關(guān)于毒扁豆堿對(duì)老年癡呆大鼠的空間記憶能力的影響

1、關(guān)于毒扁豆堿對(duì)老年癡呆大鼠的空間記憶能力的影響    【摘要】  目的：探討毒扁豆堿對(duì)老年癡呆大鼠的空間記憶能力的影響，為老年癡呆病人的臨床治療提供新的治療思路。方法：健康成年雄性大鼠48只，隨機(jī)分為癡呆組、毒扁豆堿對(duì)照組、毒扁豆堿治療組、空白對(duì)照組。運(yùn)用大鼠穹窿海馬切斷術(shù)建立癡呆模型，術(shù)后第8天開(kāi)始腹腔注射毒扁豆堿，連續(xù)1周，然后各組進(jìn)行Morris水迷宮測(cè)試。結(jié)果：空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，大鼠各象限游泳距離占總距離百分率和跨越各象限平臺(tái)相應(yīng)位置次數(shù)占總次數(shù)百分率，毒扁豆堿治療組均有明顯提高()。定位航行實(shí)驗(yàn)提示毒扁豆堿處理后的癡呆大

2、鼠尋找水下平臺(tái)時(shí)間明顯縮短。結(jié)論：癡呆大鼠經(jīng)過(guò)毒扁豆堿治療后，空間記憶能力出現(xiàn)明顯好轉(zhuǎn)，提示毒扁豆堿對(duì)癡呆大鼠具有一定的改善作用。 Nature is the glass reflecting truth.  【關(guān)鍵詞】  毒扁豆堿; 老年癡呆; 大鼠; Morris水迷宮隨著全世界步入老齡化社會(huì)，老年癡呆的發(fā)病率目前呈現(xiàn)進(jìn)行性遞增的趨勢(shì)。由于此病影響患者的認(rèn)知功能、記憶功能、語(yǔ)言功能、視空間功能、社會(huì)生活能力、個(gè)人生活自理能力和情感人格等，給家庭和社會(huì)帶來(lái)很大負(fù)擔(dān)。因此，WHO已將老年癡呆癥定為21世紀(jì)5大重點(diǎn)疾病之一1。

3、尋找治療老年癡呆癥的有效藥物，成為世界醫(yī)學(xué)界的研究熱點(diǎn)之一。研究指出2，在老年癡呆的早期，膽堿功能缺乏的癥狀早于其它任何癥狀，AD特征之一的神經(jīng)元凋亡也主要發(fā)生在膽堿神經(jīng)元(醫(yī)藥學(xué)/臨床醫(yī)學(xué)論文 )。從治療角度看，美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市治療AD的藥物均為膽堿酯酶抑制劑3，因而研究和開(kāi)發(fā)新的具有更好療效的膽堿酯酶抑制劑是當(dāng)前治療和預(yù)防老年癡呆的有效手段。毒扁豆堿是從非洲的毒扁豆種子中提出的生物堿，是一種可逆性膽酯酶抑制劑，但有關(guān)毒扁豆堿對(duì)老年癡呆大鼠的空間記憶能力的研究卻鮮有報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)此展開(kāi)研究。1 材料和方法1.1 動(dòng)物及分組選用成年雄性SD大鼠200220g(購(gòu)至武漢大

4、學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。動(dòng)物隨機(jī)分為4組：老年癡呆組、毒扁豆堿組、毒扁豆堿治療組以及空白對(duì)照組。The best of friends must part.  1.2 試劑論文分為專(zhuān)題型、論辯型、綜述型和綜合型四大類(lèi)  毒扁豆堿購(gòu)置美國(guó)sigma公司。Manners make the man.  1.3 模型制備Politeness costs nothing and gains everything.  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無(wú)巴比妥鈉(40 mg/kg)常規(guī)麻醉，大鼠立體定位儀定位，無(wú)菌操作下沿顱頂中線(xiàn)作長(zhǎng)2 cm切口。于前囟后2

5、.0 mm，中線(xiàn)右側(cè)旁0.5 mm處用牙科鉆打開(kāi)右側(cè)顱骨，仔細(xì)剝開(kāi)硬腦膜暴露大腦皮質(zhì)， 按照大鼠腦立體定位圖譜4，用特制的寬2 mm刀片于前囟后2 mm， 中線(xiàn)右側(cè)1 mm處置刀于腦表面，然后降刀4.1 mm，并向外向內(nèi)各移動(dòng)1和0.5 mm。最后再降刀 1 mm外移 1.5 mm， 此時(shí)上下抽動(dòng)刀片15次， 依次切斷(單側(cè)) 扣帶回、 胼胝體干、背側(cè)穹窿海馬傘，制作AD動(dòng)物模型, 于術(shù)后第 8天開(kāi)始腹腔注

6、射注射毒扁豆堿 100 ug/kg，每天3次，連續(xù) 給藥 3 d后進(jìn)行Morris水迷宮行為訓(xùn)練。One ploughs, another sow; who will reap  1.4 Morris 水迷宮行為能力測(cè)試定位航行實(shí)驗(yàn) 水池分為 I、II 、III 、IV4個(gè)象限。在第3象限放置平臺(tái)，浸潤(rùn)在水下約1cm高度。實(shí)驗(yàn)前 1 d 將大鼠放入水池( 不含平臺(tái)) 自由游泳2 min熟悉水迷宮環(huán)境，試驗(yàn)歷時(shí)5

