經(jīng)歷哪些物理、化學(xué)變化？這些變化與藥理作用的關(guān)系如何？答：物理變化系指藥物與生物大分子如血漿蛋白的結(jié)合反應(yīng)?；瘜W(xué)變化系指藥物的代謝反應(yīng)，包括一相代謝（氧化、還原、水解反應(yīng)）和二

3、相代謝反應(yīng)（各種結(jié)合反應(yīng)）由于藥物的作用強度與血液中游離藥物的濃度密切相關(guān)，同時藥物經(jīng)代謝后活性發(fā)生了變化，故藥物的物理、化學(xué)變化與藥理作用密切有關(guān)。必做藥物在體內(nèi)的代謝反應(yīng)有哪些類型？必做3常用生物樣本有哪些？如何采集、儲存。答：常用生物樣本有：血樣（血漿、血清和全血）、尿樣、唾液。采集與儲存：血漿全血加抗凝劑，離心，取上清液；血清全血離心，取上清液。采血后必須盡快離心分離出血漿或血清，置20以下冷凍保存。尿樣收集服藥后一定時間內(nèi)尿樣，記錄體積，混合均勻后取一定量,測定尿中藥物濃度，計算一定時間內(nèi)尿中藥物的累積量。唾液漱口15分鐘后收集口內(nèi)自然流出或經(jīng)舌在口內(nèi)攪動后流出的混合唾液，離心后取上

4、清液。樣本采集后不能及時測定，可置4冷藏，若放置時間較長，則需-20-80冷凍保存。必做生物樣品測定前為什么要除去蛋白質(zhì)？除去蛋白質(zhì)的常用方法有哪些？答：除蛋白質(zhì)的意義：使結(jié)合型藥物釋放出來，以測定總濃度。得到較“干凈”的提取液，減少乳化。消除對測定的干擾。常用去蛋白質(zhì)方法：蛋白質(zhì)沉淀法生成不溶性鹽或鹽析和脫水作用。包括：加酸類、重金屬鹽、中性鹽和能與水混溶的有機溶劑等，如：三氯乙酸、高氯酸、Cu2+、硫酸銨、甲醇、乙腈等。組織酶消化法蛋白水解酶，如胰蛋白酶、胃蛋白酶等。必做影響液-液提取和液-固提取效率的因素分別有哪些？必做影響液-液提取的因素有:水相pH 提取溶劑 離子強度影響液-固提取的

5、主要因素有:固定相 洗脫液流速 樣品裝載量4評價分析方法的效能指標(biāo)包括哪些項目？如何求算？必做試述體內(nèi)藥物分析方法設(shè)定的一般步驟。答：首先進行文獻(xiàn)查閱，設(shè)計方案，然后通過實驗加以驗證。一般實驗步驟如下：以純品進行測定選擇最佳測定條件（線性，靈敏度、pH、檢測波長等）?？瞻讟悠窚y定按設(shè)定的方法進行前處理和測定，考察空白值的大小和干擾程度。以水代替空白樣品，添加標(biāo)準(zhǔn)品后測定，以獲得提取回收率的大致情況，從而對前處理中各步操作條件進行選擇?？瞻讟悠分刑砑訕?biāo)準(zhǔn)后測定求樣品回收率，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線等。體內(nèi)實樣測定根據(jù)實樣測定結(jié)果來判斷設(shè)定的方法是否合理、可行。以上步驟需要反復(fù)試驗以獲得最佳實驗條件。必做闡述

6、定量限與檢測限的定義、區(qū)別及表示方法。答：定量限即定量下限（LLOQ），表示藥物可定量測定的最低量，須符合一定精密度和準(zhǔn)確度要求，常以標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點來確定，或以 S/N=510確定。檢測限（LOD）表示藥物的最低可測度，不必定量，通常以信噪比（S/N）=23時被測藥物的絕對量表示；兩者的區(qū)別主要在于是否有定量要求：LOD沒有定量要求，而LLOQ則有定量要求。必做體內(nèi)藥物分析方法有哪些？各有何優(yōu)缺點？答：體內(nèi)藥物分析方法可分為三大類：光譜法包括比色法、紫外法和熒光法。方法優(yōu)點是操作簡便、快速，所需設(shè)備簡單。其缺點是不具備分離功能，選擇性較差，對前處理要求高；比色法和紫外法靈敏度較低。免疫法包

