遺傳學(xué)補(bǔ)充練習(xí)

1、遺傳學(xué)補(bǔ)充練習(xí)題(2009級(jí)用)第二章遺傳的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)1水稻的正常的孢子體組織，染色體數(shù)目是12對(duì)，問(wèn)下列各組織的染色體數(shù)目是多少？（1）胚乳；（2）花粉管的管核；（3）胚囊；（4）葉；（5）根端；（6）種子的胚；（7）穎片；2用基因型Aabb的玉米花粉給基因型AaBb的玉米雌花授粉，你預(yù)期下一代胚乳的基因型是什么類(lèi)型，比例如何？3蠶豆的體細(xì)胞是12個(gè)染色體，也就是6對(duì)同源染色體（6個(gè)來(lái)自父本，6個(gè)來(lái)自母本）。一個(gè)學(xué)生說(shuō)，在減數(shù)分裂時(shí)，只有1/4的配子，它們的6個(gè)染色體完全來(lái)自父本或母本，你認(rèn)為他的回答對(duì)嗎？4在玉米中：（1）5個(gè)小孢子母細(xì)胞能產(chǎn)生多少配子？（2）5個(gè)大孢子母細(xì)胞能產(chǎn)生多少配子

2、？（3）5個(gè)花粉細(xì)胞能產(chǎn)生多少配子？（4）5個(gè)胚囊能產(chǎn)生多少配子？5馬的二倍體染色體數(shù)是64，驢的二倍體染色體數(shù)是62。（1）馬和驢的雜種染色體數(shù)是多少？（2）如果馬和驢之間在減數(shù)分裂時(shí)很少或沒(méi)有配對(duì)，你是否能說(shuō)明馬-驢雜種是可育還是不育？6在玉米中，與糊粉層著色有關(guān)的基因很多，其中三對(duì)是Aa，Ii，和Prpr。要糊粉層著色，除其他有關(guān)基因必須存在外，還必須有A基因存在，而且不能有基因存在。如有Pr存在，糊粉層紫色。如果基因型是prpr，糊粉層是紅色。假使在一個(gè)隔離的玉米試驗(yàn)區(qū)中，基因型 AaprprII的種子種在偶數(shù)行，基因型 aaPrprii的種子種在奇數(shù)行。植株長(zhǎng)起來(lái)時(shí)，允許天然授粉，問(wèn)

3、在偶數(shù)行生長(zhǎng)的植株上的果穗的糊粉層顏色怎樣？在奇數(shù)行上又怎樣？（糊粉層是胚乳一部份，所以是3n）。8兔子的卵沒(méi)有受精，經(jīng)過(guò)刺激，發(fā)育成兔子。在這種孤雌生殖的兔子中，其中某些兔子對(duì)有些基因是雜合的。你怎樣解釋?zhuān)浚ㄌ崾荆簶O體受精。）第四章孟德?tīng)栠z傳1下面是紫茉莉的幾組雜交，基因型和表型已寫(xiě)明。問(wèn)它們產(chǎn)生哪些配子？雜種后代的基因型和表型怎樣？（1）Rr RR（2）rr Rr（3）Rr Rr粉紅紅色白色粉紅粉紅粉紅2在南瓜中，果實(shí)的白色（W）對(duì)黃色（w）是顯性，果實(shí)盤(pán)狀（D）對(duì)球狀（d）是顯性，這兩對(duì)基因是自由組合的。問(wèn)下列雜交可以產(chǎn)生哪些基因型，哪些表型，它們的比例如何？（1）WWDDwwdd（2）

4、XwDdwwdd（3）WwddwwDd（4）WwddWwDd3在豌豆中，蔓莖（T）對(duì)矮莖（t）是顯性，綠豆莢（G）對(duì)黃豆莢（g）是顯性，圓種子（R）對(duì)皺種子（r）是顯性。現(xiàn)在有下列兩種雜交組合，問(wèn)它們后代的表型如何？（1）TTGgRrttGgrr （2）TtGgrrttGgrr4在番茄中，缺刻葉和馬鈴薯葉是一對(duì)相對(duì)性狀，顯性基因C控制缺刻葉，基因型cc是馬鈴薯葉。紫莖和綠莖是另一對(duì)相對(duì)性狀，顯性基因A控制紫莖，基因型aa的植株是綠莖。把紫莖、馬鈴薯葉的純合植株與綠莖、缺刻葉的純合植株雜交，在F2中得到9331的分離比。如果把F1：（1）與紫莖、馬鈴薯葉親本回交；（2）與綠莖、缺刻葉親本回交；以

5、及（3）用雙隱性植株測(cè)交時(shí)，下代表型比例各如何？5在下列表中，是番茄的五組不同交配的結(jié)果，寫(xiě)出每一交配中親本植株的最可能的基因型。（這些數(shù)據(jù)不是實(shí)驗(yàn)資料，是為了說(shuō)明方便而假設(shè)的。）6真實(shí)遺傳的紫莖、缺刻葉植株（AACC）與真實(shí)遺傳的綠莖、馬鈴薯葉植株（aacc）雜交，F(xiàn)2結(jié)果如下：紫莖缺刻葉紫莖馬鈴薯葉綠莖缺刻葉綠莖馬鈴薯葉247908334（1）在總共454株F2中，計(jì)算4種表型的預(yù)期數(shù)。（2）進(jìn)行c2測(cè)驗(yàn)。（3）問(wèn)這兩對(duì)基因是否是自由組合的？7一個(gè)合子有兩對(duì)同源染色體A和A及B和B，在它的生長(zhǎng)期間（1）你預(yù)料在體細(xì)胞中是下面的哪種組合，AABB？AABB？AABB？AABB？AABB？還是

6、另有其他組合。（2）如果這個(gè)體成熟了，你預(yù)期在配子中會(huì)得到下列哪些染色體組合：（a）AA，AA，AA，BB，BB，BB？（b）AA，BB，（c）A，A，B，B，（d）AB，AB，AB，AB？（e）AA，AB，AB，BB？8如果一個(gè)植株有4對(duì)顯性基因是純合的。另一植株有相應(yīng)的4對(duì)隱性基因是純合的，把這兩個(gè)植株相互雜交，問(wèn)F2中：（1）基因型，（2）表型全然象親代父母本的各有多少？9遺傳性共濟(jì)失調(diào)（hereditary ataxia）的臨床表型是四肢運(yùn)動(dòng)失調(diào)，吶呆，眼球震顫。本病有以顯性方式遺傳的，也有以隱性方式遺傳的。下面是本病患者的一個(gè)家系。你看哪一種遺傳方式更可能？請(qǐng)注明家系中各成員的基因型

