純化水需氧菌檢查R2A培養(yǎng)基適用性試驗(yàn)方案--2015年版藥典-上上2018年

1、制藥有限公司第#頁共16頁純化水需氧菌檢查R2砥養(yǎng)基適 用性試驗(yàn)方案-2015年版藥典-上上2018年純化水需氧菌檢查R2Ag養(yǎng)基適用性試驗(yàn)方案起草部門：Qd簽名：日期：審核部門：Qca簽名：日期：部門：質(zhì)量 部簽名：日期：批準(zhǔn)質(zhì)量負(fù)責(zé)人簽名：日期：質(zhì)量部 頒發(fā)本文件根據(jù)需要應(yīng)分發(fā)于以下部門：01質(zhì)量部下表用于記錄修訂/變更主要內(nèi)容及歷史文件編 號修訂原因修訂 日期按GMP（2010年修訂版）及2015年版中國藥典要求新制定制藥有限公司第3頁共15頁1.2.3.4.5.6.概述驗(yàn)證目的和范圍組織及職責(zé)驗(yàn)證進(jìn)度計(jì)劃表驗(yàn)證所需要的儀器設(shè)備的確認(rèn)驗(yàn)證所需要的菌種、培養(yǎng)基、試劑、檢驗(yàn)樣品的確認(rèn)7.驗(yàn)證

2、項(xiàng)目和驗(yàn)證方法7. 1試驗(yàn)菌株7. 2菌液制備1 .3培養(yǎng)基適用性檢查7 . 4計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)（薄膜過濾法）8 .偏差與漏項(xiàng)控制9 .驗(yàn)證報(bào)告會審制藥有限公司第7頁 共 16頁制藥有限公司第4頁 共16頁1. 概述我公司自制純化水微生物限度檢查項(xiàng)目為需氧菌總數(shù)檢查。 參照 中國藥典 2015 版四部附錄 1105：微生物計(jì)數(shù)法的規(guī)定，須對純化水檢查所用的 R2A培養(yǎng)基進(jìn)行適用性試驗(yàn)。 通過適用性試驗(yàn)以確認(rèn)所采用的培養(yǎng)基適用于純化水的需氧菌檢查。本驗(yàn)證方案通過試驗(yàn)菌株的回收率測試，驗(yàn)證R2A瓊脂培養(yǎng)基是否適用于本品的需氧菌總數(shù)檢查。2. 驗(yàn)證目的和范圍驗(yàn)證純化水的需氧菌檢查所用 R2A 培養(yǎng)

3、基的適用性， 對其有效性進(jìn)行評價(jià)， 保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。本驗(yàn)證方案采用1批按GMF求組織生產(chǎn)的純化水，并進(jìn)行R2A培養(yǎng)基適用性檢查。3. 組織及職責(zé)3.1 驗(yàn)證方案和驗(yàn)證報(bào)告的起草、審核、批準(zhǔn)驗(yàn)證方案由質(zhì)量部QC組負(fù)責(zé)起草，由質(zhì)量部審核，最終由質(zhì)量負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。驗(yàn)證方案實(shí)施完成后，由QC組負(fù)責(zé)匯總需氧菌檢查法驗(yàn)證的結(jié)果、撰寫報(bào)告，由質(zhì)量部審核，最終由質(zhì)量負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)報(bào)告。3.2 驗(yàn)證方案的培訓(xùn)驗(yàn)證方案在經(jīng)質(zhì)量負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后，由QC組組長對本次驗(yàn)證實(shí)施的相關(guān)人員組織培訓(xùn)工作， 并將該次的培訓(xùn)記錄歸檔。制藥有限公司第6頁共16頁3.3驗(yàn)證方案實(shí)施過程中的變更和偏差驗(yàn)證方案實(shí)施過程中如有變更和偏差，質(zhì)量

