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文檔簡介
1、關(guān)于診斷酶學(xué)第五版第一頁,共55頁幻燈片第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述(一)酶的組成、結(jié)構(gòu)和功能(一)酶的組成、結(jié)構(gòu)和功能 酶的本質(zhì)酶的本質(zhì)-絕大部分的酶是蛋白質(zhì),有些酶是核酸絕大部分的酶是蛋白質(zhì),有些酶是核酸 和酶蛋白組成的復(fù)合體,極少數(shù)酶的本質(zhì)是核酸。和酶蛋白組成的復(fù)合體,極少數(shù)酶的本質(zhì)是核酸。 酶的特性酶的特性-極高的催化效率、高度的特異性極高的催化效率、高度的特異性 (specificity)(specificity)以及催化作用的可調(diào)節(jié)性以及催化作用的可調(diào)節(jié)性一、酶的概念與特征一、酶的概念與特征 第二頁,共55頁幻燈片酶的結(jié)構(gòu)和功能酶的結(jié)構(gòu)和功能 酶是蛋白質(zhì),具有一、二、三級結(jié)構(gòu),有些酶還
2、具酶是蛋白質(zhì),具有一、二、三級結(jié)構(gòu),有些酶還具 有四級結(jié)構(gòu)。有四級結(jié)構(gòu)。 單體酶單體酶(monomeric enzyme)-(monomeric enzyme)-只由一條多肽鏈構(gòu)成只由一條多肽鏈構(gòu)成 寡聚酶寡聚酶 (oligomeric enzyme)-(oligomeric enzyme)-由多個相同或不同由多個相同或不同 亞基以非共價鍵連接的酶亞基以非共價鍵連接的酶 多酶體系多酶體系(multienzyme system)-(multienzyme system)-由幾種不同功能由幾種不同功能 的酶彼此聚合而成的多酶復(fù)合物的酶彼此聚合而成的多酶復(fù)合物 酶的必需基團酶的必需基團(essent
3、ial group)-(essential group)-與酶的活性密與酶的活性密 切相關(guān)的基團切相關(guān)的基團 酶的活性中心酶的活性中心(active center)-(active center)-組成具有能與底組成具有能與底 物結(jié)合并起催化反應(yīng)的特定空間結(jié)構(gòu)區(qū)域物結(jié)合并起催化反應(yīng)的特定空間結(jié)構(gòu)區(qū)域第三頁,共55頁幻燈片(二)酶的催化作用機制(二)酶的催化作用機制酶主要通過與底物形成一種或多種中酶主要通過與底物形成一種或多種中 間復(fù)合物來降低反應(yīng)的活化能。間復(fù)合物來降低反應(yīng)的活化能。 在酶促反應(yīng)中,酶與底物結(jié)合時,底物在酶促反應(yīng)中,酶與底物結(jié)合時,底物首先和酶分子上的活性中心相結(jié)合,形成酶首先
4、和酶分子上的活性中心相結(jié)合,形成酶底物中間復(fù)合物(底物中間復(fù)合物(ESES),降低反應(yīng)的活),降低反應(yīng)的活化能,顯著提高了反應(yīng)速度?;埽@著提高了反應(yīng)速度。第四頁,共55頁幻燈片(三)酶的命名、分類與編號(三)酶的命名、分類與編號 酶的命名酶的命名-習(xí)慣命名法、系統(tǒng)命名法習(xí)慣命名法、系統(tǒng)命名法 酶的分類酶的分類-可分為六大類可分為六大類 氧化還原酶氧化還原酶(oxido-reductases)(oxido-reductases)、轉(zhuǎn)移酶、轉(zhuǎn)移酶(transferases)(transferases)、水解酶、水解酶(hydrolases)(hydrolases)、裂解酶、裂解酶( (或裂合酶
