空調(diào)系統(tǒng)性能確認(rèn)

1、 批準(zhǔn)執(zhí)行簽名下面的簽名表示批準(zhǔn)本文件及其附件，且表明已經(jīng)為執(zhí)行作好了準(zhǔn)備。在批準(zhǔn)后，對本文件的目的或驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行的任何改變或修正都必須起改善的作用，在執(zhí)行以前就必須取得批準(zhǔn)。 XXXX有限公司 日期Validation committeeDate驗(yàn)證委員會DateDate1 范圍本運(yùn)行確認(rèn)方案將會在XXXX有限公司的空調(diào)凈化系統(tǒng)上實(shí)施。本文件描述了設(shè)備、檢驗(yàn)程序及可接受標(biāo)準(zhǔn)、文件和參考文件，這些可以用來確定空調(diào)凈化系統(tǒng)的操作符合制造商和XXXX有限公司的設(shè)計規(guī)范。 本運(yùn)行確認(rèn)文件提供了有關(guān)XXXX有限公司責(zé)任的描述、有效的批準(zhǔn)簽名、支持文件和其他包含于文件包中的因素。完成后所有的支持?jǐn)?shù)據(jù)和文

2、件將附于本驗(yàn)證文件之后。 2 目的進(jìn)行性能確認(rèn)的目的是確認(rèn)空調(diào)凈化系統(tǒng)能夠連續(xù)、穩(wěn)定地使?jié)崈魠^(qū)的潔凈度符合設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)及生產(chǎn)工藝的要求，也就是對空氣交通化系統(tǒng)是否能達(dá)到規(guī)定的潔凈度做出判斷，因此，平時所做的不包括安裝確認(rèn)及運(yùn)行確認(rèn)的驗(yàn)證實(shí)際上就是“性能確認(rèn)”，在空氣凈化系統(tǒng)驗(yàn)證中，性能確認(rèn)也就是“潔凈度測定”，包括：懸浮粒子和微生物兩個方面。3 背景本空調(diào)凈化系統(tǒng)是XXXX有限公司為XXXX車間改造的采辦的一套新系統(tǒng)。21CFR Part 211.44規(guī)定了通風(fēng)、空氣過濾、空氣加熱與冷卻系統(tǒng)“提供足夠的通風(fēng)。提供足夠能控制空氣正壓、微生物、塵土、溫度和濕度的設(shè)備，適應(yīng)藥品生產(chǎn)、加工和貯存需要。空氣

3、過濾系統(tǒng)，包括預(yù)過濾器和微粒物質(zhì)空氣過濾器?？諝饨?jīng)過濾才送至生產(chǎn)區(qū)，如果空氣是再循環(huán)到生產(chǎn)區(qū)，應(yīng)測量塵埃含量，控制從生產(chǎn)區(qū)帶來的塵埃。在生產(chǎn)區(qū)、生產(chǎn)中發(fā)生空氣污染，應(yīng)以排氣系統(tǒng)或其他系統(tǒng)充分抽出空氣，控制污染。”FDA關(guān)于藥品生產(chǎn)的指南文件也規(guī)定: “對與環(huán)境有關(guān)的工廠建筑物、面積和位置進(jìn)行審查。所有的操作包括灰塵、溫度、濕度和細(xì)菌控制，都必須有充分的照明、通風(fēng)、屏蔽和合適的物理屏障。必須有高純水、HEPA和壓縮空氣系統(tǒng)的合理設(shè)計圖。廠房須有足夠的更衣室、衛(wèi)生間和洗手設(shè)施?！泵绹鴩噎h(huán)境平衡局：清潔驗(yàn)證及可接受標(biāo)準(zhǔn)要求檢測“（1）風(fēng)速及均勻性試驗(yàn)；（2）高效過濾器安裝泄漏試驗(yàn)；（3）房間微粒計

