實驗6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測

1、.實驗6 -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測 導(dǎo)學(xué)案【學(xué)習(xí)目的】1. 嘗試用吸附法制作固定化-淀粉酶。2. 應(yīng)用固定化-淀粉酶進展淀粉水解的測定。3. 說明酶固定化的方法及制作原理。4. 通過此實驗討論固定化酶的應(yīng)用價值。一、根底盤點：酶與固定化酶1酶：活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的一類有機物，它是生物體內(nèi)各種化學(xué)反響的催化劑。2固定化酶：將_的酶用_或_方法_，使之成為_而又有_的制劑。3將酶改造成固定化酶的原因是：由于酶_，且不利于_，所以要將酶改造成固定化酶。4酶固定化的方法有：_法、_法、_法和_法等。本實驗用的是_法。5固定化酶作用的機理：將固定化酶_，當(dāng)_時，在_的作用下_。二、自主

2、探究：-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測實驗1. 實驗?zāi)康模?制備 。2進展 的測試。2. 實驗原理：用 法將-淀粉酶固定在 上。一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過 后，可使淀粉水解成 。用 測試，假設(shè)流出物呈_色，說明有_生成。淀粉 葡萄糖遇碘顯藍色 遇碘顯紅色 遇碘不顯色3本實驗使用的酶及特性：本實驗使用的酶是 的-淀粉酶，其作用的最適宜pH為_，最適宜溫度為_。4 實驗設(shè)備及用品：5 mL塑料注射器、50 mL燒杯、滴管、自行車用氣門芯及夾子、注射器架、試管或微量離心管3支。5實驗材料及其制備：­淀粉酶的固定化：在燒杯中將5 mg 溶于4 mL 中 由于 ，可能有些不溶物； 再參加5g_

3、，不時攪拌30 min；然后將上述溶液裝入1支注射器中 該注射器的下端接有_并用_封住，石英砂體積約4 mL用 倍體積的蒸餾水_此注射器以除去 ，流速為1 mL/min。可溶性淀粉溶液：取_mg可溶性淀粉溶于100 mL_中，攪拌均勻。可溶性淀粉溶液：稱取0.127 g 和0.83 g 。加蒸餾水100 mL，完全溶解后裝入滴瓶中。6 實驗步驟： 固定化-淀粉酶，裝入注射器中 以0.3mL/min的流速滴加 過柱 流出5mL的淀粉溶液后接收0.5mL流出液 滴加 溶液，觀察顏色。用水稀釋_倍后再觀察顏色。 用_倍柱體積的蒸餾水洗滌固定化柱。放置在_冰箱中，幾天后重復(fù)實驗7預(yù)期實驗結(jié)果：三、我的

4、困惑：四、實驗優(yōu)化方案：5、 最終實驗結(jié)果樣品水淀粉溶液淀粉濾液 KI-I2溶液稀釋1倍結(jié)果 對照+-+- 樣品1-+-+- 樣品2-+- 樣品3-+ 你的實驗到達預(yù)期實驗結(jié)果了嗎？假設(shè)沒有，請分析失敗原因。六、真題感悟1、2019浙江自選，17利用紫甘薯制酒可進步其附加值。請答復(fù)：由于酶在水溶液中不穩(wěn)定，因此常將酶固定在某種介質(zhì)上制成 。紫甘薯勻漿流經(jīng)-淀粉酶柱后，取適量流出的液體，經(jīng)脫色后參加KI-I2溶液，結(jié)果液體呈紅色。說明該液體中含有 。A. 淀粉 B. 糊精 C. 麥芽糖 D. 葡萄糖2、2019浙江自選，171某興趣小組欲利用固定化酶進展酶

5、解淀粉的實驗，分組見下表。組別固定化酶柱長度cm淀粉溶液的流速mL·min-1甲100.3乙100.5丙150.3丁150.5將吸附了­淀粉酶的石英砂裝入柱中后，需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱，以除去_。按上表分組，將配制好的淀粉溶液參加到固定化酶柱中，然后取一定量的流出液進展KI­I2檢測。假設(shè)流出液呈紅色，說明有_生成；假設(shè)各組呈現(xiàn)的顏色有顯著差異，那么流出液中淀粉水解產(chǎn)物濃度最高的是_組。2以下關(guān)于上述固定化酶實驗的表達，錯誤的選項是_。A固定化酶柱長度和淀粉溶液流速決定了酶柱中酶的含量B淀粉溶液流速過快會導(dǎo)致流出液中含有淀粉C各組實驗所用的淀粉溶液濃度應(yīng)一樣

6、D淀粉溶液的pH對實驗結(jié)果有影響3、2019浙江自選，17某工廠為了消費耐高溫植酸酶飼料添加劑，開展了產(chǎn)該酶菌株的挑選、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如以下圖所示。請答復(fù)以下問題。4在適宜條件下，將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后，滴加到一定濃度的鈣離子溶液中，使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對酶進展。A.吸附 B.包埋 C.裝柱 D.洗滌5溫度與植酸酶相對酶活性的關(guān)系如下圖。以下表達錯誤的選項是。A.測試溫度中，固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60 和45 B.測試溫度范圍內(nèi)，固定化植酸酶的相對酶活性波動低于非固定化植酸酶C.固定化與非固定化植酸酶相比，相對酶活性在80%以上時的溫度范

7、圍較寬D.65 時固定化與非固定化植酸酶的相對酶活性因蛋白質(zhì)變性而位于最低點七、穩(wěn)固練習(xí)1、以下各項中屬于固定化酶優(yōu)點的是 A. 有利于增加酶的活性 B. 有利于產(chǎn)物的純化C. 有利于進步反響速度 D.有利于酶發(fā)揮作用2、以下關(guān)于­淀粉酶的固定化過程的表達中錯誤的選項是A首先要在燒杯中將­淀粉酶溶于4 mL蒸餾水中B再將5 g石英砂參加上述燒杯中，不時攪拌30 minC隨后將燒杯中的物質(zhì)裝入1支下端接有氣門芯但并不封住的注射器中D最后用10倍體積的蒸餾水洗滌此注射器，除去那些未吸附的游離淀粉酶3、2019·金華十校聯(lián)考請答復(fù)與“固定化酶實驗有關(guān)的問題：1淀粉酶可以通過培養(yǎng)枯草桿菌來消費，是挑選高表達量菌株的最簡便方法之一。挑選出的菌株在發(fā)酵消費之前還需利用培養(yǎng)基進展擴大培養(yǎng)。2利用物理或化學(xué)的方法將淀粉酶固定后，成為且又有酶活性的制劑。假設(shè)用吸附法固定時，在裝柱后需要用 緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉碘混合液發(fā)生為止。3將