醫(yī)療器械無(wú)菌檢驗(yàn)操作規(guī)程

1、醫(yī)療器械產(chǎn)品無(wú)菌檢驗(yàn)操作規(guī)程1 目的通過無(wú)菌檢驗(yàn),確保滅菌后產(chǎn)品能夠達(dá)到無(wú)菌的要求。2 適用范圍適用于滅菌后醫(yī)療器械產(chǎn)品(列舉的無(wú)菌檢驗(yàn)。3 檢驗(yàn)依據(jù)本廠產(chǎn)品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)(編號(hào)EN1174-1996 醫(yī)療器械滅菌產(chǎn)品中微生物數(shù)量的評(píng)估中國(guó)藥典(2005年版GB14233.2-2005 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第二部分:生物試驗(yàn)方法GB15980-1995 一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)4 儀器、設(shè)備百級(jí)層流超凈工作臺(tái)、電熱干燥箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌器、集菌儀(器、電子天平、PH計(jì)、冰箱、恒溫水浴鍋、酒精燈、三角燒瓶,接種環(huán)、無(wú)菌棉簽、鑷子,試管架,大試管若干等。5 無(wú)菌檢

2、驗(yàn)室的環(huán)境要求5.1 無(wú)菌檢驗(yàn)應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部百級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。5.2 緩沖區(qū)與外界環(huán)境、無(wú)菌檢驗(yàn)室與緩沖區(qū)之間空氣應(yīng)保持正壓,陽(yáng)性對(duì)照室與緩沖區(qū)之間空氣應(yīng)保持負(fù)壓。無(wú)菌檢驗(yàn)室與室外大氣之間靜壓差應(yīng)大于10Pa。無(wú)菌檢驗(yàn)室的室溫應(yīng)保持1826,相對(duì)濕度:4565%。5.3 無(wú)菌檢驗(yàn)室的單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū)懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的監(jiān)測(cè)。每年至少檢測(cè)一次。5.4 無(wú)菌檢驗(yàn)過程中應(yīng)同時(shí)檢查超凈工作臺(tái)單向流空氣中的菌落數(shù):每次操作時(shí)在層流空氣所及臺(tái)面的左中右置3個(gè)營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,暴露30m

3、in,于3035培養(yǎng)48小時(shí),菌落數(shù)平均應(yīng)不超過1CFU/平板。6 無(wú)菌檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備6.1 器具滅菌、消毒6.2 人員、物料進(jìn)入無(wú)菌檢驗(yàn)室30min。7 無(wú)菌檢驗(yàn)操作要求7.1 全過程必須嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作,防止微生物污染。7.2 使用玻璃器皿應(yīng)輕取輕放,避免破損,以防培養(yǎng)物擴(kuò)散。7.3 所有操作均應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行,且不得有大幅度或快速動(dòng)作,以免攪動(dòng)空氣中的塵埃微粒。7.4 使用金屬接種器具時(shí),用前、用后均需灼燒滅菌。7.5 在接種培養(yǎng)物時(shí),動(dòng)作應(yīng)輕、準(zhǔn),防止培養(yǎng)物濺出,產(chǎn)生汽溶膠,造成污染。7.6 操作過程中所有的帶菌物品,用后均應(yīng)作消毒、滅菌處理。可在檢驗(yàn)過程中隨用隨時(shí)放入消毒液缸內(nèi)浸泡或消

4、毒桶內(nèi),或在檢驗(yàn)完成后經(jīng)傳遞窗傳至一般區(qū),立即用壓力蒸汽滅菌鍋121滅菌30分鐘。8 培養(yǎng)基制備8.1需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基(硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的制備酪胨(胰酶水解15.0g葡萄糖5.0gL-胱氨酸0.5g硫乙醇酸鈉0.5g(或硫乙醇酸(0.3ml酵母浸出粉5.0g氯化鈉2.5g新配制的0.1%刃天青溶液1.0ml瓊脂0.75g水1000ml除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微溫溶解,調(diào)節(jié)pH為弱堿性,煮沸,濾清,加入葡萄糖和刃天青溶液,搖勻,調(diào)節(jié)pH為7.1±0.2。在供試品接種前,培養(yǎng)基氧化層的高度不得超過培養(yǎng)基深度的1/5,否剛需經(jīng)100水浴加熱到粉紅色消失(不超過20分

5、鐘迅速冷卻,只限加熱一次,并應(yīng)防止被污染。8.2 霉菌培養(yǎng)基(改良馬丁培養(yǎng)基的制備胨5.0g酵母浸出粉2.0g葡萄糖20.0g磷酸二氫鉀1.0g硫酸鎂0.5g水1000 ml除葡萄糖外,取上述成分混和,微溫溶解,調(diào)節(jié)pH值約為6.8,煮沸,加葡萄糖溶解后,搖勻,濾清,調(diào)節(jié)pH為6.4±0.2。8.3 還可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基,按照使用說明書配制。8.4 培養(yǎng)基配制后應(yīng)盡快滅菌,避免微生物繁殖。一般采用高壓蒸汽121滅菌30分鐘。8.5 制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在225保存,在3周內(nèi)使用。8.6 培養(yǎng)基的無(wú)菌性檢查每批配制的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌性檢查(可與產(chǎn)品無(wú)菌檢驗(yàn)同步進(jìn)行。檢

6、查時(shí),每批培養(yǎng)基隨機(jī)取不少于5支(瓶培養(yǎng)14天,應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。9 稀釋液、沖洗液的制備9.1 0.1%蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g,加水1000ml,微溫溶解,濾清,分裝后置入壓力蒸汽滅菌器內(nèi),121滅菌30分鐘后,于4保存?zhèn)溆谩? 分裝后置入壓力蒸汽滅菌器內(nèi), 121滅菌30分鐘后,于4保存?zhèn)溆?.2 pH7.0 氯化鈉-蛋白胨緩沖液取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鉀7.23g、氯化鈉4.30g、蛋白胨1.0g,加水1000ml。微溫溶解,濾清,分裝后置入壓力蒸汽滅菌器內(nèi),121滅菌30分鐘后,于4保存?zhèn)溆谩?.3 浸提介質(zhì):9g/L無(wú)菌氯化鈉溶液,可直接從有證單位采購(gòu)大輸液。10 對(duì)照菌液制備10.1 無(wú)菌檢驗(yàn)所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代。10.3 采用平皿