4、數(shù)試驗(yàn)；（4）增壓試驗(yàn)；（5）溫濕度均一性試驗(yàn)；（6）聲音和震動試驗(yàn)；（7）光照度和均一性試驗(yàn)；（8）自凈試驗(yàn)；（9）傳導(dǎo)率試驗(yàn)；（10）微粒輻射計數(shù)試驗(yàn)；（11）靜電試驗(yàn)”4 介紹本運(yùn)行確認(rèn)方案文件特定用于XXXX有限公司的空調(diào)凈化系統(tǒng)。 作為本文件執(zhí)行過程中的測量設(shè)備，所有的儀表校驗(yàn)、標(biāo)準(zhǔn)化和調(diào)整將會進(jìn)行且記錄下來。使用的標(biāo)準(zhǔn)源自ISO 14644-3。國家標(biāo)準(zhǔn)不涵蓋的地方，如果合適也可以使用其它的公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)。運(yùn)行確認(rèn)的過程，以確認(rèn)和證明系統(tǒng)的運(yùn)行符合cGMP的要求、ISO14644、XXXX有限公司的工藝要求、XXXX設(shè)計院的設(shè)計要求運(yùn)行的。運(yùn)行確認(rèn)將會檢驗(yàn)空調(diào)凈化系統(tǒng)的相應(yīng)運(yùn)行過程。任

5、何與文件或規(guī)范的偏差或遇到任何例外的情況都要記錄下來，加以鑒別，以供文件偏差報告表的審查。記錄的偏差和例外情況要進(jìn)行調(diào)查，而且決定并采取相應(yīng)的措施。文件偏差報告表中需記錄有調(diào)查、糾正性措施及其理由。最終文件包的批準(zhǔn)必須由最初批準(zhǔn)文件的人員、設(shè)計者或相同職位的另外人員來完成。5 參考書目本文件符合下面出版物的使用方針。除非另外注明，每一出版物為文件批準(zhǔn)時的最新版本，附錄有效。 21CFR cGMP FDA. Guide to Inspections of Dosage Form Drug Manufacturers cGMPs. FDA藥品生產(chǎn)企業(yè)cGMP檢查指南。 USP 28 -美國藥典中華

6、人民共和國國家藥典潔凈室施工與驗(yàn)收規(guī)范 XXXX項(xiàng)目空調(diào)凈化系統(tǒng)的技術(shù)規(guī)范和附件6. 責(zé)任方及其責(zé)任61 XXXX有限公司· 在文件準(zhǔn)備時提供支持和專業(yè)技術(shù)知識。· 提供產(chǎn)生和執(zhí)行；文件需要的所有文件、數(shù)據(jù)、程序、手冊和圖表。· 驗(yàn)證過程的具體實(shí)施。62 XXXX有限公司· 撰寫本文件。· 確認(rèn)執(zhí)行。· 提供產(chǎn)生和執(zhí)行文件需要的所有程序、圖表、數(shù)據(jù)、手冊和文件，完成最終報告。· 提供本文件執(zhí)行的檢驗(yàn)和化驗(yàn)支持。· 在文件準(zhǔn)備和執(zhí)行時提供支持和專業(yè)技術(shù)知識。· 審查和批準(zhǔn)原始文件。· 審查和批準(zhǔn)完

7、成的文件包和最終報告。63驗(yàn)證組成員（1）驗(yàn)證協(xié)調(diào)人：XXX（2）組長：XXX（3）恒威工程師：XXX （4） 其他組員：XXX 64. 職責(zé)6.41 驗(yàn)證協(xié)調(diào)人：參見驗(yàn)證管理SOP6.42 組長：負(fù)責(zé)起草驗(yàn)證方案和報告，按驗(yàn)證計劃組織實(shí)施驗(yàn)證工作。6.43 XX工程師：· 在文件準(zhǔn)備時提供支持和專業(yè)技術(shù)知識。· 提供產(chǎn)生和執(zhí)行；文件需要的所有文件、數(shù)據(jù)、程序、手冊和圖表。· 驗(yàn)證過程的具體實(shí)施。6.44 其他組員：協(xié)助驗(yàn)證的實(shí)施。7 系統(tǒng)說明本空調(diào)系統(tǒng)為組合式上出風(fēng)，尺寸大小為XXXmm×XXXmm×XXXmm(長×寬×高

