丙磺舒對(duì)家兔體內(nèi)頭孢克羅的藥動(dòng)學(xué)影響

1、丙磺舒對(duì)家兔體內(nèi)頭孢克羅的藥動(dòng)學(xué)影響         【摘要】【關(guān)鍵詞】  丙磺舒 頭孢克羅 藥動(dòng)學(xué) HPLC 家兔   Effects of probenecid on the pharmacokinetics of cefaclor in rabbits   ABSTRACT  Objective  To investigate effects of probenecid (PBC) at different doses on the pha

2、rmacokinetics of cefaclor (CCL) and to explore a suitable proportion of their single coadministration.  Methods Fortytwo rabbits were randomly divided into 7 groups: CCL 50 mg/kg, alone CCL 50 mg/kg combined with PBC 50 mg/kg, CCL 50 mg/kg combined with PBC 100 mg/kg, CCL 50 mg/kg combined with

3、 PBC 200 mg/kg, CCL 50 mg/kg combined with PBC 300 mg/kg, CCL 50 mg/kg combined with PBC 400 mg/kg, CCL 25 mg/kg combined with PBC 100 mg/kg. Both drugs were given through intragastric administration, but CCL was 30 min later than PBC. Blood samples were drawn from thigh vein at 0, 10, 20, 30, 45, 6

4、0, 90, 120, 180, 240 and 360 min after CCL administration. Plasma CCL concentration were determined by HPLC method, and the pharmacokinetic parameters were calculated with 3P87 programme.  Results  Concentrationtime course of CCL in plasma fitted a onecompartment open model. Within the ran

5、ge of experimental dosages, continuous prolongation in t1/2ke and MRT were observed, which showed a dosedependent relationship with the increase dosage of PBC the values of r were 0.9876 and 0.9973, respectively; t1/2 and tmax prolong when higher doses of PBC  (   ) were used and show

6、ed significant difference compared with I (CCL 50 mg/kg administration alone) (P0.05 and P0.01, respectively). cmax and AUC of CCL increased and CL/F decreased continuously, and the standard curve was linear over the concentration range of 50 to 200 mg/kg of PBC (the values of r 0.9918, 9.9952 and 0

7、.9036, respectively). Honever, cmax decreased (r=0.9866) when doses of PBC were higher than 200 mg/kg, and AUC and CL/F of CCL maintained at the levels of those with PBC 200 1CCL was able to reach an ideal level in plasma when CCL 50 mg/kg was coadministrated with PBC 200 mg/kg. With such a proporti

8、on, when half the dosage of CCL combined PBC were used, a similar plasma level of CCL could be produced as CCL 50 mg/kg used alone.  Conclusions  Coadministration with PBC cluld markedly alter the pharmacokinetics of CCL, and the effects on every parameter were closely dependent on doses o

9、f PBC. Values of cmax, AUC and  t1/2ke of CCL increase or prolong by coadministrating with proper dosage of PBC, and the efficacy of CCL can be increased; but overdose of PBC results in the decrease in cmax of CCL, and it might be for PBC interfere with the absorption of CCL through gastrointes

10、tinal tract. The result of this study suggests that the proportion of CCL combined with PBC in single close is 1 to 4.   KEY WORDS  Probenecid;  Cefaclor;  Pharmacokinetics;  HPLC;  Rabbit   丙磺舒(probenecid，PBC)為一促尿酸排泄藥，是許多藥物經(jīng)腎小管主動(dòng)排泌的抑制劑1。自Beyer發(fā)現(xiàn)PBC可提高青霉素

11、的血藥水平之后，相繼發(fā)現(xiàn)丙磺舒對(duì)多種內(nèi)酰胺類抗生素的藥動(dòng)學(xué)均有影響，如延緩后者的排泄，提高血藥濃度，延長(zhǎng)半衰期等。臨床上PBC可作為某些內(nèi)酰胺類抗生素的輔助劑，以提高抗生素的血藥濃度，延長(zhǎng)其抗菌作用時(shí)間2，3。頭孢克羅(cefaclor，CCL)系第二代頭孢菌素，主要以原形經(jīng)腎小管排泌清除4。本研究以家兔為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，觀察不同劑量PBC對(duì)CCL的藥動(dòng)學(xué)影響，并探索兩者單次聯(lián)用時(shí)的最佳比例。   1  材料與方法   1.1  藥品與試劑   CCL標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供)，CCL膠囊(每粒250mg，山東