7、。如這病是由顯性基因引起，用符號(hào)A；如由隱性基因引起，用符號(hào)a。10如果兩對(duì)基因A和a，B和b，是獨(dú)立分配的，而且A對(duì)a是顯性，B對(duì)b是顯性。（1）從AaBb個(gè)體中得到AB配子的概率是多少？（2）AaBb與AaBb雜交，得到AABB合子的概率是多少？（3）AaBb與AaBb雜交，得到AB表型的概率是多少？11下面的家系的個(gè)別成員患有極為罕見(jiàn)的病，已知這病是以隱性方式遺傳的，所以患病個(gè)體的基因型是aa。（1）注明-1，-2，-4，-2，-1和-1的基因型。這兒-1表示第一代第一人，余類(lèi)推。（2）-1個(gè)體的弟弟是雜合體的概率是多少？（3）-1個(gè)體兩個(gè)妹妹全是雜合體的概率是多少？（4）如果-1與-5

8、結(jié)婚，那么他們第一個(gè)孩子有病的概率是多少？（5）如果他們第一個(gè)孩子已經(jīng)出生，而且已知有病，那么第二個(gè)孩子有病的概率是多少？12. 假設(shè)地球上每對(duì)夫婦在第一胎生了兒子后，就停止生孩子，性比將會(huì)有什么變化？13. 在血型遺傳中，現(xiàn)把雙親的基因型寫(xiě)出來(lái)，問(wèn)他們子女的基因型應(yīng)該如何？（1）; （2）; （3）14.如果父親的血型是B型，母親是O型，有一個(gè)孩子是O型，問(wèn)第二個(gè)孩子是O型的機(jī)會(huì)是多少？是B型的機(jī)會(huì)是多少？是A型或AB型的機(jī)會(huì)是多少？15. 當(dāng)母親的表型是ORh-MN，子女的表型是ORh+MN時(shí)，問(wèn)在下列組合中，哪一個(gè)或哪幾個(gè)組合不可能是子女的父親的表型，可以被排除？ ABRh+M， ARh

9、+MN， BRh-MN， ORh-N。16. 某個(gè)女人和某個(gè)男人結(jié)婚，生了四個(gè)孩子，有下列的基因型：iiRRLMLN，IAiRrLNLN，iiRRLNLN，IBirrLMLM，他們父母親的基因型是什么？解：他們父母親的基因型是：IAiRrLMLN，IBiRrLMLN17. 在家蠶中，一個(gè)結(jié)白繭的個(gè)體與另一結(jié)白繭的個(gè)體雜交，子代中結(jié)白繭的個(gè)體與結(jié)黃繭的個(gè)體的比率是3：1，問(wèn)兩個(gè)親體的基因型怎樣？18. 在小鼠中，我們已知道黃鼠基因AY對(duì)正常的野生型基因A是顯性，另外還有一短尾基因T，對(duì)正常野生型基因t也是顯性。這兩對(duì)基因在純合態(tài)時(shí)都是胚胎期致死，它們相互之間是獨(dú)立地分配的。（1）問(wèn)兩個(gè)黃色短尾個(gè)

10、體相互交配，下代的表型比率怎樣？（2）假定在正常情況下，平均每窩有8只小鼠。問(wèn)這樣一個(gè)交配中，你預(yù)期平均每窩有幾只小鼠？19. 兩個(gè)綠色種子的植物品系，定為X，Y。各自與一純合的黃色種子的植物雜交，在每個(gè)雜交組合中，F(xiàn)1都是黃色，再自花授粉產(chǎn)生F2代，每個(gè)組合的F2代分離如下：X：產(chǎn)生的F2代 27黃：37綠Y：產(chǎn)生的F2代，27黃：21綠請(qǐng)寫(xiě)出每一交配中二個(gè)綠色親本和黃色植株的基因型。第五章 連鎖遺傳與性連鎖1. 你怎樣區(qū)別某一性狀是常染色體遺傳，還是伴性遺傳的？用例來(lái)說(shuō)明。2. 在果蠅中，長(zhǎng)翅（Vg）對(duì)殘翅（vg）是顯性，這基因在常染色體上；又紅眼（W）對(duì)白眼（w）是顯性，這基因在X染色體

11、上。果蠅的性決定是XY型，雌蠅是XX，雄蠅是XY，問(wèn)下列交配所產(chǎn)生的子代，基因型和表型如何？（l）WwVgvgwvgvg （2）wwVgvgWVgvg3. 純種蘆花雄雞和非蘆花母雞交配，得到子一代。子一代個(gè)體互相交配，問(wèn)子二代的蘆花性狀與性別的關(guān)系如何？4. 在雞中，羽毛的顯色需要顯性基因C的存在，基因型cc的雞總是白色。我們已知道，羽毛的蘆花斑紋是由伴性（或Z連鎖）顯性基因B控制的，而且雌雞是異配性別。一只基因型是ccZbW的白羽母雞跟一只蘆花公雞交配，子一代都是蘆花斑紋，如果這些子代個(gè)體相互交配，它們的子裔的表型分離比是怎樣的？5. 有一視覺(jué)正常的女子，她的父親是色盲。這個(gè)女人與正常視覺(jué)的

12、男人結(jié)婚，但這個(gè)男人的父親也是色盲，問(wèn)這對(duì)配偶所生的子女視覺(jué)如何？6. 植物L(fēng)ychnis alba是雌雄異株。把闊葉雌株與窄葉雄株雜交，得到的F1代雌雄植株都是闊葉的，但F2雄性植株有兩種類(lèi)型闊葉和窄葉，你怎樣解釋?zhuān)磕囊粋€(gè)性別是異配性別（XY），哪一個(gè)性別是同配性別？7. 在小家鼠中，有一突變基因使尾巴彎曲?，F(xiàn)在有一系列雜交試驗(yàn)，結(jié)果如下：?jiǎn)枺?)這突變基因是顯性還是隱性？2)是常染色體遺傳，還是伴性遺傳？3)表中6個(gè)雜交中，親代和子代的基因型各如何？8. 下面是患有肌營(yíng)養(yǎng)不良個(gè)體的一個(gè)家系，是一個(gè)女人和兩個(gè)不同的男人在兩次分別的婚姻中產(chǎn)生的。你認(rèn)為那種遺傳方式最有可能。請(qǐng)寫(xiě)出家系中各成員的