7、括放射免疫、酶免疫、熒光免疫等。方法優(yōu)點是靈敏、專屬，操作簡便、快速，對樣品預(yù)處理要求不高。其缺點是精密度較差，需要試劑盒和專屬儀器。色譜分析法包括HPLC, GC, LC/MS, GC/MS等。方法優(yōu)點是具有分離分析功能，是評價其它方法的參比方法。必做5紫外法消除干擾的方法有哪些？說明原理和應(yīng)用條件。P82必做 1.差示分光光度法（1） 利用最大吸收波長進行測定（2）利用最小吸收波長處的增色效應(yīng)進行測定（3）利用最大吸收與最小吸收之差（即振幅）進行測定2.雙波長測定法如何進行激發(fā)光譜和熒光光譜的測定？P91頁必做熒光物質(zhì)吸收紫外光后被激發(fā)出熒光，如果將激發(fā)熒光的光源用單色器使其分光后，測定在

8、每一波長的激發(fā)光照射下，物質(zhì)所發(fā)射的熒光，以熒光強度對激光光波長作圖，得到熒光物質(zhì)的激光光譜，實際上，激發(fā)光譜就是熒光物質(zhì)的吸收光譜。激發(fā)光譜中最高峰的波長，能使熒光物質(zhì)發(fā)出最強烈的熒光。如果使激發(fā)光的波長和強度保持不變，而讓物質(zhì)所發(fā)生的熒光通過單色器色散，依次將不同波長的熒光照射于接收器上，并依次測其熒光強度，然后以熒光強度對相應(yīng)的熒光波長作圖，得到該物質(zhì)的熒光發(fā)射光譜，簡稱熒光光譜。6免疫分析的基本原理、基本條件是什么？答：基本原理：即抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)。在反應(yīng)體系中，當(dāng)抗體（Ab）量一定時，抗原（Ag）與標(biāo)記抗原（Ag*）就與抗體發(fā)生競爭性結(jié)合反應(yīng)，生成的Ag*-Ab與Ag的量呈負(fù)相關(guān)，

9、這種特異的競爭性抑制的數(shù)量關(guān)系是免疫分析的定量基礎(chǔ)?；緱l件是：特異性抗體、標(biāo)記抗原、未標(biāo)記抗原（即標(biāo)準(zhǔn)品）。必做常用免疫分析有哪幾種？相互間區(qū)別在哪些方面？答：常用免疫分析有放射免疫法、酶免疫法、熒光免疫法、化學(xué)發(fā)光免疫法等，它們的主要區(qū)別在于標(biāo)記物不同，由此采用的測定方法也不同。必做在RIA中，結(jié)合物與游離標(biāo)記物的分離方法有哪些？必做7氣相色譜儀最常用檢測器是什么？有何特點？適用范圍？必做GC法定量方法與內(nèi)標(biāo)選擇原則？答：對內(nèi)標(biāo)物的要求：內(nèi)標(biāo)物必須是樣品中不含有的組分，其保留時間應(yīng)與待測物tR值相近，但R1.5，并具有足夠的純度。內(nèi)標(biāo)物選擇原則：內(nèi)標(biāo)與被測物相差一個化學(xué)元素；或內(nèi)標(biāo)與被測物

10、為同系物；或內(nèi)標(biāo)與被測物結(jié)構(gòu)相似，或內(nèi)標(biāo)與被測物理化性質(zhì)相似。必做什么是正相色譜？什么是反相色譜？必做說明RP-HPLC法的常用固定相、流動相、適用范圍，及流動相中甲醇等有機溶劑濃度變化對被測組分保留時間的影響。答：常用固定相ODS（C18）柱；流動相甲醇-水、乙腈-水、四氫呋喃-水；適用范圍非極性至中等極性的各類分子型化合物；流動相中甲醇等有機溶劑濃度增大，被測組分保留時間縮短。必做HPLC儀常用檢測器有哪些？指出各種檢測器的適用范圍和適用注意點。答：常用檢測器有：紫外、二極管陣列、熒光、蒸發(fā)光散射、電化學(xué)、質(zhì)譜等。紫外檢測器通用型檢測器，適合具有紫外吸收的各種物質(zhì)的檢測。二極管陣列檢測器具