12、淄博新達(dá)制藥有限公司，批號(hào)010807)，PBC片(每片250mg，上海集成藥廠，批號(hào)20000803)，乙腈、高氯酸、冰乙酸、三乙胺均為分析純。   1.2  動(dòng)物   健康青紫蘭家兔，體重(2.2±0.3)kg，兔齡6個(gè)月(皖南醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，實(shí)驗(yàn)前12h禁食、不禁水，實(shí)驗(yàn)后4h內(nèi)禁食、禁水。室溫：(20±3)，濕度：(65±5)%。   1.3  儀器與色譜條件   美國(guó)惠普公司HP1100高效液相色譜儀(G1312A二元泵、G1316A柱溫箱、G1

13、314A紫外檢測(cè)器)，預(yù)柱：Zobax ODS 4.6mm×12.5mm，分析柱：Hypersil ODS 4mm×125mm，  m。流動(dòng)相：甲醇水冰乙酸(20800.4)。流速：1.0ml/min。紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：264nm。柱溫：30。   1.4  樣品處理   精確量取兔血漿0.2ml，加入6%(V/V)高氯酸0.20ml，旋渦混勻1min，3000r/min離心10min，取上清液20l進(jìn)樣。   1.5  標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制   制作精確稱取CCL標(biāo)準(zhǔn)品，以兔

14、空白血漿配制成0、0.25、0.5、1，5、10、20、50和100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列，按1.4項(xiàng)方法處理后進(jìn)樣。以血藥濃度(C)對(duì)峰面積(A)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。   1.6  實(shí)驗(yàn)步驟   家兔42只，隨機(jī)分7組，每組雌、雄各半。組PBC分別按0(等量0.5%的纖維素溶液)、50、100、200、300、400和100mg/kg溶入20ml 0.5%的纖維素溶液后灌胃給藥，0.5h后均以CCL 50mg/kg(組CCL為25mg/kg)灌胃給藥；各兔于灌胃結(jié)束后0、10、20、30、45、60、90、120、180、240和360min分別由股靜

15、脈取血0.8ml，即刻離心分離血漿，按1.4項(xiàng)方法測(cè)定CCL的血藥濃度。   1.8  數(shù)據(jù)處理   DAS軟件計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)5，數(shù)據(jù)以(±s)表示，組間比較用t檢驗(yàn)。   2  結(jié)果   2.1  標(biāo)準(zhǔn)曲線和色譜行為   A=9.306C+2.509  r=0.99998(n=5)   最低檢出濃度為0.1mg/L。   2.2  血藥濃度   見(jiàn)Tab.1，血藥濃度時(shí)間曲線

16、見(jiàn)Fig.1。            2.3  藥動(dòng)學(xué)   CCL的血藥濃度時(shí)間曲線符合一室開(kāi)放模型，各組藥動(dòng)學(xué)參數(shù)值見(jiàn)Tab.2。    3  討論   藥物的腎小管排泌為一主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，需要載體參與并消耗能量，存在競(jìng)爭(zhēng)及飽和現(xiàn)象6。腎近曲小管上存在兩個(gè)獨(dú)立的載體系統(tǒng)：有機(jī)陰離子系統(tǒng)(OATs)和有機(jī)陽(yáng)離子系統(tǒng)(OCTs)7。已證實(shí)頭孢菌素可經(jīng)由腎小管上皮細(xì)胞膜的OATs排泌。分子結(jié)構(gòu)中具氨基的口服頭孢菌

17、素類除由OATs排泌外，尚經(jīng)管腔膜上的OCTs排泌并經(jīng)雙肽轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)(DTs)重吸收8。CCL是一具有兩性離子的化合物，含有羧基和氨基，主要表現(xiàn)為陰離子性質(zhì)并經(jīng)小管OATs排泌。PBC亦為有機(jī)陰離子化合物，可與其它有機(jī)陰離子共同作用于腎小管上同一轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)而產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用，使后者排泌減少并導(dǎo)致后者的藥動(dòng)學(xué)變化9。本實(shí)驗(yàn)中，CCL聯(lián)用PBC后，其t1/2ke及MRT顯著延長(zhǎng)，CL/F漸次下降，且與PBC劑量呈依賴性。表明PBC確實(shí)可競(jìng)爭(zhēng)性抑制了CCL的OATs轉(zhuǎn)運(yùn)，降低了CCL的腎排泄，此結(jié)果與前人報(bào)道一致10。   PBC聯(lián)用對(duì)CCL血藥濃度的影響因PBC劑量不同而有明顯差

