生化與分子大題匯編

1、1、什么是非編碼RNA非編碼RNA有哪些？有什么作用？（13年真題）非編碼RNA（non-codingRNA）是指不編碼蛋白質(zhì)的RNA其中包括rRNA,tRNA,snRNAsnoRNA和siRNA,miRNA,piRNA等多種已知功能的RNA,還包括未知功能的RNA這些RNA的共同特點(diǎn)是都能從基因組上轉(zhuǎn)錄而來，但是不翻譯成蛋白，在RNA水平上就能行使各自的生物學(xué)功能了。非編碼RNA從長度上來劃分可以分為3類：小于50nt,包括miRNAsiRNA,piRNA;50nt至U500nt,包括rRNAtRNA,snRNAsnoRNASLRNASRPRN曲等；大于500nt,包括長白mRNA-like

2、的非編碼RNA長的不帶polyA尾巴的非編碼RN描等。tRNA:功能主要是攜帶氨基酸進(jìn)入核糖體，在mRNAf導(dǎo)下合成蛋白質(zhì)。rRNA：是細(xì)胞中含量最多的RNA它與蛋白質(zhì)結(jié)合而成核糖體，其功能是作為mRNA勺支架，使mRN吩子在其上展開，實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的合成。snRNA是smallnuclearRNA的簡稱，也稱作小核RNA其功能是與蛋白因子結(jié)合形成小核核糖蛋白顆粒，參與mRN順體的加工過程。snoRNA是最早在核仁發(fā)現(xiàn)的小RNA稱作小核仁RNA最初發(fā)現(xiàn)它們的生物功能是用來修飾rRNA的。miRNA:也是非編碼RNA是小的RNA子，具有破壞目標(biāo)特異性基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物或者誘導(dǎo)翻譯抑制的功能，與轉(zhuǎn)錄基因互

3、補(bǔ)，介導(dǎo)基因沉默（RNAi）。siRNA:激發(fā)與之互補(bǔ)的目標(biāo)mRNA勺沉默.piRNA:piRNA主要存在于哺乳動物的生殖細(xì)胞和干細(xì)胞中，通過與Piwi亞家族蛋白結(jié)合形成piRNA復(fù)合物（piRC）來調(diào)控基因沉默途徑。對Piwi亞家族蛋白的遺傳分析以及piRNA積累的時(shí)間特性研究發(fā)現(xiàn)，piRC在配子發(fā)生過程中起著十分重要的作用。還能維持生殖系和干細(xì)胞功能和調(diào)節(jié)翻譯和mRNA勺穩(wěn)定性.非編碼RNA目前的研究顯示，ncRNA的主要功能有：參與mRNA勺穩(wěn)定和翻譯水平的調(diào)節(jié)、參與蛋白質(zhì)的運(yùn)輸、參與RNA勺加工和修飾、影響染色體的結(jié)構(gòu)等。2、表觀遺傳學(xué)的概念機(jī)主要研究內(nèi)容。（10年真題）3、表觀遺傳概

4、念、主要內(nèi)容及其與癌癥研究作用。（11年真題）4、組蛋白翻譯后修飾、對轉(zhuǎn)錄的意義（10年真題）表觀遺傳學(xué)的內(nèi)容太多，一時(shí)整理不出來，我這里有本圖書館借來的書，你可以看一下。（2、3、4題都是表觀遺傳學(xué)）5、有關(guān)糖酵解、TCA循環(huán)、電子傳遞鏈、戊糖磷酸途徑以及乳糖操縱子、色氨酸操縱子自己總結(jié)（一定要做）6、試述泛素的降解過程？（09年真題，自己整理下，答案上說的不多，下冊301頁）7、酶的活性受哪些因素調(diào)節(jié)，試說明之。（13年真題）答：酶的調(diào)節(jié)和控制有多種方式，主要有：（1）調(diào)節(jié)酶的濃度：主要有2種方式：誘導(dǎo)或抑制酶的合成；調(diào)節(jié)酶的降解；（2）通過激素調(diào)節(jié)酶活性、激素通過與細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)受體相結(jié)

