桑蠶原原種檢驗(yàn)規(guī)程

1、121四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 發(fā)布2006-08-15實(shí)施2006-08-04發(fā)布桑蠶原原種檢驗(yàn)規(guī)程Testing rules for grandparent eggs of silkworm ( Bombyx mori )DB51/T 5972006DB51四川省地方標(biāo)準(zhǔn)ICS備案號：目 次前言1221 范圍1232 檢驗(yàn)項(xiàng)目1233 檢驗(yàn)規(guī)則1234 檢驗(yàn)方法1235 數(shù)據(jù)修約125附錄A （資料性附錄） 桑蠶原原種母蛾微粒子病檢疫126A.1 母蛾處理126A.2 蛾盒驗(yàn)收126A.3 檢疫方法126A.4 衛(wèi)生消毒127A.5 病蛾率計算127前 言本標(biāo)準(zhǔn)附錄A為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由四川

2、省農(nóng)業(yè)廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：四川省蠶業(yè)管理總站、四川省閬中蠶種場、四川省南充蠶種場、四川省三臺蠶種場、四川省涼山州蠶種場。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：曾華明、楊彪、朱洪順、趙邦美、吳鋼、龔大剛、馮光檣、昝明財、張光凡。桑蠶原原種檢驗(yàn)規(guī)程1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了桑蠶原原種質(zhì)量檢驗(yàn)的項(xiàng)目、檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于桑蠶原原種的檢驗(yàn)。2 檢驗(yàn)項(xiàng)目2.1 外觀質(zhì)量2.1.1 標(biāo)簽2.1.2 產(chǎn)附2.1.3 卵色2.2 卵質(zhì)指標(biāo)2.2.1 單卵圈良卵數(shù)2.2.2 良卵率2.2.3 實(shí)用孵化率2.2.4 純度2.3 疫病指標(biāo)2.3.1 微粒子病蛾率2.3.2 微粒子病卵率3 檢驗(yàn)規(guī)

3、則以原原種批為單位，外觀質(zhì)量、卵質(zhì)、微粒子病卵率實(shí)行抽樣檢驗(yàn)；微粒子病蛾率實(shí)行單蛾全檢。4 檢驗(yàn)方法4.1 抽樣檢驗(yàn)4.1.1 抽樣時間越年種在冬季浴消整理并解除滯育后抽樣，浸酸種在浸酸整理后抽樣。4.1.2 抽樣數(shù)量、方法以制種批為單位，按圖1每批隨機(jī)抽取6張原原種作為外觀包裝檢驗(yàn)用樣品。外觀包裝檢驗(yàn)完成后，在每張樣品原原種的相同位置（114卵圈編號隨機(jī)確定一個號）抽取1個卵圈，共抽取6個卵圈，在這6個卵圈中隨機(jī)抽取2個卵圈作為單卵圈良卵數(shù)、良卵率檢驗(yàn)用樣品，剩余4個卵圈每個卵圈取1/4,拼疊成1個卵圈作為純度檢驗(yàn)用樣品。對每批原原種采取逐張逐卵圈抽取死卵、不受精卵、內(nèi)圈卵等蠶卵710粒，每

4、張原原種混合為一個樣品，作為病卵率檢驗(yàn)用樣品。4.1.3 樣品保存樣品保存條件與原制種批相同。4.1.4 檢驗(yàn)流程檢驗(yàn)工作流程見圖1。4.1.4.1 外觀質(zhì)量檢驗(yàn)按圖1規(guī)定的數(shù)量抽取外觀包裝檢驗(yàn)樣品進(jìn)行檢驗(yàn)。制種批每張在相同位置抽取1個卵圈。抽取6張樣品外觀包裝檢驗(yàn)逐張逐卵圈抽樣抽取6個卵圈良卵數(shù)、良卵率檢驗(yàn)（2圈）每圈取1/4（4圈）病卵率檢驗(yàn)純度檢驗(yàn)（1圈）實(shí)用孵化率檢驗(yàn)（2圈）圖1 抽樣、檢驗(yàn)流程圖4.1.4.1.1 標(biāo)簽檢驗(yàn)樣品標(biāo)簽有無及是否符合要求。4.1.4.1.2 產(chǎn)附檢驗(yàn)樣品產(chǎn)附是否符合本品種特性，有無堆積卵。4.1.4.1.3 卵色檢驗(yàn)樣品卵色是否符合本品種特性。4.1.4.

5、2 卵質(zhì)檢驗(yàn)4.1.4.2.1 單卵圈良卵數(shù)、良卵率分別點(diǎn)數(shù)樣品卵圈的良卵數(shù)和總卵數(shù)，其平均數(shù)即為該批單卵圈良卵數(shù)和總卵數(shù)，并按（1）式計算良卵率。4.1.4.2.2 實(shí)用孵化率取單卵圈良卵數(shù)和良卵率檢驗(yàn)后的卵圈，按簡易催青標(biāo)準(zhǔn)催青。從見苗蟻時間開始連續(xù)35日內(nèi)，每日上午調(diào)查各卵圈的孵化數(shù)量，取其中連續(xù)2日孵化最多的數(shù)量作實(shí)用孵化數(shù)，并按（2）式計算實(shí)用孵化率。4.1.4.2.3 純度對樣品卵圈進(jìn)行簡易催青，收蟻單獨(dú)飼養(yǎng)。飼養(yǎng)過程中，注意消毒防病，不淘汰弱小蠶，防止遺失。根據(jù)幼蟲或繭的形態(tài)性狀，判斷異形個體數(shù)量，并按（3）式計算品種純度。4.1.4.3 微粒子病檢疫4.1.4.3.1 微粒子病

