好 檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)

1、2.1實(shí)驗(yàn)二、檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì) 謝俊平 2016.10.16一、學(xué)習(xí)目標(biāo)1.學(xué)會(huì)使用試劑檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的方法。2.掌握根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要正確選擇實(shí)驗(yàn)材料的能力。3.嘗試使用斐林試劑、蘇丹或蘇丹染液、雙縮脲試劑、碘液檢測(cè)食物中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)。4.提高實(shí)驗(yàn)及動(dòng)手操作能力，體會(huì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本思想。二、觀察與思考（一）提出問(wèn)題 豆?jié){中有蛋白質(zhì)嗎？蘋果中有葡萄糖嗎？花生中有脂肪嗎？我們?cè)趺粗姥帑溨泻械矸勰?？（二）猜想與假設(shè) 提示：不同的化合物可以用不同的試劑來(lái)檢測(cè)。（三）交流討論三、實(shí)驗(yàn)解析（一）實(shí)驗(yàn)原理生物組織中某些有機(jī)化合物能與某些化學(xué)試劑產(chǎn)生特定的顏色反

2、應(yīng)。還原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被還原為Cu2O（磚紅色）；具有兩個(gè)以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2+反應(yīng)生成絡(luò)合物（紫色）。2.脂肪+蘇丹染液橘黃色 脂肪+蘇丹染液紅色3.蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑紫色（二）主要實(shí)驗(yàn)材料：1.蘋果或梨勻漿，馬鈴薯勻漿，花生種子、花生種子勻漿，豆?jié){，鮮肝提取液2. 斐林試劑（甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NAOH溶液，乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液），蘇丹或蘇丹染液，雙縮脲試劑（A液：質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液，B液：0.01g/ml的CuSO4溶液），體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液，碘液，蒸餾水。（三）方法與步驟：1.還原

3、糖的檢測(cè)和觀察注：溶液顏色的變化過(guò)程為淺藍(lán)色棕色磚紅色2.脂肪的檢測(cè)和觀察3.蛋白質(zhì)的檢測(cè)和觀察（四）注意事項(xiàng)1.使用斐林試劑時(shí)要現(xiàn)用現(xiàn)配，以免放置過(guò)久產(chǎn)生Cu(OH)2沉淀影響實(shí)驗(yàn)效果；試管要用水浴加熱，不能直接接觸酒精燈。2.使用雙縮脲試劑時(shí)要先加入NaOH創(chuàng)設(shè)堿性環(huán)境，然后再加入CuSO4。3.實(shí)驗(yàn)不宜選擇有顏色的材料，否則會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顏色變化。（五）實(shí)驗(yàn)變量分析在本實(shí)驗(yàn)中，組織樣液的新鮮程度和初始顏色、試劑的純度和配制的時(shí)間為無(wú)關(guān)變量，都會(huì)影響顏色的變化，從而影響對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析判斷。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論與分析（一）實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)測(cè)結(jié)果的比較需鑒定的有機(jī)物用于鑒定的試劑預(yù)期實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)際觀察到

4、的現(xiàn)象誤差分析還原糖蛋白質(zhì)淀 粉脂 肪（二）在本次實(shí)驗(yàn)中你遇到了那些問(wèn)題？你是怎樣解決的？五、例題分析：香蕉果實(shí)成熟過(guò)程中，果實(shí)中的貯藏物不斷代謝轉(zhuǎn)化，香蕉逐漸變甜。圖A中兩條曲線分別表示香蕉果實(shí)成熟過(guò)程中兩種物質(zhì)含量的變化趨勢(shì)。請(qǐng)回答：取成熟到第X天和第Y天的等量香蕉果肉，分別加等量的蒸餾水制成提取液。然后在a、b試管中各加5ml第X天的提取液，在c、d試管中各加5ml第Y天的提取液，如圖B。（1）在a、c試管中各加入等量碘液后，a試管呈藍(lán)色，與a管相比c管的顏色更 ，兩管中被檢測(cè)的物質(zhì)是 ，圖A中表示這種物質(zhì)含量變化趨勢(shì)的曲線是 。（2）在b、d試管中各加入等量斐林試劑，b試管呈磚紅色，與