5、合而引起一系列生物學(xué)效應(yīng)，以此來調(diào)節(jié)酶活性；(3)反饋抑制調(diào)節(jié)酶活性：許多小分子物質(zhì)的合成是由一連串的反應(yīng)組成的，催化此物質(zhì)合成的第一步的酶，往往被他們終端產(chǎn)物抑制；(4)抑制劑和激活劑對酶活性的調(diào)節(jié)：酶受大分子抑制劑或小分子物質(zhì)抑制，從而影響酶活性；(5)其他調(diào)節(jié)方式：通過別構(gòu)酶、酶原的激活、酶的可逆共價(jià)修飾和同工酶來調(diào)節(jié)酶活性。別構(gòu)調(diào)節(jié)：某些調(diào)節(jié)物能與酶的調(diào)節(jié)部位結(jié)合使酶分子的構(gòu)象發(fā)生改變，從而改變酶的活性以及代謝反應(yīng)的速度?？赡婀矁r(jià)修飾：酶蛋白肽鏈上的一些基因可與某種化學(xué)基團(tuán)發(fā)生可逆的共價(jià)結(jié)合，從而改變酶的活性。共價(jià)修飾包括磷酸化與脫磷酸化，乙?；c脫乙?；?、甲基化與脫甲基化等，其中以磷

6、酸化修飾最為常見。酶原的激活：有一些酶在細(xì)胞內(nèi)合成及釋放的初期，通常不具有催化活性，必須經(jīng)過蛋白酶酶解或其他因素的作用，才能轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘拿浮?、酶的調(diào)節(jié)包括酶活性的調(diào)節(jié)和酶含量的調(diào)節(jié)，前者又分為變構(gòu)效應(yīng)、酶的特異激活和抑制以及共價(jià)修飾等幾種形式；后者受合成和降解兩方面的影響。9、激素的作用方式(作用機(jī)理)，及各種作用方式的代表物質(zhì)。(自己總結(jié))(上冊570頁)10、真核生物DNA聚合酶有哪幾種？它們主要功能是什么？(下冊425頁，表34-5)11、說明真核生物基因表達(dá)調(diào)節(jié)機(jī)制的主要特點(diǎn)(10年真題)。答：真核生物基因表達(dá)調(diào)節(jié)機(jī)制的主要特點(diǎn)是：真核生物細(xì)胞基因的表達(dá)可隨細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境條件的改變和

7、時(shí)間程序面在不同表達(dá)水平上加以精確調(diào)節(jié)?；虮磉_(dá)是有多個(gè)層面上進(jìn)行的多級調(diào)控：(1)轉(zhuǎn)錄前水平的調(diào)節(jié)：染色體丟失；基因擴(kuò)增；基因重排；染色體DNA的修飾和異染色質(zhì)化。(2)轉(zhuǎn)錄活性的調(diào)節(jié)：染色質(zhì)的活化；啟動子和增強(qiáng)子的順式作用元件；調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的反式作用因子。(3)轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)節(jié)：戴帽；加尾；甲基化修飾；拼接。(4)翻譯水平的調(diào)節(jié)：對可溶性蛋白質(zhì)因子的修飾；對mRNA穩(wěn)定性的調(diào)節(jié)；.反義RNA對翻譯水平的調(diào)控。(5)翻譯后水平的調(diào)節(jié)：切割；化學(xué)修飾；連接。12、真核生物轉(zhuǎn)錄前水平的基因調(diào)節(jié)主要有哪些方式？答：真核生物轉(zhuǎn)錄前水平的基因調(diào)節(jié)主要有染色體丟失、基因擴(kuò)增、基因重排、染色體DNA的修飾和異

8、染色質(zhì)化等方式。13、比較真核生物和原核生物轉(zhuǎn)錄水平與翻譯水平的調(diào)節(jié)的異同點(diǎn)。答：原核生物的基因組和染色體結(jié)構(gòu)都比真核生物簡單，轉(zhuǎn)錄和翻譯在同一時(shí)間和空間內(nèi)發(fā)生，基因表達(dá)的調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平。原核生物通過由結(jié)構(gòu)基因、調(diào)節(jié)基因及由調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物所識別的控制序列(啟動子、操縱基因)等所組成的操縱子對基因的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)。真核生物有細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄和翻譯過程在時(shí)間和空間上都被分隔開，且在轉(zhuǎn)錄和翻譯后都有復(fù)雜的信息加工過程，其基因表達(dá)的調(diào)控可以發(fā)生在各種不同的水平上。真核生物不組成操縱子，不形成多順反子mRNA。真核生物在轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)節(jié)包括染色質(zhì)的活化和基因的活化，基因轉(zhuǎn)錄受順式作用元件，包括啟動子

