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文檔簡介

1、 基因工程工具默寫1、限制性內(nèi)切酶特點(diǎn):識別 序列,切割 鍵。產(chǎn)生或。2、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體包括: 、 、 (最常用) 特點(diǎn):含有 和 切點(diǎn),并能在受體細(xì)胞中 。質(zhì)粒本質(zhì) 。3、目的基因與載體拼接時必須都用 酶切割,只要出現(xiàn) ,就能拼接起來。4、標(biāo)記基因的作用: 5投料運(yùn)載體用EcoR切割后產(chǎn)生的片段如下:(1)為使運(yùn)載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點(diǎn)是 。(2)EcoR酶識別序列 -基因工程步驟之目的基因的獲取默寫1、為了某蛋白質(zhì)的基因,在已知該蛋白質(zhì)氨基酸序列的基礎(chǔ)上,推測出丙中蛋白質(zhì)的 序列,據(jù)此可利用 方法

2、合成目的基因。獲得該蛋白質(zhì)的基因還可用 、 方法。2、基因組文庫與CDNA文庫相比具有 、遺傳信息含量比CDNA文庫 ,基因含量比CDNA文庫 。CDNA文庫由于沒有 ,所以CDNA文庫的基因可以轉(zhuǎn)移到 和 生物的細(xì)胞中,而基因組文庫的基因一般只能轉(zhuǎn)移到 生物的細(xì)胞中。3、PCR技術(shù)的全稱 原理 所需酶 。PCR過程中解鏈需 處理,而不需 酶。4、(2012浙江)天然的玫瑰沒有藍(lán)色花,這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B,而開藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B。現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰,下列操作正確的是( )A.提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA,再擴(kuò)增基因BB.利用限制

3、性核酸內(nèi)切酶從開藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC.利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D.將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌,然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞基因工程核心步驟之基因表達(dá)載體的構(gòu)建默寫1、基因工程中基因拼接的理論基礎(chǔ) 2、構(gòu)建基因表達(dá)載體的要件有: 。在目的基因首端有 子,其作用為 ;目的基因尾端有 子,其作用為 。3、目的基因和質(zhì)粒用同一種限制酶酶切后,由于 和 的 相同,用 接時會產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因的 的連接物(具體類型),此外還會出現(xiàn) 和 等問題。那么目的基因和質(zhì)粒分別用相同的 種限制酶酶切,就可以防止上述問題。(1)只使用EcoR,則質(zhì)粒和目的基因兩端的黏性末端相同,用連接酶

4、連接時會產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因 連接物,而利用 酶剪切時,質(zhì)粒和目的基因兩端的黏性末端 ,用DNA連接酶連接時不會產(chǎn)生自身連接物。(2)只使用EcoR,經(jīng)檢測,部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因不能正確表達(dá),其最可能的原因是 。-基因工程步驟之轉(zhuǎn)化默寫生物種類植物細(xì)胞動物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法 受體細(xì)胞 轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的 上農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞整合到受體細(xì)胞的 表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純?nèi)。?)顯微注射受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的動物Ca2+處理細(xì)胞 重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子外源基因在受體細(xì)胞表達(dá)的理論基礎(chǔ) ?;蚬こ滩襟E之目的基因的檢測和鑒定

5、默寫1、用 作基因探針,來檢測 和 。2、轉(zhuǎn)基因相當(dāng)于 基因,轉(zhuǎn)基因生物相當(dāng)于 子,野生型生物相當(dāng)于 子。(2007天津卷)在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作為標(biāo)記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答:(1)如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進(jìn)行檢測,D過程應(yīng)該用_作為探針。(5)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。將轉(zhuǎn)基因植株與_雜交,其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1:1。若該轉(zhuǎn)基因植株自交,則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為_。若將該轉(zhuǎn)基因植株的

6、花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng),則獲得的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占_%。-1、導(dǎo)入檢測 其方法 ;轉(zhuǎn)錄檢測 其方法 ;翻譯檢測 其方法 ;個體水平鑒定方法 2、蛋白質(zhì)工程的流程:預(yù)期 、設(shè)計(jì) 、推測 、合成 3、用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時,構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動子等,其中啟動子的作用是_。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時,常用_處理大腸桿菌,以利于表達(dá)載體進(jìn)入:為了檢測胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可用標(biāo)記的 片段作探針與mRNA雜交,該雜交技術(shù)稱為_ 。為了檢測胰島素基因轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成_,常用抗原-抗體雜交技術(shù)??傮w來說,胰島素基因的表達(dá)用 和 方法檢測。4、若用

