脂質(zhì)體LiposomesVIP

1、脂質(zhì)體脂質(zhì)體 Liposomes 脂質(zhì)體 liposomes 1965年被英國Bangham提出 磷脂分散在水中可形成多層囊泡，每一層均為脂質(zhì)雙分子層，各層之間被水相隔開一、概述一、概述 Introductions脂質(zhì)體的示意圖脂質(zhì)體主要由磷脂和膽固醇組成 磷脂由一個親水的頭部和兩個疏水的尾部組成 磷脂的結構示意圖載藥脂質(zhì)體的結構示意圖 藥物被脂質(zhì)體包封后有以下特點：1靶向性和淋巴定向性 2長效性 3細胞親和性與組織相容性 4降低藥物毒性 5提高藥物穩(wěn)定性 脂質(zhì)體在體內(nèi)與細胞的作用過程吸附 adsorption脂交換 lipid exchange內(nèi)吞作用 endocytosis融合 fusio

2、n1中性磷脂磷中性磷脂磷 電中性、化學惰性天然磷脂 磷脂酰膽堿phosphatidylcholine合成的磷脂 二棕櫚酰膽堿dipalmitoyl phosphatidyl choline DPPC 二硬脂酰膽堿distearoyl phosphatidyl choline DSPC 鞘磷脂sphingomyelin 磷脂酰乙醇胺phosphatidylethanolamine 二、制備脂質(zhì)體的材料 Materials for preparation of liposomes2負電荷磷脂負電荷磷脂 負電荷磷脂又稱為酸性磷脂 磷脂酸 phosphatidic acid, PA 磷脂酰甘油 pho

3、sphatidyl glycerol, PG 磷脂酰肌醇 phosphatidylinositol, PI 磷脂酰絲氨酸 phosphatidyl serine,PS 3正電荷脂質(zhì)正電荷脂質(zhì) 均為人工合成產(chǎn)品 硬脂酰胺 stearylamine,SA 膽固醇衍生物 4膽固醇膽固醇 cholesterol 自然界生物膜中的另一類重要的組分 中性脂質(zhì)，兩親性分子，親油性大于親水性膽固醇的結構 5長循環(huán)膜材料長循環(huán)膜材料 神經(jīng)節(jié)苷脂 ganglioside GM1 GM1引入了唾液酸殘基增強了膜的穩(wěn)定性、減少了網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細胞對脂質(zhì)體的攝取，延長了脂質(zhì)體的體內(nèi)循環(huán)時間 聚乙二醇衍生物 polyeth

4、ylene glycol derivatives 聚乙二醇基則增強了脂質(zhì)體膜的親水性，阻止網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細胞對脂質(zhì)體的攝取，延長了脂質(zhì)體的體內(nèi)循環(huán)時間 1薄膜法薄膜法 最早由Bangham報道 磷脂等膜材溶于適量的有機溶劑 脂溶性藥物可加在有機溶劑中，然后在減壓旋轉下除去溶劑，使脂質(zhì)在器壁形成薄膜，加入含有水溶性藥物的緩沖液，進行振搖，則可形成大多室脂質(zhì)體，其粒徑范圍約1-5m。三、制備脂質(zhì)體的方法三、制備脂質(zhì)體的方法 Preparation of liposomes2逆相蒸發(fā)法逆相蒸發(fā)法 Reverse-phase evaporation 由Szoka提出 膜材溶于有機溶劑，加入待包封藥物的水

5、溶液，進行短時超聲，直至形成穩(wěn)定的W/O型乳劑，減壓蒸發(fā)有機溶劑，形成脂質(zhì)體。 一般為大單層脂質(zhì)體 包封的藥物量大它適合于包封水溶性藥物及大分子生物活性物質(zhì) 脂質(zhì)體膜制備脂質(zhì)體膜制備 擠壓制備小粒徑脂質(zhì)體擠壓制備小粒徑脂質(zhì)體 通過擠壓使脂質(zhì)體通過固定孔徑的濾膜，脂質(zhì)體粒徑變小。該方法需要很低的壓力，689kPa即可。 聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane），該膜的通道是直的并且大小相同，脂質(zhì)體容易通過，即使脂質(zhì)體直徑略大于孔徑也能通過。一般將脂質(zhì)體原液稀釋至12mol/ml后再過膜，脂質(zhì)體易通過孔徑。 脂質(zhì)體加壓通過孔時，其結構發(fā)生變化，根據(jù)所需脂質(zhì)體的大小選擇膜的孔徑。3

6、主動包封法主動包封法 Remote loading method 從根本上改變了難以制備高包封率脂質(zhì)體的局面。 主動包封技術的應用與藥物的結構密切相關，不能推廣到任意結構的藥物，因而受到了限制。 弱堿性的藥物 采用pH梯度法、硫酸銨梯度法 弱酸性的藥物 采用醋酸鈣梯度法等。遙控裝載遙控裝載硫酸銨梯度法硫酸銨梯度法包封阿霉素隱形脂質(zhì)體 根據(jù)化學平衡移動原理而設計的，空白脂質(zhì)體包封阿霉素的前提是： 1. 脂質(zhì)體膜可透過分子型藥物； 2. 離子型化合物較少或幾乎不透過脂膜； 3. 硫酸阿霉素的溶度積 鹽酸阿霉素的溶度積。硫酸銨梯度法包封阿霉素的步驟硫酸銨梯度法包封阿霉素的步驟1.制備脂質(zhì)材料薄膜旋轉

7、蒸發(fā)；2.用硫酸銨溶液使脂膜水化，形成粗空白脂質(zhì)體；3.擠壓使通過聚碳酸酯微孔濾膜，較大粒徑的脂質(zhì)體被“粉碎”成小粒徑的脂質(zhì)體，得空白脂質(zhì)體；4.通過透析法或凝膠柱過濾，除去空白脂質(zhì)體囊泡外部的硫酸銨，從而使脂質(zhì)體囊泡內(nèi)、外部的硫酸銨濃度形成了濃度梯度差(1000倍）；5.鹽酸阿霉素水溶液與上述空白脂質(zhì)體混合、60孵育30min、不斷振搖，即得。(NH4)2SO4 2NH3 + 2H+ = 2NH4+ + SO42-(DOX-NH2)2SO4 DOX-NH2gel-like precipitate2DOX-NH3.CI2DOX-NH3+2CI-2DOX-NH2+2HCI2DOX-NH2硫酸銨梯度法包封鹽酸阿霉素硫酸銨梯度法包封鹽酸阿霉素隱形脂質(zhì)體的隱形機理隱形脂質(zhì)體的隱形機理4免疫脂質(zhì)體制備法免疫脂質(zhì)體制備法 抗體與脂質(zhì)體結合方法有：（1）吸附法（2）脂質(zhì)蛋白融合法 （3）交聯(lián)法1形態(tài)、粒徑及其分布2包封率和載藥量的測定3釋放度與滲漏率的測定4藥物體內(nèi)分布