13、基因型。9. 在家雞中，白色由于隱性基因c與o的兩者或任何一個(gè)處于純合態(tài)，有色要有兩個(gè)顯性基因C與O的同時(shí)存在，今有下列的交配：CCoo白色 ccOO白色子一代有色子一代用雙隱性個(gè)體ccoo測(cè)交。做了很多這樣的交配，得到的后代中，有色68只，白色204只。問(wèn)oc之間有連鎖嗎？如有連鎖，交換值是多少？10. 雙雜合體產(chǎn)生的配子比例可以用測(cè)交來(lái)估算?，F(xiàn)有一交配如下：?jiǎn)枺海?）獨(dú)立分配時(shí)，p=？（2）完全連鎖時(shí)，p=？（3）有一定程度連鎖時(shí)，p=？11. 在家雞中，px和al是引起陣發(fā)性痙攣和白化的伴性隱性基因。今有一雙因子雜種公雞與正常母雞交配，孵出74只小雞，其中16只是白化。假定小雞有一半是雌

14、的，沒(méi)有一只早期死亡，而px與al之間的交換值是10，那么在小雞4周齡時(shí)，顯出陣發(fā)性痙攣時(shí)，（1）在白化小雞中有多少數(shù)目顯出這種癥狀，（2）在非白化小雞中有多少數(shù)目顯出這種癥狀？12. 7、在果蠅中，有一品系對(duì)三個(gè)常染色體隱性基因a、b和c是純合的，但不一定在同一條染色體上，另一品系對(duì)顯性野生型等位基因A、B、C是純合體，把這兩品系交配，用F1雌蠅與隱性純合雄蠅親本回交，觀察到下列結(jié)果：表型數(shù)目a b c211ABC209a B c212AbC 208（1）問(wèn)這三個(gè)基因中哪兩個(gè)是連鎖的？（2）連鎖基因間重組值是多少？第六章 基因突變1在E.coli的色氨酸合成酶的蛋白質(zhì)A的某一位點(diǎn)（位置223

15、）上觀察到下列氨基酸的替換:（a）假定每個(gè)氨基酸的替換只是由一個(gè)核苷酸的改變引起的。利用遺傳密碼表，指出什么密碼子適合這系列的變化？（b）你預(yù)期哪兩個(gè)突變結(jié)合能重組形成野生型（gly）？（c）哪兩個(gè)突變結(jié)合不能重組形成野生型？（d）上述氨基酸的改變中，哪一個(gè)表示堿基轉(zhuǎn)換？哪一個(gè)代表堿基顛換2一具有四核苷酸順序的DNA分子-C-G-A-T-G-C-T-A-a）用亞硝酸處理，這條DNA鏈復(fù)制時(shí)，核苷酸順序會(huì)發(fā)生怎樣的變化？b）用硫酸二乙酯處理，這條DNA鏈復(fù)制時(shí)，核苷酸順序會(huì)發(fā)生怎樣的變化？注：每種情況只考慮一個(gè)核苷酸發(fā)生突變。3就某一順?lè)醋觼?lái)說(shuō)，正向突變率往往比回復(fù)突變率至少高一個(gè)數(shù)量級(jí)。如何說(shuō)

16、明？第七章 染色體畸變1什么是平衡致死品系，在遺傳學(xué)研究中，它有什么用處？2用圖解說(shuō)明無(wú)籽西瓜制種原理。3異源八倍體小黑麥?zhǔn)侨绾斡傻模?何以單倍體的個(gè)體多不育？有否例外？舉例。5有一玉米植株，它的一條第9染色體有缺失，另一條第9染色體正常，這植株對(duì)第9染色體上決定糊粉層顏色的基因是雜合的，缺失的染色體帶有產(chǎn)生色素的顯性基因C，而正常的染色體帶有無(wú)色隱性等位基因c，已知含有缺失染色體的花粉不能成活。如以這樣一種雜合體玉米植株作為父本，以cc植株作為母本，在雜交后代中，有10的有色籽粒出現(xiàn)。你如何解釋這種結(jié)果？6在玉米中，蠟質(zhì)基因和淡綠色基因在正常情況下是連鎖的，然而發(fā)現(xiàn)在某一品種中，這兩個(gè)基因

17、是獨(dú)立分配的。（1）你認(rèn)為可以用那一種染色體畸變來(lái)解釋這個(gè)結(jié)果？（2）那一種染色體畸變將產(chǎn)生相反的效應(yīng)，即干擾基因之間預(yù)期的獨(dú)立分配？7曼陀羅有12對(duì)染色體，有人發(fā)現(xiàn)12個(gè)可能的“2n+1”型。問(wèn)有多少個(gè)“2n+1+1”型？ （注：“2n+1+1”是指在12對(duì)染色體中，某一對(duì)面多一個(gè)，另一對(duì)又多一個(gè)，而不是某一對(duì)多兩個(gè)。）8無(wú)籽西瓜為什么沒(méi)有種子？是否絕對(duì)沒(méi)有種子？9.同源三倍體是高度不育的。已知得到平衡配子（2n和n）的機(jī)會(huì)僅為，問(wèn)這數(shù)值是怎么求得的？又如假定只有平衡的配子是有受精功能的，且假定受精過(guò)程是隨機(jī)的，問(wèn)得到不平衡合子（unbalanced zygotes）的機(jī)會(huì)是多少？第八章 數(shù)

18、量性狀遺傳1自然界中雜交繁殖的生物強(qiáng)制自交或其他方式近交時(shí)生活力降低，為什么自然界中自交的生物繼續(xù)自交沒(méi)有不良影響呢？2如果給有下標(biāo)0的基因以5個(gè)單位，給有下標(biāo)1的基因以10個(gè)單位，計(jì)算A0A0B1B1C0C0和A1A1B0B0C0C0兩個(gè)親本和它們F1雜種的計(jì)量數(shù)值。設(shè)（1）沒(méi)有顯性；（2）A1對(duì)A0是顯性；（3）A1對(duì)A0是顯性，B1對(duì)B0是顯性。3. 上海奶牛的泌乳量比根賽（Guernseys）牛高12%，而根賽牛的奶油含量比上海奶牛高30%。泌乳量和奶油含量的差異大約各包括10個(gè)基因位點(diǎn)，沒(méi)有顯隱性關(guān)系。在上海奶牛和根賽牛的雜交中，F(xiàn)2中有多少比例的個(gè)體的泌乳量跟上海奶牛一樣高，而奶油