8、)，電源為三相380V、50Hz，電機(jī)功率為XX kW。本系統(tǒng)設(shè)計的總風(fēng)量為XXXXm3/h，新風(fēng)量為XXXXm3/h，空調(diào)風(fēng)機(jī)機(jī)外余壓為XXXXPa。制冷量為XXXXkcal/h；制熱量為XXXXkcal/h。整個空調(diào)系統(tǒng)框架為鋁合金，蓋板為雙層鋼板，保溫材料為聚氨酯發(fā)泡，濾網(wǎng)為袋式初效過濾器及袋式中效過濾器。用橡皮防震墊防震，水盤為SUS304不銹鋼板，接管方向（以面對回見側(cè)來決定）為（右/左）接，數(shù)量X臺。8 檢驗(yàn)程序8.1 概述8.1.1 性能確認(rèn)周期空調(diào)凈化系統(tǒng)連續(xù)運(yùn)行的3個星期，分為3個周期，每個周期7天。懸浮粒子數(shù)、浮游菌數(shù)、沉降菌數(shù)、靜壓差在連續(xù)運(yùn)行的3個周期中，應(yīng)符合設(shè)計要求

9、及相應(yīng)級別潔凈區(qū)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的要求。溫濕度的性能確認(rèn)結(jié)果應(yīng)以全年為一個周期。只有經(jīng)歷了季節(jié)變化，才能全面評價空調(diào)凈化系統(tǒng)對潔凈區(qū)內(nèi)溫度與相對濕度的控制能力。8.1.2 檢測項(xiàng)目及檢測頻率.懸浮粒子數(shù) 每天生產(chǎn)操作前監(jiān)測一次.浮游菌數(shù) 每天生產(chǎn)操作前監(jiān)測一次.沉降菌數(shù) 每天生產(chǎn)操作前監(jiān)測一次.溫度、相對濕度 每日監(jiān)測，每天上下午各讀數(shù)記錄1次.靜壓差 每日監(jiān)測，每天上下午各讀數(shù)記錄1次82潔凈室和潔凈室裝置的懸浮粒子等級計數(shù)與測量821 目的 懸浮粒子等級計數(shù)是對粒徑分布在0.1m至5.0m之間的懸浮粒子 子測量方法的詳細(xì)規(guī)定,為了驗(yàn)證或定期測量設(shè)施的潔凈度等級。822 儀器 塵埃粒子計數(shù)器，能夠計

10、數(shù)并確定單一懸浮粒子的粒徑，并報告以等效光學(xué)直徑表示的粒徑數(shù)據(jù)。使用儀器時應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說明書操作。 光散射離散粒子計數(shù)器測量技術(shù)要求項(xiàng)目技術(shù)要求敏感度/分辨率1在0.1-5mm間選擇，粒徑分辨率10%誤差粒徑設(shè)定值的濃度誤差的±20%電子反應(yīng)時間50s校準(zhǔn)間隔最多12個月或規(guī)定的性能鑒定 1 粒徑分辨率大于10%的粒子計數(shù)結(jié)果，可以有達(dá)1個數(shù)量級的變化。823 測量原理光散射離散粒子計數(shù)器是一種光散射裝置，能夠顯示或記錄空氣中離散粒子的數(shù)目和粒徑，并具粒徑鑒別能力，可檢測所選級別之適當(dāng)粒徑范圍內(nèi)的粒子總濃度。824測量程序（1） 儀器校準(zhǔn) 儀器應(yīng)有有效的校準(zhǔn)證書。（2）預(yù)測試測試條

11、件（1） 測試前，驗(yàn)證潔凈室或潔凈區(qū)運(yùn)行整體在各個方面都是完整的、工作正常的，符合其技術(shù)性能要求。主要的工作有：氣流量或風(fēng)速測試；空氣壓差測試；隔離結(jié)構(gòu)泄漏測試；安裝好的過濾器泄漏測試。（2）預(yù)測試儀器架設(shè) 按照說明書架設(shè)儀器并對儀器進(jìn)行預(yù)測試校準(zhǔn)。（3）確定點(diǎn)位置的確定 采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置懸浮粒子潔凈度監(jiān)測的采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置要根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及工藝關(guān)鍵操作區(qū)設(shè)置。按公式求出最少的采樣點(diǎn)數(shù)目： NL=A 其中： NL為最少采樣點(diǎn)數(shù)（四舍五入為整數(shù)）； A為潔凈室或潔凈區(qū)的面積，以m2計。采樣點(diǎn)布置規(guī)則如下：最少采樣點(diǎn)數(shù)目面積(M2)潔凈度級別100級10,000級100,000級300,000

