實驗室生物安全標準操作規(guī)程

1、實驗室生物安全標準操作規(guī)程ZHCADC-PGC-2015（第二版）受控狀態(tài)：YDND受控編號:持有人:2015年1月11日發(fā)布2015年1月20日實施哈爾濱市動物疫病預防控制中心實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC-2010修表第1頁共1頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施修訂表版號規(guī)程號修訂次序修訂內容批準日期實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC-2010目錄第1頁共1頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施ZHCADC-PGC01-2010BSL-2實驗室個人防護裝備的總體要求ZHCADC-PGC02-2010ZH

2、CADC-PGC03-2010ZHCADC-PGC04-2010ZHCADC-PGC05-2010ZHCADC-PGC06-2010ZHCADC-PGC07-2010ZHCADC-PGC08-2010ZHCADC-PGC09-2010ZHCADC-PGC10-2010ZHCADC-PGC11-2010ZHCADC-PGC12-2010實驗室人員進出實驗室實驗室檢測樣品采集實驗室檢測樣品包裝和運送實驗室檢測樣品接收樣品檢測操作規(guī)程電氣設備操作規(guī)程實驗室消毒劑配制標準操作規(guī)程無菌間使用標準操作規(guī)程實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程 實驗室消毒標準操作程序 實驗室意外事故處理實驗室生物安全標準操作規(guī)程（S

3、OPZHCADC-PGC01-2010實驗室個人防護裝備的總體要求第1頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的個人防護裝備是減少操作人員暴露于氣溶膠、噴濺物以及意外接種等危險的一個屏 障。為了實驗人員的安全，以保證實驗室人員的安全及實驗室環(huán)境不被污染。2適用范圍適用于生物安全實驗室選用個人防護裝備（防護口罩、防護手套、防護服與防護鞋） 的質量控制。3職責實驗室組織有關人員采購符合要求的個人防護裝備，并且嚴格控制其質量。4過程要求實驗室所用的個人防護裝備應符合國家標準GB19489-2008實驗室生物安全通用要求。在生物因子危害評估的基礎上，按不同級別的防護要求選擇

4、適當?shù)膫€人防護裝備。4.1 防護口罩根據(jù)病原微生物實驗室生物安全管理條例、GB19489-2008實驗室生物安全通用要求、醫(yī)用防護口罩技術要求，生物安全實驗室選用P2級的防護口罩，必須滿足GB19083-2003以下條件：(1) 長方形口罩展開后中心部分尺寸：長度不小于17cm寬度不小于17cni密合型拱形口罩尺寸：橫徑不小于14cmi縱徑不小于14cnr(2) 口罩表面不得有破洞、污漬；口罩帶應調節(jié)方便，應有足夠強度固定口罩位置。每根口罩帶與口罩體連接點的斷裂強力應不小于10N1(3) 口罩濾料的顆粒過濾效率應不小于95%;經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌的口罩，其環(huán)氧乙烷殘留量應不超過10仙g/g ;不能從

5、防護口罩中檢出致病菌；口罩對皮膚無刺激。4.2 防護手套實驗室防護手套選擇用國內生產(chǎn)的一次性乳膠手套和耐酸堿手套。技術要求見國標GB7543-1996實驗室生物安全標準操作規(guī)程(SOPZHCADC-PGC01-20104.3第2頁共2頁防BSL-2實驗室個人防護裝備的總體要求第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施護鞋及鞋套防護鞋應該選擇耐磨、防滑和舒適的合成材料制成的鞋類。鞋套應為塑料材質制成，可防水、要求一次性使用。4.4 防護服BSL-2實驗室試驗操作人員的防護服裝主要選擇一次性的連體防護服，通常選用國內 廠商合格的防護服。上下連體式，宜連鞋帽，無口袋、無橫褶、腰帶、接縫

