食品中維生素C含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn) 3食品中維生素C 含量的測(cè)定（ 2，6-二氯酚靛酚滴定法）一、實(shí)驗(yàn)原理維生素 C又稱抗壞血酸， 還原型抗壞血酸能還原染料2，6- 二氯酚靛酚鈉鹽， 本身則氧化成脫氫抗壞血酸。2，6- 二氯酚靛酚的鈉鹽水溶液呈藍(lán)色，在酸性溶液中呈玫瑰紅色，當(dāng)其被還原時(shí)就變?yōu)闊o(wú)色，因此，可用 2， 6- 二氯酚靛酚滴定樣品中的還原型抗壞血酸。當(dāng)抗壞血酸完全被氧化后，稍多加一點(diǎn)染料，使滴定液呈淡紅色，即為終點(diǎn)。如無(wú)其他雜質(zhì)干擾，樣品提取液所還原的標(biāo)準(zhǔn)染料量與樣品中所含的還原型抗壞血酸量成正比。二、試劑和器材偏磷酸醋酸溶液：取15g（用時(shí)研細(xì)）溶于40mL醋酸及 20mL水的混合液中，然后用水稀釋至 500mL

2、，過(guò)濾后儲(chǔ)入試劑瓶中。標(biāo)準(zhǔn) 2，6- 二氯酚靛酚溶液：取， 6- 二氯酚靛酚溶于 700mL蒸餾水中（用力攪動(dòng)），加入 300mL磷酸緩沖液（預(yù)先配制L L Na 2HPO4·2HO水溶液，用時(shí)以KH2PO4：Na2HPO4·2H2O=4： 6 的比率將其混合， pH 值為），翌日過(guò)濾，濾液儲(chǔ)于棕色瓶中，臨用時(shí)，以抗壞血酸溶液標(biāo)定。標(biāo)準(zhǔn)維生素 C 溶液：以少量偏磷酸醋酸溶液溶解維生素C 于 100mL容量瓶中，再以該液稀釋至刻度。2，6- 二氯酚靛酚液的標(biāo)定：在3 個(gè) 100mL錐形瓶中，各置5mL偏磷酸醋酸液，再各加 2mL標(biāo)準(zhǔn)維生素 C溶液，搖勻。用上面所制的標(biāo)準(zhǔn) 2，

3、6- 二氯酚靛酚液滴定，呈玫瑰紅色保持 30s 不褪色為止。記下所用 2，6- 二氯酚靛酚溶液體積平均值，再以同樣方法做一空白實(shí)驗(yàn)，取 7mL偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相當(dāng)于以上所用的 2，6- 二氯酚靛酚溶液的低定量），仍用 2，6- 二氯酚靛酚溶液滴定。將第一次滴定的量減去空白實(shí)驗(yàn)的量，即為標(biāo)準(zhǔn)維生素的反應(yīng)量，求出1mL 2，6- 二氯酚靛酚對(duì)應(yīng)于維生素C的質(zhì)量（ mg）。研缽、容量瓶、剪刀、錐形瓶、微量滴定管三、實(shí)驗(yàn)步驟1、用自來(lái)水沖洗果蔬樣品，再以蒸餾水清洗，用紗布或吸水紙吸干表面水分，然后稱取 25g，剪碎，在研缽中研呈漿狀。 加入 20mL3%偏磷酸醋酸液， 攪動(dòng)，抽提。過(guò)濾液經(jīng)漏

4、斗流入 100mL容量瓶中，殘?jiān)僖?30mL偏磷酸醋酸液提取 3 次，濾液及洗滌液皆流入該容量瓶中，以蒸餾水稀釋至刻度，加塞搖勻。如濾液顏色較深，可用白陶土脫色。2、吸取 10mL提取液于錐形瓶中，加5mL偏磷酸醋酸液，混合均勻，以2，6- 二氯酚靛酚溶液滴定，并不斷搖動(dòng)，至溶液呈玫瑰紅色保持30s 不褪色為止。3、吸取 15mL 偏磷酸醋酸液，加水若干毫升（相當(dāng)于以上樣品實(shí)驗(yàn)滴定所用2，6-二氯酚靛酚溶液的量）做一空白實(shí)驗(yàn)，用同樣方法，以 2，6- 二氯酚靛酚溶液滴定。4、結(jié)果計(jì)算維生素 C的含量（ mg/100g）按下式計(jì)算：（v1）維生素 C的含量v2 * c* 10010* m100式中 v1 樣品用 2，6- 二氯酚靛酚溶液的滴定體積，mLV2 空白用 2，6- 二氯酚靛酚溶液的滴定體積，mLC 1 mL 2 ，6- 二氯酚靛酚相當(dāng)于維生素 C的含量， mg/mL m 樣品質(zhì)量。四、注意事項(xiàng)1、樣品中某些雜質(zhì)也能還原2，6- 二氯酚靛酚，但速率均較抗壞血酸慢，故終點(diǎn)以淡色存在 30s 為準(zhǔn)。2、維生素 C還可以用 2%草酸溶液來(lái)提取， 2%草酸和偏磷酸同樣具有抑制抗壞血酸氧化酶的功效。3、若樣品中含有大量Fe