6、蛾率原原種母蛾微粒子病檢疫方法見附錄A（資料性附錄）4.1.4.3.2 微粒子病卵率樣品按簡易催青標(biāo)準(zhǔn)催青。待樣品孵化后保護(hù)3日進(jìn)行檢驗(yàn)。檢驗(yàn)時，將樣品置于乳缽孔中，每孔一個樣品。用吸管加5滴2氫氧化鉀溶液充分磨碎后，再加0.51ml 2氫氧化鉀溶液攪拌混勻。用玻棒點(diǎn)樣于載玻片上，制備2套鏡檢標(biāo)本，2名檢驗(yàn)員各檢驗(yàn)1套標(biāo)本，每點(diǎn)標(biāo)本在600或640倍顯微鏡下觀察5個視野。對發(fā)現(xiàn)有微粒子孢子的樣品，再點(diǎn)樣確認(rèn)。5 數(shù)據(jù)修約卵粒數(shù)取整數(shù)，其余按數(shù)據(jù)修約規(guī)則保留兩位小數(shù)。附錄A （資料性附錄）桑蠶原原種母蛾微粒子病檢疫A.1 母蛾處理A.1.1 母蛾裝盒原原種母蛾采用標(biāo)明序號的14蛾（格）紙質(zhì)蛾盒對

7、號裝蛾，蛾盒上標(biāo)明生產(chǎn)單位、品種、批次、蛾盒編號，蛾盒編號與產(chǎn)卵連紙編號一致。A.1.2 干燥裝蛾后，將蛾盒按制種批次、編號順序排列，立即進(jìn)行烘干處理。烘蛾溫度68.03.0，干燥程度以母蛾頭胸干燥、腹部稍軟為宜。暫不作烘干處理的，攤放于低溫通風(fēng)干燥的室內(nèi)保存12日為限。A.2 蛾盒驗(yàn)收母蛾干燥后，要及時清理捆扎，連同送檢蛾盒清單，送檢驗(yàn)單位檢疫。檢驗(yàn)單位要對送到的蛾盒進(jìn)行查驗(yàn)。凡蛾盒填寫不清，批次號、蛾盒號錯亂，或母蛾生霉、蟲蛀、鼠咬、腐爛、烘焦等影響檢驗(yàn)正確性的母蛾，檢驗(yàn)單位拒收。驗(yàn)收合格后妥善保管及時檢驗(yàn)。A.3 檢疫方法采用單蛾手工磨蛾檢驗(yàn)。A.3.1 檢疫流程記載結(jié)果鏡檢觀察點(diǎn)取樣品

8、注液磨碎拆盒投蛾按序編號A.3.2 操作步驟A.3.2.1 按序編號按送檢單位進(jìn)行編號，批次和蛾盒號不變。A.3.2.2 拆盒投蛾拆開蛾盒，檢查裝蛾情況，若該盒母蛾出現(xiàn)空蛾，則登記空蛾號（對應(yīng)卵圈淘汰）。對準(zhǔn)蛾號與乳缽號，裝入乳缽內(nèi)，每孔一蛾。裝完后，撕下蛾盒上寫有批號、編號的蓋紙，壓在乳缽下，連同編號隨磨蛾液傳遞，防止錯亂。若空蛾數(shù)超過兩個，則該盒母蛾不予檢驗(yàn)，也不記入母蛾總數(shù)，其對應(yīng)的原原種淘汰。A.3.2.3 注液磨碎每乳缽孔內(nèi)加注2氫氧化鉀溶液1.5ml，用乳棒研磨成糊狀，再加注2氫氧化鉀溶液1.5ml磨細(xì)、混勻。A.3.2.4 點(diǎn)取樣品對號將母蛾磨粹液用乳棒點(diǎn)在載玻片上制成鏡檢標(biāo)本，

9、每片點(diǎn)3個母蛾的磨粹液，共點(diǎn)制2板（套）標(biāo)本，連同洗條送2人分別初檢。A.3.2.5 初檢鏡檢標(biāo)本加蓋玻片，在600或640倍光學(xué)顯微鏡下檢驗(yàn)有無微粒子孢子，每點(diǎn)標(biāo)本觀察5個視野。若兩人檢驗(yàn)結(jié)果不一致，或有微粒子孢子，則重新點(diǎn)樣，經(jīng)復(fù)檢確認(rèn)，記入檢驗(yàn)單。A.3.2.6 復(fù)檢初檢后，除有微粒子孢子的磨粹液外，用吸管從每個乳缽吸取0.5ml磨粹液，每張原原種混為1個樣本，經(jīng)3000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，倒去上層清液，沉淀物經(jīng)振蕩后，每個樣本點(diǎn)2點(diǎn)，每點(diǎn)看10個視野。復(fù)檢無微粒子孢子，告知初檢人員；復(fù)檢發(fā)現(xiàn)有微粒子孢子，再點(diǎn)樣二次復(fù)檢；二次復(fù)檢仍有微粒子孢子，即退初檢員重檢；二次復(fù)檢無微粒子孢子，由復(fù)檢員直接取原磨粹液進(jìn)行單蛾鏡檢、確認(rèn)。A.3.2.7 記載結(jié)果將顯微鏡觀察結(jié)果準(zhǔn)確填入原原種母蛾檢疫單（見表A.1）。表 A.1原原種母蛾檢疫單樣品檢驗(yàn)編號： 品種： 批號： 制種季別：蛾盒號蛾號與檢疫結(jié)果12345678910111213141234567891011121314備注：將檢疫結(jié)果用符號表示填入檢疫原始記錄表中：1、有微粒子孢子符號“”；2、無微粒子孢子符號“”；3、空圈符號“”。初檢員： 復(fù)檢員： 檢驗(yàn)室負(fù)責(zé)人： 年 月 日A.4 衛(wèi)生消毒A.4.1 檢驗(yàn)器具若