5、b管相比d管的顏色更 ，兩管中被檢測(cè)的物質(zhì)是 ，圖A中表示這種物質(zhì)含量變化趨勢(shì)的曲線是 。（3）已知乙烯利能增加細(xì)胞內(nèi)乙烯的含量。如果在第X天噴施乙烯利，從第X天開始曲線將呈現(xiàn)出 (加快、減慢)下降的趨勢(shì)，曲線將呈現(xiàn)出 （加快、減慢）上升趨勢(shì)。六、知識(shí)反饋（一）同步練習(xí)1.實(shí)驗(yàn)原理 （1）還原糖能與 試劑在 條件下發(fā)生作用，生成 沉淀。 （2）脂肪可以被 染成 色或被 染成 色。（3）蛋白質(zhì)與 發(fā)生作用可以生成 。2. 實(shí)驗(yàn)材料的選擇(1)還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中，理想的實(shí)驗(yàn)材料是 ，因?yàn)?。(2)脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)材料最好選 。(3)蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中，最好選用 ，如 。3. 注意事項(xiàng)（1）斐

6、林試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配，甲液和乙液 后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。（2）蛋白質(zhì)的鑒定中先加 ，再加 。（二）檢測(cè)過(guò)關(guān).使用斐林試劑檢驗(yàn)還原性糖的正確順序是（）制組織樣液 加入2ml 0.1g/ml的NaOH溶液 加入0.01g/ml CuSO4溶液加入0.05g/ml CuSO4 溶液 水浴2 分鐘 出現(xiàn)磚紅色沉淀A. B.（+） C. D.（+）.用斐林試劑鑒定可溶性還原性糖時(shí)，溶液的顏色變化過(guò)程為（）A.淺藍(lán)色棕色磚紅色 B.無(wú)色淺藍(lán)色棕色 C.磚紅色淺藍(lán)色棕色 D.棕色綠色無(wú)色.有關(guān)斐林試劑和雙縮脲試劑的說(shuō)法正確的是（）A.兩者的NaOH濃度相同 B.兩者的CuSO4濃度相同

7、C.實(shí)驗(yàn)時(shí)只能采用課本中給定的濃度 D.用兩者鑒定物質(zhì)時(shí)都不需要加熱.在生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中，下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述中，正確的是（ ）A.用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液，可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定B.脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色的脂肪滴C.鑒定可溶性還原糖時(shí)，要加入斐林試劑甲液搖勻后，再加入乙液D.用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A液和B液要混和均勻后，再加入含樣品的試管，且必須現(xiàn)用現(xiàn)配.下列能與斐林試劑反應(yīng)生成磚紅色沉淀的是（）葡萄糖 果糖 蔗糖 麥芽糖 淀粉 纖維素A B C D.根據(jù)“檢測(cè)生物組織中糖類、脂肪、蛋白質(zhì)的檢測(cè)”實(shí)驗(yàn)，回答下

8、列問(wèn)題：（1）檢測(cè)成熟蘋果肉中存在還原性糖所用的試劑是，該試劑與細(xì)胞內(nèi)還原性糖發(fā)生作用，形成沉淀，因此，可用該試劑檢驗(yàn)糖尿病病人尿液中是否存在。（2）檢測(cè)花生子葉細(xì)胞中脂肪的實(shí)驗(yàn)中，能將脂肪染成橘黃色的染液是，用其染色時(shí)，要用酒精來(lái)沖洗浮色，這是因?yàn)?。?）檢測(cè)黃豆組織中存在蛋白質(zhì)時(shí)，向組織液中加入雙縮脲試劑1mlA搖勻，再向樣液中加入雙縮脲試劑B搖勻。其中雙縮脲試劑B的量只有4滴，而不能過(guò)量，為什么？。（4）本實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需，使用時(shí)再臨時(shí)混合均勻用于實(shí)驗(yàn)。雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑，造成堿性環(huán)境，再加試劑。在還原糖的檢測(cè)中，對(duì)試管中溶液加熱時(shí)，試管底部不要觸