7、限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是 末端,其產(chǎn)物長度為 。(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。 從雜合子中分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段,用限制酶SmaI完全切割,產(chǎn)物中共有 種不同長度的DNA片段。基因工程綜合小課堂小測1、(2009年天津卷改造)水稻種子中70的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外,是多種動物的抗?fàn)I養(yǎng)因子,同時,排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。(1)為從根本上解決水稻中的高植酸問題,可將植酸酶基因?qū)胨?,培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。據(jù)圖回答: 圖中基因組文庫_(

8、小于/等于/大于)cDNA文庫。 B過程需要的酶是_;A、C過程中_(可以/不可以)使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。 目的基因和除從構(gòu)建的文庫中分離外,還可以分別利用圖中_和_為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增,該過程中所用酶的顯著特點(diǎn)是_。(2)已獲得的轉(zhuǎn)植酸酶基因水稻品系植酸含量低,但易感病,下圖為選育低植酸抗病水稻品種的過程。圖中兩對相對性形狀分別由兩對基因控制,并獨(dú)立遺傳。 采用上圖育種過程,需從_代開始篩選,經(jīng)篩選淘汰后,在選留的植株中低植酸抗病純合體所占的比例是_。選留植株多代自交,經(jīng)篩選可獲得低植酸抗病性狀穩(wěn)定的品性。2、如圖是獲得抗蟲棉的技術(shù)流程示意圖??敲顾乜剐曰?kanr)常

9、作為標(biāo)記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下列敘述正確的是( )A.構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.愈傷組織的分化產(chǎn)生了不同基因型的植株C.卡那霉素抗性基因(kanr)中有該過程所利用的限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點(diǎn)D.抗蟲棉有性生殖后代能保持抗蟲性狀的穩(wěn)定遺傳動物細(xì)胞工程之動物細(xì)胞培養(yǎng)1、動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ) 2、.動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理 3、.將動物細(xì)胞分散成單個的方法:用 處理組織4、在培養(yǎng)瓶中生長的細(xì)胞由于在瓶壁上 ,當(dāng)細(xì)胞與細(xì)胞接觸時會出現(xiàn) 現(xiàn)象 ,則培養(yǎng)瓶壁上可形成 層細(xì)胞,為防止該現(xiàn)象出現(xiàn)采取 處理的方法。5、.動物細(xì)胞培養(yǎng)時,為防止

10、其他微生物的污染想培養(yǎng)液中加入 ,一般還要加入動物血清,其目的是 。此外,通入CO2目的是 。6、下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是A培養(yǎng)保留接觸抵制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程上多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變C二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行付代培養(yǎng)動物細(xì)胞工程之核移植(克隆動物)1、 核移植的原理: 2、 克隆動物的遺傳特性:大部分來自 少部分來自 3、 克隆動物的過程實(shí)際上應(yīng)用的生物技術(shù) 4、 利用未受精的卵細(xì)胞去核后作為受體,而不用普通的體細(xì)胞,主要原因是 5、隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們可以根據(jù)人類的需求來改造生物的性狀,在許多領(lǐng)域取得了

11、可喜的成果,如圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)人類血清白蛋白的圖解,根據(jù)圖示回答:(1)在此生物工程中涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)手段主要有:_(至少答出三個)。(2)如果的數(shù)量太少常用_來擴(kuò)增。在進(jìn)入之前要用_ (工具)來構(gòu)建基因表達(dá)載體,能實(shí)現(xiàn)進(jìn)入的常用方法是 (3)圖中一般經(jīng)_處理可以得到,從到的過程中一般利用未受精的卵細(xì)胞去核后作為受體,而不用普通的體細(xì)胞,主要原因是 (4)是生出的后代,那么的遺傳性狀和荷斯坦奶牛最相似,為什么?_。要實(shí)現(xiàn)批量生產(chǎn)血清白蛋白,則要求的性染色體組成是_。動物細(xì)胞工程之單克隆抗體制備1、單克隆抗體的制備過程:注入 分離注入小鼠體內(nèi)B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)選擇培養(yǎng)

12、細(xì)胞培養(yǎng)基體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)從腹水提取從培養(yǎng)液提取 2、抗體:一個B淋巴細(xì)胞只分泌 種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。3、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大 ,又能產(chǎn)生 。4、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn): 。 方法: 5、對于下面制備單克隆抗體過程示意圖,不正確的敘述是()A表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的B中的篩選是通過抗原、抗體反應(yīng)進(jìn)行的C促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo)D可以無限增殖6、2010年四川理綜卷某實(shí)驗(yàn)室做了如圖所示的實(shí)驗(yàn)研究, 下列相關(guān)敘述正確的是 ( )A.與纖維母細(xì)胞相比,過程形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較低B.過程是誘導(dǎo)干細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)

