第二章尖孢鐮刀菌的生物學(xué)特性

1、是不是課題？如果是，請(qǐng)按順序?qū)懗觯?）項(xiàng)目來(lái)源；（2）具體名稱(chēng)；（3）編號(hào)。請(qǐng)寫(xiě)出試驗(yàn)/研究的時(shí)間和地點(diǎn)；請(qǐng)按上述意見(jiàn)在原稿上修改您的論文，以便編輯修改！植物保護(hù)科學(xué) 審稿費(fèi)已收到項(xiàng)目來(lái)源：國(guó)家863計(jì)劃項(xiàng)目資助“茄科作物青枯病和枯萎病生防菌劑的研究與應(yīng)用”(2006AA10A211)；福建省自然基金資助“黃瓜枯萎病內(nèi)生生防菌短短芽孢桿菌GFP基因標(biāo)記及其生防機(jī)理的研究”(2006J0068).第一作者簡(jiǎn)介：肖榮鳳，女，1977年出生，福建泰寧人，助理研究員，碩士，主要從事植物病理學(xué)及生物防治研究；通信地址：350003 福州市五四路247號(hào)，福建省農(nóng)科院生物技術(shù)研究所，Tel：0591-87

2、848933，E-mail: rongfengxiao。通訊作者：劉波，男，1957年出生，福建省惠安人，研究員，博士，從事病蟲(chóng)害生物防治研究，通信地址：福州市五四路247號(hào)，E-mail：laeptb。收稿日期：2007-11-26 修回日期：2007-12-07。黃瓜尖孢鐮刀菌的營(yíng)養(yǎng)特性肖榮鳳，朱育菁，藍(lán)江林，林抗美，劉 波（福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所，福州 350003）摘 要：【研究目的】研究黃瓜尖孢鐮刀菌生長(zhǎng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求及不同生長(zhǎng)階段的產(chǎn)孢差異，同時(shí)篩選一種最適產(chǎn)生小型分生孢子的培養(yǎng)基，為菌株小型分子孢子的收集及利用提供理論基礎(chǔ)；【方法】以Bilai's培養(yǎng)基和VBC培養(yǎng)

3、基為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)了6種培養(yǎng)基配方，分別為全糖型、淀粉型、低糖型、尿素型、低氮型和VBC型，運(yùn)用方差分析及聚分析研究了黃瓜尖孢鐮刀菌菌落生長(zhǎng)與產(chǎn)孢的營(yíng)養(yǎng)需求及其在不同生長(zhǎng)階段的差異；【結(jié)果】研究表明：培養(yǎng)基類(lèi)型對(duì)菌株的菌落生長(zhǎng)影響不顯著(p>0.05)，但是對(duì)分生孢子產(chǎn)量影響差異很大，不同類(lèi)型培養(yǎng)上產(chǎn)孢量在（1.25-14.60）×106cfu/mL之間。全糖型培養(yǎng)基對(duì)菌株小型分生孢子的產(chǎn)生最有利，對(duì)大型分生孢子的產(chǎn)生最不利，而VBC型培養(yǎng)基則相反；【結(jié)論】促進(jìn)尖孢鐮刀菌小型分生孢子產(chǎn)生的最佳培養(yǎng)基為全糖型培養(yǎng)基，最大產(chǎn)孢量發(fā)生在培養(yǎng)11d。關(guān)鍵詞：黃瓜；尖孢鐮刀菌；營(yíng)養(yǎng)需求；產(chǎn)孢量

4、中圖分類(lèi)號(hào)：S432.45 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：AEffects of Nutritive Components on Growth of Fusarium oxysporum f. sp. cucumeriumXiao Rongfeng, Zhu Yujing, Lan Jianglin, Lin Kangmei, Liu Bo(Biotechnology Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350003)Abstract:【OBJECT】To study effects of nutritive components

5、 on growth of Fusarium oxysporum f. sp. Cucumerium and choose a the optimum medium of microconidia growth, and supply theoretics basis for the collection and utilize of strain microconidia.【METHOD】Based on Bilai's and VBC culture medium, six recipes of cultural medium were desinged. They were re

6、presented with full nutritions of Bilai's medium, Bilai's medium without sucrose and glucose nutrition, Bilai's medium contained half of sucrose and glucose, Bilai's medium substituted carbamide for KNO3 , Bilai's medium contianed half of KNO3 and VBC medium, repectively. effects