9、及，試管口不要朝向，以免溶液沸騰時(shí)沖出試管造成燙傷。蛋白質(zhì)的檢測(cè)樣品液濃度不能，以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管壁，洗不凈。七、高考鏈接（一）高考導(dǎo)航本實(shí)驗(yàn)是本冊(cè)教材中的一個(gè)驗(yàn)證型實(shí)驗(yàn)，在高考中主要側(cè)重考查學(xué)生對(duì)斐林試劑、蘇丹或蘇丹染液、雙縮脲試劑、碘液四種試劑的使用方法以及相應(yīng)的顏色變化，并由此來(lái)分析判斷被測(cè)樣品中是否含有還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)、淀粉，例如2011年新課標(biāo)卷的選擇題考查的是脂肪和葡萄糖的鑒定方法。在高考試題的簡(jiǎn)答題中，該實(shí)驗(yàn)通常不獨(dú)立成題，而是作為檢測(cè)生物體在生理活動(dòng)中還原糖、淀粉等物質(zhì)的含量變化的手段，例如在2005年和2007年的全國(guó)II卷出現(xiàn)的用斐林試劑和碘液檢測(cè)果實(shí)成熟過(guò)程中還原糖和

10、淀粉含量的變化；全國(guó)II卷用碘液來(lái)檢測(cè)篩選高效分解淀粉的突變菌株；廣東卷考查的是鑒定蛋白質(zhì)的方法。（二）真題解析1.（廣東卷）雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質(zhì)，是由于蛋白質(zhì)有 （ ）A.肽鍵 B.氨基酸 C.羧基 D.氨基2.（山東卷）從細(xì)胞膜上提取了某種成分，用非酶法處理后，加入雙縮脲試劑出現(xiàn)紫色；若加入斐林試劑或班氏試劑并加熱，出現(xiàn)磚紅色。該成分是（ ） A.糖脂 B.磷脂 C.糖蛋白 D.脂蛋白. （新課標(biāo)卷）下表中根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模x用的試劑與預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確的是4. (廣東卷)假設(shè)你去某飼料研究所進(jìn)行課外實(shí)踐活動(dòng)，需要完成以下任務(wù)：（1）選用恰當(dāng)?shù)脑噭z測(cè)某樣品中是否含有蛋白質(zhì)。提供的試劑有

11、：碘液，蘇丹溶液，雙縮脲試劑，斐林試劑。你選用的試劑應(yīng)該是 ；蛋白質(zhì)與相應(yīng)試劑反應(yīng)后，顯示的顏色應(yīng)為 。（2）完善以下實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并回答問(wèn)題。 探究A動(dòng)物蛋白對(duì)小鼠生長(zhǎng)的影響資料：飼料中的蛋白含量一般低于20 ；普通飼料可維持小鼠正常生長(zhǎng)； A動(dòng)物蛋白有可能用于飼料生產(chǎn)。一、 研究目的： 探究A動(dòng)物蛋白對(duì)小鼠生長(zhǎng)的影響。二、 飼料：1.基礎(chǔ)飼料：基本無(wú)蛋白質(zhì)的飼料； 2.普通飼料（含12%植物蛋白）：基礎(chǔ)飼料+植物蛋白； 3.試驗(yàn)飼料：基礎(chǔ)飼料+A動(dòng)物蛋白。三、 實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)組號(hào) 小鼠數(shù)量（只） 飼料 飼養(yǎng)時(shí)間（天）1 10 基礎(chǔ)飼料 212 10 試驗(yàn)飼料1（含6 A動(dòng)物蛋白） 213 10

