Teixobactin 一種新型抗生素

1、Teixobactin- 30年來首個新抗生素年來首個新抗生素報告人：唐漢卿報告人：唐漢卿2016.4讀書報告讀書報告2016.4前言前言危機危機1960s合成Faster99%12016.4報告框架報告框架 1. Teixobactin的發(fā)現(xiàn)與效果的發(fā)現(xiàn)與效果 2. 活性測試活性測試 3. 合成合成2016.41. Teixobactin的發(fā)現(xiàn)的發(fā)現(xiàn)Kim Lewis, Source: Northeastern Universiry, Boston, USA“I thought: Aw, damn it,” says Lewis. “We discovered a detergent.”粗譯

2、：啊，我勒個去，我們發(fā)現(xiàn)了一種新型清潔劑。3iChip支撐板支撐板中心板中心板-中間有中間有瓊脂瓊脂2016.41. Teixobactin的發(fā)現(xiàn)的發(fā)現(xiàn)42016.41. Teixobactin的發(fā)現(xiàn)的發(fā)現(xiàn)從10,000種多種化合物中篩選具有抗S. aureus活性的化合物，發(fā)現(xiàn)了來自于Eleftheria terrae菌（G-）的一種活性非常高的化合物，命名為Teixobactin(TEIX)非核糖多肽體合成酶（非核糖多肽體合成酶（NRPS）基因）基因5 1,242Da 11個個AA 4個個D型型 1個結構個結構復雜氨基復雜氨基酸酸2016.4報告框架報告框架 1. Teixobactin的

3、發(fā)現(xiàn)與效果的發(fā)現(xiàn)與效果 2. 活性測試活性測試 3. 合成合成2016.42.活性測試活性測試MIC(最小抑菌濃度最小抑菌濃度)-Broth Microdilution(微量肉湯稀釋法微量肉湯稀釋法)微生物及遺微生物及遺傳型傳型Organism and genotypeTXO MIC (gml-1)金黃色葡萄球菌S.aureus(MSSA)0.25(耐甲氧西林型)S. aureus (MRSA)0.25肺炎雙球菌（抗青霉素）Streptococcus pneumoniae(penicillinR)0.03炭疽桿菌B. anthracis0.06梭狀芽孢桿菌Clostridium diffici

4、le0.005結合分歧桿菌（H37Rv）M.Tuberculosis H37Rv0.125大腸埃希氏菌Escherichia coli25銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa32大腸埃希氏菌（asmB1）Escherichia coli (asmB1)2.50.002% 吐溫805105 cells per mlBiological Replicates（生物學可重復性）CLSI 指導62016.42. 活性測試活性測試Minimum bactericidal concentration (MBC)-最小殺菌濃度最小殺菌濃度S. aureus NCTC8325-4 20h，

5、37離心離心MHA24h，37MBC定義為：殺死99.9%供試菌所需的最低藥物濃度。論文中，TEIX的MBC一般為2MIC。7重懸，涂布重懸，涂布2016.42. 活性測試活性測試Time-dependent kill-時間相關的殺菌時間相關的殺菌過夜培養(yǎng)，S. aureus HG003MHB 1:10,000稀釋37，225rpm2h-early exponential5h-late exponential10MIC藥物處理藥物處理37，225rpmOxacillin （苯唑西林）1.5 g/mLvancomycin10 g/mLteixobactin3 g/mL間隔取樣，100 l；離心，

6、PBS重懸，10倍連續(xù)稀釋MHA計數(shù)OD600=1.0，37孵育24h82016.42. 活性測試活性測試 Resistance studies-耐藥性研究耐藥性研究 S. aureus NCTC8325-4 at 1010 c.f.u.，在含有2，4，10 TEIX的MHA平板上37孵育48h，沒有耐藥菌出現(xiàn)，推斷出現(xiàn)耐藥突變的概率80182016.43.合成途徑合成途徑另一種固相合成另一種固相合成Teixobactin類似物的方法類似物的方法文章觀點文章觀點()先合成直鏈肽會導致無法酯化,因此起始序列是關鍵；22%的收率；Phe, Gln 和Ile改為L型，MIC損失64倍；無L-allo

7、-enduracididine 氨基酸；AllocHN-D-Thr-OH基團的合成；Anish Parmar ，et al. Chem Comm. 2016，view article online菌株菌株D型型L型型原型原型S. aureus21280.25E. coli64NI25Fmoc Thra,b,cOTrtAllocHN ThrOHa.20% PIP/DMFb.4 eq. allyl chloroformate(烯丙基甲酸酯)/8 eq. DIPEA in DCM, 1 h.c. 1: 5:96 TFA: TIS: DCM. 3 15 min.Alloc T A OIOR NHTrtPbfAlloc T A OIOR NH2Pbfdd. 10 eq. Trt-Cl(三苯甲基氯), 15% Et3N in DCM, 1 h.PheNmISQII S T A OIOR NH2PbfBocTrttButBuPheNmISQII S T A OIOR