6、封縫、光潔。 發(fā)塵量小、不易發(fā)生纖維剝落、斷絲；不易產(chǎn)生靜電和粘附粒子；耐有機溶劑，透明度低、 柔軟、舒適、不妨礙動作。實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC02-2010BSL-2實驗室人員進出實驗室第1頁共1頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的制定BSL-2實驗室人員進出的標準操作程序，保障實驗室生物安全。2適用范圍適用于BSL-2實驗室人員進出程序。3職責實驗室工作人員執(zhí)行本程序的規(guī)定。各科室負責人負責監(jiān)督執(zhí)行。4規(guī)程要求4.1 進入程序4.1.1 實驗室人員需將外衣掛入休閑吧內，避免將外衣與工作服混放。4.1.2 實驗室人員進入實驗室前在人員

7、位置示意圖上做好標記，將自己的名字磁扣貼在欲 達到的位置。4.1.3 實驗室工作人員進入BSL-2更衣室，脫掉自已所穿鞋，放入外側鞋柜內，轉向內側, 從內側鞋柜取出工作鞋換上。4.1.4 實驗室工作人員進入更衣室，穿上醫(yī)用白大褂或連體工作服。4.1.5 按要求戴手套，口罩等防護用品。4.2 退出程序4.2.1 試驗結束后，實驗室工作人員在實驗室脫掉一次性口罩和一次性乳膠手套和一次性 防護服，裝入高壓滅菌袋中4.2.2 實驗室工作人員先用0.5%新潔爾滅對手進行消毒，再用消毒肥皂洗手。實驗室工作人員在更衣室脫下醫(yī)用白大褂，打開更衣室的紫外燈進行紫外消毒。4.2.3 實驗室工作人員在更衣室脫掉工作

8、鞋，放入內側鞋柜，轉向外側，從外側鞋柜中取 出自己所穿鞋。4.2.4 實驗室工作人員退出實驗室后，將BSL-2實驗室入口門關好，將人員示意圖上標記 復位，離開實驗室。實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC03-2010實驗室檢測樣品采集第1頁共4頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的為保障檢測實驗的順利進行，規(guī)范采樣程序，防止病原微生物在采樣過程中產(chǎn)生污染2適用范圍適用于實驗室樣品的采集。3職責3.1 采集檢測樣品的工作人員在采集過程中應當防止病原擴散，并對樣本的來源、采集過程和處理方法等作詳細記錄。3.2 檢驗人員必須嚴格按照本操作規(guī)程操作，不可擅自

9、做出超出本規(guī)程的操作，所有實驗人員對所從事的工作負相應的責任。4過程要求4.1 工作要求采集和處理檢測樣品應當具備下列條件：4.1.1 具有采集、處理樣品所需要的生物安全防護設備；4.1.2 具有掌握相關專業(yè)知識和操作技能的工作人員；4.1.3 具有有效的防止病原擴散的措施;4.1.4 具有保證檢測樣品質量的技術方法和手段。4.2 實驗材料準備滅菌的解剖器械（剪刀、銀子、手術刀、大刀、斧頭等）、滅菌試管、平皿或自封袋、載玻片、棉簽、營養(yǎng)肉湯、30% 50%T油鹽水緩沖液、加抗生素的 PBS （病毒保存 夜）、50%甘油磷酸鹽緩沖液、酒精燈、滅菌注射器、15mL的離心管、1.5mLEP管、記號筆

10、、簽字筆、防護服、無粉乳膠手套、防護口罩、鉛筆、空白標簽紙、膠布、75%酉精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒藥品、采樣單等。4.3 活畜樣品的采集4.3.1 血清樣品的采集實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PG03-2010實驗室檢測樣品采集第2頁共4頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施4.3.1.1血方法對采血部位的皮膚先剃（拔）毛，碘酊消毒，75%勺酒精消毒，待干燥后采血。采血方法推行生豬站立式前腔靜脈、牛羊站立式頸靜脈、禽類翅靜脈采血，采血過程嚴格無菌。4.3.1.2 采血數(shù)量單一病種抗體監(jiān)測的每頭（只）采集 23mL全血，多病種抗體檢測的每頭（只