7、 of nutritive components on growth of strains by Variance analysis and Cluster analysis.【RESULTS】The resultes showed that colony of F. oxysporum f. sp. cucumerium was not significant varied on the different culture mediums (p>0.05) by Variance analysis.However, significant influence were found in

8、 the conidia yield from 1.25×106 to 14.60×106 cfu/mL. Bilai's medium was of benefit to the yield of microconidia but marcroconidia, However, it had a reverse result about VBC medium.【CONCLUSION】In terms of microconidia yield, Bilai's medium as the optimum culture medium supported h

9、igher growth rate of F. oxysporum and reached the peak on the 11th day by compared with other cultural mediums by Cluster analysis.Key words: cucumber, Fusarium oxysporum, nutritive components, conidia yield尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）是一種世界性分布的土傳病原真菌1，寄主范圍廣泛，可引起100多種植物枯萎病 2。其無(wú)性階段可產(chǎn)生三種類(lèi)型孢子，包括小型分生孢

10、子，大型分生孢子和厚垣孢子。鐮刀菌的研究和鑒定主要依據(jù)大型分生孢子、小型分生孢子、產(chǎn)孢細(xì)胞、厚垣孢子及菌落性狀等3。而單細(xì)胞小型分生孢子用于基因標(biāo)記，在植物生物測(cè)定的定量檢測(cè)與監(jiān)測(cè)中具有重要的意義4。尖孢鐮刀菌的生長(zhǎng)特性受培養(yǎng)基類(lèi)型、溫度、光照、通氣量和pH等條件的影響。藍(lán)江林等5研究了溫度對(duì)幾種作物尖孢鐮刀菌菌株生長(zhǎng)的影響；朱育菁等6研究了通氣量對(duì)西瓜枯萎病病原菌尖孢鐮刀菌生長(zhǎng)的影響；馬國(guó)斌等7探討了培養(yǎng)條件對(duì)西瓜枯萎病菌鐮刀菌酸產(chǎn)生的影響。培養(yǎng)基是菌體生長(zhǎng)繁殖的物質(zhì)基礎(chǔ)，其成份與配比對(duì)微生物的生長(zhǎng)發(fā)育、物質(zhì)代謝有關(guān)重要的影響8。碳源與氮源是培養(yǎng)基中最基本、最重要析兩大要素，碳源主要是供給菌

11、株生命活動(dòng)所需要的能量和構(gòu)成菌體細(xì)胞成份和代謝物質(zhì)，氮源是微生物細(xì)胞質(zhì)和含氮化合物的氮素來(lái)源9。已有研究表明，Bilai's培養(yǎng)基和VBC培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成份均較淡薄，都是較好的適宜鐮刀菌產(chǎn)孢的合成培養(yǎng)基，且碳氮比對(duì)鐮刀菌孢子的長(zhǎng)度、分隔有明顯的影響3,10,11。因此，該研究選擇Bilai's培養(yǎng)基和VBC培養(yǎng)基為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)培養(yǎng)基配方，分析不同類(lèi)型培養(yǎng)基上黃瓜尖孢鐮刀菌（F. oxysporum f. sp. cucumerium）菌落生長(zhǎng)特性和孢子生長(zhǎng)特性，旨在了解黃瓜尖孢鐮刀菌生長(zhǎng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求及不同生長(zhǎng)階段的產(chǎn)孢差異，同時(shí)篩選一種最適產(chǎn)生小型分生孢子的培養(yǎng)基，為黃瓜尖孢鐮刀菌的小

12、型分子孢子的收集提供培養(yǎng)條件。1 材料與方法1.1 材料供試菌株：黃瓜尖孢鐮刀菌菌株F-H.6.5-030318-J2和F-H.6.5-030318-J4于2003年3月采集分離自福建省漳州詔安發(fā)生枯萎病病田的黃瓜無(wú)癥植株，菌株F-H.6.5-030318-B3采集分離自同時(shí)同地采集的發(fā)病植株。在培養(yǎng)基設(shè)計(jì)上，以Bilai's培養(yǎng)基和VBC為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)培養(yǎng)基配方，(A)全糖型采用Bilai's培養(yǎng)基，(B)淀粉型將Bilai's培養(yǎng)基中蔗糖和葡萄糖成份取消，(C)低糖型將Bilai's培養(yǎng)基中葡萄糖和蔗糖含量減半，(D)尿素型將Bilai's培養(yǎng)基中KNO