7、60;d ，每天分上午，下午兩個(gè)時(shí)間段，每段分別訓(xùn)練4次，每個(gè)時(shí)間段分別從池壁4個(gè)起始點(diǎn)將大鼠面向池壁放入水池， 記錄每次找到平臺(tái)的時(shí)間 (逃避潛伏期，escape latency )和游泳路徑。如大鼠在120 s 內(nèi)找不到平臺(tái)，由實(shí)驗(yàn)者將其引上平臺(tái)，潛伏期記為120 s，每次間隔4 min讓大鼠休息，再行下次試驗(yàn)。Good counsel never comes too late.  1.5 空間探索實(shí)驗(yàn)  在第 5天下午第 5次訓(xùn)練時(shí)拆除水下平臺(tái)，&#

8、160;然后任選一個(gè)入水點(diǎn)將大 鼠面向池壁放入水中， 測(cè)其120 s內(nèi)在各象限的游泳距離及占總距離的百分率和120s內(nèi)跨越各象限平臺(tái)相應(yīng)位置次數(shù)及占總次數(shù)的百分率，并記錄大鼠120s 內(nèi)搜索平臺(tái)的路線(xiàn)圖。1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS13.0 進(jìn)行兩兩比較及t檢驗(yàn)。2 結(jié)果論文包括學(xué)年論文、畢業(yè)論文、學(xué)位論文、科技論文、成果論文等.  2.1 大鼠行為能力Early mistakes are the seeds of future trouble.  各組大鼠在Morris水迷宮中定向航行試驗(yàn)結(jié)

9、果見(jiàn)圖1，空白對(duì)照組和毒扁豆堿陰性對(duì)照組的大鼠平均逃避潛伏期逐漸縮短，而癡呆組的大鼠則喪失學(xué)習(xí)記憶能力，平均逃避潛伏期無(wú)改變。而給予毒扁豆堿的癡呆大鼠，平均逃避潛伏期時(shí)間明顯縮短(P<0.05)。說(shuō)明經(jīng)過(guò)毒扁豆堿治療的癡呆大鼠，空間記憶學(xué)習(xí)能力明顯提高。圖1 各組大鼠尋找平臺(tái)潛伏期對(duì)比2.2 空間探索試驗(yàn)拆去水下平臺(tái)后，以原站臺(tái)象限(III象限)的活動(dòng)時(shí)間和穿梭次數(shù)為指標(biāo)，模型組在第3象限的活動(dòng)時(shí)間顯著縮短，穿越站臺(tái)次數(shù)明顯降低。而給予毒扁豆堿治療的癡呆大鼠，則在第3象限的活動(dòng)時(shí)間有明顯增加，穿越站臺(tái)次數(shù)也有顯著的增加，說(shuō)明毒扁豆堿可明顯改善癡呆大鼠的行為能力，見(jiàn)表1

10、。表1 各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物第3象限活動(dòng)時(shí)間與穿越平臺(tái)次數(shù)論文包括學(xué)年論文、畢業(yè)論文、學(xué)位論文、科技論文、成果論文等.  3 討論老年癡呆的患病率目前已升至威脅老年人生命的第3位。中樞尤其是海馬等與學(xué)習(xí)和記憶相關(guān)的區(qū)域中，神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿發(fā)現(xiàn)是參與學(xué)習(xí)，記憶功能重要的神經(jīng)遞質(zhì)。 研究發(fā)現(xiàn)：老年癡呆患者大腦內(nèi)的乙酰膽堿的活性明顯降低，運(yùn)用可透過(guò)血腦屏障的膽堿酯酶抑制劑可增加腦內(nèi)乙酰膽堿的含量，增強(qiáng)突觸間的傳遞，改善患者的學(xué)習(xí)和記憶能力，因而尋找有效的膽堿酯酶抑制劑對(duì)老年癡呆的治療具有重要的研究?jī)r(jià)值5。毒扁豆堿可以抑制體內(nèi)膽堿酯酶的活力，是一種副交感神經(jīng)興奮劑，可顯

11、著增加大腦內(nèi)部的乙酰膽堿水平，因而理論上可改善老年癡呆的癥狀，而本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果提示，毒扁豆堿可明顯的改善老年癡呆大鼠的空間記憶學(xué)習(xí)能力。研究指出，嗎啡能夠抑制大鼠對(duì)水迷宮任務(wù)的回憶;這種抑制作用可能與嗎啡抑制中樞膽堿能遞質(zhì)系統(tǒng)功能有關(guān),毒扁豆堿通過(guò)加強(qiáng)膽堿能遞質(zhì)系統(tǒng)的活動(dòng),從而對(duì)抗嗎啡誘導(dǎo)而在嗎啡所致的記憶喪失，說(shuō)明毒扁豆堿對(duì)學(xué)習(xí)和記憶的影響遠(yuǎn)超過(guò)我們的想象。綜上所述，毒扁豆堿給予后可顯著的增加老年癡呆大鼠的空間學(xué)習(xí)能力和記憶能力，其機(jī)制可能是通過(guò)增加大腦中樞神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的含量而得以實(shí)現(xiàn)的，但具體的機(jī)制如何，仍有待進(jìn)一步的研究。【參考文獻(xiàn)】  1Musiai 

12、;A, Baida M, Malawska. Recent developments in eholinesterases inhibitors for Alzheimer's disease treatment. Current Medicinal Chemistry, 2007, 14: 26542679.2 Kalesnykas G，Puolivali J， Si

13、rvio J， et al. Cholinergic neurons in the basal forebrain of aged female mice. Brain Res, 2004, 1022.3 Jacobsel1 JS. Alzheimer's disease: an overview of current and emerging therapeutic strategies. Curt Top