血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)與慢性乙型肝炎（CHB）

1、血小板衍生生長因子BB（PDGF-BB）與慢性乙型肝炎（CHB）肝纖維化的相關(guān)性分析摘要 目的探討CHB患者年齡 、性別、病史、血清HBVDNA水平、肝功能指標(biāo)與血清PDGF-BB水平和清肝纖維化指標(biāo)（HA、C、PC、LN）的相關(guān)性，以及血清PDGF-BB水平與CHB肝纖維化發(fā)展程度的相關(guān)性。方法 將74例CHB患者血清PDGF-BB水平與CHB患者的年齡 、性別、 病史、血清HBVDNA水平、肝功能、血清肝纖維化指標(biāo)（HA、C、PC、LN）進(jìn)行性關(guān)系分析；將74例CHB分為輕度、中度、重度3組，分析血清HBVDNA水平、PDGF-BB水平和肝纖維化指標(biāo)與肝功能分級的相關(guān)性。結(jié)果血清PDGF-

2、BB水平與CHB患者年齡 、性別、病史、HBVDNA水平無顯著相關(guān)性（p>0.05）；與肝功能指標(biāo)和血清HA、 PC、C、LN顯著相關(guān)（P<0.01）；血清PDGF-BB水平和肝纖維化指標(biāo)HA、 PC、C、LN水平與肝功能分級呈正相關(guān)（P<0.01）；血清PDGF-BB水平與肝纖維化指標(biāo)HA、 PC、C、LN水平正相關(guān)（P<0.01）。結(jié)論CHB患者的年齡、性別 、 病史的長短和HBV DNA水平的高低并不決定CHB肝纖維化發(fā)展的程度，肝臟炎癥程度，才是進(jìn)hod，促進(jìn)促進(jìn)肝纖維化發(fā)展的始動(dòng)因素，并決定CHB肝纖維化發(fā)展的程度。CHB血清PDGF-BB水平，不但可反映CH

3、B患者的肝功能損害程度亦可反映CHB肝纖維化程度，可應(yīng)用于CHB的肝功能和肝纖維化程度的評估。關(guān)鍵詞慢性乙型肝炎(CHB);肝纖維化; 血小板衍生生長因子BB (PDGF-BB)；透明質(zhì)酸（HA ）；四型膠原（C）；前型膠原肽（PC），層粘連蛋白（LN）乙型病毒性肝炎是一種嚴(yán)重危害人類健康的傳染病,世界上已超過20 億人口感染過乙型肝炎病毒（HBV）,其中3.5億人為慢性HBV感染者,每年有5000萬新發(fā)病例,大約有150 萬人死于乙型肝炎相關(guān)的肝衰竭、肝硬化、肝癌,我國乙型肝炎表面抗原（HBsAg）陽性率約為9.09%，多數(shù)無癥狀，其中1/3為慢性肝炎患者1。血小板衍生生長因子BB(PDGF

4、-BB)在慢性肝病肝纖維化的發(fā)生和發(fā)展中的作用突出2 ,正日益受到重視，本研究為了探討血清PDGF-BB水平與CHB肝纖維化發(fā)展的關(guān)系，對CHB患者的年齡 、性別、 CHB病程、血清HBVDNA水平、肝功能、血清肝纖維化指標(biāo)（透明質(zhì)酸（hyaluronic acid ，HA ）、四型膠原（Collagen Type , C）、前型膠原肽（Procollagen Type ,PC）和層粘連蛋白（laminin ,LN）與血清PDGF-BB水平的相關(guān)性,進(jìn)行分析如下：材料和方法1 病例選擇共選擇CHB病人共74例, 男60例，女14例，均除外處于免疫耐受狀態(tài)的HBV攜帶患者以及甲型肝炎病毒（HAV

5、）、丙型肝炎病毒（HCV）、丁型肝炎病毒（HDV）、戊型肝炎病毒（HEV）等肝炎病毒重疊感染并除外因藥物、飲酒、自身免疫等因素所引起的肝損害病例；所有患者入組前均未應(yīng)用過保肝、抗肝纖維化和抗病毒類藥物治療；所有病例均行了肝功能、HBV血清學(xué)標(biāo)志、血清HBVDNA、血清肝纖維化指標(biāo)（HA、C、PC和LN）和血清PDGF-BB檢測。所有病例以2000年病毒性肝炎防治方案中的CHB 診斷標(biāo)準(zhǔn)3分為輕、中、重度。2 觀察指標(biāo): 對CHB患者年齡 、性別、 CHB病程、血清HBVDNA水平、肝功能血清肝纖維化指標(biāo)（HA、C、PC、LN）和血清PDGF-BB水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢測分析。2 1 HBV血清學(xué)標(biāo)志檢