11、）采集510mLr血。4.3.1.3 全血保存采集好的全血轉入盛血試管，斜面存放，室溫凝固后直接放在盛有冰塊的保溫箱，送實驗室。從全血采出到血清分出的時間不超過10h。4.3.1.4 血清分離凝固全血在室溫24h后，有血清析出時，用無菌針剝離血凝塊，然后放入 4c冰箱48h后，待大量血清析出時，吸出血清。必要時經(jīng)離心機 3000rpm 30min離心，吸出血清。分離的血清，一般不加防腐劑。血清若在12周內即可檢驗，可放在4c冰箱內保存；如果保存時間較長，應放在-20 C-80 C冰箱內保存。運送血清時可將血清放在盛有冰塊 的保溫箱中運送。4.3.2 全血樣品的采集全血采集后應直接注入盛有抗凝劑

12、的試管中，立即搖動，充分混合。也可將全血液注入盛有玻璃珠的滅菌瓶中，立即連續(xù)振蕩脫纖維蛋白。4.4 活禽樣品的采集咽喉拭子的采集：將棉簽插入喉頭口及上顆裂處來回刮35次取咽喉分泌液，泄殖腔拭子的采集：將棉簽插入取泄殖腔轉23圈并沾取少量糞便，再將咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有0.81.0mL加有抗生素PBS的EP管中，加蓋，編號4.5 病死（屠宰）畜禽樣品的采集4.5.1 解剖前檢查實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC03-2010實驗室檢測樣品采集第3頁共4頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施急性死亡的牛、羊、豬、馬等動物，解剖之前應作臨床檢查，疑似

13、炭疽病的應采血、鏡檢，排除炭疽病時，方可解剖。動物死亡后應在6h內進行剖檢。解剖人員要做好自我防護工作。4.5.2 肝、脾、腎、淋巴結、肺和牛、馬心臟樣品的采集在肝、脾、腎、淋巴結、肺和牛、馬心臟有病變的部位各采取23cmi的小方塊，分別置于滅菌的試管或平皿中。其他畜禽采集整個心臟，置于自封袋中。細菌分離樣品的采 集可用燒紅的刀片燙烙臟器表面，在燒烙部位刺一孔，用滅菌后的柏金耳伸入孔內，取少 量組織或液體，作涂片鏡檢或劃線接種于適宜的培養(yǎng)基上。4.5.3 腦、脊髓樣品的采集取腦、脊髓23cm3浸入50初油鹽水中或將整個頭部（豬、牛、馬除外）割下，用消 毒紗布包裹，置于不漏水的容器中。4.5.4

14、 腸、腸內容物及糞便樣品的采集腸樣品的采集：選擇病變最嚴重的部分，將其中的內容物棄去，用滅菌的生理鹽水輕 輕沖洗后，置于試管中。腸內容物樣品的采集：燒烙腸壁表面，用吸管扎穿腸壁，從腸腔 內吸取腸內容物，放入盛有 30%r油鹽水中或者直接將帶有糞便的腸管兩端結扎，從兩端 剪斷。糞便樣品的采集：用棉簽插到直腸黏膜表面采集糞便，然后將拭子放入盛有30%t油鹽水中。4.5.5 液體病料樣品的采集采集膽汁、膿、粘液、關節(jié)液、水泡液等樣品時，用藥物或燙烙法消毒采樣部位，用 滅菌吸管（毛細吸管、注射器）經(jīng)消毒部位插入，吸取內部液體，然后將病料注入滅菌試 管中，加蓋。也可用接種環(huán)經(jīng)消毒部位插入，提取病料直接接

15、種在培養(yǎng)基上。4.5.6 胎兒樣品的采集取流產(chǎn)后的整個胎兒，裝入自封袋或不透水塑料薄膜中。4.5.7 皮膚樣品的采集用清水清洗病變皮膚后，取病變皮膚 35g放入滅菌小瓶中，加適量50%甘油磷實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC03-2010實驗室檢測樣品采集第4頁共4頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施酸鹽緩沖液（pH7.4）,加蓋密封。4.5.8 死（屠宰）禽樣品的采集死（屠宰）禽樣品的采集除按上述方法采集，也可將整個死禽裝入不透水塑料薄膜袋 或自封袋中或其他容器內。4.6 組織樣品采集完后的無害化處理活畜禽、病死畜禽組織樣品采集完后，應做好樣品外包裝

