PM_(2.5)致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化大鼠ACS的可能機(jī)制及Atorvastatin的干預(yù)作用

1、PM_（2.5 ）致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化大鼠ACS的可能機(jī)制及Atorvastatin的干預(yù)作用第一部分冠狀動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型的建立研究目的: 通過(guò)對(duì)三種不同的大鼠冠狀動(dòng)脈粥樣硬化模型造模方式的比較, 探討該模型建立過(guò)程中的影響因素,從而建立一種成熟的、可重復(fù)性好的大鼠冠狀動(dòng)脈粥樣硬化模型, 為進(jìn)一步細(xì)顆粒物 (PM_2.5) 對(duì)冠心病的毒性研究建立良好的動(dòng)物模型基礎(chǔ)。研究方法 : 將 32 只 Wistar 大鼠隨機(jī)分為四組。 一組為正常對(duì)照組喂以基礎(chǔ)飼料 , 其余三組為造模組 , 分別喂以以下三種不同的高脂飼料 : 蛋黃組（10%蛋黃、 10%豬油

2、、5%白糖、0.5%膽酸鈉、0.2%丙基硫氧嘧啶、 74.3%基礎(chǔ)飼料）、膽固醇組（4%膽固醇、10%豬油、 5%白糖、 0.5%膽酸鈉、 0.2%丙基硫氧嘧啶、 80.3%基礎(chǔ)飼料）、無(wú)丙基硫氧嘧啶膽固醇組（ 4%膽固醇、10%豬油、5%白糖、0.5%膽酸鈉、80.5%基礎(chǔ)飼料）,并在喂養(yǎng)初始 , 腹腔注射 V_D360萬(wàn) IU/kg, 分三次 , 連續(xù)三天完成。正常對(duì)照組則以生理鹽水替代。喂養(yǎng)期間監(jiān)測(cè)體重改變 ,12 周后 , 處死大鼠 ,收集血清 , 檢測(cè)血脂各項(xiàng)（ TC、TG、 HDL、LDL）, 計(jì)算動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)（AI ）,并對(duì)冠狀動(dòng)脈

3、的形態(tài)學(xué)改變進(jìn)行觀察。研究結(jié)果:1 、TC、LDL水平 : 膽固醇組蛋黃組無(wú)丙基硫氧嘧啶膽固醇組正常組。2、AI: 膽固醇組無(wú)丙基硫氧嘧啶膽固醇組和蛋黃組正常組。3、組織形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn) , 膽固醇組冠脈中有典型的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成, 而蛋黃組、無(wú)丙基硫氧嘧啶膽固醇組均未見(jiàn)典型斑塊形成。4、從造模第 4 周開(kāi)始 , 蛋黃組及膽固醇組體重增長(zhǎng)緩慢 , 甚至出現(xiàn)負(fù)增長(zhǎng) , 到造模結(jié)束時(shí) , 兩組體重顯著低于正常組及無(wú)丙基硫氧嘧啶膽固醇組。研究結(jié)論 :1 、雖然大鼠等嚙齒類(lèi)動(dòng)物本身并不易形成動(dòng)脈粥樣硬化（AS）,但經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)母深A(yù)后 , 仍可用于 AS模型的建造。 2、由 4%膽固醇、 10%豬油、

4、5%白糖、 0.5%膽酸鈉、 0.2%丙基硫氧嘧啶、 80.3%基礎(chǔ)飼料配制而成的高脂飼料飼喂 Wistar 大鼠 , 并于喂養(yǎng)初始 , 腹腔注射 V_D360萬(wàn) IU/kg,12 周后 ,可成功建立冠狀動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型。3、在造模過(guò)程中 , 丙基硫氧嘧啶的使用 ,對(duì)于升高血膽固醇 , 促進(jìn) AS形成具有重要作用。第二部分 PM₂₅致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化大鼠ACS的可能機(jī)制研究目的 : 摸索一種新的 PM₂₅染毒方式 : 分別提取 PM<sub>2

5、5</sub>的水溶性成份（ WSC）及酸溶性成份（ ASC）, 通過(guò)尾靜脈注射的方式進(jìn)行染毒。并探討WSC、ASC對(duì)于 AS大鼠的心臟毒性作用機(jī)制及阿托伐他汀的干預(yù)效果。研究方法 :將大鼠隨機(jī)分為三組 : 正常對(duì)照組、 AS模型組、 AS治療組。AS模型組與 AS治療組按照第一部分中的膽固醇組造模方法建造AS大鼠模型 ,AS 治療組同時(shí)還給予阿托伐他汀 10mg·kg^-1 ·d^-1灌胃治療 ,AS 模型組、正常對(duì)照組給予等量生理鹽水灌胃。 提取 PM<sub>