13、3更換為尿素，(E)低氮型將Bilai's培養(yǎng)基中KNO3含量減半， (F)VBC型采用 VBC培養(yǎng)基(表1)。表1 培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成份設(shè)計(jì)類(lèi)型營(yíng)養(yǎng)成份配方(A)全糖型KH2PO4 1g；KNO3 1g；KCL 0.5g；MgSO47H2O 0.5g；淀粉 0.2g；葡萄糖 0.2g；蔗糖 0.2g；蒸餾水 1L(B)淀粉型KH2PO4 1g; KNO3 1g；KCL 0.5g；MgSO47H2O 0.5g；淀粉 0.2g；蒸餾水 1L(C)低糖型KH2PO4 1g；KNO3 1g；KCL 0.5g；MgSO47H2O 0.5g；淀粉 0.2g；葡萄糖 0.1g；蔗糖 0.1g；蒸餾水 1

14、L(D)尿素型KH2PO4 1g；尿素 1g；KCL 0.5g；MgSO47H2O 0.5g；淀粉 0.2g；葡萄糖 0.2g；蔗糖 0.2g；蒸餾水 1L(E)低氮型KH2PO4 1g；KNO3 0.5g；KCL 0.5g；MgSO47H2O 0.5g；淀粉 0.2g；葡萄糖 0.2g；蔗糖 0.2g；蒸餾水 1L(F)VBC型KH2PO4 1g；KNO3 1g；復(fù)合維生素B 1片；維生素C 1片；蒸餾水 1L1.2 方法1.2.1 黃瓜尖孢鐮刀菌菌落生長(zhǎng)特性 菌株分別于PSA平板上培養(yǎng)7d，用直徑為6mm的打孔器切取大小均一的菌片。將菌片分別接于不同營(yíng)養(yǎng)成份的固體平板培養(yǎng)基中央，每個(gè)培養(yǎng)皿

15、放5塊菌片,每個(gè)處理重復(fù)3次。測(cè)定培養(yǎng)5d的菌落直徑大小，用方差分析方法分析菌株在不同營(yíng)養(yǎng)成份培養(yǎng)基上的菌落生長(zhǎng)特性。1.2.2 黃瓜尖孢鐮刀菌分生孢子生長(zhǎng)特性 菌株F-H.6.5-030318-J2于PSA平板上培養(yǎng)7d后，刮下菌絲于100ml無(wú)菌水中，充分振勻，用雙層紗布過(guò)濾兩遍制成孢子懸液備用；配制上述不同成份的培養(yǎng)基（A-F），用250ml的三角瓶每瓶盛50ml培養(yǎng)液，高壓滅菌，待培養(yǎng)基冷卻后，各加入1ml已備好的尖孢鐮刀菌孢子懸浮液，以不加孢子懸浮的為空白對(duì)照，25，120 r/min搖床中培養(yǎng)，光照控制為光暗交替12h:12h，培養(yǎng)至第1d、3d、5d、7d、9d、11d、13d和

16、15d時(shí)，各出取3瓶檢測(cè)，分別計(jì)數(shù)大型和小型分生孢子數(shù)量。分析比較黃瓜尖孢鐮刀菌大、小型分生孢子生長(zhǎng)特性。1.2.3 黃瓜尖孢鐮刀菌營(yíng)養(yǎng)需求的聚類(lèi)分析 用聚類(lèi)分析方法對(duì)培養(yǎng)基類(lèi)型進(jìn)行歸類(lèi)。以培養(yǎng)基類(lèi)型為樣本，以菌株培養(yǎng)天數(shù)為指標(biāo)，構(gòu)建矩陣，用歐氏距離為相關(guān)尺度，以類(lèi)平均法進(jìn)行系統(tǒng)聚類(lèi)。分析培養(yǎng)基類(lèi)型對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌菌株產(chǎn)孢量影響。1.2.4 黃瓜尖孢鐮刀菌生長(zhǎng)階段的聚類(lèi)分析 聚類(lèi)分析方法對(duì)培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)行歸類(lèi)。以培養(yǎng)基時(shí)間為樣本，以培養(yǎng)基類(lèi)型為指標(biāo)，構(gòu)建矩陣，用歐氏距離為相關(guān)尺度，以類(lèi)平均法進(jìn)行系統(tǒng)聚類(lèi)。分析培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌菌株產(chǎn)孢量影響。2 結(jié)果與分析2.1 黃瓜尖孢鐮刀菌的菌落生長(zhǎng)特性