12、級<102-322210204222204082224010010422注：表中的面積，對于單向流潔凈室指的是送風(fēng)面積，對于非單向流潔凈室，指的是房間面積。要保證采樣點(diǎn)均勻分布于整個潔凈室或潔凈區(qū)內(nèi)，并位于工作高度。采樣點(diǎn)在離地面0.8米高度的水平面上均勻布置； 采樣點(diǎn)多余5點(diǎn)時，也可以在離地面0.81.5米高度的區(qū)域內(nèi)分層布置，但每層不少于5點(diǎn)。（4）確定各采樣點(diǎn)的單次采樣量按公式求出單次采樣量：20Cn,m Vs= ×100 其中： Vs 為每個采樣點(diǎn)單次最少采樣量，用升表示； Cn,m為相關(guān)等級規(guī)定的所選最大粒徑之等級限值（個/cm3空氣）。20：當(dāng)粒子濃度處于等級限值時

13、，可檢測到的粒子數(shù)目。每個采樣點(diǎn)的采樣量至少為2升，采樣時間最少為1分鐘。溫度和濕度: 潔凈室（區(qū)）的溫度和濕度與其生產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)。（除有特殊要求外,溫度控制在18-26，相對濕度控制在45%-65%之間為宜）。（2）壓差: 空氣潔凈級別不同的相鄰房間之間的相對靜壓差應(yīng)大于5帕，潔凈室與室外大氣的靜壓差應(yīng)大于10帕。（5）測試時間：（1） 對于單向流，測試應(yīng)在生產(chǎn)廠房凈化系統(tǒng)正常運(yùn)行時間不少于10分鐘后開始。（2）對于非單向流，測試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時間不少于30分鐘后開始。（6）采樣注意事項(xiàng)在確認(rèn)潔凈室送風(fēng)量和壓差達(dá)到要求后，方可進(jìn)行采樣。 對于單向流，計數(shù)器采樣管口朝向應(yīng)正

14、對于氣流方向，對于非單向流，采樣口宜向上。布置采樣點(diǎn)時，應(yīng)避開回風(fēng)口。采樣時測試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)。測試狀態(tài)：靜態(tài)測試，室內(nèi)測試人員不得多于兩人。（7）測試程序按照說明書和儀器校準(zhǔn)證，設(shè)定粒子計數(shù)器；采樣探頭應(yīng)位于氣流中指向氣流。若采樣的氣流方向并未受控或不可預(yù)測，則采樣探頭的入口應(yīng)垂直向上。在每個采樣點(diǎn)，按前面確定的最小采樣量采樣；當(dāng)僅需要一個采樣點(diǎn)時，則最少在該點(diǎn)進(jìn)行三次采樣。825結(jié)果記錄（1）各采樣點(diǎn)的平均粒子濃度；將相對于空氣潔凈度等級的每種所選粒徑的粒子濃度采樣測量結(jié)果記錄下來；附件2：塵埃粒子測定測定濃度表當(dāng)只用一個采樣點(diǎn)時，計算并記錄每種選擇粒徑的采樣數(shù)據(jù)平均值；當(dāng)在一個采