4、負(fù)責(zé) 人應(yīng)當(dāng)組織進(jìn)行評估并采取相應(yīng)的控制措施。3.4驗(yàn)證工作小組成員表姓名部門及職務(wù)職 責(zé)質(zhì)量負(fù)責(zé)人/ 質(zhì)量受權(quán)人負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案及報(bào)告的 批準(zhǔn)質(zhì)量部QA且 長審核驗(yàn)證方案、審核驗(yàn)證 報(bào)告并協(xié)調(diào)工作質(zhì)量部QC且 長負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案審核、實(shí) 施、匯總報(bào)告及培訓(xùn)工作質(zhì)量部QC負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案起草、具體 實(shí)施、報(bào)告工作4.驗(yàn)證進(jìn)度計(jì)劃表本次R2A培養(yǎng)基的適用性試驗(yàn)的計(jì)劃安排時(shí)間是2015年8月至2015年9月。5.驗(yàn)證所需要的儀器設(shè)備的確認(rèn)主要檢驗(yàn)儀器設(shè)備確認(rèn)表序 號儀器設(shè)備 名稱型號編號生產(chǎn)廠家1電子天平2電熱恒溫 水浴鍋制藥有限公司第11頁共16頁3恒溫培養(yǎng) 箱4壓力蒸汽 滅菌鍋5生物安全 柜6微生物限 度

5、檢查儀7潔凈工作 臺檢 查 人/ 日 期復(fù)核人/日期：6.驗(yàn)證所需要的菌種、培養(yǎng)基、試劑、檢驗(yàn)樣品的確認(rèn)6.1 .試驗(yàn)菌種檢查表在耳J 丁 P菌種名稱代碼甘油菌種 批號菌種內(nèi) 控縮寫來源1銅綠假單胞菌CMC CB) 10104Pa中國食品藥品檢定研究院2枯草芽胞桿菌CMCCB) 63501Bs中國食品藥品檢定研究院檢 查 人/ 日 期復(fù)核人/日期：6.2 試驗(yàn)所需的培養(yǎng)基檢查J 丁 P名稱生產(chǎn)廠家是否通過培養(yǎng)批號基適用性試驗(yàn)01胰酪大豆月東液體培養(yǎng)基口 是口否02胰酪大豆月東瓊脂培養(yǎng)基口 是口否03R2A瓊脂培養(yǎng)基口 是口否04R2A瓊脂對照培養(yǎng)基口 是口否檢 查 人/ 日 期復(fù)核人/日期：6

6、.3試劑在耳J 丁 P名稱規(guī)格級別生產(chǎn)廠家批號01pH 7.0無菌氯化鈉- 蛋白月東緩沖液干粉250g檢 查 人/ 日 期復(fù)核人/日期：1.4. 試劑及培養(yǎng)基配制pH7.0氯化鈉蛋白膝緩沖液（沖洗液）：稱取 pH7.0氯化鈉-蛋白膝緩沖液干粉16.09g。加水定容 1000mL微溫溶解，濾清，分裝至藍(lán)蓋試劑瓶，121c 濕熱滅菌20min。制藥有限公司第13頁 共 16頁胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基： 取胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基 29.8g ，加 1L 純化水，加熱助溶，分裝至藍(lán)蓋試劑瓶， 121濕熱滅菌 20min。胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基：取本品 40g,加1L純化水，加熱助溶，分裝至錐形瓶， 121濕熱

7、滅菌20min。R2A瓊脂對照培養(yǎng)基：4.55g ，加 300 mL 純化水，加熱助溶，分裝至錐形瓶， 121濕熱滅菌20min。R2A瓊脂培養(yǎng)基： 取本品18.2g ,加1L純化水，加熱助溶，分裝至藍(lán)蓋試劑瓶， 121濕熱滅菌 20min。7 . 驗(yàn)證項(xiàng)目和驗(yàn)證方法7.1. 試驗(yàn)菌種R2A 培養(yǎng)基的適用性試驗(yàn)所用的菌株為本實(shí)驗(yàn)室 -80 冰箱保存的銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的甘油菌，均為第 2 代。7.2. 菌液制備7.2.1. 稀釋液的配制pH 7.0 無菌氯化鈉 -蛋白胨緩沖液：稱取pH7.0氯化鈉 -蛋白胨緩沖液干粉16.09g 。加純化水定容1000mL微溫溶解，濾清，分裝至1000