16、和環(huán)境消毒以及病死畜禽及其產(chǎn)品的無害化處理。4.7 樣品編號、抽樣單填寫4.7.1 樣品編號每頭動物的不同部位的組織樣品應單獨包裝。 包裝好后，在樣品袋或平皿外貼上標簽， 標簽注明動物種類代號（Z表示豬，N表示牛，表示羊，J表示雞，Y表示鴨，E表示鵝）、 樣品名稱、樣品編號、采樣日期等，全市每種動物血清樣品，每次單獨包裝，每種動物樣 品編號每月由1、2、3、4阿拉伯數(shù)字連續(xù)編號。4.7.2 抽樣單填寫同時填寫動物血清和組織（拭子）抽樣單、流行病學調查表、動物檢測樣品送檢單和 動物疫病預防控制中心接診單。動物血清和組織（拭子）抽樣單一式三份，一份由被抽樣 單位保存、一份由送檢單位保存、一份由檢測

17、單位保存（原始記錄）。動物檢測樣品送檢實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC04-2010實驗室檢測樣品包裝和運送第1頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施式兩份，一份由送檢單位保存，一份由檢測單位保存（原始記錄）單一式兩份，一份由送檢單位保存，一份由檢測單位保存。動物疫病預防控制中心接診單1目的維護檢測樣品的質量，防止病原的泄漏和擴散，保障樣品檢測的順利開展。2適用范圍適用于檢測樣品的包裝和運送。3職責3.1 操作者必須嚴格按照本程序操作，不可擅自做出超出本程序的操作，所有實驗人員對 所從事的工作負相應的責任3.2 實驗室負有對樣品包裝、運輸?shù)谋O(jiān)督和

18、管理職責，并監(jiān)督檢查相關工作人員的安全工 作程序和行為。4過程要求擬運輸?shù)臉悠?，要求嚴密包裝，外表加以消毒，編號、登記后，貼上“生物危險”標 識，并嚴防標識脫落。樣品必須經(jīng)三層包裝。4.1 樣品的包裝4.1.1 內包裝4.1.1.1 必須是不透水、防泄漏的主容器，保證完全密封。4.1.1.2 必須是結實、不透水和防泄漏的輔助包裝。4.1.1.3 必須在主容器和輔助包裝之間填充吸附材料。吸附材料必須充足，能夠吸收所有 的內裝物。多個主容器裝入一個輔助包裝時，必須將它們分別包裝。4.1.1.4 主容器的表面貼上標簽，注明樣品類別、編號、名稱、數(shù)量等信息。4.1.1.5 相關文件，例如毒種或樣本數(shù)量

19、表格、危險性聲明、信件、毒種或樣本鑒定資料、 發(fā)送者和接收者的信息等應當放入一個防水袋中，并貼在輔助包裝的外面。4.1.2 外包裝4.1.2.1 外包裝的強度應當充分滿足對于其容器、重量及預期使用方式的要求。4.1.2.2 外包裝應當印上生物危險標識并標注“高致病性動物疫病病原微生物，非 專業(yè)人員嚴禁拆開！ ”的警告語。實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC04-2010實驗室檢測樣品包裝和運送第1頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施4.1.3包要求4.1.3.1液體或者固體樣品在輔助包裝周圍必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑，或者按照規(guī)定將冷凍劑放在由