18、異。在本實(shí)驗(yàn)條件下，當(dāng)PBC聯(lián)用劑量為50、100和200mg/kg時(shí)，CCL血藥濃度呈劑量依賴性增高，這在藥物的吸收相即很明顯，在峰值及其后的消除相更顯著，CCL的cmax漸次升高，CL/F逐漸下降。這種現(xiàn)象可能與以下因素有關(guān)：PBC競(jìng)爭(zhēng)性抑制了CCL的OATs排泌，導(dǎo)致CCL血藥濃度的升高；PBC血漿蛋白結(jié)合率較高，一般為65%90%11，可競(jìng)爭(zhēng)性抑制CCL的血漿蛋白結(jié)合率，使血中游離CCL升高；已證實(shí)，PBC在體內(nèi)呈可飽和性消除，在一定的劑量范圍內(nèi)血藥濃度及血漿半衰期均呈劑量依賴性增高及延長(zhǎng)12，導(dǎo)致PBC對(duì)CCL的腎排泌抑制作用增強(qiáng)；有學(xué)者報(bào)道，PBC可減少肝臟及腦組織對(duì)一些內(nèi)酰胺類抗

19、生素的吸收和清除13，14，這亦可能導(dǎo)致我們所觀察的CCL血藥濃度升高。   本實(shí)驗(yàn)中當(dāng)PBC聯(lián)用劑量達(dá)300、400mg/kg時(shí)，CCL的血藥濃度反而下降，CCL的cmax較PBC為200mg/kg時(shí)明顯降低，而AUC及CL/F兩參數(shù)則基本穩(wěn)定在PBC聯(lián)用200mg/kg時(shí)的水平。這種現(xiàn)象尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，也難以用已知的原因做出解釋。從所得結(jié)果看，隨著PBC劑量加大，CCL的t1/2ka持續(xù)延長(zhǎng)，tmax亦漸滯后，提示PBC可能延緩或抑制了CCL的吸收。已有研究證實(shí)，頭孢菌素的腸道轉(zhuǎn)運(yùn)除被動(dòng)擴(kuò)散外，尚有OCTs、DTs、Pgp等參與介導(dǎo)1517，而PBC可作用于以上轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)

20、18。因此，我們推測(cè)大劑量聯(lián)用PBC時(shí)CCL的血藥濃度反降低，可能是因?yàn)榇藭r(shí)PBC抑制了CCL吸收所致。本研究中CCL的AUC在PBC聯(lián)用劑量高于200mg/kg后即不再增加，也支持我們的假設(shè)，確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究。另外，本研究中CCL的CL/F在PBC聯(lián)用劑量小于200mg/kg時(shí)呈降低趨勢(shì)，而在PBC大于200mg/kg時(shí)基本穩(wěn)定于一定水平，可能是由于此時(shí)PBC對(duì)CCL腎排泌的拮抗作用趨于飽和，使CCL的腎清除率達(dá)到最大值。至于Vd/F值在聯(lián)用大劑量PBC后降低，可能因?yàn)镻BC使CCL的腎排泄延緩、血漿蛋白結(jié)合率降低，導(dǎo)致血藥濃度升高所致，也不排除PBC通過(guò)其它環(huán)節(jié)影響了CCL的體內(nèi)分布

21、。尚應(yīng)說(shuō)明的是參數(shù)Vd/F中的F可為一變數(shù)，本研究中PBC可能改變CCL的吸收而影響CCL的F值，使Vd/F值產(chǎn)生變化。   我們的研究表明，只有當(dāng)PBC聯(lián)用劑量達(dá)到一定水平時(shí)才能明顯延長(zhǎng)CCL的t1/2ke，劑量過(guò)低無(wú)實(shí)際意義，劑量過(guò)大反使CCL的血藥水平下降。Overbosch等19在一項(xiàng)臨床研究中證實(shí)，PBC聯(lián)用劑量在2g/d時(shí)即可達(dá)到抑制芐青霉素腎小管排泄的最大效果，過(guò)大劑量并無(wú)意義，反會(huì)增大藥物不良反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)中，單次聯(lián)用時(shí)CCL 50mg/kg加PBC 200mg/kg較為合理，兩者劑量比為14。按此比例，將兩藥劑量均減半聯(lián)用，仍可使CCL的血藥濃度達(dá)到并超過(guò)單

22、用CCL 50mg/kg的水平，AUC和MRT值相近或增大，表明該比例較為理想。倘人體內(nèi)PBC對(duì)CCL有類似的作用，合理聯(lián)用PBC而減少CCL的用量則具有一定的臨床意義1，20。當(dāng)然，本研究只是理論上的探討，其實(shí)際意義有待實(shí)踐證實(shí)。CCL與PBC的t1/2差別較大，多次聯(lián)用及在人體聯(lián)用時(shí)結(jié)果如何，尚需深入研究。   誠(chéng)謝：孫瑞元教授、鄭青山博士及桂常青高級(jí)實(shí)驗(yàn)師的精心指導(dǎo)！【參考文獻(xiàn)】  1 Cunningham R F, Israili Z H, Dayton P G. Clinical Pharmacokinetics of probenecid J. Cli

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