19、含量跟根賽牛一樣高？4測(cè)量101只成熟的矮腳雞的體重，得下列結(jié)果：計(jì)算平均數(shù)和方差。注：用公式5. 測(cè)量矮腳雞和蘆花雞的成熟公雞和它們的雜種的體重，得到下列的平均體重和表型方差：計(jì)算廣義和狹義遺傳率。6. 假定有兩對(duì)基因，每對(duì)各有兩個(gè)等位基因，Aa和Bb，以相加效應(yīng)的方式?jīng)Q定植株的高度。純合子AABB高50cm，純合子aabb高30cm，問(wèn)：（1）這兩個(gè)純合子之間雜交，F(xiàn)1的高度是多少？（2）在F1F1雜交后，F(xiàn)2中什么樣的基因型表現(xiàn)40cm的高度？（3）這些40cm高的植株在F2中占多少比例？7. 一連續(xù)自交的群體，由一個(gè)雜合子開(kāi)始，需要經(jīng)多少代才能得到大約97%的純合子？8下面是一個(gè)箭頭式

20、的家系（圖略）。家系中S是D和P的子裔，D是C和B的子裔等。問(wèn)：（1）誰(shuí)是共通祖先？（2）誰(shuí)是近交子裔？計(jì)算這子裔的F值。9. 在一個(gè)豬群中，6月齡體重的總遺傳方差為125千克2，顯性方差為35千克2，環(huán)境方差為175千克2。問(wèn)h2N=?10. 因?yàn)槟骋粋€(gè)體得到這對(duì)等同基因或那對(duì)等同基因是一種交互事件，所以求該個(gè)體的近交系數(shù)時(shí)，可以把通過(guò)所有共通祖先的一切通徑而得到一對(duì)遺傳上等同基因的概率都加起來(lái)?，F(xiàn)在我們來(lái)考察下面一個(gè)雙表親結(jié)婚所生孩子的一個(gè)家系（圖略）：S有幾個(gè)共通祖先？證實(shí)S的近交系數(shù)是F=1/8第九章 細(xì)菌和病毒的遺傳1.一個(gè)基因型為a+b+c+d+e+并對(duì)鏈霉素敏感的E.coli H

21、fr菌株與基因型為a-b-c-d-e-并對(duì)鏈霉素耐性的F-菌株接合，30分鐘后，用鏈霉素處理，然后從成活的受體中選出e+型的原養(yǎng)型，發(fā)現(xiàn)它們的其它野生型（+）基因頻率如下：a+70，b+-，c+85，d+10。問(wèn)a，b，c，d四個(gè)基因與供體染色體起點(diǎn)（最先進(jìn)入F-受體之點(diǎn)）相對(duì)位置如何？2.為了能在接合后檢出重組子，必須要有一個(gè)可供選擇用的供體標(biāo)記基因，這樣可以認(rèn)出重組子。另一方面，在選擇重組子的時(shí)候，為了不選擇供體細(xì)胞本身，必須防止供體菌株的繼續(xù)存在，換句話說(shuō)，供體菌株也應(yīng)帶有一個(gè)特殊的標(biāo)記，能使它自己不被選擇。例如供體菌株是鏈霉素敏感的，這樣當(dāng)結(jié)合體（conjugants）在含有鏈霉素的培

22、養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，供體菌株就被殺死了?，F(xiàn)在要問(wèn)：如果一個(gè)Hfr菌株是鏈霉素敏感的，你認(rèn)為這個(gè)基因應(yīng)位于染色體的那一端為好，是在起始端還是在末端？3.基因型ACNRX菌株，作為外源DNA用來(lái)轉(zhuǎn)化基因型acnrx的菌株得到下列類(lèi)型：AcnRx，acNrXaCnRx，AcnrX. aCnrx 請(qǐng)問(wèn)被轉(zhuǎn)化的基因順序是什么？4.用一野生型菌株抽提出來(lái)的DNA來(lái)轉(zhuǎn)化一個(gè)不能合成丙氨酸（ala）、脯氨酸（pro）和精氨酸（arg）的突變型菌株，產(chǎn)生不同轉(zhuǎn)化類(lèi)型的菌落，其數(shù)如下：?jiǎn)枺海?）這些基因間的圖距為多少？（2）這些基因的順序如何？5.利用中斷雜交技術(shù)，檢查了5個(gè)Hfr菌株（1，2，3，4，5），想知道這幾

23、個(gè)菌株把若干不同基因（F，G，O，P，Q，R，S，W，X，Y）轉(zhuǎn)移到一個(gè)F-菌株的順序。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各個(gè)Hfr菌株都以自己特有的順序轉(zhuǎn)移，如下所示：（各品系只記下最初轉(zhuǎn)移進(jìn)去的6個(gè)基因，）問(wèn)：（1）這些Hfr菌株的原始菌株的基因順序如何？（2）為了得到一個(gè)最高比例的Hfr重組子，在接合后應(yīng)該在受體中選擇哪個(gè)供體標(biāo)記基因？提示：Hfr品系是環(huán)狀DNA。6.用 P1進(jìn)行普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)，供體菌是pur+nad+pdx-，受體菌是pur-nad-pdx+。轉(zhuǎn)導(dǎo)后選擇具有pur+的轉(zhuǎn)導(dǎo)子，然后在100個(gè)pur+轉(zhuǎn)導(dǎo)子中檢定其它供體菌基因有否也轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)來(lái)。所得結(jié)果如下表：?jiǎn)枺簆ur和nad的共轉(zhuǎn)導(dǎo)（cotrans

24、duction）頻率是多少？pur和pdx的共轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率是多少？哪個(gè)非選擇性座位最靠近pur？nad和pdx在pur的同一邊，還是在它的兩側(cè)？根據(jù)你得出的基因順序，解釋實(shí)驗(yàn)中得到的基因型的相對(duì)比例。第十章 細(xì)胞質(zhì)遺傳1.母性影響和細(xì)胞質(zhì)遺傳有什么不同？2.細(xì)胞質(zhì)基因和核基因有什么相同的地方，有什么不同的地方？3.在玉米中，利用細(xì)胞質(zhì)雄性不育和育性恢復(fù)基因，制造雙交種，有一個(gè)方式是這樣的：先把雄性不育自交系A(chǔ)（Srfrf）與雄性可育自交系B（Nrfrf）雜交，得單交種AB，把雄性不育自交系C（Srfrf）與雄性可育自交系D（NRfRf）雜交，得單交種CD。然后再把兩個(gè)單交種雜交，得雙交種ABCD，

25、問(wèn)雙交種的基因型和表型有哪幾種，它們的比例怎樣？4.“遺傳上分離的”小菌落酵母菌在表型上跟我們講過(guò)的“細(xì)胞質(zhì)”小菌落酵母相似。當(dāng)一個(gè)遺傳上分離的小菌落酵母菌與一個(gè)正常酵母菌雜交，二倍體細(xì)胞是正常的，以后形成子囊孢子時(shí)，每個(gè)子囊中兩個(gè)孢子是正常的，兩個(gè)孢子產(chǎn)生小落酵母菌。用圖說(shuō)明這些結(jié)果，并注明相應(yīng)的基因型。5.分離的小菌落酵母菌與我們講過(guò)的那種小菌落酵母菌雜交，形成的二倍體是正常的。這些二倍體細(xì)胞形成的子囊，正常細(xì)胞與突變細(xì)胞各有兩個(gè)。解釋這些結(jié)果，作一圖概括你的說(shuō)明。6.一個(gè)雄性不育植株，用對(duì)育性恢復(fù)基因Rf是純合的花粉授粉，F(xiàn)1的基因型怎樣？表型怎樣？7.上題的F1植株作為母本，用一正常植