9、、增強(qiáng)子及其應(yīng)答元件的控制；也受反式作用因子如基本轉(zhuǎn)錄因子、上游轉(zhuǎn)錄因子和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子等的調(diào)節(jié)。真核生物翻譯水平的調(diào)節(jié)主要是控制mRNA的穩(wěn)定性和有選擇的進(jìn)行翻譯。14、DNA的復(fù)制過程可分為哪幾個(gè)階段？其主要特點(diǎn)是什么？答：DNA的復(fù)制過程包括復(fù)制的起始、延伸和終止三個(gè)階段。(1)復(fù)制的起始引發(fā)：當(dāng)DNA的雙螺旋解開后，合成RNA引物。引發(fā)體沿著模板鏈5-3方向移動(與岡崎片段合成的方向正好相反，而與復(fù)制叉移動的方向相同)，移到一定位置上即可引發(fā)RNA引物的合成。(2) DNA鏈的延伸前導(dǎo)鏈只需要一個(gè)RNA引物，后隨鏈的每一個(gè)岡崎片段都需要一個(gè)RNA引物，鏈的延長反應(yīng)由DNApol.出催化。

10、復(fù)制體沿著復(fù)制叉方向前進(jìn)合成DNA。DNApolI的5,-3,外切活力，切除RNA引物。DNApolI的5,-3,合成活性補(bǔ)齊缺口。DNAligase,動物、真核由ATP供能，原核由NAD供能。(3) DNA合成的終止環(huán)狀DNA、線性DNA,復(fù)制叉相遇即終止。15、DNA重組可分為哪幾種類型？它們的主要特點(diǎn)是什么？答：DNA重組有3種類型，分別是同源重組、特異位點(diǎn)重組和轉(zhuǎn)座重組。同源重組又叫一般性重組，它是由兩條同源區(qū)的DNA分子，通過配對、鏈的斷裂和再連接，而產(chǎn)生片段交換的過程。同源重組的功能是在減數(shù)分裂中使四聯(lián)體某些位置的非姊妹染色單體之間可以發(fā)生交換。同源重組發(fā)生是依賴大范圍的DNA同源

11、序列的聯(lián)會。重組過程中，兩個(gè)染色體或DNA分子交換對等的部分。其特點(diǎn)是：需要重組的蛋白質(zhì)參與；蛋白質(zhì)因子對DNA堿基序列的特異性要求不高；真核生物染色質(zhì)的狀態(tài)影響重組的頻率。特異位點(diǎn)重組的特點(diǎn)：重組依賴于小范圍同源序列的聯(lián)會，發(fā)生精確的斷裂、連接，DNA分子并不對等交換。轉(zhuǎn)座重組的特點(diǎn)：完全不依賴于序列間的同源性而使一段DNA序列插入另一段中，但在形成重組分子時(shí)往往是依賴于DNA復(fù)制而完成重組過程。16、何謂轉(zhuǎn)座重組？它有何生物學(xué)意義？答：由插入序列和轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因移位或重排稱為轉(zhuǎn)座重組。轉(zhuǎn)座重組的生物學(xué)意義有：可引起基因突變插入或切離；改變?nèi)旧|(zhì)的結(jié)構(gòu)(缺失、倒位等)；可以插入新基(amp

12、R、terR等)；在靶序列上引入新的轉(zhuǎn)座子序列，原來序列保持不變；在靶序列上造成同向重復(fù)序列；產(chǎn)生新的變異，有利于進(jìn)化。17、細(xì)菌的轉(zhuǎn)座因子有幾種？它們的結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)？答：微生物的某些DNA片段作為一個(gè)獨(dú)立單位可在染色體上移動，此種移動甚至可發(fā)生在不同種細(xì)胞之間。這種可移動的DNA片段稱之為轉(zhuǎn)座因子。細(xì)菌的轉(zhuǎn)座因子有兩種類型：插入序歹U(insertsequence,IS)和轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn)。插入序列不含任何宿主基因，是最簡單的轉(zhuǎn)座子，它們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。所有插入序列的兩端都有反向重復(fù)。轉(zhuǎn)座子除編碼轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的基因外還攜帶抗性或其它標(biāo)記基因。按結(jié)構(gòu)