15、樣點(diǎn)上進(jìn)行2次或更多次采樣時，根據(jù)下式，從每次采樣粒子濃度計算出和每種所選粒徑的粒子平均濃度，并記錄下結(jié)果Xi1+Xi2+Xin n Xi=其中：Xi 采樣點(diǎn)i的平均粒子濃度，i可代表任何位置； Xi1至Xin 每次采樣的粒子濃度； N在采樣點(diǎn)i的采樣次數(shù)。（2）95%置信上限（UCL）的計算要求當(dāng)采樣點(diǎn)數(shù)目多于1個但少于10個時，則按以下公式，根據(jù)所有各點(diǎn)的平均粒子濃度計算總平均值、標(biāo)準(zhǔn)誤差及95%置信上限。Xi1+Xi2+Xim m總平均值 X= 其中：X 為各采樣點(diǎn)平均值的總平均值； Xi1至Xim 為各個采樣點(diǎn)的平均值 M為采樣點(diǎn)平均值的數(shù)目。無論哪個給定采樣點(diǎn)的樣品數(shù)是多少，所有單個

16、采樣點(diǎn)的平均值都等量加權(quán)。采樣點(diǎn)平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差（A1-M）2 +（A2-M）2+ ··· +（AL-M）2L（L-1） SE= ······················（3）式中：SE平均值均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差，粒/ m3其中：S為采樣點(diǎn)平均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差?？偲骄档?5%置信上限（UCL） S95%UCL= X + t0.95m 其中： t0.95

17、表示具有m-1自由度的t分布的第95個百分位。 95%置信上限UCL的t分布系數(shù)平均值的數(shù)目（m）23456789>9t6.312.922.352.132.021.941.901.86在采樣點(diǎn)只有1個或多于9個時,不用計算95%置信上限。 結(jié)果評定826可接受標(biāo)準(zhǔn) 每個采樣點(diǎn)測得的粒子濃度平均值及計算的95%置信上限未超過下列所列的粒子數(shù)目。判斷懸浮粒子潔凈度級別應(yīng)依據(jù)下述二個條件：（1） 每個采樣點(diǎn)的平均粒子濃度必須低于或等于規(guī)定的級別界限，即Ai級別界限。（2）全部采樣點(diǎn)的粒子濃度平均值均值的95%置信上限必須低于或等于規(guī)定的級別界限，即UCL級別界限。潔凈室懸浮粒子潔凈度等級ISO

18、等級 大于或等于表中所示粒徑的粒子最大濃度限值（個/m3空氣）0.1m0.2m0.3m0.5m1m5mISO5級（百級）1000002370010200352083229ISO7級（萬級）352000832002930ISO8級（十萬級）35200008320002930083 微生物測定83 .1 微生物測定的目的 微生物測定的目的是確定浮游的生物微粒濃度和生物微粒沉降密度，以此來判斷潔凈室是否達(dá)到規(guī)定的潔凈度。83 .2 微生物測定的方法 微生物測定有浮游菌和沉降菌兩種測定方法。 浮游菌用計數(shù)濃度表示：CFU/L或CFU/m3；沉降菌用沉降濃度表示：CFU/（皿·min）兩種方法

19、可以并存，也可任選一種。浮游菌與沉降菌的關(guān)系存在著以下的近似公式： Ng=Ns FT其中：Ng為在F面積上的細(xì)菌沉降數(shù)，CFU； N為空氣中的浮游菌濃度，CFU/m3； s為含菌粒子沉降速度，cm/s； F為沉降面積，cm2； T為沉降時間，s。83 .2.1 浮游菌的測定方法（1）方法提要本方法采用計數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。（2）所用的儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基a）浮游菌采樣器；b）真空抽氣泵；c）培養(yǎng)皿；d）培養(yǎng)基；e）恒溫培

20、養(yǎng)箱。（3）測試條件浮游菌測試前，被測試潔凈室（或潔凈區(qū)）溫、濕度須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。浮游菌測試前，被測試潔凈室（或潔凈區(qū)）已經(jīng)過消毒。 測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。（4）測試人員測試人員必須穿戴符合環(huán)境級別的工作服。靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員不得多于2人。（5）測試時間對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10 min后開始。對非單向流，如10 000級，100 000級以上的凈化房間，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30 min后開始。（6）采樣規(guī)則采樣