5、或裂合酶)(lyases)(lyases)、異構(gòu)酶、異構(gòu)酶(isomerases)(isomerases)、合成酶、合成酶( (或連接酶或連接酶)(synthetases)(synthetases或或ligases)ligases) 酶的編號酶的編號-用用4 4個數(shù)字加以系統(tǒng)編號個數(shù)字加以系統(tǒng)編號 第一個數(shù)字表示酶的類別,第二個表示亞類,第一個數(shù)字表示酶的類別,第二個表示亞類, 第三個表示亞第三個表示亞- -亞類,第四個表示酶的編號序數(shù)。亞類,第四個表示酶的編號序數(shù)。 酶的命名酶的命名-習(xí)慣命名法、系統(tǒng)命名法習(xí)慣命名法、系統(tǒng)命名法(四)酶分類與編號(四)酶分類與編號第五頁,共55頁幻燈片 習(xí)慣
6、用名習(xí)慣用名 英文縮寫英文縮寫 ECEC編號編號 系統(tǒng)名系統(tǒng)名乳酸脫氫酶乳酸脫氫酶 LDLD(LDHLDH) 1.1.1.27 L1.1.1.27 L乳酸:乳酸:NAD+NAD+氧化還原酶氧化還原酶單胺氧化酶單胺氧化酶 MAO 1.4.3.4 MAO 1.4.3.4 單胺:氧化還原酶單胺:氧化還原酶-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶谷氨酰轉(zhuǎn)移酶 -GT/GGT 2.3.2.2 -GT/GGT 2.3.2.2 -谷氨酰肽:氨基酸谷氨酰肽:氨基酸-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶谷氨酰轉(zhuǎn)移酶門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 AST 2.6.1.1 L-AST 2.6.1.1 L-門冬氨酸:門冬氨酸:-酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)
7、移酶(谷草轉(zhuǎn)氨酶)(谷草轉(zhuǎn)氨酶) (GOT)(GOT)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 ALT 2.6.1.2 L-ALT 2.6.1.2 L-丙氨酸:丙氨酸:-酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)(谷丙轉(zhuǎn)氨酶) (GPT)(GPT)肌酸激酶肌酸激酶 CK 2.7.3.2 CK 2.7.3.2 三磷酸腺苷:肌酸轉(zhuǎn)磷酸酶三磷酸腺苷:肌酸轉(zhuǎn)磷酸酶堿性磷酸酶堿性磷酸酶 ALP(AKP) 3.1.3.1 ALP(AKP) 3.1.3.1 正磷酸單酯磷酸水解酶正磷酸單酯磷酸水解酶臨床酶學(xué)分析中常用酶的名稱與編號臨床酶學(xué)分析中常用酶的名稱與編號第六頁,共55頁幻燈片二、同工酶的概念與特征二、
8、同工酶的概念與特征同工酶是指催化相同化學(xué)反應(yīng),但酶蛋白的同工酶是指催化相同化學(xué)反應(yīng),但酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。組酶。根據(jù)同工酶的來源和結(jié)構(gòu)不同,從基因角度根據(jù)同工酶的來源和結(jié)構(gòu)不同,從基因角度可將其分為單基因決定的同工酶、復(fù)等位基可將其分為單基因決定的同工酶、復(fù)等位基因同工酶、多基因決定的同工酶和修飾同工因同工酶、多基因決定的同工酶和修飾同工酶四類。酶四類。 第七頁,共55頁幻燈片第八頁,共55頁幻燈片三、工具酶三、工具酶通常把酶學(xué)分析中作為試劑用于測定化通常把酶學(xué)分析中作為試劑用于測定化合物濃度或酶活性濃度的酶稱為工具酶。