6、;2.5</sub>的 WSC及 ASC。12 周后 , 將 WSC和 ASC以尾靜脈注射方式、 PM_2.5混懸液以非暴露式氣管注入方式分別染毒各組大鼠（40mg/kg）, 染毒 24 小時(shí)后處死。應(yīng)用化學(xué)法、放射免疫法、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫組化法、凝膠滯留電泳等方法檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo) （血脂、 MDA、SOD、IL-6 、TNF-、hs-CRP、ox-LDL、NF- B）的變化情況。 研究結(jié)果 :1 、WSC具有升高血清 TC、AI 、TNF-水平 , 激活心肌 NF- B 的作用。 2、 ASC具有升高血清 TC、TG、 LDL、 MDA

7、水平 , 降低血清 SOD水平 ,激活心肌 NF-B 的作用。3、AS模型與 WSC、ASC染毒具有交互作用 , 主要表現(xiàn)在升高LDL、AI 、IL-6水平 , 激活心肌 NF-B 的作用上。4、阿托伐他汀治療后 , 血清 TC、LDL、AI 、MDA、ox-LDL、BP水平均顯著降低 , 血清 SOD水平顯著升高 , 心肌 NF- B 的活化程度降低。研究結(jié)論 :1 、提取 PM_2.5的 WSC及 ASC成份 , 以尾靜脈注射的方式染毒大鼠 , 對(duì)于 PM_2.5毒性機(jī)制的研究具有可行性。2、PM<

8、;sub>2.5</sub>對(duì) AS大鼠的毒性作用與升高血脂、 氧化應(yīng)激損傷和加劇炎癥反應(yīng)三個(gè)方面有關(guān)。3、PM_2.5水溶性成份可能會(huì)通過(guò)加劇體內(nèi)炎癥反應(yīng) , 來(lái)發(fā)揮對(duì) AS大鼠的心臟毒性作用。 4、PM_2.5酸溶性成份對(duì) AS大鼠的心臟毒性作用則可能與氧化應(yīng)激損傷和加劇炎癥反應(yīng)有關(guān)。5、在建立 AS模型的基礎(chǔ)上給予PM_2.5染毒 , 則會(huì)加劇PM_2.5的毒性作用 , 即兩者有協(xié)同作用。 6、通

9、過(guò)阿托伐他汀的治療,在一定程度上可以降低PM_2.5對(duì) AS大鼠的心臟毒性作用。 第三部分Atorvastatin單用及聯(lián)合用藥的干預(yù)作用研究目的: 探討阿托法他汀單用 , 以及分別與氯吡格雷、氯沙坦、卡維地洛等臨床常用藥聯(lián)合用藥后的抗AS作用。研究方法 : 按照第一部分的方法 , 建立大鼠的 AS模型。 12 周后 , 分別給予阿托伐他汀 (10mg·kg^-1 ·d^-1) 、氯吡格雷(25mg·kg<sup>-1&l

10、t;/sup> ·d^-1) 、氯沙坦(20mg·kg^-1 ·d^-1) 、卡維地洛(20mg·kg^-1 ·d^-1) 、阿托伐他汀 +氯吡格雷、阿托伐他汀 +氯沙坦、阿托伐他汀 +卡維地洛灌胃治療。 8 周后處死 , 分別檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)治療前后的變化情況。研究結(jié)果 :1 、經(jīng)阿托伐他汀治療后, 可顯著降低 AS大鼠血清 TC、TG、LDL、ox-LDL、TNF-、hs-CRP水平 , 及心肌 NF- B 的活化程度。 2、當(dāng)阿托伐他汀與氯吡格雷合用時(shí) , 除以上改變外 , 還有降低血清 MDA、IL-6, 升高 SOD的作用 , 而且兩者合用對(duì)升高SOD、降低 hs-CRP具有協(xié)同作用。 3、當(dāng)阿托伐他汀與氯沙坦合用時(shí) , 還出現(xiàn)了降低血清IL-6 、升高 SOD及降血壓的作用 , 而且兩者合用對(duì)降低心肌 NF- B 的活化程度具有協(xié)同作用。4、當(dāng)阿托伐他汀與卡維地洛合用時(shí), 還出現(xiàn)了降低血清MDA、升高 SOD的作用 , 而且