植物有絲分裂實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、植物有絲分裂實(shí)驗(yàn)報(bào)告 主研人：鄧正強(qiáng) 組員：曹敏、宋卓霖、代芝芝、吳茵茵一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程，能夠識(shí)別有絲分裂的不同時(shí)期。 2. 是比較以植物根尖、莖尖、幼芽做有絲分裂的材料的難易程度。3. 初步掌握制作植物（根尖、莖尖、幼芽）有絲分裂裝片的技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理有絲分裂是植物細(xì)胞分裂的主要方式，細(xì)胞分裂過程中，核內(nèi)染色體準(zhǔn)確地復(fù)制，并有規(guī)律地、均勻地分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去，使子細(xì)胞和母細(xì)胞的遺傳組成一樣，保證了植物細(xì)胞的遺傳性狀的一致。各種生長(zhǎng)旺盛的植物組織中，如根尖組織、莖尖組織、居間分生組織、愈傷組織等，常進(jìn)行著劇烈的細(xì)胞有絲分裂。在細(xì)胞分裂的適當(dāng)（分裂旺盛期）時(shí)候取

2、材，進(jìn)行預(yù)處理，固定、解離、染色和涂抹壓片等方法，使細(xì)胞、染色體分散，便于在顯微鏡下觀察染色體的形態(tài)特征和變化特點(diǎn)及進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)。三、 實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)器材及試劑1、 實(shí)驗(yàn)材料：蠶豆干種子、2、 實(shí)驗(yàn)器材：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、鑷子、刀片、滴管、吸水紙等 3、 實(shí)驗(yàn)試劑：卡諾固定液（無水乙醇:冰醋酸=1:1）、1molL HCl溶液、0.01g/ml龍膽紫染液或0.02g/ml醋酸洋紅染液或改良石炭酸品紅染液。四、 實(shí)驗(yàn)步驟（一）、材料準(zhǔn)備 1.蠶豆根尖：選取新鮮無病斑的蠶豆干種子，經(jīng)日曬后，放在燒杯內(nèi)，室溫下清水浸泡一晝夜。種子吸水膨脹后，放在培養(yǎng)皿上20左右保濕培養(yǎng)（雙層紗布覆蓋

3、），待根長(zhǎng)12cm時(shí)，于上午9:0010:30或下午14:0016:00進(jìn)剪下根尖備用。 2. 蠶豆莖尖：選取新鮮無病斑的蠶豆干種子，經(jīng)日曬后，放在燒杯內(nèi)，室溫下清水浸泡一晝夜。種子吸水膨脹后，放在培養(yǎng)皿上20左右保濕培養(yǎng)（雙層紗布覆蓋），待長(zhǎng)出58cm即可，于上午9:0010:30或下午14:0016:00進(jìn)剪下莖尖備用。 3. 蠶豆幼芽：在長(zhǎng)出的蠶豆莖兩片葉原基上1cm處截?cái)?，待在葉原基部發(fā)出幼芽，葉芽長(zhǎng)出到45cm時(shí)即可，于上午9:0010:30或下午14:0016:00進(jìn)剪下幼芽備用。 （二）、預(yù)處理 將截取的蠶豆根尖、莖尖、幼放入盛有蒸餾水的小燒杯，置于冰水溶液中,03下處理24小時(shí)

4、。（三）、解離根尖、莖尖等體細(xì)胞需經(jīng)處理，除去細(xì)胞間的果膠層，并使細(xì)胞壁軟化，才便于壓片。這種處理過程稱為解離，解離時(shí)間的長(zhǎng)短依植物材料和解離液的不同而不同。時(shí)間短細(xì)胞不易壓散，時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞被壓破，且影響染色效果。固定好的蠶豆根尖、莖尖芽用蒸餾水沖洗2遍，然后放入預(yù)熱的60的1mol/ml鹽酸中，60恒溫處理5分鐘左右，倒去鹽酸，用蒸餾水沖洗3遍后，將材料浸泡在蒸餾水中2小時(shí)。 注：1N HCl由36%38%濃鹽酸取83ml定容至1升配置而成 （四）、漂洗 將解離好的材料用清水漂洗10min。洗去組織中的解離液，有利于染色。（五）、染色 將漂洗好的材料取出放在載玻片上滴加改良品紅溶液，靜置染

5、色1015min，或（0.01g/ml龍膽紫、0.02g/ml醋酸洋紅溶液染色35min）。 （六）、制片 用吸水紙吸去根尖周圍多余染液，加1滴清水，吸干，再加1滴清水，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加1片載玻片，用力壓片。 （七）、觀察 將制成的裝片先在低倍鏡下找到生長(zhǎng)點(diǎn)區(qū)域，該區(qū)域的特征是：細(xì)胞略呈正方形，且緊密排成束狀，細(xì)胞核與核間距核直徑；核間距2倍核直徑的區(qū)域，分裂相細(xì)胞少。找到生長(zhǎng)點(diǎn)區(qū)域后，再換成高倍鏡進(jìn)行分裂相各期細(xì)胞的觀察。五、 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象蠶豆的根尖、腋芽、莖尖都有大量的細(xì)胞處于有絲分裂中。但是腋芽中處于有絲分裂的細(xì)胞比莖尖和根尖的細(xì)胞要多，而且可以看到有很多處于有絲分裂的末期。但是很

6、遺憾的是沒有看到有絲分裂的后期的細(xì)胞。六、 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象分析實(shí)驗(yàn)中大量的細(xì)胞處于有絲分裂的末期，而沒有觀看到有絲分裂后期的細(xì)胞，從而不能夠清楚的數(shù)清蠶豆染色體的具體數(shù)目是多少，在一定的程度上表明實(shí)驗(yàn)的失敗。實(shí)驗(yàn)失敗的原因經(jīng)過分析后我們一致認(rèn)為是在進(jìn)行解離之前沒有進(jìn)行材料的固定，從而不能殺死正在處于有絲分裂中的細(xì)胞，在細(xì)胞原有的能量的基礎(chǔ)之上為細(xì)胞的進(jìn)一步分裂提供了能量，但因?yàn)槟芰坑邢迯亩鴮?dǎo)致細(xì)胞中后期的細(xì)胞不明顯，而末期的細(xì)胞比較明顯。其次蠶豆材料是通過制作芽苗菜的形式制作的，由于實(shí)驗(yàn)的延期胚乳的有機(jī)物已經(jīng)大量的被利用之后莖和芽通過光合作用還可以生長(zhǎng)，但由于可能偶爾沒有澆水，再加上缺乏無機(jī)鹽導(dǎo)致根尖分生區(qū)不明顯或者沒有分生區(qū)，這樣就使得腋芽比根和莖更適合作為有絲分裂的材料。七、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)過實(shí)驗(yàn)表明蠶豆如果用于觀察有絲分裂的材料，那么選擇腋芽比莖尖和根尖分生區(qū)要好。八、 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)、 注意刀片