21、點(diǎn)數(shù)量及其布置最少采樣點(diǎn)數(shù)目：浮游菌測試的最少采樣點(diǎn)數(shù)目分為日常監(jiān)測及環(huán)境驗(yàn)證兩種情況，見表。表 最少采樣點(diǎn)數(shù)目面 積（m2）潔 凈 度 級 別10010 000100 000驗(yàn)證監(jiān)測驗(yàn)證監(jiān)測驗(yàn)證監(jiān)測<1023121210<204221220<408321240<100164412100<20040103200<400802064001604013注：1）表1中的面積，對于100級的單向流潔凈室（包括層流工作臺），指的是送風(fēng)口表面積，對于10 000級，100 000級的非單向流潔凈室，指的是房間面積。2）日常監(jiān)測的采樣點(diǎn)數(shù)目由生產(chǎn)工藝的關(guān)鍵操作點(diǎn)來確定。a

22、）對每個100級潔凈操作區(qū)域（如層流罩、層流工作臺），可在離藥物敞開口處30cm處設(shè)測點(diǎn)，每班一次。b）對每個10 000級潔凈工作區(qū)域（如藥物開口工作區(qū)）可在工作面處設(shè)測點(diǎn)，每班一次。采樣點(diǎn)的位置采樣點(diǎn)位置可以同懸浮粒子測試點(diǎn)。a）工作區(qū)測點(diǎn)位置離地0.81.5m左右（略高于工作面）。b）送風(fēng)口測點(diǎn)位置離開送風(fēng)面30cm左右。c）可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點(diǎn)。最小采樣量采樣量根據(jù)日常檢測及環(huán)境驗(yàn)證定，每次最小采樣量見表。表 最小采樣量潔凈度級別采樣量，L/次日常監(jiān)測環(huán)境驗(yàn)證100級6001 00010 000級400500100 000級0100采樣次數(shù)每個采樣點(diǎn)一般每日采樣一次

23、。采樣注意事項(xiàng)a）對于單向流或送風(fēng)口，采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對氣流方向；對于非單向流，采樣管口向上。b）布置采樣點(diǎn)時，至少應(yīng)離開塵粒較集中的回風(fēng)口1m以上。c） 采樣時，測試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)。（7）測試步驟測試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。a）采樣器進(jìn)入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內(nèi)。b）用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。c） 采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。d）采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。

24、e）采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。浮游菌采樣器的采樣程序a）儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。b）關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。c）置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動定時器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時間。培養(yǎng)a）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。b）在3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于48h。c）每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染。可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。 菌落計數(shù)a）用肉眼直接計數(shù)、標(biāo)記或在菌落計

25、數(shù)器上點(diǎn)計，然后用510倍放大鏡檢查，有否遺漏。b） 若平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。 注意事項(xiàng)a）使用前仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。b） 采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對樣本的污染。c） 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。d）由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。e）微生物培養(yǎng)采用：大豆酪蛋白消化瓊脂培養(yǎng)基（8）記錄測試報告中應(yīng)記錄房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態(tài)。附件

26、3：浮游菌檢測記錄（9）結(jié)果計算a）用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。b） 每個測點(diǎn)的浮游菌平均濃度的計算，見式（1）。平均濃度（個/m3）=菌落數(shù)···············（1）采樣量（10）結(jié)果評定用浮游菌平均濃度判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。a）每個測點(diǎn)的浮游菌平均濃度必須低于所選定的評定標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于細(xì)菌濃度的界限。b）若某測點(diǎn)的浮游菌平均濃度超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對此區(qū)域先行消毒，然后重新采樣兩次，兩次測試結(jié)果必須合格。（11）浮游菌的

27、測定可接受標(biāo)準(zhǔn) 空氣潔凈度評價標(biāo)準(zhǔn)空氣潔凈度級別總浮游菌濃度平均值（CFU/m3）驗(yàn)證日常監(jiān)測100級1210000級220100000級20100測試狀態(tài)對單向流，測試在空氣凈化系統(tǒng)至少運(yùn)行10min后進(jìn)行；對非單向流系統(tǒng)，至少運(yùn)行30min后進(jìn)行。83 .2.2 沉降菌的測定方法沉降菌是用暴露法收集降落在培養(yǎng)皿中的活生物性粒子，然后加以培養(yǎng)、繁殖后加以計數(shù)得到的。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16293-16294-1996醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌、沉降菌的測試方法。（1）測試方法方法概述：本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其