13、生穩(wěn)定性差異的過程C.每個Y細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體,故過程不需要用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選D.過程產(chǎn)生的單抗,不需細(xì)胞膜上載體蛋白的協(xié)助就能釋放到細(xì)胞外7應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)可以大量獲得針對甲型H1N1病毒的抗體,并可用于臨床治療,如圖表示制備該抗體的設(shè)想,請據(jù)圖回答下列問題:(1)在培育轉(zhuǎn)甲型H1N1病毒抗體基因牛的過程中,過程需要的工具酶是_,過程常用的方法是_。(2)轉(zhuǎn)甲型H1N1病毒抗體基因??赏ㄟ^分泌乳汁來生產(chǎn)甲型H1N1病毒抗體,在基因表達(dá)中,甲型H1N1病毒抗體基因的首端必須含有_,它是_識別和結(jié)合的位點(diǎn)。過程培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段,可以采用_技術(shù),培養(yǎng)出多頭相同的轉(zhuǎn)基因牛。(3)prG能激

14、發(fā)細(xì)胞不斷分裂,通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因可制備單克隆抗體,最可能是_細(xì)胞,代表的細(xì)胞具有_的特點(diǎn)。(4)制備單克隆抗體也可以用動物細(xì)胞融合技術(shù),與動物細(xì)胞融合過程不同,植物體細(xì)胞雜交在細(xì)胞融合之前要用_對細(xì)胞進(jìn)行處理,作用是除去_。胚胎工程1、克隆動物與試管動物認(rèn)識的誤區(qū)(1)誤區(qū)一:試管動物與克隆動物的產(chǎn)生都是無性生殖。糾正:試管動物的產(chǎn)生是 性生殖,克隆動物的產(chǎn)生是 性生殖。(2)誤區(qū)二:試管動物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體外進(jìn)行的,克隆動物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體內(nèi)進(jìn)行的。試管動物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體 進(jìn)行的,克隆動物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體 進(jìn)行的。糾正:試管動物(哺乳類)和克隆動物(哺乳類

15、)早期胚胎之前都是在體 進(jìn)行的,早期胚胎經(jīng)過胚胎移植之后是在體 進(jìn)行的。(3)誤區(qū)三:胚胎移植的優(yōu)勢是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力,因此胚胎移植的胚胎只能來自體內(nèi)受精的胚胎。糾正:胚胎移植的胚胎有三個來源:體內(nèi)正常受精產(chǎn)生的胚胎、核移植產(chǎn)生的重組細(xì)胞培養(yǎng)而來的胚胎、體外受精產(chǎn)生的早期胚胎。2.胚胎移植的培育流程以牛胚胎移植為例:第一步:對供、受體母牛進(jìn)行選擇,并用激素進(jìn)行 處理;第二步:用 激素對供體母牛做 處理;第三步:超數(shù)排卵的母牛發(fā)情后,選擇同種優(yōu)良的公牛進(jìn)行配種或人工授精;第四步:胚胎的收集(沖卵);第五步:沖卵后,對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查,這時的胚胎應(yīng)發(fā)育到 胚或 胚階段,并培養(yǎng)或保存;

16、第六步:胚胎的移植;第七步:對受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查;第八步:受體母牛產(chǎn)下胚胎移植的犢牛。3.分清兩個標(biāo)志受精的標(biāo)志和受精完成的標(biāo)志(1)受精標(biāo)志:在 和 之間觀察到 個極體。(2)受精完成的標(biāo)志:雌、雄原核的 。4.卵子和精子能夠受精的前提條件比較(1)成熟的精子并不代表具有受精能力,必須 后方才具備受精能力。(2)動物排出的卵子并未成熟且成熟程度因動物種類不同而異,但只有達(dá)到 期時,才具備與精子受精的能力5.胚胎分割、胚胎移植易混淆的問題(1)材料選擇:發(fā)育良好、形態(tài)正常的 胚或 胚。(2)囊胚期分割要求: 均等分割,以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。6.從細(xì)胞識別和生理上來分析兩

17、個保障(1)同種生物精卵結(jié)合的保障卵細(xì)胞透明帶上存在精子的特異性識別的受體,只允許同種生物的精子與卵細(xì)胞結(jié)合。(2)防止多精入卵的保障 反應(yīng)。 封閉作用。7.胚胎發(fā)育誤區(qū)誤區(qū)一 受精卵進(jìn)行細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化,形成桑椹胚。糾正:受精卵只進(jìn)行細(xì)胞 ,形成桑椹胚。原因:細(xì)胞分化開始于 胚 ,桑椹胚的形成 (有/沒有)經(jīng)過細(xì)胞分化。誤區(qū)二 囊胚細(xì)胞開始分化,組成囊胚的細(xì)胞沒有全能性。糾正:囊胚細(xì)胞開始分化,但囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有全能性。原因:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的 ,具有全能性。誤區(qū)三 卵裂期是指早期胚胎發(fā)育的時期。糾正:卵裂期是早期胚胎發(fā)育的一部分。原因:原腸胚屬于早期胚胎,但不屬于卵裂期。誤區(qū)