13、可分為組合因子和復(fù)合因子。18、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)？答：轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子分類。轉(zhuǎn)錄因子，分為兩類：基本轉(zhuǎn)錄因子是RNA聚合酶結(jié)合啟動子所必需的一組因子，為所有mRNA轉(zhuǎn)錄起動共有特異轉(zhuǎn)錄因子為個(gè)別基因轉(zhuǎn)錄所必需，決定該基因的時(shí)間、空間特異性表達(dá)，包括轉(zhuǎn)錄激活因子和抑制因子。所有轉(zhuǎn)錄因子至少包括兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：DNA結(jié)合域和轉(zhuǎn)錄激活域；此外，很多轉(zhuǎn)錄因子還包含一個(gè)介導(dǎo)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的結(jié)構(gòu)域，最常見的是二聚化結(jié)構(gòu)域。DNA結(jié)合域通常由60-100個(gè)氨基酸殘基組成。最常見的DNA結(jié)合域結(jié)構(gòu)形式是鋅指結(jié)構(gòu)和堿性“螺旋。類似的堿性DNA結(jié)合域多見于堿性亮氨酸拉鏈和堿性螺旋-環(huán)-螺旋。轉(zhuǎn)錄激活域一

14、一由30-100個(gè)氨基酸殘基組成。根據(jù)氨基酸組成特點(diǎn)，轉(zhuǎn)錄激活域又有酸性激活域、谷氨酰胺富含區(qū)域及脯氨酸富含區(qū)域。介導(dǎo)二聚化的結(jié)構(gòu)域一一二聚化作用與亮氨酸拉鏈、螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)有關(guān)。19、為什么逆轉(zhuǎn)座子只存在于真核生物中？它有何生物學(xué)意義？答：在轉(zhuǎn)座過程中需要以RNA為中間體，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄再分散到基因組中的轉(zhuǎn)座子，叫逆轉(zhuǎn)座子。由于只有真核生物能完全滿足逆轉(zhuǎn)座子存在的條件（逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶，重復(fù)序列等），所以逆轉(zhuǎn)座子只存在于真核生物中。逆轉(zhuǎn)座子的生物學(xué)意義：影響所在位點(diǎn)或鄰近基因的活性；成為基因組的不穩(wěn)定因素，促進(jìn)基因重組；促進(jìn)生物進(jìn)化。20、為什么說在酶誘導(dǎo)中的調(diào)節(jié)蛋白起負(fù)調(diào)節(jié)作用，而在降解物阻

15、遏中的調(diào)節(jié)蛋白起正調(diào)節(jié)作用？答：酶的誘導(dǎo)和阻遏是在調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物阻遏蛋白（調(diào)節(jié)蛋白）的作用下，通過操縱基因控制結(jié)構(gòu)基因或基因組的轉(zhuǎn)錄而發(fā)生的。由于經(jīng)濟(jì)的原則，細(xì)菌通常并不合成那些在代謝上無用的酶，因此一些分解代謝的酶類只在有關(guān)的底物或底物類似物存在時(shí)才被誘導(dǎo)合成；而一些合成代謝的酶類在產(chǎn)物或產(chǎn)物類似物足夠量存在時(shí)，其合成被阻遏。在酶誘導(dǎo)時(shí)，阻遏蛋白與誘導(dǎo)物相結(jié)合，因而失去封閉操縱基因的能力。對代謝降解物敏感的操縱子受到降解物的阻遏，有關(guān)的調(diào)節(jié)蛋白起正調(diào)節(jié)作用。當(dāng)細(xì)菌在含有葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基中生長時(shí)，通常優(yōu)先利用葡萄糖，只有葡萄糖耗盡后，細(xì)菌經(jīng)過一段停滯期，在乳糖誘導(dǎo)下才能利用乳糖，這種現(xiàn)象稱為