28、繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。 所用的儀器和設(shè)備a）高壓消毒鍋：使用時應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說明書操作。b） 恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進(jìn)行檢定。c）培養(yǎng)皿：一般采用Æ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。d）培養(yǎng)基：普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認(rèn)可的培養(yǎng)基。（2）測試狀態(tài) 沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）的溫濕度須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）已經(jīng)過消毒。 測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中

29、注明測試狀態(tài)。（3） 測試人員 測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員不得多于二人。（4）測試時間 對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10min后開始。 對非單向流，如10 000級、100 000級以上的凈化房間，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min后開始。（5）采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置最少采樣點(diǎn)數(shù)目沉降法的最少采樣點(diǎn)數(shù)可按表1確定。表1 沉降菌測定最少采樣點(diǎn)數(shù)目（個）面 積m2潔 凈 度 級 別10010 000100 000<102322<20422<4082240<1001642100&l

30、t;20040103200<40080206400<100016040131 000<2 00040010032200080020063注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指的是送風(fēng)面面積，對非單向流潔凈室是指的房間面積。在滿足最少測點(diǎn)數(shù)的同時，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見表2。表2 最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級別所需Æ90mm培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降0.5h 計）100142210 000100 000采樣點(diǎn)的布置采樣點(diǎn)的位置可以同懸浮粒子測試點(diǎn)。a）工作區(qū)采樣點(diǎn)的位置離地0.8m1.5m左右（略高于工作面）。b）可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加采樣點(diǎn)。（6） 測試步驟采樣方法將已

31、制備好的培養(yǎng)皿按8.4.5.2的要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5h，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。 培養(yǎng)a）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。b） 在3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于48h。c）每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。 菌落計數(shù) a）用肉眼直接計數(shù)，標(biāo)記或在菌落計數(shù)器上點(diǎn)計，然后用510倍放大鏡檢查，不否遺漏。b） 若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2 個或2個以上菌落計數(shù)。（7）注意事項(xiàng) 測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。 采取一切措施防止人為對樣本的污染。 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參

32、數(shù)作詳細(xì)的記錄。 由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉定物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。 采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。（8）記錄測試報告中應(yīng)記錄房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態(tài)。附件4：沉降菌檢測記錄（9）結(jié)果計算 用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。 平均菌落數(shù)的計算，見式（1）。平均菌落數(shù)M=M1+M2+Mn·············

33、··（1）n式中：M平均菌落數(shù)； M11號培養(yǎng)皿菌落數(shù)； M22號培養(yǎng)皿菌落數(shù)； Mnn號培養(yǎng)皿菌落數(shù)； n培養(yǎng)皿總數(shù)。（10）結(jié)果評定用平均菌落數(shù)判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。 潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標(biāo)準(zhǔn)。若某潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對此區(qū)域先進(jìn)行消毒，然后重新采樣兩次，測試結(jié)果均須合格.（11） 沉降菌的測定可接受標(biāo)準(zhǔn) 沉降菌測定合格限度空氣潔凈度級別沉降菌落數(shù)（CFU/皿）100級平均110000級平均3100000級平均108.3 靜壓差確認(rèn)8.3.1 空氣潔凈度等級不同的靜壓差應(yīng)大于5Pa，潔凈室區(qū)與室外大氣的靜壓差應(yīng)大于10Pa。8.3.2 方法（1） 測量前應(yīng)將所有門都關(guān)閉，測量時不允許有人穿越房間，并開啟房間中的排風(fēng)機(jī)或除塵器，通過墻壁上安裝的微壓表，讀出房間這間的壓差。（2）從平面上最里面的房間依次向外測定。（4）每天上、下午各進(jìn)行一次測定，將測定時間和測定結(jié)果記錄下來。附件5：靜壓差測定結(jié)果表8.4 溫濕度確認(rèn)8.4.1 合格標(biāo)準(zhǔn) 溫度： 18-26 相對濕度：