20、一 個或者多個完整包裝件組成的合成包裝件中， 內部要有支撐物，干冰或者干冰消耗掉以后, 仍可以把輔助包裝固定在原位置上。如果使用冰，包裝必須不透水；如果使用干冰，外包 裝必須能排出二氧化碳氣體；如果使用冷凍劑，主容器和輔助包裝必須保持良好的性能, 在冷凍劑消耗完以后，仍能承受運輸中的溫度和壓力。4.1.3.2凍干樣品主容器必須是火焰封口的玻璃安甑或者是用金屬封口的膠塞玻璃瓶。在輔助包裝周圍實驗室生物安全標準操作規(guī)程(SOPZHCADC-PGC05-2010實驗室檢測樣品接收第1頁共1頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施目的還必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑。范接收檢測樣品，

21、保證生物安全。2適用范圍適用于送檢樣品的交接管理。3職責3.1 接樣室負責接收樣品和接樣的生物安全。3.2 檢驗室負責樣品檢測和檢測樣品的生物安全。4過程要求4.1 檢測樣品由樣品管理員統(tǒng)一接收，任何人不得直接對外承接檢測樣品。4.2 樣品管理員在接收送檢樣品時應填寫檢測業(yè)務委托協(xié)議和接收樣品登記表 并對樣品進行符合性檢查，檢查包括:(1)樣品包裝、標志及外觀是否完好；(2)對照抽樣單核查樣品的名稱、采樣地點、樣品數(shù)量、性狀等信息;樣品是否損壞、污染或已過有效期。4.3 樣品符合性檢查后，樣品管理員應作好樣品登記，確定樣品唯一性編號。4.4 業(yè)務辦公室制樣人員負責制備樣品，將樣品處理、分裝備份

22、。對樣品進行實驗編號， 應與原始編號一一對應，確保準確無誤。所有備份的樣品要送至樣品保存室進行登記保存。4.5 樣品管理員進行樣品符合性檢查、 標識、登記和制樣后，應填寫檢測任務書和樣品流轉卡，并通知實驗室領樣檢測。4.6 檢測人員按檢測內容，需要盡快檢測的樣品立即進行檢測。檢驗后的剩余樣品交還樣品管理員，按相應的保存條件，妥善保存。實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC06-2010樣品檢測操作規(guī)程第1頁共1頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施規(guī)范樣品的檢測，特制定本規(guī)程。2適用范圍適用不同待檢樣品的檢測。3職責3.1 實驗室工作人員嚴格依照本規(guī)程進行樣

23、品的檢測。3.2 實驗室主任負責監(jiān)督實驗室工作人員樣品的檢測工作。4過程要求樣品的檢測方法應采用作業(yè)指導書-檢測標準規(guī)定的方法。5.相關文件實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC07-2010電氣設備操作規(guī)程第1頁共1頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施作業(yè)指導書-檢測標準1目的規(guī)范實驗室電氣設備的使用和維護，特制定本規(guī)程。2適用范圍適用于電氣設備的操作和維護實驗室工作人員嚴格依照本規(guī)程進行使用電器設備4過程要求1.1 實驗室工作人員必須得到相應培訓并予使用授權，必須具有熟悉儀器的性能、用途、 使用方法等技能，嚴格按照使用說明書的要求，遵守儀器操作規(guī)程。不

24、得擅自操作任何授 權以外的電氣設備。1.2 使用儀器設備前必須先觀察設備上的標志，綠色標簽為表示該儀器設備處于正常工作 狀態(tài)，準許使用；黃色標簽表示該儀器設備部分功能停用， 此時只準使用允許使用的功能, 不得超過規(guī)定使用范圍；紅色標簽表示該儀器設備停用。1.3 儀器使用過程中發(fā)生故障必須立即停止使用，立即報告主任和行政辦公室儀器設備維 護負責人，及時查找原因，盡快排除，并登記。1.4 每日完成工作后必須對使用過的儀器設備按相關要求安全去污染，以減少其他使用人 員和維護人員受化學或生物性污染的風險。5相關文件作業(yè)指導書-儀器設備操作規(guī)程(ZHCADC-ZYGC-2010)實驗室生物安全標準操作規(guī)

