金果欖防治消化性潰瘍的機(jī)制研究

1、    【摘要】    目的研究金果欖對消化性潰瘍的作用機(jī)制。方法采用醋酸燒灼法建立大鼠胃潰瘍模型, 測血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量及胃潰瘍組織中SOD、MDA、前列腺素E2(PGE2) 的變化。結(jié)果胃潰瘍大鼠模型血清及胃黏膜組織中SOD活性降低,MDA含量增加,胃黏膜PGE2的水平降低,潰瘍指數(shù)明顯增加; 金果欖能提高組織及血清SOD的活力,降低MDA含量,并可提高胃黏膜PGE2的水平,降低潰瘍指數(shù),與模型組相比有顯著性差異。結(jié)論金果欖防治消化性潰瘍的機(jī)制可能與抗氧自由基損傷、提高胃黏

2、膜內(nèi)源性PGE2的水平有關(guān)。    【關(guān)鍵詞】 金果欖 胃潰瘍 超氧化物歧化酶 丙二醛 前列腺素E2 金果欖是中國藥典收載的具有地區(qū)特色的中藥材，含鹽酸巴馬汀、鹽酸藥根堿等生物堿類活性成分。具有清熱解毒，利咽止痛之功效。主治咽喉腫痛、癰疽疔毒、泄瀉、痢疾、脘腹熱痛等。金果欖具有多方面生理活性和藥理作用,本實(shí)驗(yàn)觀察其對大鼠胃潰瘍血清SOD，MDA及胃黏膜PGE2，SOD，MDA含量的影響來探討其作用機(jī)理，現(xiàn)報(bào)道如下。1 材料與儀器1.1 動物Wistar大鼠，200220 g,3月齡, 雌雄兼用，鄖陽醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供，動物許可證號：SYXK(鄂)20

3、05-0031。1.2 藥物金果欖購自湖北天寧中藥材公司, 經(jīng)陳吉炎老師鑒定為原為金果Tinosporacapillips Gagnep的干燥塊根。取金果欖加水煎煮3 次, 合并煎液, 過濾, 濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于原生藥2.5 g; 斯達(dá)舒膠囊，修正制藥有限公司出品，批號070621。1.3 試劑與儀器超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)試劑盒和PGE2 (前列腺素E2) 放免試劑盒,由武漢博士德生物工程有限公司提供。10%水合氯醛（十堰市太和醫(yī)藥藥學(xué)部制劑室提供）。游標(biāo)卡尺（0125 ,精度 0.02 ,成都量刀具總廠生產(chǎn)）。2 方法2.1 動物分組大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組、模型組、金果

4、欖治療組、斯達(dá)舒組， 每組10只。2.2 給藥方法金果欖治療組灌服含生藥20 g·kg-1 的金果欖煎劑, 斯達(dá)舒組灌胃劑量30 g·kg-1,其余各組均灌服等量純化水，連續(xù)用藥7 d。2.3 動物造模及標(biāo)本制作末次給藥后各組動物分別禁食水24 h,按改良Okabe法,將動物禁食48 h, 10%水合氯醛麻醉后,固定于手術(shù)臺上,剃腹毛、消毒、鋪巾，于劍突下腹中線稍左分層切開腹壁約118 cm將胃引出,在胃前壁漿膜面竇體交界處同一部位(避開血管) ,用浸有100%冰醋酸直徑為5 mm的圓形濾紙接觸2次,每次30 s后還納胃體逐層縫合切口,涂上一層稀釋的火棉膠,保護(hù)切口。假手術(shù)

5、組作同樣處理但不接觸冰醋酸。術(shù)后將動物分籠飼養(yǎng),禁食禁水,并防止吞食糞便。24 h后拆線開腹,腹主動脈取血,分離血清,檢測血清SOD及MDA含量;結(jié)扎賁門,摘除全胃,用濾紙擦凈血跡,沿胃大彎剪開胃壁,取潰瘍邊緣的胃黏膜,用冰生理鹽水制成1%的勻漿,測定胃黏膜內(nèi)源性PGE2，SOD，MDA含量;將全胃置于1%的福爾馬林溶液中固定10分鐘,然后平展于玻璃板上,在胃前部黏膜面觀察潰瘍發(fā)生情況,按下述評分標(biāo)準(zhǔn)評定潰瘍指數(shù)并計(jì)算潰瘍抑制百分率。潰瘍指數(shù)：潰瘍長度指潰瘍的最大直徑, 潰瘍長度大于1 mm，每1 mm為1分；寬度為與直徑垂直的最寬距離,寬度大于1 mm，按潰瘍點(diǎn)計(jì)算,每點(diǎn)0.5分。每只動物的

6、累計(jì)總分即為該動物的潰瘍指數(shù)；潰瘍抑制率（）（模型組潰瘍指數(shù)均值實(shí)驗(yàn)組潰瘍指數(shù)均值模型組潰瘍指數(shù)均值）×100。3 結(jié)果3.1 各組大鼠胃潰瘍指數(shù)和潰瘍抑制率的比較結(jié)果見表1。表1 各組潰瘍指數(shù)及潰瘍抑制率比較（略）與模型組比較，P0.05；n=103.2 對胃潰瘍大鼠血清SOD及MDA的影響測定結(jié)果比較見表2，結(jié)果可見,模型組大鼠血清SOD活力明顯降低,MDA含量明顯升高。金果欖及斯達(dá)舒組大鼠血清SOD活力明顯較模型組升高。表2 對胃潰瘍大鼠血清SOD及MDA的影響（略）與模型組比較, P0.05；n=103.3 對胃潰瘍大鼠胃黏膜SOD及MDA的影響表3結(jié)果可見,模型組大鼠胃黏膜