16、葡萄糖效應(yīng)或降解物阻遏。21、何謂衰減子？說明它的作用機(jī)制和生物學(xué)意義。答：在色氨酸操縱子中存在一種轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)節(jié)基因表達(dá)的衰減作用（attenuation）,用以終止和減弱轉(zhuǎn)錄。這種調(diào)節(jié)作用稱為衰減子（attenuator）,是一種位于結(jié)構(gòu)基因上游前導(dǎo)區(qū)的終止子。衰減子的作用機(jī)制是前導(dǎo)區(qū)編碼mRNA的前導(dǎo)序列，該序列可合成一段小肽（前導(dǎo)肽），它在翻譯水平上控制前導(dǎo)區(qū)轉(zhuǎn)錄的終止。衰減子控制轉(zhuǎn)錄起始后是否繼續(xù)下去，是比之阻遏作用是更為精細(xì)的調(diào)節(jié)。22、原位雜交的原理是什么？有何用途?答：將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交，稱為原位雜交。利用原位雜交，可在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或D

17、AN的存在與定位；可在原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。23、miRNA與siRNA之間有許多相同之處：1.二者的長度都約在22nt左右。2.二者都依賴Dicer酶的加工，是Dicer的產(chǎn)物，所以具有Dicer產(chǎn)物的特點(diǎn)。3.二者生成都需要Argonaute家族蛋白存在。4.二者都是RISC組分，所以其功能界限變得不清晰，如二者在介導(dǎo)沉默機(jī)制上有重疊。5.miRNA和siRNA合成都是由雙鏈的RNA或RNA前體形成的。miRNA與siRNA的不同點(diǎn)：1.根本區(qū)別是miRNA是內(nèi)源的，是生物體的固有因素；而siRNA是人工體外合成的，通過轉(zhuǎn)染進(jìn)入人體內(nèi)，是RNA干涉的中間產(chǎn)物。2.結(jié)構(gòu)

18、上，miRNA是單鏈RNA,而siRNA是雙鏈RNA。3.Dicer酶對二者的加工過程不同，miRNA是不對稱加工，miRNA僅是剪切pre-miRNA的一個(gè)側(cè)臂，其他部分降解；而siRNA對稱地來源于雙鏈RNA的前體的兩側(cè)臂。4.在作用位置上，miRNA主要作用于靶標(biāo)基因3-UTR區(qū)，而siRNA可作用于mRNA的任何部位。5.在作用方式上，miRNA可抑制靶標(biāo)基因的翻譯，也可以導(dǎo)致靶標(biāo)基因降解，即在轉(zhuǎn)錄水平后和翻譯水平起作用，而siRNA只能導(dǎo)致靶標(biāo)基因的降解，即為轉(zhuǎn)錄水平后調(diào)控。6.miRNA主要在發(fā)育過程中起作用，調(diào)節(jié)內(nèi)源基因表達(dá)，而siRNA不參與生物生長，是RNAi的產(chǎn)物，原始作用

19、是抑制轉(zhuǎn)座子活性和病毒感染。24、小RNA是一類重要的體內(nèi)調(diào)節(jié)分子，主要包括miRNA、piRNA和siRNA。它的功能主要是誘導(dǎo)基因沉默，參與基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化，以及個(gè)體發(fā)育、生殖等重要生物學(xué)過程。25、原核生物與真核生物mRNAT何特點(diǎn)？答：原核生物以操縱子為轉(zhuǎn)錄單位，產(chǎn)生順反子mRNA即一條mRNA1上有多個(gè)編碼區(qū)，5/端和3/端各有一段非翻譯區(qū)（UTR。原核生物mRNA包括噬菌體RNA都無修飾堿基。真核生物的mRNATB是單順反子，5/端有帽子（cap）結(jié)構(gòu)，然后依次是5/非編碼區(qū)、編碼區(qū)、3/非編碼區(qū)、3/端為聚腺甘酸（poly（A）尾巴，其分子內(nèi)有時(shí)還有極少甲基

