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文檔簡介
1、生物現(xiàn)代生物科技專題訓(xùn)練11.(10分) 轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四種限制酶切割位點(diǎn)。請回答: (1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時,應(yīng)選用限制酶 ,對 進(jìn)行切割。 (2)培養(yǎng)板中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長,欲利用該培養(yǎng)篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞,應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有 ,作為標(biāo)記基因。(3)香蕉組織細(xì)胞具有 ,因此,可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的 。2. (10分)肺細(xì)胞中的let7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將
2、let-7基因?qū)朔伟┘?xì)胞實現(xiàn)表達(dá),發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。請回答:(1)進(jìn)行過程時,需用 酶切開載體以插入let-7基因。載體應(yīng)有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動let-7基因轉(zhuǎn)錄,該部位稱為 。(2)進(jìn)行過程時,需用 酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞,以利于傳代培養(yǎng)。(3)研究發(fā)現(xiàn),如let-7基因能影響癌基因RAS的表達(dá),其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析,可從細(xì)胞中提取 進(jìn)行分子雜交,以直接檢測let-7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制,可能是由于細(xì)胞中 (RASmRNARAS蛋白質(zhì))含最減少引起的。3(10分)紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一
3、種糖蛋白,可用于治逆子療腎衰性貪血等疾病。由于天然EPO來源極為有限,目前臨訂、床上使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胸生成素(rhEPO),其簡要生產(chǎn)流程如右圖。請回答:(1)圖中所指的是 技術(shù)。(2)圖中所指的物質(zhì)是 ,所指的物質(zhì)是 。(3)培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時,為便于清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害,應(yīng)定其更換 。(4)檢測rhEPO的體個活性需要抗rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的 細(xì)胞,可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓癌細(xì)胞融合而成。4.(10分)I型糖尿病是因胰島B細(xì)胞受損而導(dǎo)致的疾病??茖W(xué)家正在研究利用胚胎干細(xì)胞技術(shù)來治
4、療此病。K$S5*U.CO¥M(1)此項研究的基本原理是:胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的 ,即可以分化為成年個體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞的能力。(3)此項研究的基本思路是:通過核移植技術(shù),將患者的 移入到 的卵(母)細(xì)胞中,然后放人發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)。幾天后,從胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離出胚胎干細(xì)胞,再將這些細(xì)胞誘導(dǎo)定向分化成 細(xì)胞后移植到患者體內(nèi),以達(dá)到治療目的。(3)誘導(dǎo)定向分化的方法之一是:將控制胰腺發(fā)育的相關(guān)基因轉(zhuǎn)入胚胎干細(xì)胞,可采用 技術(shù)來檢測目的基因是否已插入細(xì)胞DNA中。5.(10分)一對表現(xiàn)型正常的夫婦,生了一個鐮刀型細(xì)胞貧血癥(常染色體隱性遺傳?。┗純?。在他們欲生育第二胎時,發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵
5、塞,不能完成體內(nèi)受精。醫(yī)生為該夫婦實施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷,過程如右圖。請回答:(1)過程是指在體外進(jìn)行的 處理,從而使精子與卵子結(jié)合形成受精卵;過程稱為 。(2)在對胎兒進(jìn)行鐮刀型細(xì)胞貧血癥的產(chǎn)前基因診斷時,要先從羊水中的胎兒細(xì)胞提取物質(zhì) 進(jìn)行PCR擴(kuò)增。然后用Mst II對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行切割,產(chǎn)生多個片段的酶切產(chǎn)物。據(jù)此判斷,Mst II是一種 酶。(3)不同長度的酶切產(chǎn)物在電泳時移動的速率不同,形成不同的電泳條帶。該家庭成員的鐮刀型細(xì)胞貧血癥基因分析的電泳帶譜如,據(jù)此判斷該胎兒為 (正常/患者/攜帶者)。6 (10分) 胃癌是我國發(fā)生率很高的一種惡性疾病,制備抑制胃癌細(xì)胞增殖的單克隆抗
6、體對治療胃癌具有重要意義??刮赴﹩慰寺】贵w制備過程如下圖。(1)甲代表 細(xì)胞。 (2)誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞與甲融合,可用的誘導(dǎo)因素有滅活的病毒、 等(寫出兩種)。 (3)為篩選出丙,需將乙放人含有5CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱培養(yǎng),其中CO2的主要 作用是 。通過檢測細(xì)胞是否產(chǎn)生所需的專一抗體,篩選出丙,該過程中所選用的抗原是 。(4)在甲、丙及骨髓瘤細(xì)胞中,只有丙經(jīng)培養(yǎng)后,可獲得大量的抗胃癌單克隆抗體,原因是 。7(10分) 2009年2月6日,美國首次批準(zhǔn)了一種從轉(zhuǎn)基因山羊的乳汁中提取的抗血栓藥物上市。 請回答: (I)為了使乳汁中含有抗血栓藥物,需要獲取僅在_細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因的啟動子,與該藥
7、用蛋白基因等構(gòu)建基因表達(dá)載體,并用_技術(shù)將基因表達(dá)載體導(dǎo)人山羊的受精卵中,成功后,在胚胎發(fā)育的初期,通過_技術(shù)分析DNA進(jìn)行性別鑒定,選取能夠發(fā)育成母羊的胚胎繼續(xù)培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因山羊。 (2)科研人員通過以上過程獲得了所需的胚胎,可在胚胎發(fā)育的_階段采用_技術(shù)在體外獲得更多的胚胎。8 (10分) 1、(1)pst I和EcoR I 含抗病基因的DNA和質(zhì)粒 (2)抗卡那霉素基因 (3)全能性 脫分化、再分化2、(1)限制(或限制性核酸內(nèi)切) 啟動子 (2)胰蛋白 (3)RNA RAS蛋白3 (2)mRNA rhEPO (3)培養(yǎng)液 (4)雜交瘤4、(1)全能性 (2)體細(xì)胞核 去核 胰島(B) (3)分子雜交(或DNA分子雜交、DNA探針、基因探針)5、(1)精子獲能 胚胎移植(2)DNA 限制性核酸內(nèi)切(3)正常6、(1)B淋巴細(xì)胞 (2)聚乙二醇、離心、振動、電激等(任寫兩種) (3)維持培養(yǎng)液
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