禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗接種的操作方法對免疫效果的影響.docx

1、禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗接利S11操作方法對免疫效果的影響李惠蘭'，李鳳元'，吳洪濤'，李樹博2（1.遼寧省重大動物疫病應(yīng)急中心，遼寧沈陽110161;2.遼寧省動物疫病預(yù)防控制中心，遼寧沈陽110164）中圖分類號S852.5%文獻(xiàn)標(biāo)識碼B文章編號1672-9692（2010）09-0070-03：摘要用禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗（H5亞型）對20日齡非免疫海蘭褐蛋雞雛接種，試:5驗(yàn)1組用25ml滅菌生理鹽水稀釋500羽/瓶疫苗，采用翅內(nèi)側(cè)三角區(qū)翼膜垂直刺穿的方法接種；試§§驗(yàn)2組用10ml滅菌生理鹽水稀釋500羽/瓶疫苗，采用離翅根最近的關(guān)

2、節(jié)部位內(nèi)側(cè)斜刺的方法接-:種；試驗(yàn)3組用試驗(yàn)2組同濃度稀釋的疫苗，以試驗(yàn)1組相同的部位和接種方法接種；試驗(yàn)4組以試驗(yàn)t01組相同濃度的稀釋疫苗，以試驗(yàn)2組相同的部位和接種方法接種.結(jié)果：試驗(yàn)1組和試驗(yàn)3組接種2；14d后，用HI方法檢測禽流感抗體，100%達(dá)2，2，;試臉2組和試驗(yàn)4組，接種14d后，抗體檢測100%J5小于2。說明禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗接種操作的方法對免疫效果有顯著的影響。5J關(guān)鍵詞禽疽苗;接種操作；免疫效果I疫苗的免疫效果受多種因素的影響，如疫苗質(zhì)量、疫苗的保存與運(yùn)輸、疫苗的接種方法、被免疫動物的營養(yǎng)與健康狀況、飼養(yǎng)環(huán)境因素等都會影響疫苗的免疫效果。禽流感重組雞痘病毒

3、載體活疫苗的接種方法對免疫效果有顯著的影響。本試驗(yàn)就該疫苗接種的操作方法對疫苗免疫效果的影響進(jìn)行了探索。1試驗(yàn)材料1.1試驗(yàn)動物20日齡非免疫海蘭褐蛋雞雛90只，購自八家子養(yǎng)雞場。1.2疫苗禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗（H5亞型），批號20050619o1.3診斷液禽流感H5抗原，禽流感H5陽性血清，禽流感H5陰性血清，批號20050120,購自哈爾濱獸醫(yī)研究所。1.4試驗(yàn)器材疫苗接種針為標(biāo)準(zhǔn)的雙鋒接種針，試驗(yàn)GB/T18936-2003高致病性禽流感診斷技術(shù)HI方法所需器材。2試驗(yàn)方法2.1試驗(yàn)分組將20日齡非免疫海蘭褐蛋雞雛90只隨機(jī)分為6組，其中，試驗(yàn)組4組，每組20只，分別標(biāo)記為試驗(yàn)1

4、組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組和試驗(yàn)4組；對照組2組，每組5只，分別標(biāo)記為對照1組和對照2組。2.2疫苗稀釋疫苗A稀釋液：疫苗稀釋按疫苗使用說明書標(biāo)準(zhǔn)操作，用滅菌生理鹽水25ml,稀釋500羽/瓶的疫苗1瓶，待用。疫苗B稀釋液：疫苗稀釋濃度大于疫苗使用說明書規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)濃度，用火菌生理鹽水10ml稀釋500羽/瓶的疫苗1瓶，待用。2.3接種方法試驗(yàn)1組：用雙鋒接種針蘸取疫苗A稀釋液，在雞翅膀內(nèi)側(cè)三角區(qū)翼膜的無羽毛無血管部位垂宜刺穿翼膜1次，進(jìn)針深度以接種針凹槽透過翼膜對而皮膚為準(zhǔn)。試驗(yàn)2組：用與試驗(yàn)1組同型號的雙鋒接種針，懿取疫苗B稀釋液，在雞翅膀離翅根最近的關(guān)節(jié)部位內(nèi)側(cè)，接種針朝雞體方向成45度角斜刺