26、株（rfrf）的花粉測(cè)交，測(cè)交的結(jié)果應(yīng)該怎樣？寫(xiě)出基因型和表型，注明細(xì)胞質(zhì)種類(lèi)。8.舉一個(gè)經(jīng)典的孟德?tīng)柺竭z傳的例子，正交和反交的結(jié)果是不同的。9.一個(gè)Dd的椎實(shí)螺自交。子代的基因型和表型怎樣？如子代個(gè)體自交，它們的下一代表型又怎樣？10.上題中開(kāi)始做實(shí)驗(yàn)所用的雜合體椎實(shí)螺的表型是怎樣的？說(shuō)明。11.正反交在F1往往得出不同的結(jié)果。這可以由（1）伴性遺傳，（2）細(xì)胞質(zhì)遺傳，（3）母性影響。如果你得到這樣的一種結(jié)果，怎樣用實(shí)驗(yàn)方法來(lái)決定是屬于哪一種范疇？第十二章 群體遺傳與進(jìn)化1白花三葉草是自交不親和的，所以阻止了自花受精。白花三葉草的晨子上缺乏條斑是一種隱性純合狀態(tài)，vv，大約16%植株有這種表

27、型。白花三葉草植株中有多少比例對(duì)這個(gè)隱性性等位基因v是雜合的？白花三葉草植株產(chǎn)生的花粉中，有多少比例帶有這個(gè)隱性等位基因？2參考上一題目。假使你把相互交配的白花三葉草群體中，所有非條斑葉的植株都淘汰（s=1），那末下一代有多少比例的植株將是非條斑葉的？假使你只把非條斑葉的植株淘汰一半（s=0.5），那末下一代有多少比例將是非條斑葉的？3對(duì)個(gè)體生存有害的基因會(huì)受到自然選擇的作用而逐漸淘汰，請(qǐng)問(wèn)有害的伴性基因和有害的常染色體隱性基因，那一種容易受到自然選擇的作用？4人類(lèi)中，色盲男人在男人中占8%，假定色盲是X連鎖隱性遺傳，問(wèn)你預(yù)期色盲女人在總?cè)丝谥械谋壤龖?yīng)為多少？5在一個(gè)隨機(jī)交配的群體中，如AA個(gè)

28、體占18%，且假定隱性個(gè)體全部淘汰，結(jié)果應(yīng)該如下表所示:交配組合頻率下代（頻率）AAAaaaAAAAAAAaAaAa(0.18)2=0.032(0.18)(0.82)=0.30(0.82) 2=0.670.030.150.17 0.150.33 0.17合計(jì)1.000.350.480.17請(qǐng)你再算一代，證明隱性基因型的頻率將從0.17降低到大約0.09。6家養(yǎng)動(dòng)物和栽培植物的遺傳變異比相應(yīng)的野生群體要豐富的多，為什么？請(qǐng)從下列幾方面來(lái)考慮：交配體系，即雜交和自交所占的比例，自然選擇，突變。遺傳學(xué)小綜述（占課程總分的10分） 找一個(gè)遺傳學(xué)問(wèn)題，查閱至少10篇中英文文獻(xiàn)，根據(jù)所查文獻(xiàn)寫(xiě)出一篇小綜述

29、論文。 要求：1. 綜述包括中英文標(biāo)題、摘要、關(guān)鍵詞、正文，參考文獻(xiàn)，字?jǐn)?shù)不少于1500；必須用word文檔。2. 必須摘錄所查文獻(xiàn)的摘要（包括：作者，文題，雜志，年，卷期，頁(yè)碼，摘要），作為參考文獻(xiàn)附在最后，如不摘錄，不予計(jì)分。3. 同學(xué)之間的題目和內(nèi)容不能雷同，否則都作零分計(jì)；4. 電子版發(fā)至：shechaowen模版：中文標(biāo)題（小二號(hào)黑體）英文標(biāo)題（三號(hào)黑體）學(xué)號(hào) 姓名（小四號(hào)宋體）摘要：（五號(hào)宋體）關(guān)鍵詞：（五號(hào)宋體）正文（小四號(hào)宋體）參考文獻(xiàn)：（五號(hào)宋體）參考文獻(xiàn)的格式： 作者. 題名. 雜志名，年，卷（期）：頁(yè)碼. 摘要例：1. 佘朝文，宋運(yùn)淳. 植物著絲粒的結(jié)構(gòu)和功能研究進(jìn)展.

30、遺傳, 2006, 28(12):15971606.摘要：著絲粒是真核生物有絲分裂和減數(shù)分裂染色體正確分離和傳遞所必需的染色體區(qū)域。十多年來(lái), 已對(duì)包括擬南芥、水稻、玉米在內(nèi)的一些植物的著絲粒進(jìn)行了較深入的分子生物學(xué)研究。在不同的植物間, 著絲粒DNA的保守性很低, 呈現(xiàn)快速進(jìn)化, 但著絲粒的DNA序列類(lèi)型和組織方式基本相似, 一般是由夾雜排列著的衛(wèi)星DNA串聯(lián)重復(fù)陣列和著絲粒專(zhuān)一的反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子構(gòu)成。與著絲粒DNA相反, 著絲粒/著絲點(diǎn)的結(jié)構(gòu)性和瞬時(shí)蛋白質(zhì)在包括植物在內(nèi)的真核生物中保守。與其他真核生物的情況一樣, 擁有含著絲粒組蛋白H3(CENH3)的核小體是植物功能著絲粒染色質(zhì)最基本的特征,