18、四 胚胎移植以及胚胎分割移植的操作對象是早期胚胎。糾正:胚胎移植以及胚胎分割移植的操作對象是 。原因:早期胚胎包括桑椹胚、囊胚、原腸胚。原腸胚不適于胚胎移植和胚胎分割移植。8、胚胎干細(xì)胞(1)、哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱 或 細(xì)胞,來源于 中分離出來。(2)、具有胚胎細(xì)胞的特性,在形態(tài)上表現(xiàn)為 小, 大, 明顯;在功能上,具有 ,可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)也中培養(yǎng),(只能、可以)增殖而 (分化、不分化),可進(jìn)行冷凍保存,也可進(jìn)行遺傳改造。8(7分)為了加快優(yōu)良種牛的繁殖速度,科學(xué)家采用了以下兩種方法:請根據(jù)圖示信息回答:(1)試管牛和克隆牛的

19、培育過程中均用到的細(xì)胞工程技術(shù)有_。(2)用來促進(jìn)B牛多排卵的激素可能是_分泌的促性腺激素。E牛的性別是_。(3)產(chǎn)生F牛的理論依據(jù)是_,其生殖方式屬于_。(4)要培育高產(chǎn)奶率的轉(zhuǎn)基因牛,則目的基因的受體細(xì)胞一般是_,轉(zhuǎn)基因牛乳腺細(xì)胞中含有較多的參與分泌物加工的_等細(xì)胞器。(10海南卷)26(18分)選修模塊3:現(xiàn)代生物科技專題請回答胚胎工程和基因工程方面的問題:(1)應(yīng)用胚胎工程技術(shù)可以培育出“試管?!薄T嚬芘5呐嘤杞?jīng)過體外受精、以及在母體中發(fā)育和產(chǎn)出等過程。(2)在“試管?!钡呐嘤^程中,要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合,需要對精子進(jìn)行處理,使其。另外,培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次

20、分裂的中期,該時期在顯微鏡下可觀察到次級卵母細(xì)胞和。(3)通常奶牛每次排出一枚卵母細(xì)胞,采用激素處理可使其一次排出多枚卵母細(xì)胞,常使用的激素是。(4)利用基因工程可以獲得轉(zhuǎn)基因牛,從而改良奶牛的某些性狀?;蚬こ痰乃膫€基本操作步驟是、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、和。若要獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素,則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括:某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動子、和復(fù)制原點(diǎn)等。將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞所采用的方法是(顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法),為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛,該基因表達(dá)載體應(yīng)導(dǎo)入的受體細(xì)胞是(受精卵、乳腺細(xì)胞)。(2010山東高考理綜)35. 【生物-現(xiàn)代生物科技專題

21、】胚胎工程是一項(xiàng)綜合性的動物繁育技術(shù),可在畜牧業(yè)和制藥業(yè)等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。下圖是通過胚胎工程培育試管牛的過程。(1)從良種母牛采集的卵母細(xì)胞,都需要進(jìn)行體外培養(yǎng),其目的是_;從良種公牛采集的精子需_后才能進(jìn)行受精作用。(2)在體外培養(yǎng)受精卵時,除了給予一定量的O2以維持細(xì)胞呼吸外,還需要提供_氣體以維持_。(3)圖中過程A稱為_,它在胚胎工程中的意義在于_。(4)研制能夠產(chǎn)生人類白細(xì)胞介素的牛乳腺生物反應(yīng)器,需將目的的基因?qū)肱J芫?,最常用的?dǎo)入方法是_;獲得轉(zhuǎn)基因母牛后,如果_即說明目的基因已經(jīng)表達(dá)。B題(14分)一對健康夫婦生下一男嬰,一歲時腦出血死亡,二年后女方懷孕6個月時,經(jīng)羊水及臍帶血診斷為男孩且患血友病,遂引產(chǎn)。于是夫婦倆到廣州中山醫(yī)附屬一院做試管嬰兒。醫(yī)生培養(yǎng)7個活體胚胎,抽取每個胚胎1-2個細(xì)胞檢查后,選兩個胚胎移植,最后一個移植成功,出生了一健康女嬰,她是我國第三代試管嬰兒。請回答: (1)試管嬰兒技術(shù)作為現(xiàn)代生物技術(shù)和母親正常懷孕生產(chǎn)的過程

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