17、方差分析結(jié)果表明，菌株在不同培養(yǎng)基之間差異不顯著(p>0.05)，形成的菌落直徑在4.204.67cm之間；而不同尖孢鐮刀菌的菌落生長(zhǎng)直徑差異顯著（P<0.05），菌株F-H.6.5-030318-J2的菌落直徑為4.18cm、F-H.6.5-030318-J4為4.43cm、F-H.6.5-030318-B3為4.65cm（表2）。表2 黃瓜尖孢鐮刀菌在不同類(lèi)型培養(yǎng)基上的菌落生長(zhǎng)特性供試培養(yǎng)基培養(yǎng)5d的菌落直徑大小cm均值F-H.6.5-030318-J2F-H.6.5-030318-J4F-H.6.5-030318-B3(A)全糖型4.204.204.704.37 a(B)淀粉

18、型4.104.304.204.20 a(C)低糖型4.004.105.004.37 a(D)尿素型4.104.604.704.47 a(E)低氮型4.405.004.604.67 a(F)VBC型4.304.404.704.47 a均值4.18 b4.43 ab4.65 a注：表中同一列相同字母表示差異不顯著，同一行不同字母表示差異顯著。2.2 黃瓜尖孢鐮刀菌分生孢子的生長(zhǎng)特性2.2.1 不同培養(yǎng)基中菌株F-H.6.5-030318-J2分生孢子產(chǎn)生比例 在培養(yǎng)基A-E上，菌株F-H.6.5-030318-J2產(chǎn)生的小型分生孢子比例平均可達(dá)95.67-98.19%，且各差異不顯著(p>0

19、.01)，說(shuō)明Bilai's培養(yǎng)基成份中碳源、氮源的改變對(duì)不同類(lèi)型分生孢子產(chǎn)生的比例影響不顯著，但(A)全糖型培養(yǎng)基上小型分生孢子比例最高，(B)淀粉型培養(yǎng)基上最低.使用(F)VBC型培養(yǎng)基產(chǎn)生的小型分生孢子的比例較A-E培養(yǎng)基低，比例86.21%，說(shuō)明(F)VBC型培養(yǎng)基更有利于大型分生孢子的形成（表3）。表3 不同培養(yǎng)基中黃瓜尖孢鐮刀菌菌株F-H.6.5-030318-J2分生孢子產(chǎn)生比例供試培養(yǎng)基小型分生孢子比例%大型分生孢子比例%(A)全糖型98.19 A1.81 A(B)淀粉型95.67 A4.33 A(C)低糖型96.88 A3.12 A(D)尿素型95.89 A4.11

20、A(E)低氮型97.03 A2.97 A(F)VBC型86.21 B13.79 B2.2.2 黃瓜尖孢鐮刀菌菌株F-H.6.5-030318-J2在不同培養(yǎng)基上小型分生孢子產(chǎn)孢量的變化 試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1。用不同類(lèi)型培養(yǎng)基培養(yǎng)尖孢鐮刀菌菌株F-H.6.5-030318-J2，其不同時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生小型分生孢子的數(shù)量差異較大?？傮w上隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，小型分生孢子數(shù)量逐漸增加，到11d產(chǎn)孢量達(dá)到高峰，隨后產(chǎn)孢量逐漸下降.從培養(yǎng)基看，(A)全糖型培養(yǎng)基最有利于小型分生孢子的產(chǎn)生，其數(shù)量均較其他培養(yǎng)基的高，在第11d達(dá)到最大值為14.60×106 cfu/ml；最差為(B)淀粉型培養(yǎng)基，在第11天達(dá)