31、 CENH3在著絲粒染色質(zhì)的識(shí)別和保持中起著關(guān)鍵作用。DNA分子標(biāo)記分子標(biāo)記的概念分子標(biāo)記（Molecular Markers）是以個(gè)體間遺傳物質(zhì)內(nèi)核苷酸序列變異為基礎(chǔ)的遺傳標(biāo)記，是DNA水平遺傳多態(tài)性的直接的反映。與其他幾種遺傳標(biāo)記形態(tài)學(xué)標(biāo)記、生物化學(xué)標(biāo)記、細(xì)胞學(xué)標(biāo)記相比，DNA分子標(biāo)記具有的優(yōu)越性有：大多數(shù)分子標(biāo)記為共顯性，對(duì)隱性的性狀的選擇十分便利；基因組變異極其豐富，分子標(biāo)記的數(shù)量幾乎是無(wú)限的；在生物發(fā)育的不同階段，不同組織的DNA都可用于標(biāo)記分析；分子標(biāo)記揭示來(lái)自DNA的變異；表現(xiàn)為中性，不影響目標(biāo)性狀的表達(dá)，與不良性狀無(wú)連鎖；檢測(cè)手段簡(jiǎn)單、迅速。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在DNA

32、分子標(biāo)記技術(shù)已有數(shù)十種，廣泛應(yīng)用于遺傳育種、基因組作圖、基因定位、物種親緣關(guān)系鑒別、基因庫(kù)構(gòu)建、基因克隆等方面。理想的分子標(biāo)記的要求理想的分子標(biāo)記必須達(dá)以下幾個(gè)要求：(1) 具有高的多態(tài)性；(2) 共顯性遺傳，即利用分子標(biāo)記可鑒別二倍體中雜合和純合基因型；(3) 能明確辨別等位基因；(4) 遍布整個(gè)基因組；(5) 除特殊位點(diǎn)的標(biāo)記外，要求分子標(biāo)記均勻分布于整個(gè)基因組；(6) 選擇中性(即無(wú)基因多效性)；(7) 檢測(cè)手段簡(jiǎn)單、快速(如實(shí)驗(yàn)程序易自動(dòng)化)；(8) 開(kāi)發(fā)成本和使用成本盡量低廉；(9) 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和實(shí)驗(yàn)室間重復(fù)性好(便于數(shù)據(jù)交換)。但是，目前發(fā)現(xiàn)的任何一種分子標(biāo)記均不能滿足以上所有要求

33、。一、基于分子雜交技術(shù)的分子標(biāo)記技術(shù)此類(lèi)標(biāo)記技術(shù)是利用限制性?xún)?nèi)切酶解及凝膠電泳分離不同的生物 DNA 分子，然后用經(jīng)標(biāo)記的特異 DNA 探針與之進(jìn)行雜交，通過(guò)放射自顯影或非同位素顯色技術(shù)來(lái)揭示 DNA 的多態(tài)性。限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP)1974年Grodzicker等創(chuàng)立了限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)技術(shù)，它是一種以DNADNA雜交為基礎(chǔ)的第一代遺傳標(biāo)記。RFLP基本原理：利用特定的限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別并切割不同生物個(gè)體的基因組DNA，得到大小不等的DNA片段，所產(chǎn)生的DNA數(shù)目和各個(gè)片段的長(zhǎng)度反映了DN

34、A分子上不同酶切位點(diǎn)的分布情況。通過(guò)凝膠電泳分析這些片段，就形成不同帶，然后與克隆DNA探針進(jìn)行Southern雜交和放射顯影，即獲得反映個(gè)體特異性的RFLP圖譜。它所代表的是基因組DNA在限制性?xún)?nèi)切酶消化后產(chǎn)生片段在長(zhǎng)度上差異。由于不同個(gè)體的等位基因之間堿基的替換、重排、缺失等變化導(dǎo)致限制內(nèi)切酶識(shí)別和酶切發(fā)生改變從而造成基因型間限制性片段長(zhǎng)度的差異。RFLP的等位基因其有共顯性特點(diǎn)。RFLP標(biāo)記位點(diǎn)數(shù)量不受限制，通?？蓹z測(cè)到的基因座位數(shù)為14個(gè)。RFLP技術(shù)也存在一些缺陷，主要是克隆可表現(xiàn)基因組DNA多態(tài)性的探針較為困難；另外，實(shí)驗(yàn)操作較繁鎖，檢測(cè)周期長(zhǎng)，成本費(fèi)用也很高。自RFLP問(wèn)世以來(lái)，

35、已經(jīng)在基因定位及分型、遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建、疾病的基因診斷等研究中仍得到了廣泛的應(yīng)用。數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性(Variable Number of Tandem Repeats，VNTR)數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)序列又稱(chēng)小衛(wèi)星DNA (Minisatellite DNA)，是一種重復(fù)DNA小序列，為10到幾百核苷酸，拷貝數(shù)10一10001不等。VNTR基本原理與RFLP大致相同，只是對(duì)限制性?xún)?nèi)切酶和DNA探針有特殊要求：(1)限制性?xún)?nèi)切酶的酶切位點(diǎn)必須不在重復(fù)序列中，以保證小衛(wèi)星或微衛(wèi)星序列的完整性。(2)內(nèi)切酶在基因組的其他部位有較多酶切位點(diǎn)，則可使衛(wèi)星序列所在片段含有較少無(wú)關(guān)序列，通過(guò)電泳可充分顯示

36、不同長(zhǎng)度重復(fù)序列片段的多態(tài)性。(3)分子雜交所用DNA探針核昔酸序列必須是小衛(wèi)星序列或微衛(wèi)星序列，通過(guò)分子雜交和放射自顯影后，就可一次性檢測(cè)到眾多小衛(wèi)星或微衛(wèi)星位點(diǎn)，得到個(gè)體特異性的DNA指紋圖譜。小衛(wèi)星標(biāo)記的多態(tài)信息含量較高，在17一19之間。缺點(diǎn)是數(shù)量有限，而且在基因組上分布不均勻，這就極大限制其在基因定位中的應(yīng)用。VNTR也存在實(shí)驗(yàn)操作繁瑣、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、成本高的缺點(diǎn)。二、基于PCR技術(shù)的分子標(biāo)記技術(shù)（一）、隨機(jī)引物的PCR標(biāo)記所用引物的核苷酸序列是隨機(jī)的，其擴(kuò)增的 DNA 區(qū)域事先未知。隨機(jī)引物PCR擴(kuò)增的 DNA 區(qū)段產(chǎn)生多態(tài)性的分子基礎(chǔ)是模板 DNA 擴(kuò)增區(qū)段上引物結(jié)合位點(diǎn)的堿基序列

37、的突變，不同來(lái)源的基因組在該區(qū)段上表現(xiàn)為擴(kuò)增產(chǎn)物有無(wú)差異或擴(kuò)增片段大小的差異。隨機(jī)引物PCR標(biāo)記表現(xiàn)為顯性或共顯性。隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphism DNA，RAPD)RAPD技術(shù)是1990年由Wiliam和Welsh等人利用PCR技術(shù)發(fā)展的檢測(cè)DNA多態(tài)性的方法。基本原理：它是利用隨機(jī)引物（一般為810bp）通過(guò)PCR反應(yīng)非定點(diǎn)擴(kuò)增DNA片段，然后用凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物DNA片段的多態(tài)性。擴(kuò)增片段多態(tài)性便反映了基因組相應(yīng)區(qū)域的DNA多態(tài)性。RAPD所使用的引物各不相同，但對(duì)任一特定引物，它在基因組DNA序列上有其特定的結(jié)合位點(diǎn)，一旦基因組在這些