9、合物濃度或酶活性濃度的酶稱為工具酶。常用工具酶多為氧化還原酶類。常用工具酶多為氧化還原酶類。 第九頁,共55頁幻燈片1 1偶聯(lián)偶聯(lián)H H2 2O O2 2的工具酶及其指示反應(yīng)的工具酶及其指示反應(yīng) 利用葡萄糖氧化酶等工具酶使相應(yīng)底物被氧化生成利用葡萄糖氧化酶等工具酶使相應(yīng)底物被氧化生成H H2 2O O2 2。在。在PODPOD的直接催化下,的直接催化下,H H2 2O O2 2氧化芳香族胺色素原氧化芳香族胺色素原生成有色的色素生成有色的色素 , ,再進行比色測定。再進行比色測定。 2 2NAD(P)+NAD(P)+或或NAD(P)HNAD(P)H偶聯(lián)的脫氫酶及其指示反應(yīng)偶聯(lián)的脫氫酶及其指示反應(yīng)
10、 作為工具酶的脫氫酶如作為工具酶的脫氫酶如LDLD將底物的氫原子去除后傳遞將底物的氫原子去除后傳遞給給NAD(P)+NAD(P)+而形成而形成NAD(P)HNAD(P)H。因。因NAD(P)HNAD(P)H在在340nm340nm有特有特征性光吸收,可借此用分光光度法進行檢測。征性光吸收,可借此用分光光度法進行檢測。 (一)工具酶參與的指示反應(yīng)(一)工具酶參與的指示反應(yīng) 第十頁,共55頁幻燈片第十一頁,共55頁幻燈片(二)酶循環(huán)法(二)酶循環(huán)法 (405nm405nm)第十二頁,共55頁幻燈片(三)代謝物濃度的酶法測定技術(shù)(三)代謝物濃度的酶法測定技術(shù) 直接法直接法 1 1終點法終點法 酶偶聯(lián)
11、法酶偶聯(lián)法 2 2動力學(xué)法動力學(xué)法 第十三頁,共55頁幻燈片第二節(jié)第二節(jié) 酶測定技術(shù)酶測定技術(shù)酶活性測定主要利用酶有加速化學(xué)反酶活性測定主要利用酶有加速化學(xué)反應(yīng)(催化)的特性,通過測定被加速應(yīng)(催化)的特性,通過測定被加速化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速率,根據(jù)酶促反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速率,根據(jù)酶促反應(yīng)中底物的減少量或產(chǎn)物的生成量來計中底物的減少量或產(chǎn)物的生成量來計算酶活性濃度的高低。算酶活性濃度的高低。 第十四頁,共55頁幻燈片酶促反應(yīng)動力學(xué)酶促反應(yīng)動力學(xué) 酶促反應(yīng)酶促反應(yīng) 第十五頁,共55頁幻燈片 酶促反應(yīng)進程酶促反應(yīng)進程第十六頁,共55頁幻燈片一、酶活性測定一、酶活性測定 (一)定時法測定酶活性(一)定時
12、法測定酶活性 終點法終點法是在酶促反應(yīng)是在酶促反應(yīng)平衡期(平衡期(SS或或PP不變)不變)任何一點進行測定,故不任何一點進行測定,故不需終止反應(yīng)。需終止反應(yīng)。 第十七頁,共55頁幻燈片1 1直接法直接法 是在不終止酶促反應(yīng)條件下,直接通過測是在不終止酶促反應(yīng)條件下,直接通過測定反應(yīng)體系中底物或產(chǎn)物理化特性的變化定反應(yīng)體系中底物或產(chǎn)物理化特性的變化如吸光度、熒光、旋光性、如吸光度、熒光、旋光性、pHpH、電導(dǎo)率、電導(dǎo)率、粘度等,從而計算出酶活性濃度。、粘度等,從而計算出酶活性濃度。 2 2間接法間接法 在原反應(yīng)體系中加入另一些酶試劑,所在原反應(yīng)體系中加入另一些酶試劑,所進行的酶促反應(yīng)和被測酶反應(yīng)
