實驗二_檢測生物組織中的糖類脂肪和蛋白質(zhì)學(xué)案

1、檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)實驗報告姓名:班級:【實驗?zāi)康摹?、嘗試檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì),探討細(xì)胞中主要化合物的種類。2、掌握實驗的操作技能。3、認(rèn)識到脂肪、糖類、蛋白質(zhì)和淀粉是生物組織的重要成分?！緦嶒炘怼磕承┗瘜W(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色也可以被蘇丹染液染成紅色。糖類中的還原性糖(如葡萄糖、果糖可以與斐林試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生磚紅色沉淀。蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。淀粉遇碘變藍(lán)色。因此,可以根據(jù)與某些化學(xué)試劑所產(chǎn)生的顏色反應(yīng),檢測生物組織中糖類、脂肪或蛋白質(zhì)的存在?！静牧掀骶摺?.實驗材料:蘋果或梨勻

2、漿,馬鈴薯勻漿,花生種子,花生種子勻漿,豆?jié){。2.儀器:解剖刀,試管(最好用刻度試管,試管架,試管夾,滴管,大小燒杯,量筒,酒精燈,三腳架,石棉網(wǎng),火柴,載玻片,蓋玻片,毛筆,吸水紙,顯微鏡。3.試劑:斐林試劑(甲夜:質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液,乙夜:質(zhì)量濃度為0.05g/ml 的CuSO4溶液蘇丹III或蘇丹染液,雙縮脲試劑(A夜:質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液,B夜:質(zhì)量濃度為0.01g/ml的CuSO4溶液,體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液,蒸餾水,碘液?！緦嶒炞⒁鈫栴}】一定要聽從老師的安排,不讓動的堅決不動。保持安靜,堅決不能大聲喧嘩。注意實驗安全注意愛護(hù)實驗器材,誰損壞

3、誰負(fù)責(zé)?！緦嶒炦^程】(一可溶性糖的鑒定操作方法注意問題解釋1. 制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過濾蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的顏色掩蓋。2. 取1支試管,向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。3. 向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,實驗前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進(jìn)行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH 2在70900C下分解成黑色CuO 和水;甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應(yīng),無Cu ( OH 2生成。4. 試管

4、放在盛有50650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,溶液顏色:淺藍(lán)色棕色(沉淀最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向?qū)嶒炚摺Ｒ部捎镁凭珶羲〖訜?。防止試管?nèi)的溶液沖出試管,造成燙傷;縮短實驗時間。(二脂肪的鑒定操作方法注意問題解釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡34小時,新花生的浸泡時間則可縮短。因為浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。在子葉薄片上滴23滴蘇丹或蘇丹染液,染色1分鐘。染色時間不宜過長。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色

5、,再用吸水紙吸去酒精。酒精用于洗去浮色,若不洗去,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上12滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片最薄處,可看到細(xì)胞中有染成或圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙醇中。(三蛋白質(zhì)的鑒定操作方法注意問題解釋制備組織樣液。(浸泡、去皮研磨、過濾。黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。鑒定。加樣液約2ml于試管中,加入雙縮脲試劑A液1ml,搖勻;再加入雙縮脲試劑B液3 4滴,搖勻,溶液變。A液和B液也要分開配制

6、,儲存。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入,會導(dǎo)致Cu2+變成Cu ( OH 2沉淀,而失效。否則CuSO4的藍(lán)色會遮蓋反應(yīng)的真實顏色?？捎玫扒宕娑?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。附:淀粉的檢測和觀察:用試管取2ml待測組織樣液,向試管內(nèi)加2滴碘液,觀察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察【實驗結(jié)論】實驗結(jié)果和分析:生物組織樣液化學(xué)試劑特定顏色反應(yīng)證明某種化合物存在梨花生種子黃豆馬鈴薯【課后鞏固】1、以花生子葉為材料

7、進(jìn)行脂肪的檢測時,制作臨時裝片的正確步驟是 ( 蓋蓋玻片切子葉蘇丹染液染色滴加蒸餾水酒精洗去浮色A.B.C.D.2、下列各組中的前項為需檢測的物質(zhì),中項為使用的試劑,后項為產(chǎn)生的顏色,正確的是 ( A. 葡萄糖、斐林試劑、磚紅色B. 脂肪、蘇丹染液、紅色C. 蛋白質(zhì)、雙縮脲試劑、藍(lán)色D. 脂肪、蘇丹染液、橘黃色3、醫(yī)院確認(rèn)糖尿病的常用方法及結(jié)果是( A. 加入斐林試劑,出現(xiàn)磚紅色B.加入碘碘化鉀溶液,出現(xiàn)藍(lán)色C. 加入蘇丹溶液,出現(xiàn)橘黃色D.加入碘碘化鉀溶液,出現(xiàn)淡黃色4、在可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗中,對實驗材料的選擇敘述錯誤的是( A.馬鈴薯塊莖中含有較多的糖且近于白色,可用于進(jìn)行可溶性還原糖的鑒定B.花生種子富含脂肪且子葉肥厚,是用于脂肪鑒定的好材料C.大豆種子蛋白質(zhì)含量高,是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的理想植物組織材料D.雞蛋清含蛋白質(zhì)多,是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的動物材料5、在鑒定可溶性還原糖的實驗中,加入斐林試劑時必