38、區(qū)域發(fā)生DAN片段插人、缺失或堿基突變，就可能導(dǎo)致這些特定結(jié)合位點(diǎn)的分布發(fā)生變化，從而導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物數(shù)量和大小發(fā)生改變，表現(xiàn)出多態(tài)性。就單一引物而言，其只能檢測(cè)基因組特定區(qū)域DNA多態(tài)性，但利用一系列引物則可使檢測(cè)區(qū)域擴(kuò)大到整個(gè)基因組，因此，RAPD可用于對(duì)整個(gè)基因組DNA進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)，也可用于構(gòu)建基因組指紋圖譜。與RFLP相比，RAPD具有以下優(yōu)點(diǎn)：(1)技術(shù)簡(jiǎn)單，檢測(cè)速度快；(2) RAPD分析只需少量DNA樣品；(3)不依賴(lài)于種屬特異性和基因組結(jié)構(gòu)，一套引物可用于不同生物基因組分析；(4)成本較低。但RAPD也存在一些缺點(diǎn)：(1) RAPD標(biāo)記是一個(gè)顯性標(biāo)記，不能鑒別雜合子和純合子；(2

39、)存在共遷移問(wèn)題，凝膠電泳只能分開(kāi)不同長(zhǎng)度DNA片段，而不能分開(kāi)那些分子量相同但堿基序列組成不同的DNA片段；(3) RAPD技術(shù)中影響因素很多，所以實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和重復(fù)性差。任意引物PCR(Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction， APPCR)在APPCR分析中，所使用的引物較長(zhǎng)(1050 bp) ， PCR反應(yīng)分為兩個(gè)階段，首先寡核昔酸引物在低嚴(yán)謹(jǐn)條件下與模板DNA退火，此時(shí)發(fā)生了一些合成，以便穩(wěn)定模板與引物之間相互作用。然后進(jìn)行高嚴(yán)謹(jǐn)退火條件的循環(huán)，兩個(gè)位點(diǎn)間那些序列在低嚴(yán)謹(jǐn)度退火條件下發(fā)生的引物延伸可繼續(xù)在高嚴(yán)謹(jǐn)條件下擴(kuò)增。采用變性聚丙烯

40、酞胺凝膠電泳分析PCR產(chǎn)物，最終反應(yīng)結(jié)果與RAPD類(lèi)似。只要設(shè)計(jì)的引物在低嚴(yán)謹(jǐn)退火條件下能減少引物產(chǎn)生人為產(chǎn)物，應(yīng)用成對(duì)組合的引物可以產(chǎn)生新的APPC R譜帶，但引物配對(duì)組合使用時(shí)，得到的圖譜與單引物單獨(dú)使用時(shí)產(chǎn)生的圖譜之和很不相同，這樣，50個(gè)引物能產(chǎn)生1250種不同指紋圖譜。APPCR方法不需預(yù)知序列資料，而且檢測(cè)的基因組樣本是任意的，還能夠用于檢測(cè)近等基因系(或同類(lèi)系)中的多態(tài)性。APPCR的缺點(diǎn)是每個(gè)新的多態(tài)性都必須經(jīng)純化才能進(jìn)一步使用。另外，此方法在雜合體中僅可辨別長(zhǎng)度多態(tài)性。DNA擴(kuò)增指紋印跡(DNA Amplification Fingerprinting，DAF)DAF是一種改

41、進(jìn)的RAPD分析技術(shù)，與RAPD技術(shù)不同的是，DAF分析中所使用的引物濃度更高，長(zhǎng)度更短(一般為5一8 bp)，因此它所提供的譜帶信息比RAPD大得多，如當(dāng)使用5個(gè)核昔酸的引物時(shí)，引物和模板的組合大約可擴(kuò)增出10一100個(gè)DNA片段。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物是在凝膠上進(jìn)行分離，通過(guò)銀染即可產(chǎn)生非常復(fù)雜帶型。（二）、特異引物的PCR標(biāo)記特異引物的PCR標(biāo)記所用引物是針對(duì)已知序列的 DNA 區(qū)段而設(shè)計(jì)的，具有特定核苷酸序列（通常為 1824 bp），可在常規(guī)PCR復(fù)性溫度下進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)基因組 DNA 的特定區(qū)域進(jìn)行多態(tài)性分析。序列標(biāo)志位點(diǎn)(Sequence Tagged Sites，STS)STS是對(duì)以特定

42、對(duì)引物序進(jìn)行PCR特異擴(kuò)增的一類(lèi)分子標(biāo)記的統(tǒng)稱(chēng)。通過(guò)設(shè)計(jì)特定的引物，使其與基因組DNA序列中特定結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，從而可用來(lái)擴(kuò)增基因組中特定區(qū)域，分析其多態(tài)性。利用特異PCR技術(shù)的最大優(yōu)點(diǎn)是它產(chǎn)生信息非?？煽?，而不像RFLP和RAPD那樣存在某種模糊性。簡(jiǎn)單重復(fù)序列(Simple Sequence Repeat，SSR)簡(jiǎn)單重復(fù)序(SSR)也稱(chēng)微衛(wèi)星DNA，其串聯(lián)重復(fù)的核心序列為1一6 bp，其中最常見(jiàn)是雙核昔酸重復(fù)，即(CA) n和(TG) n每個(gè)微衛(wèi)星DNA的核心序列結(jié)構(gòu)相同，重復(fù)單位數(shù)目10一60個(gè)，其高度多態(tài)性主要來(lái)源于串聯(lián)數(shù)目的不同。SSR標(biāo)記的基本原理：根據(jù)微衛(wèi)星序列兩端互補(bǔ)序列設(shè)計(jì)引

43、物，通過(guò)PCR反應(yīng)擴(kuò)增微衛(wèi)星片段，由于核心序列串聯(lián)重復(fù)數(shù)目不同，因而能夠用PCR的方法擴(kuò)增出不同長(zhǎng)度的PCR產(chǎn)物，將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳，根據(jù)分離片段的大小決定基因型并計(jì)算等位基因頻率。SSR具有以下一些優(yōu)點(diǎn)：(l)一般檢測(cè)到的是一個(gè)單一的多等位基因位點(diǎn)；(2)微衛(wèi)星呈共顯性遺傳，故可鑒別雜合子和純合子；(3)所需DNA量少。顯然，在采用SSR技術(shù)分析微衛(wèi)星DNA多態(tài)性時(shí)必須知道重復(fù)序列兩端的DNA序列的信息。如不能直接從DNA數(shù)據(jù)庫(kù)查尋則首先必須對(duì)其進(jìn)行測(cè)序。序列特異性擴(kuò)增區(qū)(Sequencecharacterized Amplified Region，SCAR)SCAR標(biāo)記是在RAPD技術(shù)