13、偶聯(lián)起來進行的酶促反應(yīng)和被測酶反應(yīng)偶聯(lián)起來。 連續(xù)測定酶反應(yīng)過程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時間變連續(xù)測定酶反應(yīng)過程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時間變化的多點數(shù)據(jù),求出酶反應(yīng)初速度,間接計算酶活性濃度的化的多點數(shù)據(jù),求出酶反應(yīng)初速度,間接計算酶活性濃度的方法。方法。 (二)連續(xù)監(jiān)測法測定酶活性(二)連續(xù)監(jiān)測法測定酶活性 第十八頁,共55頁幻燈片酶偶聯(lián)反應(yīng)酶偶聯(lián)反應(yīng) A B C DA B C D 酶學(xué)分析中作為試劑用于測定酶學(xué)分析中作為試劑用于測定化合物濃度或酶活性濃度的酶化合物濃度或酶活性濃度的酶 EiEi指示酶指示酶EaEa輔助酶輔助酶ExExEiEiEaEa工具酶工具酶第十九頁,共55頁幻
14、燈片L-L-丙氨酸丙氨酸 -酮戊二酸酮戊二酸 -丙酮酸丙酮酸 L-L-谷氨酸谷氨酸丙酮酸丙酮酸 NADH H+ 乳酸乳酸 NAD+ALT(樣品)(樣品)LD(試劑)(試劑)酶耦聯(lián)法測定酶耦聯(lián)法測定ALTALT340nmA/min-酮酸酮酸標(biāo)本中標(biāo)本中GLDH標(biāo)本中標(biāo)本中試劑試劑1試劑試劑2第二十頁,共55頁幻燈片第二十一頁,共55頁幻燈片酶耦聯(lián)法測定舉例酶耦聯(lián)法測定舉例第二十二頁,共55頁幻燈片第二十三頁,共55頁幻燈片第二十四頁,共55頁幻燈片( (三三) )干擾因素干擾因素 1 1其他酶和物質(zhì)的干擾其他酶和物質(zhì)的干擾 2 2酶的污染酶的污染 3 3非酶反應(yīng)非酶反應(yīng) 4 4分析容器的污染分析
15、容器的污染 5 5沉淀形成沉淀形成 第二十五頁,共55頁幻燈片 (四)血清酶活性濃度測定條件的優(yōu)化(四)血清酶活性濃度測定條件的優(yōu)化 (1)(1)方法選擇方法選擇 (2)(2)儀器和設(shè)備儀器和設(shè)備 (3)(3)試劑試劑 (4)(4)儀器參數(shù)的設(shè)置儀器參數(shù)的設(shè)置 1 1方法類型方法類型 2 2波長波長 3 3樣品量與試劑量樣品量與試劑量 4. 4. 稀釋水量稀釋水量 5 5反應(yīng)時間反應(yīng)時間 6 6孵育時間孵育時間 7. 7. 延遲時間延遲時間 8. 8. 監(jiān)測時間監(jiān)測時間 9. 9. 試劑吸光度上、下試劑吸光度上、下 限限 10. 10. 底物耗盡限額底物耗盡限額 11. 11. 線性度線性度
16、12. 12. 試劑空試劑空 白速率白速率 13. 13. 線性范圍線性范圍 14. 14. 計算因子計算因子F F值值 ( (五五) )部分分析前因素對酶活性測定的干擾部分分析前因素對酶活性測定的干擾 1 1溶血溶血 2 2抗凝劑抗凝劑 3 3標(biāo)本儲存溫度標(biāo)本儲存溫度第二十六頁,共55頁幻燈片(六)酶活性濃度的單位(六)酶活性濃度的單位 1. 1. 酶活性單位酶活性單位 (1 1)慣用單位)慣用單位 (2 2)國際單位)國際單位-在特定的條件下,一分鐘內(nèi)使底在特定的條件下,一分鐘內(nèi)使底 物轉(zhuǎn)變一微摩爾的酶量為一個國際單位。物轉(zhuǎn)變一微摩爾的酶量為一個國際單位。 (3 3)KatalKatal單