25、程(SOPZHCADC-PGC08-2010實驗室消毒劑配制標準操作規(guī)程第1頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施范實驗室消毒劑配制，保證消毒液的有效性和實驗室生物安全。2 .適用范圍適用于BSL-2實驗室常用消毒劑的配制。3 .職責實驗室工作人員負責常用消毒劑的配制，保證所需消毒劑的供應，實驗室主任負責監(jiān) 督。4 .過程要求4.1 消毒劑配制4.1.1 配制前，實驗室工作人員應洗凈配制容器及量具，自然晾干。按試劑配制的配方和 配質量量取所需藥品。按配制要求的先后順序加入藥品，攪拌均勻配制試劑。4.3配制過程產(chǎn)熱的試劑待自然冷卻后分裝，并將填寫好品名、濃度、配制時間、

26、有效期實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC08-2010實驗室消毒劑配制標準操作規(guī)程第2頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施的標簽貼于盛裝容器上。做好配制記錄。常用消毒劑的配方及注意事項見下表1表1常用消毒劑種類和配制方法表消毒劑名稱用途配制方法備注0.2%新潔爾火手消毒，儀器表面消口中量取5%新潔爾滅溶液100mL置于配制容器中，加入2400mL純化水攪拌混勻。2%NaOH溶液原位消毒稱取20gNaOH 固體，緩慢加入純化水定容到1000mL 。強堿pH值1375%乙醇手表面消毒取750mL 無水乙醇加純化水定容到1000mL 。15%18% 過

27、氧乙酸實驗室薰蒸消毒冰醋酸：H2O2 ：濃H2SO4按體積比140.0 : 60.0 : 2.1配制。根據(jù)需要量分別量取所需的過氧化氫、冰醋酸和濃硫酸。置于配制容器中攪拌均勻。使用時可加入催化劑高鎰酸鉀或加熱。配制好的過氧乙酸需室溫放置48h后使用。超過20%的過 氧乙酸會發(fā) 生爆炸。一 周內用完。實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC09-2010無菌間使用標準操作規(guī)程第1頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施目的保無菌室環(huán)境的無菌狀態(tài)，特指定本規(guī)程2適用范圍適用于無菌間空氣微生物監(jiān)測。3.1 實驗室工作人員負責實驗室空氣微生物監(jiān)測。3.2 實驗室主

28、任監(jiān)督實驗室工作人員實施4過程要求4.1 實驗室工作人員在進無菌間之前，應先用2%B碳酸或來蘇爾對手進行浸泡消毒。4.2 緩沖間在每次使用前，應先打開紫外燈，紫外照射30min；工作人員在進入無菌室前,必須于緩沖間內更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。檢驗用的有關器材（待檢品除外），搬入無菌室前必須分別進行滅菌消毒。4.3 將無菌間和生物安全柜的紫外燈打開照射 30min后，才能進行工作。4.4 實驗完畢后，用0.2%新潔爾滅消毒液擦拭生物安全柜臺面，打開生物安全柜內紫外燈, 照射30min。同時無菌間和緩沖間的紫外燈一并打開，照射30min。4.5 工作人員在緩沖間脫下工作服、工作帽及工作鞋

29、。4.6 每月應對無菌間進行一次熏蒸消毒。每月用新潔爾滅消毒液擦拭地面和墻壁一次的方 式進行消毒。4.7 每月應對無菌間進行一次無菌檢查記錄4.7.1 營養(yǎng)瓊脂平板的制備按營養(yǎng)瓊脂說明書配制營養(yǎng)瓊脂，120c 15min高壓滅菌后，冷卻到50c左右傾倒于9cm的平板。待瓊脂凝固后，放37c 48h培養(yǎng)，無菌生長，方可以使用。4.7.2 沉降菌數(shù)測定 先打開無菌室內紫外燈照射30min后，將備妥的營養(yǎng)瓊脂平板5個。以無菌方式移入操作實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC09-2010無菌間使用標準操作規(guī)程第2頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施間，置四