44、基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。SCAR標(biāo)記是將目標(biāo) RAPD 片段進(jìn)行克隆并對(duì)其末端測(cè)序，根據(jù) RAPD 片段兩端序列設(shè)計(jì)特異引物，對(duì)基因 DNA 片段再進(jìn)行PCR特異擴(kuò)增，把與原RAPD片段相對(duì)應(yīng)的單一位點(diǎn)鑒別出來(lái)。SCAR標(biāo)記是共顯性遺傳，待檢 DNA 間的差異可直接通過(guò)有無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物來(lái)顯示。SCAR標(biāo)記方便、快捷、可靠，可以快速檢測(cè)大量個(gè)體，結(jié)果穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性高。單引物擴(kuò)增反應(yīng)(Single Primer Amplificatipn Reaction，SPAR)SPAR技術(shù)是與RAPD技術(shù)相似的一種標(biāo)記技術(shù)，SPAR也只用一個(gè)引物，但所用的引物是在SSR的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)的。這些引物能與SSR之間的間隔序

45、列進(jìn)行特異性結(jié)合，然后通過(guò)P(：R技術(shù)擴(kuò)增SSR之間的DNA序列，凝膠電泳分離擴(kuò)增產(chǎn)物，分析其多態(tài)性。另外，還有一種與SPAR技術(shù)非常相似的標(biāo)記技術(shù)，即ISTR ( Inverse Sequencetagged Repeat)技術(shù)，ISTR所用的引物是在反向重復(fù)序列基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)的，PCR擴(kuò)增的是反向重復(fù)序列之間的DIVA序列。DNA單鏈構(gòu)象多態(tài)性(Single Strand Conformation Polymorphism，SSCP)SSCP是指等長(zhǎng)的單鏈DNA因核昔酸序列的差異而產(chǎn)生構(gòu)象變異，在非變性聚丙烯酞胺中的表現(xiàn)為電泳遷移率的差別。單鏈DNA構(gòu)象分析對(duì)DNA序列的改變非常敏感，常常一個(gè)

46、堿基差別都能顯示出來(lái)。在SSCP分析中，利用PCR技術(shù)定點(diǎn)擴(kuò)增基因組DNA中某一目的片段，將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行變性處理，雙鏈DNA分開(kāi)成單鏈，再用非變性聚丙烯酞胺凝膠電泳分離，根據(jù)條帶位置變化來(lái)判斷目的片段中是否存在突變。SSCP結(jié)果判定是通過(guò)多個(gè)樣品之間對(duì)比，觀察條帶之間位置改變，從而顯示出不同生物個(gè)體的DNA特異性，達(dá)到指紋分析目的。為了進(jìn)一步提高SSCP的檢出率，可將SSCP分析與其它突變檢測(cè)方法相結(jié)合。其中與雜交雙鏈分析(Heterocluplex analysis，Het)法結(jié)合可以大大提高檢出率。Het法是用探針與要檢測(cè)的單鏈DNA或RNA進(jìn)行雜交，含有一對(duì)堿基對(duì)錯(cuò)配的雜交鏈可以和完全互

47、補(bǔ)的雜交鏈在非變性PAG凝膠上通過(guò)電泳被分離開(kāi)。對(duì)同一靶序列分別進(jìn)行SSCP和Het分析可以使點(diǎn)突變的檢出率接近100%，而且實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)便。雙脫氧化指紋法(Dideoxy Fingerprints，ddF)ddF是將雙脫氧末端終止測(cè)序法與SSCP結(jié)合起來(lái)的分析技術(shù)，對(duì)由雙脫氧末端終止的長(zhǎng)短不一的單鏈DNA進(jìn)行SSCP分析。如果目的片段存在一個(gè)突變，則所有大于某一大小對(duì)應(yīng)于突主變位置的雙脫氧終止片段無(wú)野生型系統(tǒng)，對(duì)于每一個(gè)突有多次機(jī)會(huì)檢測(cè)其遷移率改變，提高了檢測(cè)突變的效率。ddF方法克服了SSCP分析時(shí)因DNA長(zhǎng)度影響SSCP顯示的困難，通過(guò)一種雙脫氧核昔酸生產(chǎn)特異性的單鏈DNA，使其中長(zhǎng)度合適的D

48、NA片段顯示SSCP改變。三、基于限制性酶切和PCR技術(shù)的DNA標(biāo)記擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP)AFLP是1993年荷蘭科學(xué)家Zbaeau和Vos發(fā)展起來(lái)的一種檢測(cè)DN A多態(tài)性的新方法。AFLP 是 RFLP 與PCR相結(jié)合的產(chǎn)物，其基本原理是先利用限制性?xún)?nèi)切酶水解基因組 DNA 產(chǎn)生不同大小的 DNA 片段，再使雙鏈人工接頭的酶切片段相邊接，作為擴(kuò)增反應(yīng)的模板 DNA，然后以人工接頭的互補(bǔ)鏈為引物進(jìn)行預(yù)擴(kuò)增，最后在接頭互補(bǔ)鏈的基礎(chǔ)上添加 13個(gè)選擇性核苷酸作引物對(duì)模板 DNA 基因再進(jìn)行選擇性擴(kuò)增，通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離檢測(cè)獲得的DNA擴(kuò)增片段，根據(jù)擴(kuò)增片段長(zhǎng)度的不同檢測(cè)出多態(tài)性。引物由三部分組成：與人工接頭互補(bǔ)的核心堿基序列、限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別序列、引物3端的選擇堿基序列（110 bp）。接頭與接頭相鄰的酶切片段的幾個(gè)堿基序列為結(jié)合位點(diǎn)。該技術(shù)的獨(dú)特之處在于所用的專(zhuān)用引物可在知道 DNA 信息的前提下就可對(duì)酶切片段進(jìn)行PCR 擴(kuò)增。為使酶切濃度大小分布均勻，一般采用兩個(gè)限制性?xún)?nèi)切酶，一個(gè)酶為多切點(diǎn)，另一個(gè)酶切點(diǎn)數(shù)較少，因而 AFLP 分析產(chǎn)生的主要是由兩個(gè)酶共同酶切的片段。A