5、1次，接種針的凹槽向上，進(jìn)針深度以接種針的凹槽進(jìn)入皮膚為準(zhǔn)。收稿日期2010-07-16試驗(yàn)3組：用雙鋒接種針醮取疫苗B稀釋液，接種方法與部位同試驗(yàn)1組。試驗(yàn)4組：用雙鋒接種針醮取疫苗A稀釋液，接種方法與部位同試驗(yàn)2組。對照組：用同型號雙鋒接種針蘸取滅菌生理鹽水，對照1組接種方法同試驗(yàn)1組，對照2組接種方法同試驗(yàn)2組。2.4樣品采集及采樣時間于接種前采集全血分離血清檢測母源抗體。接種徐7d和14d分別采集全血，分離血清檢測禽流感H5免疫抗體。2.5檢測方法GBff18936-2003致病性禽流感診斷技術(shù)HI方法。3試驗(yàn)結(jié)果禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗不同接種操作方法免疫效果檢測結(jié)果見表lo表1

6、禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗不同接種操作方法免疫效果檢測結(jié)果組別免疫后夭數(shù)檢測只數(shù)<1皿2!Log22Log23Log24Ix)g25Log26Log27Ix)g2抗體滴度2'%試驗(yàn)1組免疫前20200.免疫后7d20200免疫后14d20144362100試驗(yàn)2組免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d20200試驗(yàn)3組免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d2023456100試驗(yàn)4組免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d20200對照1組免疫前550免疫后7d550免疫后14d550對照2組免疫而550免疫后7d550免疫后14<15504小

7、結(jié)與討論4.1試驗(yàn)表明，禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗無論是標(biāo)準(zhǔn)濃度還是高于標(biāo)準(zhǔn)濃度稀釋，采用翼膜直刺的接種方法禽流感抗體均高于翅關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)皮下斜刺的接種方法。不同的接種操作方法對免疫效果有顯著的影響。試驗(yàn)1組、試多3組免疫接種后14d抗體滴度100%在222，而試驗(yàn)2組、試驗(yàn)4組免疫接種后14d抗體滴度100%小于21另據(jù)2005年黑山禽流感疫情期間全省13市用禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗對肉雞進(jìn)行緊急免疫時監(jiān)測抗體的結(jié)果，免疫接種后14d檢測1679只，33%抗體滴度小于67%抗體滴度在之間，從另一側(cè)面證明了免疫接種不同操作方法對免疫效果有顯著影響。4.2本試驗(yàn)使用的禽流感重組雞痘病毒載體活疫

8、苗，疫苗抗原載體是禽痘病毒。載體禽痘病毒在免疫消體內(nèi)增殖的程度與免疫雞的禽流感抗體滴度的高低呈正相關(guān)性。試驗(yàn)1組、試驗(yàn)3組在翅膀內(nèi)側(cè)三角區(qū)翼膜刺穿1次，此接種部位是雙面皮膚，兩層皮膚間無肌肉等組織。而試驗(yàn)2組、試驗(yàn)4組在翅關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)斜刺1次，這兩組的接種部位是一層皮膚，皮下是肌肉、骨或關(guān)節(jié)韌帶等組織。本試驗(yàn)中，4個試驗(yàn)組均用相同刺種針接種1次，試驗(yàn)1組、試驗(yàn)3組被接種的皮膚細(xì)胞是試驗(yàn)2組、試驗(yàn)4組被接種的皮膚細(xì)胞的2倍。雞體上禽痘病毒的敏感細(xì)胞是皮膚細(xì)胞和氣管黏膜細(xì)胞。禽痘病毒一般經(jīng)損傷的皮膚和黏膜而感染。禽痘病毒的傳播方式是細(xì)胞間傳播，禽痘病毒在敏感細(xì)胞內(nèi)增殖后，不釋放出來，通過細(xì)胞間橋直接傳