21、到最大值僅為1.25×106 cfu/ml，較前者低近10倍，而這兩者培養(yǎng)基的差異在于培養(yǎng)基B中取消了蔗糖和葡萄糖，其余成份與培養(yǎng)基A相同，表明缺乏蔗糖和葡萄糖不利于小型分生孢子的產(chǎn)生。圖1 黃瓜尖孢鐮刀菌菌株F-H.6.5-030318-J2在不同培養(yǎng)基上小型分生孢子產(chǎn)孢量的變化請(qǐng)把圖1外框的虛線去掉用方差分析方法，分析培養(yǎng)基類(lèi)型和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌菌株F-H.6.5-030318-J2小型分生孢子產(chǎn)生的影響.結(jié)果表明，培養(yǎng)基類(lèi)型和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)菌株小型分生孢子產(chǎn)孢量影響極顯著（p<0.01）。從培養(yǎng)基類(lèi)型看(表4)，(A)全糖型培養(yǎng)基對(duì)小型分生孢子的產(chǎn)孢量最佳，隨后依次為

22、(E)低氮型、(D)尿素型、(C)低糖型、(F)VBC型，(B)淀粉型培養(yǎng)基為最差，其產(chǎn)孢量依次為：9.8200×106 cfu/ml、5.9375×106 cfu/ml、4.8625×106 cfu/ml、2.3813×106 cfu/ml、2.1563×106 cfu/ml和1.4438×106 cfu/ml。表4 培養(yǎng)基類(lèi)型對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌菌株F-H.6.5-030318-J2小型分生孢子產(chǎn)孢量顯著性檢驗(yàn)培養(yǎng)基類(lèi)型均值P<0.05P<0.01(A)全糖型9.8200aA(E)低氮型5.9375bB(D)尿素型4.86

23、25bBC(C)低糖型2.3813cCD(F)VBC型2.1563cCD(B)淀粉型1.4438cD從培養(yǎng)時(shí)間看（表5），培養(yǎng)11d和13d小型分生孢子的產(chǎn)孢量最大，平均值分別為6.1833×106 cfu/ml和6.1267×106 cfu/ml，顯著地高于培養(yǎng)7d、9d、15d的4.2083×106 cfu/ml、5.1917×106 cfu/ml和5.3750×106 cfu/ml，而培養(yǎng)時(shí)間為1d、3d、5d時(shí)最低。在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)狀態(tài)下的小型分生孢子產(chǎn)孢量以11d為最佳。表5 培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌菌株F-H.6.5-030318-J

24、2小型分生孢子產(chǎn)孢量顯著性檢驗(yàn)培養(yǎng)時(shí)間（d）均值P<0.05P<0.01116.1833aA136.1267aA155.3750abAB95.1917abAB74.2083abcAB53.1750bcAB32.9833bcAB12.2250cB2.3 黃瓜尖孢鐮刀菌營(yíng)養(yǎng)需求的聚類(lèi)分析用聚類(lèi)分析方法，對(duì)培養(yǎng)基類(lèi)型進(jìn)行歸類(lèi)。以培養(yǎng)基類(lèi)型為樣本，以菌株培養(yǎng)天數(shù)為指標(biāo)，構(gòu)建矩陣，用歐氏距離為相關(guān)尺度，以類(lèi)平均法進(jìn)行系統(tǒng)聚類(lèi).聚類(lèi)過(guò)程見(jiàn)表6；培養(yǎng)基類(lèi)型對(duì)產(chǎn)孢量影響聚類(lèi)分析見(jiàn)圖2。當(dāng)=15.90時(shí)，可將培養(yǎng)基類(lèi)型分為3類(lèi)，第1類(lèi)包括了(A)全糖型培養(yǎng)基，其特點(diǎn)是對(duì)菌株小型分生孢子產(chǎn)孢量最有利；

25、第2類(lèi)包括了(B)淀粉型和(C)低糖型培養(yǎng)基，其特點(diǎn)是較有利于菌株小型分生孢子產(chǎn)孢；第3類(lèi)包括了(D)尿素型、(E)低氮型和(F)VBC型培養(yǎng)基，其特點(diǎn)是不利于菌株小型分生孢子產(chǎn)孢。表6 聚類(lèi)過(guò)程TIJ距離1540.225002640.825003321.075004423.406205216.46372培養(yǎng)基類(lèi)型(A)全糖型(B)淀粉型(C)低糖型(D)尿素型(E)低氮型(F)VBC型=15.90 圖2 培養(yǎng)基類(lèi)型對(duì)小型分生孢子產(chǎn)孢量影響聚類(lèi)分析請(qǐng)把表跟圖分開(kāi)，去掉外面的虛線2.4 黃瓜尖孢鐮刀菌生長(zhǎng)階段的聚類(lèi)分析用聚類(lèi)分析方法，對(duì)培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)行歸類(lèi)。以培養(yǎng)基時(shí)間為樣本，以培養(yǎng)基類(lèi)型為指標(biāo)，構(gòu)