17、位單位-在規(guī)定條件下,每秒鐘催化轉(zhuǎn)化在規(guī)定條件下,每秒鐘催化轉(zhuǎn)化 一摩爾底物的酶量。一摩爾底物的酶量。1katal1katal606010106 6U U 第二十七頁,共55頁幻燈片 2. 2. 酶活性濃度單位酶活性濃度單位 以每單位體積所含的酶活性單位數(shù)表示。以每單位體積所含的酶活性單位數(shù)表示。 (1 1)表示方法)表示方法-U-UL L (2 2)酶活性濃度單位的計算)酶活性濃度單位的計算-用連續(xù)監(jiān)測法測用連續(xù)監(jiān)測法測 定時,根據(jù)摩爾消光系數(shù)計算。定時,根據(jù)摩爾消光系數(shù)計算。第二十八頁,共55頁幻燈片3. 3. 參考值和正常上限倍數(shù)的應(yīng)用參考值和正常上限倍數(shù)的應(yīng)用 (1 1)參考區(qū)間)參考
18、區(qū)間 (2 2)正常上限倍數(shù)的應(yīng)用)正常上限倍數(shù)的應(yīng)用 正常上限正常上限(upper limits of normal(upper limits of normal, ULN)ULN)倍數(shù)作為酶活性濃度的表示法,倍數(shù)作為酶活性濃度的表示法, 就是測定值除以正常上限值。就是測定值除以正常上限值。第二十九頁,共55頁幻燈片(七)系數(shù)(七)系數(shù)K K值的計算與應(yīng)用值的計算與應(yīng)用1. 系數(shù)系數(shù)K值的意義與設(shè)置值的意義與設(shè)置2. 系數(shù)系數(shù)K值的類型與計算值的類型與計算第三十頁,共55頁幻燈片(八)臨床酶學(xué)測定的標(biāo)準(zhǔn)化(八)臨床酶學(xué)測定的標(biāo)準(zhǔn)化 1. 1. 標(biāo)準(zhǔn)化途徑標(biāo)準(zhǔn)化途徑 1 1使用推薦方法和參考方
19、法使用推薦方法和參考方法 2 2使用公認(rèn)的酶校正物或酶參考物使用公認(rèn)的酶校正物或酶參考物 2. 2. 酶活性濃度測定的參考系統(tǒng)酶活性濃度測定的參考系統(tǒng) 1 1建立原級參考方法建立原級參考方法 2 2制備原級參考物制備原級參考物 3 3建立參考實驗室網(wǎng)絡(luò)建立參考實驗室網(wǎng)絡(luò)第三十一頁,共55頁幻燈片(一)測定原理(一)測定原理(二)免疫化學(xué)測定的優(yōu)缺點(二)免疫化學(xué)測定的優(yōu)缺點 優(yōu)點主要有:靈敏度高特異性高優(yōu)點主要有:靈敏度高特異性高 能用于一些不表現(xiàn)酶活性的酶蛋白能用于一些不表現(xiàn)酶活性的酶蛋白 特別適用于同工酶的測定特別適用于同工酶的測定 局限性主要有:制備足夠量的提純酶作為抗原和局限性主要有:
20、制備足夠量的提純酶作為抗原和 具有免疫化學(xué)性質(zhì)的抗血清較困難具有免疫化學(xué)性質(zhì)的抗血清較困難 測定步驟多,操作繁瑣測定步驟多,操作繁瑣 測定成本高測定成本高二、酶質(zhì)量測定二、酶質(zhì)量測定第三十二頁,共55頁幻燈片三、同工酶檢測三、同工酶檢測 第三十三頁,共55頁幻燈片 ( (一一) )電泳法電泳法-瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰 胺凝膠電泳、等電聚焦電泳、胺凝膠電泳、等電聚焦電泳、 毛細管電泳毛細管電泳 用電泳法進行同工酶分析時,如顯示的用電泳法進行同工酶分析時,如顯示的 區(qū)帶數(shù)與同工酶數(shù)不一致時,要特別注意區(qū)帶數(shù)與同工酶數(shù)不一致時,要特別注意 巨分子酶的存在。巨分子酶的存在。