7、SOD活力明顯降低,MDA含量明顯升高。金果欖及斯達(dá)舒組大鼠胃黏膜SOD活力明顯升高,MDA含量明顯降低。表3 對胃潰瘍大鼠胃黏膜SOD及MDA的影響（略）與模型組比較, P0.05；n=103.4 對胃潰瘍大鼠胃黏膜PGE2的影響表4結(jié)果可見,模型組大鼠胃黏膜PGE2含量明顯降低, 金果欖及斯達(dá)舒組大鼠胃黏膜PGE2含量明顯升高。 表4 各組大鼠血漿PGE2含量測定結(jié)果比較（略）與模型組比較,P0.05；n=104 討論 目前對胃潰瘍形成的原因有多種解釋，尚未形成肯定的病因理論，胃潰瘍的發(fā)病機(jī)理可能與高胃酸狀態(tài)和胃黏膜屏障作用減弱密切相關(guān)，精神情緒、應(yīng)激狀態(tài)、藥物和飲食等是引起潰瘍的誘因。據(jù)

8、此可用化學(xué)性、物理性刺激以及通過應(yīng)激狀態(tài)誘發(fā)各種潰瘍病理模型。本實(shí)驗(yàn)從研究金果欖對大鼠消化性胃潰瘍的作用入手，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，金果欖能明顯降低潰瘍指數(shù),具有促進(jìn)潰瘍愈合的作用，對消化性胃潰瘍有明顯的改善作用。 胃和十二指腸黏膜的內(nèi)生前列腺素主要是PGE2 ,具有促進(jìn)胃黏膜上皮細(xì)胞分泌粘液與HCO3·、加強(qiáng)黏膜血液循環(huán)和蛋白質(zhì)合成等作用,是增強(qiáng)黏膜上皮細(xì)胞更新、維持黏膜完整性的一個(gè)重要保護(hù)因素。因此,提高胃腸黏膜內(nèi)源性PGE2的分泌,可增強(qiáng)胃腸黏膜的自我保護(hù)能力。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,胃舒膠囊明顯減輕因幽門結(jié)扎所致胃黏膜損傷的程度,可能與提高胃黏膜內(nèi)源性PGE2的水平有關(guān)。金果欖能提高血漿P

9、GE2水平。PGE2是評價(jià)再生黏膜功能成熟度的一個(gè)重要指標(biāo),為公認(rèn)的細(xì)胞保護(hù)因子。它作為一種局部激素,通過抑制胃酸分泌,增加黏膜血流,促進(jìn)胃粘液和碳酸氫鹽分泌,促進(jìn)蛋白合成和細(xì)胞更新,介導(dǎo)適應(yīng)性細(xì)胞保護(hù)作用,從而間接減少黏膜損害,使已受損的胃黏膜修復(fù)。模型組大鼠PGE2 水平較正常組明顯降低,說明潰瘍形成過程中,其胃黏膜分泌細(xì)胞保護(hù)性激素PGE2 功能受損。而經(jīng)金果欖治療后, 大鼠血漿PGE2水平明顯上升, 與模型組比較有顯著性差異,說明金果欖可顯著促進(jìn)胃潰瘍大鼠上皮細(xì)胞合成和分泌PGE2,增強(qiáng)胃黏膜防御功能,有提高再生黏膜功能成熟度的作用，這可能是其促進(jìn)潰瘍愈合的機(jī)理之一。 胃腸黏膜在化學(xué)物

10、質(zhì)作用或缺血等情況下可產(chǎn)生大量的氧自由基,過量的氧自由基在整體水平和細(xì)胞水平都可以引起胃黏膜或黏膜細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化,并以共價(jià)鍵結(jié)合的方式造成胃黏膜的損傷5。清除氧自由基不但能防止胃腸黏膜損傷,還可促進(jìn)損傷的修復(fù)。SOD是催化、清除氧自由基的重要酶類,是生物體內(nèi)氧自由基清除系統(tǒng)的首要防線, 具有保護(hù)細(xì)胞DNA、蛋白質(zhì)與細(xì)胞膜的功能,是胃黏膜的保護(hù)因子之一,其活力的高低間接反應(yīng)了機(jī)體清除自由基的能力;MDA是胃黏膜的攻擊因子之一,MDA含量的高低又間接反映出機(jī)體組織細(xì)胞受氧自由基攻擊的嚴(yán)重程度,因而MDA的測定常常和SOD的測定相互配合。在胃黏膜損傷過程中, SOD的活性降低,MDA的含量升高。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示, 金果欖可提高胃黏膜及血清SOD水平、降低MDA的水平,顯示出較強(qiáng)的清除氧自由基、保護(hù)胃黏膜的能力。    【參考文獻(xiàn)】 鐘 鳴, 朱紅梅, 余勝民，等. 金果欖醇提物的抗炎鎮(zhèn)痛作用J.中國中藥雜志, 1999(增刊): 105. 黎運(yùn)呈. 復(fù)方潰瘍靈治療胃潰瘍的實(shí)驗(yàn)研究J. 湖北民族學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版) , 2005, 22 (1) : 22. 許宏俐益氣化淤煎劑抗大