8、 mL藍(lán)蓋試劑瓶中， 121濕熱滅菌 20min。7.2.2. 菌液的制備從-80 冰箱取出銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌制藥有限公司第10頁共16頁的第2代菌液，分別接種至10ml胰酪大豆月東液體培 養(yǎng)基中，3035c培養(yǎng)1824小時(shí)。同時(shí)分別劃線 接種至胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基中，3035c培養(yǎng)1824小時(shí)。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在 2小時(shí)內(nèi)使 用；若保存在2 8C,可在24小時(shí)內(nèi)使用。黑曲霉 抱子懸液可保存在 2 8C,在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使 用。7.3. .培養(yǎng)基適用性檢查取銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌各不大于100cfu的菌液1ml分別注入90mm無菌平皿中，注入 15-20ml溫度不超過

9、45c的供試R2A瓊脂培養(yǎng)基， 混勻，凝固，每種試驗(yàn)菌各稀釋度制備兩個(gè)平板，置30-35。5到置培養(yǎng)3天，計(jì)數(shù)；同時(shí)，用 R2A瓊脂對 照培養(yǎng)基替代被檢R2A瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行上述試驗(yàn)?；厥章?供試培養(yǎng)基組/對照培養(yǎng)組X100% 計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄試驗(yàn)時(shí)間 年 月 日完成時(shí)間 年 月 日驗(yàn)證菌株平皿號供試培養(yǎng) 基組對照培 養(yǎng)基組回收率銅綠假單 胞菌1-2平均值(M 3制藥有限公司第15頁共16頁枯草芽泡 桿菌12平均值（蜀13復(fù)核人試驗(yàn)人.7.4. 接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)為各株試驗(yàn)菌的回收率應(yīng)在0.52范圍內(nèi)o8 .偏差與漏項(xiàng)控制：微生物限度檢查方法驗(yàn)證過程中存在和發(fā)現(xiàn)的 任何偏差與漏項(xiàng)，都

10、應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)的記錄，并應(yīng)按公司 GMPC件偏差處理規(guī)程進(jìn)行調(diào)查與處理。偏差調(diào)查與處理的報(bào)告和支持文件，應(yīng)作為此確 認(rèn)方案的附錄部分。偏差和漏項(xiàng)j己錄表偏差和漏項(xiàng)： 處理過程: 檢 查 人/ 日 期復(fù)核人/日期：9 .驗(yàn)證報(bào)告會審驗(yàn)證報(bào)告會審表驗(yàn)證項(xiàng)目彳 名稱：純化水需氧菌左 生R2AW養(yǎng)基適用性 甫驗(yàn)方案名驗(yàn)證項(xiàng) 目負(fù)責(zé) 人驗(yàn)證起止 日期驗(yàn)證報(bào) 告編號驗(yàn)證結(jié)論：評價(jià)和建議：驗(yàn)證報(bào)告會審人簽名起草部門：質(zhì)量部QC且簽名/日期：審核部門：質(zhì)量部QC且簽名/日期：部門：質(zhì)量部QAia簽名/日期：批準(zhǔn)質(zhì)量負(fù)責(zé)人簽名/日期：制藥有限公司第19頁共16頁驗(yàn)證報(bào)告月 日，驗(yàn)證小組根據(jù)批準(zhǔn)的進(jìn)行了相關(guān)的一系列驗(yàn)證2015 年 8 月 29 日至微生物限度檢查方法驗(yàn)證文件對培養(yǎng)基適用性檢查工作，達(dá)到了預(yù)期效果，滋將有關(guān)事項(xiàng)說明如下：1、 驗(yàn)證方案在實(shí)施過程中未做修改。2、 驗(yàn)證方案各項(xiàng)性能指標(biāo)在驗(yàn)證中未作變動，誤差在允許范圍內(nèi)。3、 驗(yàn)證過程中結(jié)果符合規(guī)定要求，記錄完整屬實(shí)。4、 驗(yàn)證結(jié)果符合設(shè)計(jì)要求和GMPM則要求，可以投入使用。5、 片組分或檢驗(yàn)條件改變時(shí)須重新驗(yàn)證。以上情況，請驗(yàn)證委員會審批!驗(yàn)證小組：年 月