12、試驗(yàn)飼料2（含12 A動(dòng)物蛋白） 214 10 試驗(yàn)飼料3（含18 A動(dòng)物蛋白） 21 5 10 試驗(yàn)飼料4（含24 A動(dòng)物蛋白） 216 10 備注：小鼠的性別組成、大小、月齡、喂飼量和飼養(yǎng)環(huán)境均相同。實(shí)驗(yàn)方法和檢測(cè)指標(biāo)：略實(shí)驗(yàn)組6中，應(yīng)該為 ，原因是 ；應(yīng)該為 ，原因是 ；要直觀和定量地反映小鼠的生長(zhǎng)情況，可以測(cè)量小鼠的 和 。（三）高考預(yù)測(cè)請(qǐng)完成一個(gè)驗(yàn)證淀粉酶對(duì)淀粉具有分解作用的實(shí)驗(yàn)。（實(shí)驗(yàn)材料、用具齊全）（1）取兩支試管編號(hào)1、2，分別注入2ml可溶性淀粉溶液。（2）向1號(hào)試管內(nèi)加入2ml ，2號(hào)試管內(nèi)加入2ml蒸餾水，搖勻，并恒溫水?。?7）10min。（3）分別向兩支試管中各加入2

13、ml剛配制的 ，混勻，并 2 min，觀察溶液的顏色變化。（4）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論： （5）實(shí)驗(yàn)分析若要驗(yàn)證淀粉酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)應(yīng)加入 試劑，將出現(xiàn) 色。本實(shí)驗(yàn)還可以加入 來(lái)檢測(cè)淀粉是否被分解，若實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比藍(lán)色 ，則說(shuō)明淀粉酶對(duì)淀粉具有分解作用?！究键c(diǎn)提示】本題以驗(yàn)證“淀粉酶對(duì)淀粉具有分解作用”為切入點(diǎn)，分別考查了斐林試劑、雙縮脲試劑、碘液的作用，使學(xué)生能夠利用本節(jié)課所學(xué)的鑒定型實(shí)驗(yàn)的知識(shí)技能應(yīng)用于其它生物實(shí)驗(yàn)中，解決實(shí)際問(wèn)題，是高考中最常見的考查形式。八、課外作業(yè)（一）鞏固訓(xùn)練1.下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡 （ ）A.還原糖的檢測(cè) B.蛋白質(zhì)的檢測(cè) C.檢測(cè)脂肪 D.檢測(cè)淀粉2.生物

14、組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機(jī)物的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，以下操作錯(cuò)誤的是（ ）A.可溶性還原糖的檢測(cè)，可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀 B.只有脂肪的檢測(cè)需要使用顯微鏡C.用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)不需要加熱 D.使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用3在過(guò)氧化氫酶溶液中加入雙縮脲試劑，其結(jié)果應(yīng)該是A.產(chǎn)生氣泡 B.溶液呈藍(lán)色 C.溶液呈紫色 D.產(chǎn)生磚紅色沉淀4.檢測(cè)蘋果中是否有還原性糖，可以選用的試劑是 （ ）A.碘液 B.蘇丹III染液 C.雙縮脲試劑 D.斐林試劑5.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)的描述，正確的是 （ ）A.葡萄糖與斐林試劑在沸水浴條件下呈藍(lán)色 B.將斐林試劑加入到葡萄糖溶液中，50-65水浴加熱

15、后出現(xiàn)磚紅色沉淀C.鑒定脂肪需要在加熱條件下進(jìn)行 D.將雙縮脲試劑加入到蛋清稀釋液，溶液變成藍(lán)色6.在還原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，最佳的一組實(shí)驗(yàn)材料是 （ ）甘蔗的莖 油菜子 花生種子 梨 甜菜的塊根 豆?jié){ 雞蛋清A. B. C. D.在生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，對(duì)實(shí)驗(yàn)材料的選擇，敘述錯(cuò)誤的是（ ） A.甘蔗莖的薄壁組織、甜菜的塊根等，都含有較多的糖且近于白色，因此可以用于進(jìn)行可溶性還原糖的鑒定B.花生種子含脂肪多且子葉肥厚，是用于脂肪鑒定的理想材料C.大豆種子蛋白質(zhì)含量高，是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的理想植物組織材料D.雞蛋清含蛋白質(zhì)多，是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的動(dòng)物材料.檢測(cè)