21、( (二二) )層析法層析法第三十四頁,共55頁幻燈片血血 清清 LD LD 電電 泳泳 圖圖 譜譜 分分 析析第三十五頁,共55頁幻燈片正常和病理狀況時血清正常和病理狀況時血清CK同工酶譜同工酶譜第三十六頁,共55頁幻燈片( (三三) )免疫分析法免疫分析法 免疫抑制法免疫抑制法 利用同工酶的一種亞基與相應(yīng)的抗利用同工酶的一種亞基與相應(yīng)的抗體結(jié)合后,酶活性受到抑制,測定加與不加抗體前后體結(jié)合后,酶活性受到抑制,測定加與不加抗體前后樣品中酶活性的變化,可以計算出該型同工酶的活性。樣品中酶活性的變化,可以計算出該型同工酶的活性。 不加抗不加抗CK-MMCK-MM血清時樣品的血清時樣品的CKCK活
22、性:活性:CK-MMCK-MM和和CK-MBCK-MB活性;活性; 加入抗加入抗CK-MMCK-MM血清時樣品的血清時樣品的CKCK活性:活性:5050CK-MBCK-MB的活性;的活性; 加入抗加入抗CK-MMCK-MM血清時樣品的血清時樣品的CKCK活性活性2 2:CK-MBCK-MB活性;活性; 所測所測CK-MMCK-MM和和CK-MBCK-MB之總活性之總活性CK-MBCK-MB活性活性CK-MMCK-MM活性。活性。第三十七頁,共55頁幻燈片 ( (四四) )動力學(xué)分析法動力學(xué)分析法 1 1底物特異性分析法底物特異性分析法 2 2抑制劑分析法抑制劑分析法 3 3pHpH分析法分析法
23、 4 4熱失活分析法熱失活分析法 ( (五五) )蛋白酶水解法蛋白酶水解法第三十八頁,共55頁幻燈片第三節(jié)第三節(jié) 常用酶及同工酶測定的臨床應(yīng)用常用酶及同工酶測定的臨床應(yīng)用 一、血清酶一、血清酶血清酶活性升高的原因:血清酶活性升高的原因:組織器官受損造成細胞破壞或細胞膜通透性增高,組織器官受損造成細胞破壞或細胞膜通透性增高,細胞內(nèi)的某些酶大量釋放入血;細胞內(nèi)的某些酶大量釋放入血;細胞的轉(zhuǎn)換率增高或細胞的增殖加快,其特異細胞的轉(zhuǎn)換率增高或細胞的增殖加快,其特異的標(biāo)志酶釋放入血;的標(biāo)志酶釋放入血;細胞內(nèi)酶的合成或誘導(dǎo)增強;細胞內(nèi)酶的合成或誘導(dǎo)增強;酶的清除受阻。酶的清除受阻。第三十九頁,共55頁幻燈
24、片1 1、血清酶的來源、血清酶的來源 (1 1)血漿特異酶)血漿特異酶 (2 2)非血漿特異酶)非血漿特異酶 外分泌酶外分泌酶 細細胞酶胞酶2 2、血清酶的去路、血清酶的去路 (1 1)血清酶的半壽期)血清酶的半壽期 (2 2)血清酶的失活和排泄)血清酶的失活和排泄(一)血清酶的來源與去路(一)血清酶的來源與去路 第四十頁,共55頁幻燈片(二)血清酶的生理差異(二)血清酶的生理差異 1 1性別性別 2 2年齡年齡 3 3進食進食 4 4運動運動 5 5妊娠妊娠 6 6其他其他第四十一頁,共55頁幻燈片 常用的酶譜:常用的酶譜:(1)(1)心肌酶譜心肌酶譜-ASTAST、LDLD、CKCK、CK