20、化的堿基。26、什么是生物膜？研究生物膜的重要性。試述生物膜膜內(nèi)在蛋白三維結(jié)構(gòu)的解析的重要性與困難。（08年真題、課后題）27、RNA的分離（上冊513頁，自己整理）28、總結(jié)檸檬酸循環(huán)在機(jī)體代謝中的作用和地位。（13年真題）答：檸檬酸循環(huán)是絕大多數(shù)生物體主要的分解代謝途徑，也是準(zhǔn)備提供大量自由能的重要代謝系統(tǒng)，在許多合成代謝中都利用檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物作為生物合成的前體來源，從這個(gè)意義上看，檸檬酸循環(huán)具有分解代謝和合成代謝雙重性或稱兩用性。檸檬酸循環(huán)是新陳代謝的中心環(huán)節(jié)。它們在循環(huán)過程中產(chǎn)生的還原型NADH和FADH2,進(jìn)一步通過電子傳遞鏈和氧化磷酸化被再氧化，所釋放出的自由能形成ATP分子

21、。檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物在許多生物合成中充當(dāng)前體原料。地位：1、三竣酸循環(huán)是機(jī)體獲取能量的主要方式2、三竣酸循環(huán)是糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種主要有機(jī)物在體內(nèi)徹底氧化的共同代謝途徑3、三竣酸循環(huán)是體內(nèi)三種主要有機(jī)物互變的聯(lián)結(jié)機(jī)構(gòu)?？傊?，TCA循環(huán)是連接糖代謝、脂代謝和氨基酸代謝的樞紐。（若能將下冊110頁圖23-14用于這里，答案就接近滿分）29、什么是化學(xué)滲透學(xué)說？解釋氧化磷酸化作用機(jī)理的化學(xué)滲透學(xué)說的主要論點(diǎn)是什么？（13年真題）化學(xué)滲透學(xué)說（chemiosmotictheory）:該學(xué)說假設(shè)能量轉(zhuǎn)換和偶聯(lián)機(jī)構(gòu)具有以下特點(diǎn)：由磷脂和蛋白多肽構(gòu)成的膜對離子和質(zhì)子具有選擇性具有氧化還原電位的電子傳遞體不

22、勻稱地嵌合在膜內(nèi)膜上有偶聯(lián)電子傳遞的質(zhì)子轉(zhuǎn)移系統(tǒng)膜上有轉(zhuǎn)移質(zhì)子的ATP酶。在解釋光合磷酸化機(jī)理時(shí)，該學(xué)說強(qiáng)調(diào)：當(dāng)氧化進(jìn)行時(shí)，呼吸鏈起質(zhì)子泵作用，質(zhì)子被泵出線粒體內(nèi)膜之外側(cè)（膜間隙），造成了膜內(nèi)外兩側(cè)間跨膜的電化學(xué)勢差，后者被膜上ATP合成酶所利J用，使ADP與Pi合成ATR主要論點(diǎn)：1）呼吸鏈中的電子傳遞體在線粒體內(nèi)膜中有著特定的不對稱分布，遞氫體和電子傳遞體是間隔交替排列的，催化反應(yīng)是定向的。2）在電子傳遞過程中，復(fù)合物I,III和IV的傳氫體起質(zhì)子泵的作用，將H+從線粒體內(nèi)膜基質(zhì)側(cè)定向地泵至內(nèi)膜外側(cè)空間將電子傳給其后的電子傳遞體。3）線粒體內(nèi)膜對質(zhì)子具有不可自由透過的性質(zhì)，泵到外側(cè)的H+不

23、能自由返回。結(jié)果形成內(nèi)膜內(nèi)外的電化學(xué)勢梯度（由質(zhì)子濃度差產(chǎn)生的電位梯度）。4）線粒體F1-F0-ATPase復(fù)合物能利用ATP水解能量將質(zhì)子泵出內(nèi)膜，但當(dāng)存在足夠高的跨膜質(zhì)子電化學(xué)梯度時(shí)，強(qiáng)大的質(zhì)子流通過F1-F0-ATPase進(jìn)入線粒體基質(zhì)時(shí)，釋放的自由能推動ATP合成。30、DNA測序第一代DNA1序：雙脫氧終止法即sanger測序法。Sanger法是根據(jù)核甘酸在某一固定的點(diǎn)開始，隨機(jī)在某一個(gè)特定的堿基處終止，并且在每個(gè)堿基后面進(jìn)行熒光標(biāo)記，產(chǎn)生以A、T、C、G結(jié)束的四組不同長度的一系列核甘酸，然后在尿素變性的PAGE交上電泳進(jìn)行檢測，從而獲得可見的DNAM基序列。第二代DNA1序：邊合成