16、脫脂奶粉是否“脫脂”，需用的化學(xué)試劑是（ ）A.斐林試劑 B.蘇丹溶液 C.雙縮脲試劑 D.碘液.下列物質(zhì)中，與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)最明顯的是 （ ）A.蘋果組織樣液 B.豆?jié){ C.浸軟的油葵種子 D.馬鈴薯組織樣液.根據(jù)生物組織中的有機(jī)物與某些化學(xué)試劑相互作用能產(chǎn)生顏色反應(yīng)的原理，可以檢測(cè)生物組織中某些有機(jī)物的存在。填寫下表中的空格。需檢測(cè)的有機(jī)物用于檢測(cè)的試劑反應(yīng)產(chǎn)生的顏色還原糖斐林試劑蛋白質(zhì)紫 色淀 粉碘 液脂 肪橘黃色（二）課外延伸討論分析我們今天的午餐中都含有什么類型有機(jī)物？請(qǐng)利用本實(shí)驗(yàn)的試劑進(jìn)行檢測(cè)鑒定并完成下表：被檢測(cè)的食物斐林試劑蘇丹或蘇丹染液雙縮脲試劑碘液2.1檢

17、測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)答案二、觀察與思考答案：豆?jié){中的蛋白質(zhì)可以用雙縮脲試劑檢測(cè)，呈現(xiàn)紫色；蘋果中的葡萄糖可以用斐林試劑來(lái)檢測(cè)，呈現(xiàn)磚紅色；脂肪可以用蘇丹或蘇丹染液來(lái)檢測(cè)，呈現(xiàn)橘紅色或紅色；燕麥中的淀粉可以用斐林試劑來(lái)檢測(cè)，呈現(xiàn)藍(lán)色。五、【解析】本題考查的是果實(shí)成熟過(guò)程中淀粉和還原糖含量的變化，分別用碘液和斐林試劑來(lái)檢測(cè)，由于在此過(guò)程中淀粉逐漸被分解為還原糖，所以隨著成熟時(shí)間的延長(zhǎng)，淀粉減少，加入碘液后出現(xiàn)的藍(lán)色變淺，而加入斐林試劑后，磚紅色加深。 【答案】（1）淺 淀粉 I （2）（2）深 還原糖 （3）加快 加快六、知識(shí)反饋（一）同步練習(xí)答案：1.（1）斐林試劑 50-65水浴

18、磚紅色 （2）蘇丹 橘黃色 蘇丹 紅色 （3）雙縮脲試劑 紫色 2.顏色淺，含還原糖較多的，如蘋果、梨等， 顏色淺，便于觀察磚紅色沉淀 (2)花生子葉 (3)含蛋白質(zhì)豐富的物質(zhì) 豆?jié){、雞蛋清3. （1）混合均勻 （2）甲液 乙液（二）檢測(cè)過(guò)關(guān) 1.D 2.A 3.A 4.B 5.D.斐林試劑 磚紅色 葡萄糖 蘇丹染液 蘇丹能溶解在酒精中 過(guò)量的雙縮脲試劑B會(huì)與試劑A發(fā)應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色 分別配制、儲(chǔ)存0.1g/mlNaOH 0.01g/mlCuSO4 燒杯底部 實(shí)驗(yàn)者 太大七、高考鏈接：（二）真題解析1. 【解析】本題考查對(duì)雙縮脲試劑能夠檢測(cè)蛋白質(zhì)的原理，在堿性溶液Na（OH)中，雙縮脲(H2NOCNHCONH2)能與Cu2+作用，形成紫色的絡(luò)合物，這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)