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1、淀粉糊化度的測定(酶水解法)(一)定義未經(jīng)糊化的淀粉分子,其結構呈微品束定向排列,這種淀粉結構狀態(tài)稱為B型結構,通過蒸煮或擠壓,達到物化溫度時,淀粉充分吸水膨脹,以致微晶束解體,排列混亂,這種淀粉結構狀態(tài)叫a型。淀粉結構由犀型轉化為“型的過程叫 a化,也稱糊化。通俗地說,淀粉的?;潭染褪怯缮兪斓某潭?,即糊化程度。在糧食食品、飼料的生產(chǎn)中,常需要了解產(chǎn)品的糊化程度。因為a度的高低影響復水時間,影響食品或飼料的品質。例如方便面理化指標(GB 9848 88)規(guī)定,油炸方便面的 a度85. 0%,熱風干燥面 a度80. 0%,米粉的熟透的質量指標在85%左右。(二)原理(酶水解法)已糊化的淀粉在
2、淀粉酶的作用下,可水解成還原糖,a度越高,即糊化的淀粉越多,水解后生成的糖越多。先將樣品充分糊化,經(jīng)淀粉酶水解后,用碘量法測定糖,以此作為 標準,其糊化程度定為100 %。然后將樣品直接用淀粉酶水解,測定原糊化程度時的含糖量。糊化度以樣品原糊化時含糖量占充分糊化時含糖量的百分率表示。(三)試劑1. 0. 05mo1/L( ;l 2)稱取6. 25g碘及17. 5g碘化鉀溶于100ml水中。稀釋至1000ml,搖勻,貯于棕色瓶中。 密閉置于陰暗處冷卻。2. 0. 1mol/L氫氧化鈉溶液稱取 100g氫氧化鈉,溶于100mL水中,搖勻,注入聚乙烯容 器中,密封靜置數(shù)日,取上清液5mL,用已除去二
3、氧化碳的水稀釋至1L。3 0. 1mo1/ L硫代硫酸鈉溶液按GB5490 一 85糧食、油料和植物油脂檢驗一般規(guī)則附錄B進行配制和標定4. 1mo1/L鹽酸溶液 取鹽酸(相對密度1. 19)90mL,加入1L水,搖勻;5. 10%硫酸溶液。6. 5g/ 100mL淀粉酶溶液取5.00g淀粉酶于燒杯中,加少量水溶解,用水稀釋至100ml,現(xiàn)用現(xiàn)配;7. 0. 5g/ 100ml淀粉溶液(四)儀器和用具(1)150mL碘價瓶;(2)100mL錐形瓶;(3)索氏抽提器;(37 土 1.0) C恒溫水浴移液管 l0mL , 2mL(6)100mL容量瓶;(7)25mL滴定管;(8)粉碎機 粉碎樣品時
4、發(fā)熱不得超過50度;(9)電爐;(10)感量0.0001g分析天平。(五)操作方法1樣品制備將樣品按測量脂肪的方法放入索氏抽提器中,抽凈脂肪,并加以粉碎,細度通過CQ26篩。取5個100mL錐形瓶,分別以 A、A、A、A、B標記,用分析天平分 4次稱取上述 步驟處理的試樣, 每次稱取1.000g ,分別放入A、A、A、A B四個錐形瓶中各加入 50mL 水。2.糊化與水解將A、A2,兩個錐形瓶用電爐加熱至沸騰,保持15min,迅速冷卻至20C,于A、AB三個錐形瓶中各加入5mL淀粉酶 溶液。將上述5個錐形瓶均放入(50 土 1) C的恒溫水浴中保持90mim,并不時搖動,到時取下,冷卻至室溫,
5、力口 1mol/L HCl2mL,以停止酶解作用, 分別移入l00mL容量瓶中,加水定容,以干燥濾紙過濾。3 .碘量法定糖用移液管取 A、A、A3、A4、B試液及蒸餾水各 10mL,分別放入6個150mL碘量瓶內(nèi),用移液管各加入 0.05mo1 / L(1/2 I 2)液10mL和0.1mo1/L NaOH溶液18mL,加塞,搖勻,放涼15min,然后用移液管快速在各瓶中加入2mL10%硫酸,用0.1mol/L硫代硫酸鈉溶液滴定(至溶液為淡黃色接近終點時,加入淀粉指示劑1ml,繼續(xù)滴至溶液的藍色退盡,在0.5min內(nèi)不再變藍為止),記錄各瓶消耗的硫代硫酸鈉溶液體積。(六) 結果結算 樣品a度按
6、公式計算(耳兀一(冬亠耳)一(叭一叫、和從 a(VY- - (Vr-Vs) - (Vy-Vfl) X100心 24)式申幻、心o度* /6", 耳、X分別為A、A?、g 久消耗硫代硫酸鈉前體積.mLVr空白消耗硫代疏酸鈉的體積,mLVy B.試液消耗硫代硫酸鈉的體積,mLWy樣品充分糊化后,韓分解后所得糖分消耗硫代硫酸鈉溶液聶升 數(shù),mLWy孔J樣品被酶分解后所得塘分消耗硫代硫酸鈉溶液毫升數(shù),mL(Vy-VJ 樣吊中其他還原性組分消耗硫代硫酸鈉休積,mL(Vv-VJ為匕J的對比試驗,(叭一>為(.Vy-V.)的對比試驗 <Vy-V0)因悔制劑不純所消耗琉代疣釀納溶液休積,mL雙試驗給果允許差不超過2%取苴平均值柞為測定結果.測定結果取小數(shù)點后一位. 說朋門樣品脫脂預處理時,為防止樣品的糊化稈度發(fā)主蠻化,樣品不可
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