24、邊測序在Sanger等測序方法的基礎(chǔ)上，通過技術(shù)創(chuàng)新，用不同顏色的熒光標(biāo)記四種不同的dNTP,當(dāng)DNA聚合酶合成互補(bǔ)鏈時(shí)，每添加一種dNTP就會釋放出不同的熒光，根據(jù)捕捉的熒光信號并經(jīng)過特定的計(jì)算機(jī)軟件處理，從而獲得待測DNA勺序列信息。第三代DNA1序：單分子測序用一種聚合酶將DNA勺復(fù)制限制在一個(gè)微小的間隙中，給各種堿基加上熒光示蹤標(biāo)記，當(dāng)堿基合成DNA連時(shí)，這些熒光標(biāo)記就會發(fā)出不同顏色的閃光，根據(jù)閃光顏色就可識別出不同的堿基。31、比較兩種DNA快速測序的方法，包括方法的原理和優(yōu)缺點(diǎn)。答：目前應(yīng)用的兩種快速序列測定技術(shù)是Sanger等（1977）提出的雙脫氧法（酶法）及Maxam和Gil

25、bert（1977）提出的化學(xué)降解法。雖然其原理大相徑庭，但這兩種方法都是同樣生成互相獨(dú)立的若干組帶放射性標(biāo)記的寡核甘酸，每組寡核甘酸都有固定的起點(diǎn)，但卻隨機(jī)終止于特定的一種或者多種殘基上。由于DNA上的每一個(gè)堿基出現(xiàn)在可變終止端的機(jī)會均等，因些上述每一組產(chǎn)物都是一些寡核甘酸混合物，這些寡核甘酸的長度由某一種特定堿基在原DNA全片段上的位置所決定。然后在可以區(qū)分長度僅差一個(gè)核甘酸的不同DNA分子的條件下，對各組寡核甘酸進(jìn)行電泳分析，只要把幾組寡核甘酸加樣于測序凝膠中若干個(gè)相鄰的泳道這上，即可從凝膠的放射自影片上直接讀出DNA上的核甘酸順序。Sanger法DNA測序Sanger法測序的原理就是利

26、用一種DNA聚合酶來延伸結(jié)合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核甘酸為止。每一次序列測定由一套四個(gè)單獨(dú)的反應(yīng)構(gòu)成，每個(gè)反應(yīng)含有所有四種脫氧核甘酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一種不同的雙脫氧核甘三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團(tuán)，使延長的寡聚核甘酸選擇性地在G、A、T或C處終止。終止點(diǎn)由反應(yīng)中相應(yīng)的雙脫氧而定。每一種dNTPs和ddNTPs的相對濃度可以調(diào)整，使反應(yīng)得到一組長幾百至幾千堿基的鏈終止產(chǎn)物。它們具有共同的起始點(diǎn)，但終止在不同的的核甘酸上，可通過高分辨率變性凝膠電泳分離大小不同的片段，凝膠處理后可用X-光膠片放射自顯影或非同位素標(biāo)記進(jìn)行檢測。S

27、anger法測序快速、省事，不需要比強(qiáng)很高的32P-dNTP,但有時(shí)會出現(xiàn)一些不夠清晰的結(jié)果。MaxamGilbertDNA化學(xué)降解法化學(xué)降解法的原理是首先標(biāo)記雙鏈DNA的5端，然后加入二甲基亞碉并加熱到90。C,使雙鏈DNA分子變成單鏈。通過凝膠電泳分離兩條鏈，其中一條鏈含有更多的喋吟成為重鏈，另一條鏈為輕鏈。純化兩條鏈，分成四份，分別利用不同的降解試劑進(jìn)行降解(哌咤,氮雜環(huán)己烷)，產(chǎn)生了一系列的降解片段?？梢酝ㄟ^電泳分離顯示出來?；瘜W(xué)降解法可以提供比較清晰的結(jié)果，但步驟繁瑣，許多藥品有劇毒。32、電子傳遞鏈和氧化磷酸化之間有何關(guān)系？答：生物氧化亦稱細(xì)胞呼吸，指各類有機(jī)物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行氧化分