25、-MBCK-MB、CK-CK- MB MB亞型或亞型或CK-MMCK-MM亞型亞型(2)(2)肌酶譜肌酶譜-LDLD、ASTAST及其同工酶、及其同工酶、CK-MMCK-MM亞型亞型(3)(3)肝酶譜肝酶譜-ALTALT、LDLD、-GT-GT、ALPALP、ChEChE、MAOMAO(4)(4)腫瘤酶譜腫瘤酶譜-ACPACP及其同工酶、及其同工酶、ALPALP及其同工酶、及其同工酶、 -GT-GT及其同工酶、及其同工酶、AFUAFU、AMYAMY及其同工酶、及其同工酶、LPSLPS(5)(5)胰酶譜胰酶譜-AMYAMY及其同工酶、及其同工酶、LPSLPS、彈力蛋白酶、彈力蛋白酶-1-1、 磷
26、脂酶磷脂酶A2A2(三)血清酶的臨床應(yīng)用(三)血清酶的臨床應(yīng)用 第四十二頁,共55頁幻燈片第四十三頁,共55頁幻燈片二、尿液酶二、尿液酶三、漿膜腔積液酶三、漿膜腔積液酶 四、腦脊液酶四、腦脊液酶 第四十四頁,共55頁幻燈片五、同工酶的診斷價值五、同工酶的診斷價值 LDLD同工酶同工酶心肌梗死、肝功能損傷和惡性腫瘤心肌梗死、肝功能損傷和惡性腫瘤 CKCK同工酶同工酶心肌梗死、肌肉疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病心肌梗死、肌肉疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病 ASTAST同工酶同工酶肝臟、心肌等細胞損傷程度的判斷肝臟、心肌等細胞損傷程度的判斷 GPGP同工酶同工酶急性心肌梗死急性心肌梗死 ARSARS同工酶同工酶膀胱癌膀胱癌
27、 ALDALD同工酶同工酶肝臟疾病、心肌梗死、神經(jīng)肌肉系肝臟疾病、心肌梗死、神經(jīng)肌肉系 統(tǒng)疾病和惡性腫瘤統(tǒng)疾病和惡性腫瘤 -GT-GT同工酶同工酶肝臟占位性病變肝臟占位性病變 AMSAMS同工酶同工酶急性胰腺炎、腮腺炎急性胰腺炎、腮腺炎 ALPALP同工酶同工酶肝膽疾病、骨骼疾病肝膽疾病、骨骼疾病 ACPACP同工酶同工酶前列腺疾病前列腺疾病 GST GST 同工酶同工酶肝臟疾病、肺癌肝臟疾病、肺癌 第四十五頁,共55頁幻燈片1 1、轉(zhuǎn)氨酶及其同工酶、轉(zhuǎn)氨酶及其同工酶DeRitisDeRitis比值(比值(ASTASTALTALT)對于急、慢性肝炎的診對于急、慢性肝炎的診 斷、鑒別診斷以及判斷
28、轉(zhuǎn)歸也有特別價值。急斷、鑒別診斷以及判斷轉(zhuǎn)歸也有特別價值。急 性肝炎時比值性肝炎時比值1 1,肝硬化時比值,肝硬化時比值2 2,肝癌時,肝癌時 比值比值3 3?!懊改懛蛛x酶膽分離”現(xiàn)象現(xiàn)象重癥肝炎時由于大量肝細胞壞死,重癥肝炎時由于大量肝細胞壞死, 血中血中ALTALT逐漸下降,而膽紅素卻進行性升高,常逐漸下降,而膽紅素卻進行性升高,常 是肝壞死的前兆。是肝壞死的前兆。第四十六頁,共55頁幻燈片2 2、-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶及其同工酶谷氨酰轉(zhuǎn)移酶及其同工酶-GT-GT同工酶分為同工酶分為-GT-GT1 1、-GT-GT2 2、-GT-GT3 3和和-GT-GT4 4四種,正常人只見四種,正常人只見-G
29、T-GT2 2和和-GT-GT3 3。重癥肝膽疾病。重癥肝膽疾病和肝癌時常有和肝癌時常有-GT-GT1 1出現(xiàn),乙醇性肝壞死和膽總管出現(xiàn),乙醇性肝壞死和膽總管結(jié)石時常有結(jié)石時常有-GT-GT2 2增加,增加,-GT-GT4 4與膽紅素增高密切相關(guān)。與膽紅素增高密切相關(guān)。第四十七頁,共55頁幻燈片3 3、肌酸激酶及其同工酶和亞型、肌酸激酶及其同工酶和亞型 在細胞質(zhì)內(nèi)存在在細胞質(zhì)內(nèi)存在3 3種同工酶,即種同工酶,即CK-BB(CKCK-BB(CK1 1) ),CK-MB(CKCK-MB(CK2 2) )和和CK-MM(CKCK-MM(CK3 3) )。在細胞線粒體內(nèi)還存在。在細胞線粒體內(nèi)還存在另一
