胸腺肽對嚴(yán)重?zé)齻颊呙庖吖δ苷{(diào)理的初步研究

1、胸腺肽對嚴(yán)重?zé)齻颊呙庖吖δ苷{(diào)理的初步研究         10-05-12 15:04:00     編輯：studa20                     作者：劉靜杰，隋志甫，朱敬民，郝天智 【摘要】  目的 研究胸腺肽對嚴(yán)重?zé)齻颊叩拿庖哒{(diào)理作用

2、。方法 選取30例嚴(yán)重?zé)齻颊?其中15例除常規(guī)治療外還應(yīng)用胸腺肽治療)，分別于傷后3、7、14、28天抽取靜脈血，酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法測定腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN)，并用流式細(xì)胞儀測定單核細(xì)胞表面人類白細(xì)胞DR抗原(HLADR)。結(jié)果 接受胸腺肽治療的患者血漿IFN水平升高持續(xù)至停藥后較長的一段時間，未接受胸腺肽治療的患者IFN水平幾乎測不出。接受胸腺肽治療的患者與未接受胸腺肽治療的患者外周血TNF水平無顯著差異。傷后7、14、28天接受胸腺肽治療的患者單核細(xì)胞HLADR較未接受治療組高。結(jié)論 胸腺肽對嚴(yán)重?zé)齻颊叩拿庖吖δ苡忻黠@改善。 【關(guān)鍵詞】  胸腺

3、肽;免疫抑制;抗原Abstract： Objective To study the immune opsonization of thymic peptide in severe burned patients.Methods The peripheral blood was drawn from 30 severe burned patients(15 of them were given 1.6mg thymic peptide every other day) on days 3,7,14,28 after injury.TNF and IFN were measured by mean

4、s of ELISA.The expressed HLADR of monocyte was measured by means of flow cytometry.Results The IFN of the patients who were given thymic peptide increased,which was not found in control group.The TNF of the two groups had no significant difference.The HLADR in thymic peptide group was higher than th

5、at in control group.Conclusion Thymic peptide can largely improve the immune function of severe patients.Key words:thymic peptide;immune inhibition;antigen胸腺肽是來自于胸腺組織中的肽類成分，對胸腺依賴性淋巴細(xì)胞的分化、成熟起著重要的調(diào)節(jié)和控制作用。自被發(fā)現(xiàn)分離提純以來，胸腺肽己廣泛應(yīng)用于多種臨床免疫疾病，并且取得了一定的療效。有研究表明2，7嚴(yán)重?zé)齻颊叽嬖诓煌潭鹊拿庖呶蓙y，臨床工作者已開始關(guān)注胸腺肽對燒傷免疫功能的作用，胸腺肽己開始用于

6、嚴(yán)重?zé)齻闹委?。本研究觀察了應(yīng)用了胸腺肽治療的燒傷患者的細(xì)胞因子和人類白細(xì)胞DR抗原(HLADR)的變化，對胸腺肽對嚴(yán)重?zé)齻颊呙庖吖δ苡绊戇M(jìn)行評價。        材料與方法1 觀察對象我科近年來的住院的特重度燒傷患者30例，年齡(32.4±5.8)歲，深°以上燒傷面積在50%60%之間，其中°面積在40%60%之間，傷前無器質(zhì)性疾病?；颊呷拷?jīng)正規(guī)治療。其中15例重度燒傷患者，除常規(guī)治療外，在傷后第3日(休克期過后)開始應(yīng)用胸腺肽治療。用法為1.6mg，皮下注射，隔日1次，應(yīng)用10次后停藥。

7、胸腺肽治療組患者°燒傷面積平均為46%，常規(guī)治療組患者°燒傷面積平均為47.5%，經(jīng)統(tǒng)計二組傷情差異不顯著。所研究病例治療過程中病情平穩(wěn)，均痊愈出院。2 標(biāo)本收集根據(jù)臨床實際,在不影響臨床治療,并考慮到患者承受程度的情況下,燒傷后3、7、14、28天靜脈采血，采血時間均為清晨5:006:00，5%乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，無菌操作。采血后留取0.5ml全血做HLADR的檢測,其余立即分離血漿-70并保存。用于測定正常組、燒傷后各組患者的腫瘤壞死因子(TNF)及干擾素(IFN)的水平。3 指標(biāo)檢測及方法3.1 外周血漿TNF、IFN水平測定 采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELIS

8、A)檢測血漿中TNF、IFN水平(按操作說明書進(jìn)行)，通過倍比稀釋制作標(biāo)準(zhǔn)曲線依次加入抗體、標(biāo)記二抗、顯色底物，酶標(biāo)儀在合適的波長(450nm)測定光密度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸方程計算相應(yīng)標(biāo)本中TNF、IFN含量。3.2 用流式細(xì)胞儀檢測單核細(xì)胞表面HLADR的表達(dá) (1)0.5ml新鮮全血(采血后6小時內(nèi))加入5ml紅細(xì)胞裂解液(KHCO3 1.0g,NH4Cl 8.3g EDTA 37mg加蒸餾水至100ml調(diào)整pH至7.4)，混勻，室溫下靜置15分鐘，待溶液變清亮后，200g離心，棄上清。(2)以PBS(NaCl 8g;KCl 0.2g;NaHPO·7H2O 1.15g;KH

9、2PO4加蒸餾水1000ml)溶液洗滌沉淀1次，加入PBS恢復(fù)體積至0.5ml;(3)加入10l PECD14鼠抗人單克隆抗體充分混勻，再加入10l FITCHLADR鼠抗人單克隆抗體充分混勻，室溫避光孵育1小時;(4)PBS溶液洗滌2次;(5)定容至0.4ml，加入100l 4%多聚甲醛固定;(6)用200目濾網(wǎng)將溶液過濾入流氏專用樣品檢測管中;(7)上流式細(xì)胞儀檢測。4 統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用stata軟件進(jìn)行t檢驗和方差分析，P<0.05為差異顯著;P<0.01為差異非常顯著特重度燒傷患者外周血漿IFN水平變化。        結(jié) 果1 健康人血中測不出IFN和TNF。2 給予胸腺肽治療的患者血中IFN水平升高并持續(xù)停藥以后，傷后28日后可測出，未給予胸腺肽僅給予常規(guī)治療的患者，血中測不出IFN(見表1)。3 給予胸腺肽治療的患者血中TNF水平較對照組低，但二者差異無顯著意義(見表2)。4 治療早期二組單核細(xì)胞表面HLADR均處