9、播給相鄰敏感細(xì)胞。試驗(yàn)1組、試驗(yàn)3組的接種方式更符合禽痘病毒的傳播方式，疫苗接種采用了疫苗載體病毒自然感染的方式。試驗(yàn)1組、試驗(yàn)3組接種操作的方法，被接種的疫苗敏感細(xì)胞是試驗(yàn)2組、試驗(yàn)4組接種方法被接種的疫苗敏感細(xì)胞的2倍。4.3試驗(yàn)2組接種的疫苗抗原稀釋濃度高于試驗(yàn)1組1.5倍，而試驗(yàn)2組在接種后14d抗體滴度低于2試驗(yàn)1組組接種后14d抗體滴度100%達(dá)222?？赡茉蚴窃囼?yàn)2組在關(guān)節(jié)部位用接種針斜刺接種，此部位皮下是肌肉、骨或關(guān)節(jié)韌帶等組織，肌肉、骨或關(guān)節(jié)韌帶等組織細(xì)胞不是疫苗載體禽痘病毒的敏感細(xì)胞，疫苗載體不能很好增殖，疫苗抗原就不能得到有效表達(dá)。4.4試驗(yàn)2組、試驗(yàn)4組禽流感抗體均低

10、于試驗(yàn)1組和試驗(yàn)3組，可能原因是試驗(yàn)2組、試驗(yàn)4組接種時將疫苗接種到皮下其他組織，導(dǎo)致疫苗直接接種到敏感細(xì)胞皮膚細(xì)胞的量不足：另一方面，如操作中進(jìn)針深度不夠，使疫苗不能有效接種到組織內(nèi)，疫苗抗原同樣不能很好表達(dá)。導(dǎo)致試驗(yàn)2組、試驗(yàn)4組的試驗(yàn)雞實(shí)際疫苗接種量不如試驗(yàn)1組、試驗(yàn)3組確實(shí)有效。而疫苗的實(shí)際接種量直接影響免疫效果。說明只有接種操作方法正確，才能保證接種效果。綜上所述，疫苗接種操作方式、方法的正確性，對免疫效果有顯著影響，應(yīng)引起養(yǎng)殖者高度重視。弛羔羊痢疾的診療體會2010年3月，法庫縣大孤家子張某飼養(yǎng)的絨山羊出生24d,出現(xiàn)精神萎頓、低頭拱背等癥狀，病羊與母羊分開，不食,喜臥，排惡臭黃色

11、或帶血的稀便，隨后昏迷死亡。通過流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀和病理剖檢變化，確診為羔羊痢疾。經(jīng)過采取綜合防制措施，病情得到控制。1臨床癥狀發(fā)病均為出生后24d的羔羊，超過1周的沒有發(fā)病。病羊拒食、喜臥、排出黃色稀薄如水的糞便，有的還帶有出血和黏液，下痢次數(shù)頻繁，糞便惡臭，糞色灰白，黃色或暗紅，羔羊時時弓背，體重減輕，體況愈來愈差，最后倒地死亡。2剖檢變化剖檢時可見尸體脫水現(xiàn)象嚴(yán)重，肛門周圍被稀糞污染。真胃內(nèi)有未消化的凝乳塊，小腸出血性腸炎。胃、腸黏液充血和出血，腸黏膜壞死及潰瘍，潰瘍灶大小、多少不一。腸腔內(nèi)充滿血樣內(nèi)容物，腸系膜淋巴結(jié)腫脹充血或見有出血，心包積液，心內(nèi)膜有出血點(diǎn)，肺有充血斑或淤血。23預(yù)防在常發(fā)地區(qū)，應(yīng)定期注射羔羊痢I疾苗或“羊快疫、猝狙、腸毒血癥、羔羊痢I疾四聯(lián)苗”。平時加強(qiáng)母羊飼養(yǎng)管理，抓膘保§膘，使所產(chǎn)羔羊體格健狀，抵抗力增強(qiáng)。做j好消毒，用2%的火堿對圈舍周圍消毒，用百$毒殺和碘酚對羊舍消毒。合理哺乳，避免羔I羊饑飽不均，并注意羔羊冬季保暖工作。羔I羊出生后12h內(nèi)，灌服土霉素0.15-0.2g,1I次/d,連服3d,有一定預(yù)防本病的效果。j4治療用鹽酸左旋氧窺