30、個角落和中央各1個，開蓋，暴露30分鐘后將蓋蓋上。在37c培養(yǎng)箱內倒置培養(yǎng)48h,取出檢查。分別數(shù)出5個平板的生長菌落數(shù)并得出5個平板的平均菌落數(shù)4.7.3 結果判定無菌室內的潔凈級別應達到 10000級，即在進行沉降菌數(shù)測定時，平均菌落數(shù)應小于 或等于3個（4 90mm, 0.5h）。如所測得的平均菌落數(shù)小于3個，則證明該無菌室無菌程 度符合要求，否則該無菌室的無菌程度不符合要求，需要對無菌間進行徹底消毒，直至重 復檢查符合要求為止。實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC10-2010實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程第1頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日

31、實施制定BSL-2實驗室廢棄物安全處理的標準操作程序，保護實驗室生物安全。2適用范圍適用于BSL-2實驗室廢棄物的處理。3職責3.1 實驗準備人員和相關工作人員嚴格遵守本程序，并對所從事的工作負有生物安全責任。3.2 實驗室主任負有監(jiān)督和管理責任。4過程要求4.1 實驗室工作人員做好個人防護。穿好工作服、戴好手套、口罩和帽子等。4.2 實驗人員用防滲專用包裝容器（袋）或者防銳器穿透密閉容器收集實驗室廢棄物。在 包裝上貼警示標志和標簽，標簽上填寫廢棄物名稱、數(shù)量、產(chǎn)生日期、處理人名字、廢棄 物來源、是否回收、處理注意事項等后存放規(guī)定位置。實驗準備人員及時進行無害化處理 ,并做好實驗室廢棄物處理記

32、錄。4.3 廢棄物分類處理4.3.1 感染性廢棄物處理培養(yǎng)基、標本和菌（毒）種保存液、血液、血清、臨床標本等感染性廢棄物首選進行 壓力蒸汽滅菌。用過的一次性手套、口罩、帽子，用過的試管、吸管、移液器吸頭，用過 的一次性實驗用品及實驗器械等感染性廢棄物可選進行壓力蒸汽滅菌或消毒液浸泡24h。4.3.2 損失性廢棄物處理針頭、縫合針、解剖刀、手術刀、備皮刀、手術鋸，試驗玻片、玻璃試管、玻璃安甑 等能夠刺傷或割傷人體的廢棄的實驗利（銳）器等損傷性廢棄物需放入符合要求的利器盒 里，容器裝滿3/4后封蓋，進行壓蒸汽滅菌處理，按要求貼上警示標志和標簽。實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC

33、10-2010實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程第2頁共2頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施4.3.3性廢棄物處理過期、淘汰、變質或者被污染的診斷試劑、疫苗和血液制品等，若量大，必須對外包裝進行徹底的消毒處理。按要求貼上警示標志及中文標簽，于-20 C冰柜貯存，統(tǒng)一送往無害化處理場處理。量少可采用壓力蒸汽滅菌。4.3.4 病理性廢棄物處理動物組織及動物尸體使用兩層防滲專用包裝容器（袋）包裝好，必須對外包裝進行徹底的消毒處理。按要求貼上警示標志及中文標簽，于 -20 C冰柜貯存，統(tǒng)一送往無害化處 理場處理。做好廢棄物移交記錄。4.3.5 化學品廢棄按組分收集后，倒入專用化學廢棄

34、物收集桶內，由中心集中處理實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOPZHCADC-PGC11-2010實驗室消毒標準操作程序第1頁共1頁第1版第0次修訂2010年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的保護實驗室的生物安全，防止病原逃逸。2適用范圍實驗室日常清潔，實驗過程中產(chǎn)生的污染廢棄物、使用過的防護裝備及設施設備等的 消毒。3職責實驗室工作人員按照本標準進行日常消毒，實驗室主任監(jiān)督實施。4過程要求4.1儀器設備表面：用0.2湎潔爾或0.1%0.2%效氯消毒液擦拭，30min后再用清潔的濕抹布擦拭2次。4.2廢棄的病毒材料和操作過程中使用的一次性耗材先置于2%NaOH6液或0.1%農(nóng)福中浸泡2h,按照廢棄物的處理程序處理。4