糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒說明書

1、糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究利用標(biāo)本：體液糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒實驗原理：BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酹標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將BFGF和生物索標(biāo)記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再通過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B.和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒自備材料1 .蒸儲水。2 .加樣滯：5uK10ul、50ul、lO

2、Ouls200、500uKlOOOul,3 .振蕩謂及磁力攪拌器等。平安性1 .幸免直接接觸終止液和底物A、8=一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2 .實驗中不要吃喝、抽煙或利用化妝品。3 .不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒操作注意事項1 .試劑應(yīng)按標(biāo)簽貯存，利用前恢梵到室溫。稀稀事后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)拋棄，不可保留。2 .實驗中不用的板條應(yīng)當(dāng)即放回包裝袋中，密封保留，以避免變質(zhì)。3 .不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前利用。4 .利用一次性的吸頭以避免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，幸免利用帶金屬部份的加樣器。5 .利用干凈的塑

3、料容器配置洗滌液。利用前充分混勻試劑盒里的各類成份及樣品。6 .洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入旃標(biāo)反映孔中吸水。7 .底物A應(yīng)揮發(fā)，幸免長時刻打開蓋子。底物B對光靈敏，幸免長時刻暴露了光卜；幸免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)當(dāng)即讀取0D值。8 .加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反映板孔溫育的時刻一樣。9 .依照中標(biāo)明的時刻、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒樣品搜集、處置及保留方式一、血清操作進(jìn)程中幸免任何細(xì)胞刺激。利用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。搜集血液后，1000Xg離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速警惕地分離。二、血漿EDTA、檸椽酸鹽、肝素血漿可用于

4、檢測。lOOOXg離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液-lOOOXg離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保留若是樣品不當(dāng)即利用，應(yīng)將其分成小部份-700C保留，幸免反復(fù)冷凍。盡可能的不要利用溶血或高血脂血。若是血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫卜解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的預(yù)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀粒應(yīng)在實驗時預(yù)備，不能貯存。稀粒前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。10 洗滌緩沖液(50X)的稀粹：蒸儲水50倍稀釋。糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒操作步驟1 .利用前，將所有或劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以避免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤

5、差。2 .依照待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，每一個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做熨孔。每一個樣品依照白己的數(shù)量來定，能利用復(fù)孔的盡可能做復(fù)孔。3 .加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反映孔、加入待測樣品50ulF反映孔內(nèi)。當(dāng)即加入50ul的生物索標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37X:溫育1小時。4 .甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。若是用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5 .每孔加入80ul的親和鏈酶索-HRP,輕輕振蕩混勻，37c溫育30分鐘。6 .甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重且此操作3次。若

6、是用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7 .每孔加入底物A、B各50uL輕輕振蕩混勻，37溫育10分鐘。幸免光照。8 .掏出附標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)當(dāng)即測定結(jié)果。9 .在450nm波優(yōu)勢測定各孔的0D值。局限10 標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，依照此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法取得精準(zhǔn)的結(jié)果。糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒性能1 .靈敏度：最小的檢測濃度小丁F號標(biāo)準(zhǔn)品。稀擇度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2 .特異性：不與其它細(xì)胞因子反映。3 .重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小丁10樂糖抗原50(CA50)ELISA試劑盒結(jié)果判定與分析一、儀器值：于波長450n

7、m的酷標(biāo)儀上讀取各孔的OD值二、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可依照其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-S00pg/ml4、靈敏度：1.0pg/mlVlll-Ag人凝血因子VU相關(guān)抗原規(guī)格：48T/96TFill人凝血因子IH規(guī)格：48T/96TFII人凝血因子H規(guī)格：48T/96TF1+2人凝血酹原片段F1+2規(guī)格：48T/96TT-TM人凝血酹血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物規(guī)格：48T/96TTR人凝血前受體規(guī)格：48T/96TTAT人凝血酹抗凝血酷豆合物規(guī)格：48"96TGelsolin人凝溶膠蛋白規(guī)格：48T/96TCLU人凝聚素規(guī)格：48T/96Tgelson人凝膠原蛋白規(guī)格：48T/96TUFC人尿游離皮質(zhì)醇規(guī)格：48T/96TALB人尿微量白蛋白規(guī)格：48T/96TUr