單克隆抗體的制備

1、2.2.2單克隆抗體單克隆抗體1、簡述單克隆抗體制備的過程。、簡述單克隆抗體制備的過程。2、了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用。、了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用。 什么是抗體？抗體是怎什么是抗體？抗體是怎么產(chǎn)生的？么產(chǎn)生的？ 抗體是機體受抗原刺激后抗體是機體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。的球蛋白。 知識回顧知識回顧（一）獲得抗體的傳統(tǒng)方法（血清抗體）（一）獲得抗體的傳統(tǒng)方法（血清抗體）1 1、把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi)，使動、把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi)，使動物產(chǎn)生抗體，然后，從物產(chǎn)生抗體，然后，從動物血

2、清動物血清中分離出所中分離出所需的抗體。需的抗體。2 2、血清抗體的缺點：、血清抗體的缺點： 產(chǎn)量低，純度低，產(chǎn)量低，純度低，特異性差特異性差。為了解決血清抗體產(chǎn)量低、純度低，特異性差這一為了解決血清抗體產(chǎn)量低、純度低，特異性差這一難題，科學(xué)家們進行了多年的研究和探索。他們發(fā)難題，科學(xué)家們進行了多年的研究和探索。他們發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)，哺乳動物感染病原體后，體內(nèi)會形成相應(yīng)的哺乳動物感染病原體后，體內(nèi)會形成相應(yīng)的B B淋淋巴細(xì)胞。巴細(xì)胞。B B淋巴細(xì)胞能分泌抗體，凝集或殺死這些病淋巴細(xì)胞能分泌抗體，凝集或殺死這些病原體。動物在免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)產(chǎn)生的特異原體。動物在免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗

3、體的種類可多達(dá)百萬種以上，但是每一個性抗體的種類可多達(dá)百萬種以上，但是每一個B B細(xì)胞細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。只分泌一種特異性抗體。所以，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單所以，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。1、B淋巴細(xì)胞是一種高度分化的細(xì)胞，有沒有可能淋巴細(xì)胞是一種高度分化的細(xì)胞，有沒有可能通過細(xì)胞培養(yǎng)進行無限增殖？通過細(xì)胞培養(yǎng)進行無限增殖？ 不可能不可能2、我們學(xué)過的什么細(xì)胞具有這樣的能力？、我們學(xué)過的什么細(xì)胞具有這樣的能力？癌細(xì)胞癌細(xì)胞3、有什么辦法讓、有什么辦法讓B淋巴細(xì)胞也具有這樣的能力？淋巴細(xì)胞也具有這樣的能力？細(xì)胞融合細(xì)

4、胞融合用用單個單個B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞進行（無性繁殖）克隆，進行（無性繁殖）克隆，得到的得到的基因型相同基因型相同的的細(xì)胞群能夠分泌一種細(xì)胞群能夠分泌一種化化學(xué)性質(zhì)單一學(xué)性質(zhì)單一、特異性強特異性強的抗體。的抗體。單克隆抗單克隆抗體的概念：體的概念：（二）單克隆抗體的制備過程（二）單克隆抗體的制備過程1975年設(shè)計實驗?zāi)暝O(shè)計實驗1984年獲得諾貝爾生理年獲得諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎學(xué)和醫(yī)學(xué)獎單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備例題例題1 1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨

5、髓瘤細(xì)胞融合的是（隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ） A A、經(jīng)過免疫的、經(jīng)過免疫的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 B B、不經(jīng)過免疫的、不經(jīng)過免疫的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 C C、經(jīng)過免疫的、經(jīng)過免疫的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 D D、不經(jīng)過免疫的、不經(jīng)過免疫的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞2. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（ ） 淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞自身融淋巴細(xì)

6、胞自身融 合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 A B C D 1.1.在制備單克隆抗體的過程中，選用在制備單克隆抗體的過程中，選用哪兩種細(xì)胞進行融合？為什么選擇這哪兩種細(xì)胞進行融合？為什么選擇這兩種細(xì)胞？兩種細(xì)胞？漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞漿細(xì)胞能產(chǎn)生漿細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體單一抗體，但不能無限，但不能無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞增殖；骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖能無限增殖，但不，但不能產(chǎn)生單一抗體。能產(chǎn)生單一抗體。2 2、在這過程中進行了幾次篩選？分、在這過程中進行了幾次篩選？分別在哪個步驟進行篩選？別在哪個步驟進行篩選？兩次篩選。第一次在兩次篩選。

7、第一次在B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合以后篩選出雜交瘤細(xì)胞；細(xì)胞融合以后篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生第二次在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。3 3、單克隆抗體具有哪些優(yōu)點？、單克隆抗體具有哪些優(yōu)點？特異性強，靈敏度高，可大量制備特異性強，靈敏度高，可大量制備3 3、動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是（、動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是（ ）A A、克服遠(yuǎn)緣雜交不親和、克服遠(yuǎn)緣雜交不親和 B B、制備單克隆抗體、制備單克隆抗體C C、培育新物種、培育新物種 D D、生產(chǎn)雜種細(xì)胞、生產(chǎn)雜種細(xì)胞（三）單克隆抗體的應(yīng)用（三）單克隆抗體的應(yīng)用1、作

8、為診斷試劑作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等體內(nèi)腫瘤的定位等, ,與常規(guī)抗體相比與常規(guī)抗體相比, ,具有具有準(zhǔn)確、高效、準(zhǔn)確、高效、簡易、快速簡易、快速特點特點.用用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體抗體做成的做成的“早早孕診斷試劑早早孕診斷試劑盒盒”，靈敏度很高。在妊娠第，靈敏度很高。在妊娠第8天就可以做出診斷。比原來的診天就可以做出診斷。比原來的診斷方法提前了斷方法提前了10天左右，可以避天左右，可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對胎兒造成不利影響。服用藥物而對胎兒造成不利影

9、響。該方法檢測的準(zhǔn)確率在該方法檢測的準(zhǔn)確率在90%以上。以上。 2、用于治療疾病和運載藥物用于治療疾病和運載藥物： 主要用于癌癥治療。主要用于癌癥治療。 生物導(dǎo)彈：生物導(dǎo)彈：抗癌細(xì)胞的單克隆抗體抗癌細(xì)胞的單克隆抗體+ +放射性放射性同位素同位素+ +化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素。（單克隆抗。（單克隆抗體：導(dǎo)向。準(zhǔn)確找到癌細(xì)胞位置，原位殺死體：導(dǎo)向。準(zhǔn)確找到癌細(xì)胞位置，原位殺死癌細(xì)胞。）癌細(xì)胞。）4 4、研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（、研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（ ）A A利用單克隆抗體特異性地對抗癌細(xì)胞利用單克隆抗體特異性地對抗癌細(xì)胞 B B以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C C抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成D D單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合結(jié)合5 5只能使動物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法（只能使動物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法（ ） A APEGPEG B B滅活的病毒滅活的病毒 C C電刺激電刺激 D D離心離心6 6、“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”是指是指 （ ） A.A.單克隆抗體單克隆抗體 B.B.雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 C.C.產(chǎn)生特定抗體的產(chǎn)生特定抗體的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 D.D.在單在單克隆抗體克隆抗體上連接抗癌藥物上連接抗癌藥物