28、解，最終產(chǎn)生CO2和H2O,同時(shí)釋放能量(ATP)的過程。包才TCA循環(huán)、電子傳遞和氧化磷酸化三個(gè)步驟，分別是在線粒體的不同部位進(jìn)行的。其中電子傳遞鏈和氧化磷酸化之間關(guān)系密切，電子傳遞和氧化磷酸化偶聯(lián)在一起。根據(jù)化學(xué)滲透學(xué)說(電化學(xué)偶聯(lián)學(xué)說)，在電子傳遞過程中所釋放的能量轉(zhuǎn)化成了跨膜的氫離子濃度梯度的勢能，這種勢能驅(qū)動氧化磷酸化反應(yīng)，合成ATP。即葡萄糖等在TCA循環(huán)中產(chǎn)生的NADH和FADH2只有通過電子傳遞鏈，才能氧化磷酸化，將氧化產(chǎn)生的能量以ATP的形式貯藏起來。33、說明“酮尿癥”的生化機(jī)制(08年真題)。答：酮體是乙酰乙酸、3羥丁酸及丙酮的總稱。嚴(yán)重饑餓或胰島素水平過低，耗盡體內(nèi)糖的

29、貯存，肝中糖異生作用加強(qiáng)，脂肪酸氧化產(chǎn)生大量乙酰-CoA,由于糖異生已經(jīng)耗盡草酰乙酸，使乙酰-CoA不能進(jìn)入TCA循環(huán)，轉(zhuǎn)向生成酮體方向，導(dǎo)致血和尿中酮體過多，即“酮尿癥”，動物沒有乙醛酸循環(huán)。34、試比較脂肪酸合成與脂肪酸3-氧化的異同。(？)答：脂肪酸合成與脂肪酸3-氧化的差異主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面(1)發(fā)生場所不同：胞質(zhì)中；線粒體(2)?；d體不同：ACP;CoA(3)發(fā)生的反應(yīng)不同：縮合、還原、脫水、再還原；脫氫、水化、再脫氫、硫解(4)參與酶類不同：2種酶系；5種(5)輔因子不同：NADPH;FAD,NAD+(6)原料轉(zhuǎn)運(yùn)不同：三竣酸轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制；肉堿載體系統(tǒng)(6) ATP不同：耗7AT

30、P;生成106ATP(7)方向不同：甲基端向竣基端；相反35、說明尿素形成的機(jī)制和意義。答：尿素是通過尿素循環(huán)形成的。尿素循環(huán)亦稱鳥氨酸循環(huán)，是排尿素動物在肝臟中合成尿素的一個(gè)循環(huán)機(jī)制。肝細(xì)胞胞漿中的氨基酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用與a-酮戊二酸形成的谷氨酸，透過線粒體膜進(jìn)入線粒體基質(zhì)，在谷氨酸脫氫酶作用下脫氨形成游離氨。形成的氨（NH+4）與三竣酸循環(huán)產(chǎn)生的二氧化碳、2分子ATP,在氨基甲酰合成酶I的催化下生成氨基甲酰磷酸。氨基甲酰磷酸在線粒體的鳥氨酸轉(zhuǎn)氨基甲酰酶的催化下，將氨基甲?；D(zhuǎn)移給鳥氨酸生成瓜氨酸。瓜氨酸形成后即離開線粒體進(jìn)入胞漿，在ATP的存在下，由精氨酸代琥珀酸合成酶的催化，與天冬氨酸縮合成精氨酸代琥珀酸。天冬氨酸在反應(yīng)中作為氨基的供體。精氨酸代琥珀酸通過裂解酶的催化生成精氨酸和延胡索酸。精氨酸在胞漿精氨酸酶的催化下水解產(chǎn)生尿素和鳥氨酸。鳥氨酸可重新進(jìn)入尿素循環(huán)。蛋白質(zhì)在體內(nèi)分解成氨基酸，再分解產(chǎn)生氨，過量的氨具有神經(jīng)毒性，氨的解毒是在肝內(nèi)合成尿素,再隨尿排出。因此，通過合成尿素可以維持正常的血氨水平。36、尿素循環(huán)的過程及發(fā)生部位（11年真題，自己總結(jié)，真題答案不詳細(xì)）37、生物體內(nèi)喋吟和喀咤從頭合成途徑有何區(qū)別？分別有什么氨基酸參與？（1