26、建矩陣，用歐氏距離為相關(guān)尺度，以類(lèi)平均法進(jìn)行系統(tǒng)聚類(lèi).聚類(lèi)過(guò)程見(jiàn)表7；培養(yǎng)時(shí)間對(duì)產(chǎn)孢量影響聚類(lèi)分析見(jiàn)圖3。當(dāng)=5.09時(shí)，可將其分為2類(lèi)，第1類(lèi)包括了1d、3d、5d、7d，其特點(diǎn)是此時(shí)菌株小型分生孢子產(chǎn)生量較少；第2類(lèi)包括了9d、11d、13d、15d，其特點(diǎn)是該階段菌株小型分生孢子產(chǎn)生量較大。表7 聚類(lèi)過(guò)程TIJ距離1212.000802762.009173542.228694313.108735863.125106415.197977618.44637培養(yǎng)時(shí)間（d5.09 圖2 培養(yǎng)時(shí)間對(duì)小型分生孢子產(chǎn)孢量影響聚類(lèi)分析請(qǐng)把表跟圖分開(kāi)，去掉外面的虛線3 討論培養(yǎng)基

27、類(lèi)型對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌的菌落生長(zhǎng)影響不顯著(p>0.05)，但是對(duì)分生孢子產(chǎn)量影響差異很大，不同類(lèi)型培養(yǎng)上產(chǎn)孢量在（1.2514.60）×106 cfu/ml之間。(A)全糖型培養(yǎng)基對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌小型分生孢子的產(chǎn)生最有利，而對(duì)大型分生孢子的產(chǎn)生最不利，而(F)VBC型培養(yǎng)基則相反，對(duì)大型分生孢子產(chǎn)生有利與王拱辰等3的研究結(jié)果一致。改變培養(yǎng)基的氮源和碳源都能改變小型分生孢子的產(chǎn)孢量。從該變氮源的結(jié)果看，將(A)全糖型培養(yǎng)基成份中KNO3量減半得到(E)低氮型培養(yǎng)基，將(A)全糖型培養(yǎng)基成份中KNO3用尿素替代得到(D)尿素型培養(yǎng)基，二者的變化趨勢(shì)基本同(A)全糖型培養(yǎng)基，但孢子數(shù)

28、較(A)全糖型培養(yǎng)基低，而(E)低氮型培養(yǎng)基產(chǎn)生的孢子數(shù)在培養(yǎng)至第7天后，高于(D)尿素型培養(yǎng)基，試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明產(chǎn)孢培養(yǎng)中使用KNO3作氮源優(yōu)于尿素。從該變碳源的結(jié)果看，將(A)全糖型培養(yǎng)基成份中葡萄糖、蔗糖去除得到(B)淀粉型培養(yǎng)基，將(A)全糖型培養(yǎng)基成份中葡萄糖、蔗糖減半得到(C)低糖型培養(yǎng)基，二者的產(chǎn)孢量顯著低于(A)全糖型培養(yǎng)基，其中(B)淀粉型培養(yǎng)基從第5d開(kāi)始產(chǎn)孢量逐漸下降，可見(jiàn)蔗糖和葡萄糖碳源的缺乏，極不利于小型分生孢子的產(chǎn)生，而碳源不足也顯著影響產(chǎn)孢量。另外使用VBC培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得的小型分生孢子產(chǎn)孢量結(jié)果不理想。對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌營(yíng)養(yǎng)需求和生長(zhǎng)階段的研究結(jié)果進(jìn)行聚類(lèi)分析，表明尖孢鐮刀菌小型分生孢子產(chǎn)生的最佳培養(yǎng)基為(A)全糖型培養(yǎng)基，最大產(chǎn)孢量發(fā)生在培養(yǎng)11d，為14.60×106 cfu/ml。這為尖孢鐮刀菌的分子標(biāo)記中小型分子孢子的收集提供了培養(yǎng)條件。致謝：感謝福建農(nóng)林大學(xué)張紹升教授對(duì)本論文研究的悉心指導(dǎo).參考文獻(xiàn)：1 Correll J C. The relationship between formae speciales, races, and vegetative compatibility groups in Fusarium oxysporum. Phytopatho