安神補心丸中地西泮的鑒別

1、安神補心丸中地西泮的鑒別         【摘要】  目的利用薄層色譜法和高效液相色譜（HPLC）法鑒別安神補心丸中是否添加了地西泮。方法采用薄層色譜法、HPLC法鑒別。結果供試品中未檢出地西泮。結論 薄層色譜鑒別方法簡便可靠， HPLC法更靈敏精確，兩種鑒別方法都可為打擊在安神補心類中藥中擅自添加地西泮成分的違法行為提供有力依據。 【關鍵詞】  安神補心丸 地西泮 薄層色譜法 高效液相色譜法   安神補心丸1是由丹參、五味子（蒸）、石菖蒲、合歡皮、菟絲子、墨旱蓮、地黃等10

2、味中藥所組成的一種中藥丸劑，它具有養(yǎng)心安神的功效，臨床廣泛用于陰血不足引起的心悸失眠，頭暈耳鳴。此藥特別受到一些失眠患者的青睞，人們通常比較信賴中藥制劑，認為服用安全，毒副作用小，而對中成藥制劑持有的態(tài)度往往是敬而遠之，能不用就不用。一些不法分子為了充分拓寬市場，牟取暴利而不擇手段，在中藥制劑中人為添加了地西泮。地西泮2是屬于苯二氮卓類抗焦慮藥，對焦慮性失眠療效極佳，但長期應用可致耐受與依賴性，突然停藥有戒斷癥狀出現。新生兒、哺乳期婦女、孕婦忌用。因此，此違法行為存在著嚴重的危險性。筆者抽檢了北京市某藥廠生產的安神補心丸，經檢驗結果發(fā)現此藥中未添加地西泮，廣大患者可以安心服用，現將抽驗結果以及

3、所建立的測定方法介紹如下。1  儀器和材料   R200D型電子分析天平（德國塞多利斯公司）；UV-1型三用紫外分析儀（上海顧村電光儀器廠）；Agilent 1100型高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；UV2450型紫外/可見分光光度計（日本島津公司）；硅膠GF254薄層板（青島海洋化工廠分廠）；環(huán)己烷、醋酸乙酯、三氯甲烷、丙酮（分析純，均為北京化學試劑公司）；甲醇（色譜醇）；地西泮對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：1159302）；安神補心丸；水為純化水。2  方法與結果2.1   薄層色譜法將安神補心丸15丸，研碎，取

4、細粉適量加三氯甲烷適量溶解，配成濃度為2 mg/ml的溶液，振搖，濾過，濾液作為供試品溶液。稱取地西泮對照品適量，置2 ml容量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀釋至刻度，制成每毫升含2 mg的溶液，作為對照品溶液。吸取供試品溶液、對照品溶液各5 l，混合溶液2 l，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以環(huán)己烷醋酸乙酯三氯甲烷（631）為展開劑展開，取出晾干后，置紫外光燈下觀察，在254nm處混合溶液與地西泮對照品相應的位置均顯示紫紅色的斑點，供試品相應位置無上述斑點。見圖1。2.2   HPLC法色譜柱ZORBAX C18 (4.6 mm×250 mm,5 m)；流動相：

5、甲醇水（5050）；流速為1.0 ml/min；檢測波長為254 nm；進樣量為20 l。         稱取地西泮對照品適量，置25 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，配成濃度為0.02 mg/ml的溶液，作為對照品溶液。取安神補心丸細粉適量（約5丸），地西泮對照品適量（約20 mg），加丙酮10 ml超聲處理10 min,濾過，取濾液揮干，加甲醇10   ml溶解,用微孔濾膜（0.45 m）濾過即得。對照品溶液中，地西泮的出峰時間為20.1min,混合溶液中同樣發(fā)現在相同時間出峰的色譜

6、峰，并且此峰與其它雜質峰也能得到較好分離，而供試品溶液中未發(fā)現相同時間出峰的色譜峰。見圖2。3  討論   如果使用硅膠G薄層板，可采用如下操作：將硅膠G薄層板在105下活化30 min，分別點供試品溶液、對照品溶液各5 l，混合溶液2 l，用環(huán)己烷：醋酸乙酯：三氯甲烷（631）為展開劑展開，先在層析池中飽和5min,然后展開，展距約15 cm。取出，揮盡展開劑，依次噴稀硫酸溶液、碘化鉍鉀試液顯色。混合溶液與地西泮對照品相應的位置均顯示磚紅色的斑點，供試品相應位置無上述斑點。與使用硅膠G薄層板相比，采用GF254薄層板方法顯色過程簡單且斑點更為清晰。   對HPLC法中的流動相的比例進行了多次篩選，分別以甲醇-水為3070，4060，5050，6040和7030進行實驗，結果表明，選擇甲醇-水（5050）色譜峰峰形及分離度良好。   薄層色譜法實驗通過比較供試品和對照品的熒光斑點，確保了定性結果的準確性，整個分析方法具有簡便的特點，并且斑點清晰，專屬性及重現性好；HPLC法比薄層色譜法更加靈敏、準確、可靠，因此，在使用薄層色譜法檢測出某成分的存在后，可進一步使用HPLC法進行確認。   薄層色譜法和HPLC法都可作為安神補心類中藥制劑中擅自添加地西泮的有效鑒別方法，能為此類假藥