6、測采用化學(xué)發(fā)光法(美國雅培公司)檢測。2 2 血清HBV DNA采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction ,PCR ）法檢測。儀器采用美國PE 公司5700 型自動(dòng)熒光PCR分析檢測儀,型號:ABI5700PCR。試劑盒由中山醫(yī)科大學(xué)達(dá)安基因診斷中心提供。2 3 肝功能檢測用全自動(dòng)生化分析儀采用動(dòng)力學(xué)法檢測。儀器：采用美國貝克曼(BECKMAN)公司生產(chǎn)的CX9 型全自動(dòng)生化分析儀。檢測試劑由美國貝克曼(BECKMAN)公司提供。 2 4血清HA、C、PC、LN檢測 采用放射免疫分析法。檢測試劑由河南省焦作市解放免疫診斷試劑研究所提供。2 5血清PDGF-B

7、B檢測 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測。試劑由上海西唐生物科技有限公司提供。4 統(tǒng)計(jì)方法： 應(yīng)用Excel2000對所有資料建立數(shù)據(jù)庫，采用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson和Spearman相關(guān)分析。結(jié)果1. 臨床資料構(gòu)成情況和相關(guān)性分析：本組共74例CHB，男 60例，女14例，經(jīng)Spearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)：CHB患者血清PDGF-BB水平與患者年齡（26±10.35歲） 、 CHB病程（5.15±5.29年）、HBV-DNALog值（5.576±1.29）無顯著相關(guān)性關(guān)系（r=

8、0.185，0.034，-0.183；p>0.05）；與性別無顯著相關(guān)性關(guān)系（F=0.331，p>0.05），見表1；血清PDGF-BB水平與肝功能、血清肝纖維化指標(biāo)Spearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)：血清PDGF-BB水平與肝功能、血清肝纖維化指標(biāo)均顯著性相關(guān)（P<0.01），見表2：表1 血清PDGF-BB水平與性別的相關(guān)分析（）例數(shù)（n）PDGF-BB(pg/mL)男6011000±57.47女14100.74±36.22F值0.331， p>0.05表2 血清PDGF-BB水平與肝功能、血清肝纖維化指標(biāo)相關(guān)分析（）PDGF-BB(pg/mL)ALT

9、（IU/L）AST（IU/L）TBIL（mol/L）HA(g/L)PC(g/L)C(g/L)LN(g/L)108.25±54.00439.54±548.01274.22±332.0873.05±69.21223.0±126.13227.2±107.40104.88±43.57125.19±54.36PDGF-BB(pg/mL)0.516* p<0.010.460* p<0.010.620* p<0.010.466* p<0.010.363*p<0.010.506* p<0.010

10、.306* p<0.01注： *為r值。2.74例CHB患者肝功能分與血清HBVDNA、血清PDGF-BB水平和血清肝纖維化指標(biāo)的相關(guān)性分析：74例CHB患者肝功能分3級：輕度23例，中度25例，重度26例，經(jīng)Spearman等級相關(guān)分析,發(fā)現(xiàn)CHB患者肝功能分級與血清PDGF-BB水平和血清肝纖維化指標(biāo)呈正相關(guān)（P<0.01）；與血清HBVDNA水平無相關(guān)性，見表3。表3血清PDGF-BB水平和血清肝纖維化指標(biāo)與肝功能分級的相關(guān)分析（）病情例數(shù)HBV-DNALog值HA(g/L)PC-(g/L)C-(g/L)LN(g/L)PDGF-BB(pg/mL)輕度255.43±1

11、.21137.91.8±102.07164.98±51.9084.19±42.6190.65±41.4667.02±26.42中度235.90±1.38248.32±137.60252.84±152.1290.96±37.88156.04±51.9693.6±27.99重度265.42±1.28282.40±91.06264.40±69.43137.11±29.17131.13±49.97160.8±48.77r值-0.02p

12、>0.050.477p<0.010.385p<0.010.510p<0.010.307p<0.010.728p<0.01討論肝纖維化（hepatic fibrosis）是指肝臟由于受慢性炎癥或其他原因損傷所致的肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織增生，細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)的合成大于降解而導(dǎo)致肝內(nèi)過度沉積的病理生理過程，是各種慢性肝病重要的病理特征，也是肝硬化發(fā)展的必經(jīng)中間環(huán)節(jié) 4。HSC在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中起主導(dǎo)作用，HSC 活化是一個(gè)復(fù)雜的程序化過程, 細(xì)胞因子參與的炎癥反應(yīng)在HSC 激活過程中起著重要作用 5 ，血小板衍生生長因子