11、有光譜、色譜和三維圖譜，可以進行定性和定量分析，以及色譜峰純度檢查。熒光檢測器專屬檢測器，適合具有熒光或潛在熒光物質(zhì)的檢測，靈敏度高。蒸發(fā)光散射檢測器適合于無紫外吸收物質(zhì)的檢測，要求流動相必須是揮發(fā)性的，不能含有非揮發(fā)性的緩沖鹽。電化學(xué)檢測器適合于具有氧化還原性質(zhì)的物質(zhì)，要求流動相必須有一定的電導(dǎo)率，一般為鹽類、有機溶劑和水的混合物。質(zhì)譜檢測器具有定性定量功能和高的靈敏度。必做8什么是手性藥物？為什么要研究手性藥物？必做常用手性色譜方法有哪些？答：分子結(jié)構(gòu)中含有不對稱碳原子（即手性中心）的藥物稱為手性藥物。因手性藥物兩對映體在體內(nèi)的生物活性有差異，包括藥效學(xué)差異（競爭拮抗等）和藥動學(xué)差異（吸收

12、、分布、代謝、排泄）。為正確評價兩對映體的作用和進行對映體藥物的質(zhì)量控制，所以要研究手性藥物。常用手性HPLC法有：手性衍生化法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。必做9毛細(xì)管電泳有哪幾種分離模式？毛細(xì)管電泳分離模式有 毛細(xì)管區(qū)帶電泳，膠束電動色譜，毛細(xì)管凝膠色譜，毛細(xì)管等電聚焦，毛細(xì)管等速電泳，移動界面毛細(xì)管電色譜 。必做10常用聯(lián)用技術(shù)有哪些？常用聯(lián)用技術(shù)有 LC-MS，GC-MS，GC-GC，HPLC-HPLC，GC-HPLC，免疫分析-HPLC 等必做二、名詞解釋第X章題目要求1TDM答：治療藥物監(jiān)測，為英文“therapeutic drug monitoring”的縮寫。必做2一相代

13、謝答：指藥物在體內(nèi)發(fā)生的氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、水解反應(yīng)。必做二相代謝答：指藥物在體內(nèi)的結(jié)合反應(yīng)，包括：葡萄糖醛酸結(jié)合、硫酸酯化、甲基化、乙?；?、氨基酸綴合、谷胱甘肽綴合等。必做生物轉(zhuǎn)化答：主要指體內(nèi)代謝反應(yīng)。必做CYP1A2答：細(xì)胞色素P450 1族A亞族第2個酶基因。必做3血清答：全血經(jīng)離心后的上清液。必做血漿答：全血加抗凝劑（肝素等），經(jīng)離心后的上清液。必做4RSD答：相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，即精密度的一種表示方法。必做檢測限答：表示藥物的最低可測度，不必定量，通常以S/N=23倍時被測藥物的絕對量表示。必做定量限答：表示藥物可定量測定的最低量，須符合一定精密度和準(zhǔn)確度要求，常以標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點來

14、確定，或以 S/N=510確定。必做提取回收率答：指藥物加入到生物樣本中經(jīng)前處理后測得的量與理論加入量的比值。必做5熒光光譜答：以發(fā)射波長為橫坐標(biāo)，熒光強度為縱坐標(biāo)所作的圖。必做激發(fā)光譜答：以激發(fā)波長為橫坐標(biāo)，熒光強度為縱坐標(biāo)所作的圖必做6酶免疫分析答：酶免疫分析是在放射免疫分析基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種免疫分析方法，以酶代替同位素來標(biāo) 記藥物，酶與底物、輔酶等反應(yīng)后引起吸收光譜變化而被檢測。必做7反相HPLC答：即流動相極性大于固定相極性的HPLC。必做ODS答：即十八烷基硅烷鍵合硅膠，為常用反相HPLC的固定相。必做三、填充題第X章題目要求1體內(nèi)藥物分析的特點 干擾雜質(zhì)多，樣品量少濃度低，不能再

15、度獲得完全相同的樣品，B要有一定的儀器設(shè)備、工作量大 等。必做影響血藥濃度的因素有 機體因素（生理因素、遺傳因素、病理因素）、藥物因素（劑型、手性藥物相互作用）、環(huán)境因素（藥酶誘導(dǎo)劑、抑制劑、大氣污染、飲食） 等。必做2藥物在體內(nèi)發(fā)生的物理變化和化學(xué)變化分別是指 和 。必做3常用生物樣品有 血樣（血漿、血清、全血），尿樣，唾液 等必做常用去蛋白的方法有 蛋白質(zhì)沉淀法（加蛋白質(zhì)沉淀劑，如：三氯乙酸，高氯酸，Zn2+，Cu2+ ，硫酸銨，氯化鈉，甲醇，乙腈，丙酮等）和組織酶消化法（加蛋白水解酶如：胃蛋白酶，胰蛋白酶，枯草菌溶素等）必做生物樣品中藥物與代謝物的提取方法有 液-液提取和液-固提取 等必