30、另一CKCK同工酶,即所謂線粒體同工酶,即所謂線粒體CK(CK-Mt)CK(CK-Mt),也稱,也稱CKCK4 4。CK-MMCK-MM亞型測定對早期亞型測定對早期AMIAMI的檢出更為敏感,一的檢出更為敏感,一般以般以CK-MM3CK-MM3CK-MMlCK-MMl1 10 0作為診斷作為診斷 AMIAMI的標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)CK-MB2CK-MB2亞型在亞型在AMIAMI早期診斷和判斷有無再灌注上早期診斷和判斷有無再灌注上有很高的靈敏度和特異性。一般有很高的靈敏度和特異性。一般CK-MB21CK-MB219U9UL L或或CK-MB2CK-MB2CK-MB11CK-MB115 5可作為可作為AMI
31、AMI的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。第四十八頁,共55頁幻燈片4 4、乳酸脫氫酶及其同工酶、乳酸脫氫酶及其同工酶 AMIAMI時,時,LDLD由于分子量較大,在常用心肌酶中升高最遲,通常在梗死由于分子量較大,在常用心肌酶中升高最遲,通常在梗死8-8-18h18h升高,升高,48-144h48-144h達峰值,可顯著升高達峰值,可顯著升高(5ULN)(5ULN),因其半壽期較長,增高,因其半壽期較長,增高持續(xù)時間可達持續(xù)時間可達5-10d5-10d,此時其他酶已恢復(fù)正常,在亞急性心肌梗死診斷上,此時其他酶已恢復(fù)正常,在亞急性心肌梗死診斷上有一定價值。有一定價值。 測定血清及胸腹水中測定血清及胸
32、腹水中LDLD含量常用來鑒別其為漏出液抑或滲出液,若胸含量常用來鑒別其為漏出液抑或滲出液,若胸水水LDLD血清血清LDLD0.60.6、腹水、腹水LDLD血清血清LDLD0.40.4為滲出液,反之為漏出液。為滲出液,反之為漏出液。 骨骼肌和肝細胞損傷時常出現(xiàn)骨骼肌和肝細胞損傷時常出現(xiàn)LD5LD5LD4LD4。急性肝炎時。急性肝炎時LD1LD1和和LD2LD2相對下降,相對下降,LD5LD5升高;慢性肝炎時升高;慢性肝炎時LD5LD5升高,且升高,且LDlLDlLD3LD3;肝硬化時僅表現(xiàn);肝硬化時僅表現(xiàn)LD2LD2下降和下降和LD5LD5升高;肝癌升高;肝癌時時LD5LD5升高,但升高,但LD
33、1LD1LD3LD3。惡性腫瘤如轉(zhuǎn)移到肝臟往往伴有。惡性腫瘤如轉(zhuǎn)移到肝臟往往伴有LD4LD4、LD5LD5升高。升高。第四十九頁,共55頁幻燈片5 5、堿性磷酸酶及其同工酶、堿性磷酸酶及其同工酶 人體各組織人體各組織ALPALP同工酶可分為同工酶可分為3 3大類,即胎盤大類,即胎盤ALPALP、腸腸ALPALP和肝骨腎和肝骨腎ALPALP同工酶。同工酶。 肝硬化、膽石癥和腫瘤引起的膽汁淤積,肝硬化、膽石癥和腫瘤引起的膽汁淤積,ALPALP增高增高達達ULNULN的的520520倍。倍。9090以上的肝外膽道阻塞患者血清以上的肝外膽道阻塞患者血清ALPALP升高,升高的程度常和阻塞程度及病程成正比。升高,升高的程度常和阻塞程度及病程成正比。 胃腸道腫瘤;肺癌等惡性腫瘤時出現(xiàn)類腸型胃腸道腫瘤;肺癌等惡性腫瘤時出現(xiàn)類腸型ALPALP,稱為稱為KasaharaKasahara同工酶和類胎盤同工酶稱為同工酶和類胎盤同工酶稱為ReganRegan或或NagaoNagao同工酶。同工酶。第五十頁,共
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