13、(PDGF)是其中較為突出的一個(gè)細(xì)胞因子。血小板衍生生長因子(Platelet derived growth factor, PDGF)為30KD的二聚體蛋白, 是目前已知多肽生長因子中對HSC作用最強(qiáng)的有絲分裂原，在肝臟PDGF由非實(shí)質(zhì)細(xì)胞如HSC、肝竇內(nèi)皮細(xì)胞分泌2，5。PDGF有3種形式的二聚體亞型,即PDGF-AA,PDGF -BB及PDGF-AB，其中PDGF-BB在慢性肝病肝纖維化的發(fā)生和發(fā)展中的作用最突出6。HSC既是PDGF的產(chǎn)生細(xì)胞,又是PDGF作用的靶細(xì)胞，在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中起主導(dǎo)作用，HSC 被激活后可增殖、轉(zhuǎn)化為肌成纖維樣母細(xì)胞,合成和分泌細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)上調(diào),同

14、時(shí)合成和釋放大量基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子,使間質(zhì)膠原酶等蛋白酶活性降低,ECM 降解減少,最終導(dǎo)致ECM 積聚而發(fā)生肝纖維化乃至肝硬化 7，8 。ECM主要包括HA、 PC、C、LN等。 HA、PC、C、LN作為無創(chuàng)性指標(biāo)判斷肝纖維化已被認(rèn)可9本研究中， CHB患者的肝功能分級與血清HA、 PC、C、LN和血清PDGF-BB水平呈正相關(guān)（P<0.01），與血清HBVDNA水平無相關(guān)性(p>0.05)；血清PDGF-BB水平與肝功能和血清HA、 PC、C、LN顯著相關(guān)（P<0.01），并與肝功能分級和肝纖維化指標(biāo)HA、 PC、C、LN水平呈正相關(guān)（P<0.01），與患者年齡

15、 、 CHB病程、HBVDNA水平無顯著相關(guān)性（p>0.05），提示CHB患者的年齡 、性別、 CHB病史的長短和HBV DNA水平的高低并不決定CHB肝纖維化發(fā)展的程度，而肝臟炎癥活動(dòng)，才是促進(jìn)hod，促進(jìn)促進(jìn)肝纖維化發(fā)展的始動(dòng)因素，并決定CHB肝纖維化發(fā)展的程度；血清PDGF-BB水平與血清肝纖維化指標(biāo)HA、 PC、C、LN一樣，不但可反映CHB患者的肝功能損害程度亦可反映CHB肝纖維化程度，與血清肝纖維化指標(biāo)HA、 PC、C、LN聯(lián)合檢測，可更好的評估CHB的肝功能和肝纖維化程度。參考文獻(xiàn)1Maddry WC.Hepatitis B:an important public heal

16、th issue.J Med Virol,2000;61:362-366.2KatjaBreitkopf,ClaudiavanRoeye,IrisSawitza,etal.Expression pattens of PDGF A, B, C and D and the PDGF receptorsandinac tivated rat hepatic stellate cells(HSC).Cytokine,2005,31:349-357.3Chinese Society of Infectious Diseases and Paresitology and Chinese Society o

17、f Hepatology of Chinese Medical Association. The programme of prevention and cure for viral hepatitis. Zhonghua Ganzangbing Zazhi,2000,8:324-329.(in Chinese)中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)會(huì)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì).病毒性肝炎防治方案.中華肝臟病雜志, 2000，18324-329.4 丁向春,張栩.1012例HBeAg陰性及陽性慢性肝病的臨床分析.中國醫(yī)師雜志.2007,9(1):120-125.5 Solis-Herruzo JA , de la

18、 Torre P , Munoz-Yague MT. Hepatic stellate cells (HSC) : architects of hepatic fibrosis. Rev Esp Enferm Dig ,2003 , 95(6) : 438439.6Katja Breitkopf,Claudiavan Roeye,Iris Sawitza,etal.Expression pattens of PDGF A, B, C and D and the PDGF receptorsandinac tivated rat hepatic stellate cells(HSC).Cytokine,2005,31:349-357.7 Moreira RK.Hepatic stellate cells and liver fibrosis.Arch Pathol Lab Med. 2007