豬肉中克倫特羅的檢測(cè)_豬肉中的瘦肉精檢測(cè)整體解決方案

1、 ANAlySIS & TEST 分析與檢測(cè)豬肉中克倫特羅的檢測(cè) 萊伯泰科有限公司 供稿鹽酸克倫特羅是一種-興奮劑，豬食用該物質(zhì)后可在代謝過程中促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成，加速脂肪的轉(zhuǎn)化和分解，從而提高豬肉的瘦肉率，因此其被稱為“瘦肉精”。瘦肉精由于使用量大、使用時(shí)間長(zhǎng)，加之在豬體內(nèi)代謝慢，所以其在豬體內(nèi)的殘留量很大。如果這些殘留的瘦肉精通過食物鏈進(jìn)入人體，便可導(dǎo)致人體食物中毒，因此一直被禁用。然而一些養(yǎng)豬戶不顧相關(guān)部門的規(guī)定，在飼料中摻入大量瘦肉精，視人們的食用安全而不顧，嚴(yán)重?cái)_亂了肉類食品市場(chǎng)的秩序，給人們的日常生活帶來很大影響。在這種情境之下，如何采用科學(xué)快速的方法對(duì)豬肉中的瘦肉精進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)

2、現(xiàn)有效監(jiān)管成為亟待解決的問題。對(duì)于豬肉中克倫特羅的檢測(cè)而言，樣品前處理顯得尤為重要。為此，本文介紹了一種快速準(zhǔn)確的檢測(cè)方案，該方案使用LabTech公司全自動(dòng)固相萃取儀-定量濃縮系統(tǒng)進(jìn)行樣品前處理工作，樣品經(jīng)提取、初步凈化后，全自動(dòng)完成豬肉樣品的固相萃取-洗脫液濃縮-溶劑置換過程，最終樣品可直接用于液相檢測(cè)，極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)人員的工作步驟，液相色譜檢測(cè)準(zhǔn)確、樣品測(cè)定平行性好、回收率高。儀器與試劑儀器：LabTech Prep Elite-VS全自動(dòng)固相萃取-定量濃縮儀，LabTech LC600二元梯度高效液相色譜系統(tǒng)；試劑：乙酸乙酯、10%碳酸鈉溶液、0.1mol/L的鹽酸溶液、2.5mol

3、/L氫氧化鈉溶液、甲醇（色譜級(jí)）、4%氨水甲醇、去離子水。S P E 小柱：Pr o E l u t P X C 90mg/6mL；上樣：將提取液加入小柱中，流出液棄去；實(shí)驗(yàn)方法樣品前處理1.提取方法：將50g豬肉平均分成10份，準(zhǔn)確進(jìn)行稱重。取其中5份加入15mL乙酸乙酯、3mL10%碳酸鈉溶液置于50mL離心管中，10000rpm下均質(zhì)2min，6000rpm下離心2min，將上清液轉(zhuǎn)入另一離心管中。用15mL乙酸乙酯重復(fù)提取殘?jiān)喜⒁宜嵋阴?。向乙酸乙酯提取液中加?mL、0.1mol/L的鹽酸溶液，渦旋混合1min，然后在6000rpm下離心1min，收集下層水相。重復(fù)萃取一次，合并下

4、層水相，用2.5 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至5.2。取另外5份，破碎后加入1.0g/mL克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)液1mL，按上述方法進(jìn)行提取操作，作為加標(biāo)樣品。PrepElite-VS方法設(shè)定界面如圖1所示。2.樣品凈化：洗脫：7.5mL、4%氨水甲醇洗脫；在線濃縮：50下在線濃縮，進(jìn)行流動(dòng)相（甲醇：水=35:65）置換，自動(dòng)定容到1mL。圖1 PrepElite-VS方法設(shè)定界面樣品檢測(cè)1.液相色譜條件：食品安全導(dǎo)刊 2011年5月刊 ANAlySIS & TEST色譜柱：C18柱，250mm4.6mm，5m；流動(dòng)相：甲醇：水35：65；流速：1mL/min；進(jìn)樣量：20L；紫外檢測(cè)器：244n

5、m。2.標(biāo)準(zhǔn)品及樣品測(cè)定（1）克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置：準(zhǔn)確稱取克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇配成濃度為25g/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相甲醇+水（35:65）將濃度稀釋成0.025g/mL、0. 05g/mL、0.25g/mL、1.0g/mL、2.5g/mL標(biāo)準(zhǔn)液；（2）將濃縮后的試樣采用0.45m的針筒式微孔過濾膜過濾，濾液待進(jìn)行液相色譜測(cè)定；（3）吸取50L標(biāo)準(zhǔn)溶液及試樣液注入液相色譜儀，進(jìn)行定性、定量分析。克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品濃度：0.025g/m L、0.05g/mL、0.25g/mL、1.0g/mL、2.5g/mL，線性方程為：Y=361552X-4061.8，線性系數(shù)為：R

6、 2=0.9998。如圖3所示。 加標(biāo)樣品回收率加標(biāo)樣品回收率結(jié)果見下表1所示，加標(biāo)樣品色譜圖如圖4所示。未加標(biāo)樣品檢測(cè)結(jié)果未加標(biāo)樣品檢測(cè)結(jié)果見圖5所示，經(jīng)計(jì)算，未加標(biāo)樣品未檢出克倫特羅成分?？藗愄亓_標(biāo)準(zhǔn)品（1.0g/mL）、理，自動(dòng)化程度高，可以解決傳統(tǒng)固相萃取步驟操作繁瑣、溶劑揮發(fā)、過柱流速難以控制等問題。同時(shí)，收集到的洗脫液可以在線濃縮、溶劑置換、定容過程，極大地簡(jiǎn)化了繁瑣的樣品前處理工作，保護(hù)操作者免受各種有機(jī)溶劑毒害，而且回收率穩(wěn)定、可靠（回收率高達(dá)89.53%）。未加標(biāo)樣品、加標(biāo)樣品對(duì)比色譜圖未加標(biāo)樣品、加標(biāo)樣品對(duì)圖6 克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品、比圖克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品、未加標(biāo)樣品、加標(biāo)樣品對(duì)比色譜圖如圖6所示。采用高效液相色譜方法對(duì)樣品中克倫特羅進(jìn)行定性、定量檢測(cè)，方便快速，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性系數(shù)為R2=0.9998，對(duì)加標(biāo)樣品和未加標(biāo)樣品進(jìn)行精確濃度檢測(cè)、準(zhǔn)確計(jì)算回收率、儀器操作簡(jiǎn)