潔凈室(區(qū))沉降菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、名稱：潔凈室（區(qū)）沉降菌測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程共 6 頁編號(hào)：SOP-QC-002版本號(hào)：00起草:日期：變更原因：審核:日期：批準(zhǔn):日期：執(zhí)行日期：頒發(fā)部門：質(zhì)量保證部分發(fā)部門：質(zhì)量總監(jiān)、質(zhì)量保證部、質(zhì)量控制部目的 制定標(biāo)準(zhǔn)的潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法，指導(dǎo)沉降菌的測(cè)試工作。范圍適用于潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)定和驗(yàn)證。責(zé)任QC微生物室檢驗(yàn)員負(fù)責(zé)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試，QC主管和QA部門負(fù)責(zé)對(duì)測(cè)試的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。程序1. 定義 1.1. 菌落：微生物培養(yǎng)后，由一個(gè)或幾個(gè)微生物繁殖而形成的微生物集落，簡(jiǎn)稱CFU。1.2. 沉降菌：通過自然沉降原理收集在空氣中的活微生物粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適

2、宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數(shù)。1.3. 動(dòng)態(tài)測(cè)試：潔凈室（區(qū)）已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)設(shè)備在指定的方式下進(jìn)行，并且有指定的人員按照規(guī)范操作的狀態(tài)。2. 測(cè)試方法2.1. 測(cè)試過程2.1.1. 設(shè)備和培養(yǎng)基：恒溫培養(yǎng)箱、購(gòu)買預(yù)灌裝TSA平皿或者自制TSA平皿。2.2. 測(cè)試條件2.2.1. 潔凈室（區(qū)）的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)（無特殊要求時(shí)，溫度在1826，相對(duì)濕度在45%65%為宜）。2.2.2. 風(fēng)速、壓差應(yīng)在合格范圍內(nèi)。2.2.3. 動(dòng)態(tài)測(cè)試。2.3. 測(cè)試方法2.3.1. 將準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿按采樣點(diǎn)要求放置或放在沉降架上（約1.0m）。將采樣臺(tái)面取樣位置或采樣輔助設(shè)施表面消

3、毒，打開培養(yǎng)皿，將培養(yǎng)皿蓋置于已消毒位置，將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)皿蓋上，使培養(yǎng)基表面充分暴露后，將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。2.3.2. 在每一只培養(yǎng)皿上標(biāo)記好具體的取樣位置及取樣日期，將所有培養(yǎng)皿在QC微生物室進(jìn)行培養(yǎng)觀察。2.4. 培養(yǎng)觀察計(jì)數(shù)2.4.1. 全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在2025培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2天后觀察計(jì)數(shù)。2.4.2. 每批培養(yǎng)基應(yīng)有陰性對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染。可每次選定2只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。2.5. 計(jì)算2.5.1. 平均菌落數(shù)= M11號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)M22號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)Mnn號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)n培養(yǎng)皿總數(shù)2.5.2. 結(jié)果判定2.

4、5.2.1. 最終結(jié)果采用平均值。但每個(gè)碟的菌落數(shù)亦不得多于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。2.5.2.2. 如有一個(gè)碟的菌落數(shù)超過標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，平均卻符合規(guī)定，也以不合格論。2.5.2.3. 靜態(tài)測(cè)試時(shí)，若某潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對(duì)此區(qū)域先進(jìn)行消毒，然后重新采樣兩次，測(cè)試結(jié)果均須合格。2.6. 注意事項(xiàng)2.6.1. 若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。2.6.2. 采取一切措施防止人為因素對(duì)樣本的污染。2.6.3. 由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，

5、必要時(shí)用顯微鏡鑒別。2.6.4. 采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。2.6.5. 對(duì)于沉降菌測(cè)試，符合最少采樣點(diǎn)數(shù)時(shí)，還必須符合最小培養(yǎng)皿數(shù)。最少采樣點(diǎn)數(shù)與最少培養(yǎng)皿見附表。2.7. 日常監(jiān)控2.7.1. 對(duì)于沉降菌的監(jiān)控，宜設(shè)定糾偏限和警戒限 ，以保證潔凈室（區(qū)）的微生物濃度受到控制。應(yīng)定期檢測(cè)以檢查微生物負(fù)荷以及消毒劑的效力，并做趨勢(shì)分析。靜態(tài)動(dòng)態(tài)監(jiān)控都可以采用此方法。2.7.2. 對(duì)于沉降菌的取樣頻次。如果出現(xiàn)下列情況應(yīng)考慮修改，在評(píng)估以下情況后，也應(yīng)確定其他項(xiàng)目的檢測(cè)頻次：2.7.2.1. 連續(xù)超過糾偏限和警戒限2.7.2.2. 停工時(shí)間比預(yù)計(jì)長(zhǎng)2.7.

6、2.3. 關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)污染存在2.7.2.4. 在生產(chǎn)期間，空氣凈化系統(tǒng)進(jìn)行任何重大的維修2.7.2.5. 日常操作記錄反映出傾向性的數(shù)據(jù)2.7.2.6. 消毒規(guī)程的改變2.7.2.7. 引起生物污染的事故等2.7.2.8. 當(dāng)生產(chǎn)設(shè)備有重大維修或增加設(shè)備時(shí)2.7.2.9. 當(dāng)潔凈室（區(qū)）結(jié)構(gòu)或區(qū)域分布有重大變動(dòng)時(shí)2.8. 潔凈車間采樣點(diǎn)分布圖詳見潔凈區(qū)潔凈度監(jiān)控管理規(guī)程。2.9. 微生物實(shí)驗(yàn)室采樣點(diǎn)分布圖詳見微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境測(cè)試規(guī)程。相關(guān)文件和記錄序號(hào)文件/記錄名稱文件/記錄編號(hào)備注1沉降菌測(cè)試記錄SOP-QC-002a-002潔凈區(qū)潔凈度監(jiān)控管理規(guī)程SMP-QA-0153微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境

7、測(cè)試規(guī)程SMP-QA-031變更 /修訂記錄：原版本生效日期本次變更/修訂的原因、依據(jù)及詳細(xì)變更內(nèi)容附圖： 最少采樣點(diǎn)數(shù)目面 積m2潔 凈 度 級(jí) 別A級(jí) C級(jí)D級(jí)< 10232210< 2042220< 4082240< 1001642100< 20040103200< 40080206400< 100016040131000< 200040010032200080020063注：對(duì)于A級(jí)的單向流潔凈室（區(qū)），包括A級(jí)工作臺(tái)，面積指的是送風(fēng)口的表面積。對(duì)于C級(jí)以上的非單向流潔凈室（區(qū)），面積指的是指房間面積。沉降菌測(cè)試記錄編號(hào)：SOP-QC-002a-00 測(cè)試人： 測(cè)試日期： 測(cè)試時(shí)間： 測(cè)試依據(jù)： 測(cè)試級(jí)別： 級(jí) 生化培養(yǎng)箱型號(hào)： 編號(hào)：_有效期至：_霉菌培養(yǎng)箱型號(hào)：_編號(hào)：_有效期至：_培養(yǎng)基批號(hào) ： 來源： 有效