16、做影響液-液提取的因素有 水相pH 值、提取溶劑和離子強度 等。必做4分析方法認(rèn)證的主要指標(biāo) 線性范圍、 準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、靈敏度、 穩(wěn)定性 等必做體內(nèi)藥物分析方法包括 光譜法（比色、紫外、熒光），色譜法（HPLC、GC、GC-MS、LC-MS），免疫分析法（放射免疫、酶免疫、熒光免疫） 等。必做5紫外光譜法消除干擾的方法有 差示光譜法、導(dǎo)數(shù)光譜法、雙波長法 等必做6在放射免疫分析中，結(jié)合物與游離標(biāo)記物的分離方法有 沉淀法、吸附法、固相法、差速遷移法、雙抗體法 必做7氣相色譜法中常用的檢測器有 氫焰離子化檢測器、氮磷檢測器、電子捕獲檢測器、MS 等必做液相色譜中常用檢測器有 紫外檢測器（

17、可變波長、二極管陣列）、熒光檢測器、電化學(xué)檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、MS 等。必做反相HPLC法常用流動相有 甲醇-水，乙腈-水，四氫呋喃-水 必做8手性HPLC法常用測定方法有 手性試劑衍生化法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。必做9在毛細(xì)管電泳中，驅(qū)動荷電物質(zhì)前進的兩個重要作用力是 電泳流 和 電滲流 。必做四、單選題第X章題目要求1尿中異煙肼及乙酰異煙肼的比色測定是利用（ B ）專屬反應(yīng)（KCN氯胺T反應(yīng)）A異煙肼 B乙酰異煙肼 C異煙肼及乙酰異煙肼 D異煙腙 E 異煙酸必做藥理作用強度與下列哪一項最相關(guān)（ C ）A血液濃度 B 攝入量 C 血液中游離藥物的濃度 D 與蛋白結(jié)合藥物的濃

18、度 E血藥總濃度必做2引起藥物氧化代謝的主要酶是（ D ）A氧化酶 B 硫酸酯酶 C脫氫酶 D細(xì)胞色素P450 E葡醛酸轉(zhuǎn)移酶必做屬于藥物二相代謝酶的是（ E ）A氧化酶 B 酯酶 C脫氫酶 D細(xì)胞色素P450 E葡醛酸轉(zhuǎn)移酶必做3欲提取尿中某一堿性藥物，其pKa為7.8，要使99.9%的藥物能被有機溶劑提取，尿樣pH應(yīng)調(diào)節(jié)到（ D ）A. 5.8 B.9.8 C. 4.8以下 D.10.8或10.8以上 E. 7.8-9.8必做4表示生物樣品測定方法準(zhǔn)確度的是（ E ）A 檢測限 B 定量限 C精密度 D 線性范圍 E回收率必做表示生物介質(zhì)中藥物最低可測度的是（ A ）A檢測限 B定量限 C

19、線性范圍 D最低檢測濃度 E可信限必做方法的專屬性也稱選擇性，在體內(nèi)藥物分析中主要考察（ E ）A相關(guān)物質(zhì) B內(nèi)標(biāo)物 C共存雜質(zhì) D降解物 E內(nèi)源性物質(zhì)必做表示樣品中含有其他共存物質(zhì)時該法能定量測定被測物的能力的是（ D ）A方法的精密度 B方法的準(zhǔn)確性 C方法的相關(guān)性D方法的選擇性 E方法的線性范圍必做5以發(fā)射波長對熒光強度所作的圖稱為（ E ） A激發(fā)光譜 B照射光譜 C紫外發(fā)射光譜 D吸收光譜 E熒光光譜（發(fā)射光譜）必做6放射免疫法與熒光免疫法的區(qū)別在于（D ）A抗體不同 B親和力不同 C標(biāo)準(zhǔn)抗原不同 D標(biāo)記物不同 E原理不同必做7高效液相中流動相極性大于固定相的稱為（ A ）A. RP-HPLC B. HPTLC C. NP-HPLC D. LLPC E. HPCE必做一般鍵合相色譜的使用pH范圍為（ E ）A 39 B 29 C 27 D 38 E 28必做高效液相中流動相極性大于固定相的稱為（ A ）A. RP-HPLC B. HPTLC C. NP-HPLC D. LLPC E. HPCE必做五、多選題第X章題目要求1體內(nèi)藥物分析的任務(wù)包括（ ABCD ）.A分析方法的研究 B血藥濃度監(jiān)測 C藥動學(xué)研究D體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)測定 E新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究必做2藥物二相代謝物綴合物（結(jié)合物）的水解方法有（ ACD ）A酸水解 B堿水解 C